锌指蛋白440在人膝关节OA软骨细胞损伤中的促进作用及机制

目的探讨锌指蛋白440(ZNF440)在膝关节(Knee)骨性关节炎(OA)软骨细胞损伤和退化变性病理生理学中的作用。方法Knee软骨中分离人软骨细胞,分为对照组、Knee OA组、ZNF440-GFP(绿色荧光蛋白)组、ZNF440-siRNA组和Scriptaid组。通过免疫组化和Western blotting测定ZNF440在Knee OA软骨中的表达。用ZNF440-GFP过表达和ZNF440-siRNA转染细胞,并给予白细胞介素-1β(IL-1β)刺激。分别用qPCR和WB检测分解代谢、合成代谢和凋亡相关标志物的mRNA和蛋白表达水平。生物信息学分析有可能抑制ZNF440表达的化合物。结果与对照组相比,ZNF440在Knee OA软骨中的表达有所增加(P<0.05);ZNF440过表达明显增加基质金属蛋白酶(MMP)13和PARP p85的表达,并降低COL2A1表达(P<0.05);siRNA敲除ZNF440可部分逆转IL-1β刺激诱导的人Knee OA软骨细胞的分解代谢和细胞凋亡(P<0.05)。通过生物信息学分析和验证实验,确定Scriptaid是一种有可能下调ZNF440表达的化合物。Scriptaid处理可降低OA软骨细胞中ZNF440的表达,同时降低过表达ZNF440的人Knee OA软骨细胞中MMP13和PARP p85的表达(P<0.05)。结论ZNF440在人Knee OA软骨中的表达明显增加,可能通过调节细胞中炎症、分解代谢和凋亡标志物的表达参与软骨退行性机制。此外,Scriptaid可降低ZNF440的表达,并抑制其在OA软骨细胞中的破坏作用。