自噬对锌指转录因子1及高糖诱导的肾小管EMT的影响

目的探讨自噬是否可以通过调控锌指转录因子1(Snail1)的降解而影响肾小管上皮细胞-间充质转化(EMT)过程。方法12只清洁级雄性SD大鼠,随机分为正常(NC)组、糖尿病(DM)组,予链脲佐菌素(STZ)53 mg/kg尾静脉注射复制大鼠Ⅰ型糖尿病模型;造模成功后第24周末处死NC和DM组大鼠,检测大鼠血糖、血尿素氮(BUN)和24 h尿白蛋白(24 hUAlb),Western blot检测肾组织自噬相关分子[自噬基因BECN 1(Beclin1)、微管相关蛋白1轻链3(LC3-Ⅱ/Ⅰ)、自噬降解底物蛋白1(p62)]、Snail1蛋白的表达水平;将大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)分为正常糖组(NG组)、高糖组(HG组)及高渗组(HM组),HG组培养的NRK-52E细胞在分为全蛋白组(Input组)和IP组[IP组又为阴性对照(IgG组)和实验组(Snail1/P62)];在高糖培养的NRK-52E细胞中分别使用自噬激动剂[雷帕霉素(RAP)和自噬抑制剂氯喹(CQ)]处理48 h,分为NG组、HG组、HG+RAP组及HG+CQ组,采用双标荧光腺病毒观察各组细胞的自噬流的情况,免疫荧光化学染色和免疫共沉淀观察Snail1与p62的蛋白相互作用,Western blot检测各组NRK-52E细胞中自噬相关分子、EMT、细胞外基质(ECM)指标表达变化;用二甲基亚砜(DMSO)、RAP、CQ处理NRK-52E细胞48 h,再联合放线菌酮(CHX)和蛋白酶抑制剂(MG-132)处理0、6及10 h,分为HG+DMSO/RAP组、HG+DMSO/CQ组,采用Western blot检测自噬对Snail1蛋白衰减的调控作用。结果与NC组相比,DM组大鼠血糖、BUN及24 hUAlb均增高(P<0.05);Western blot结果显示,与NC组比较,DM组大鼠肾组织及高糖培养的NRK-52E细胞中Beclin1和LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达下调(P<0.05),p62、Snail1蛋白表达上调(P<0.05);双标腺病毒实验显示,在高糖刺激的NRK-52E中自噬流受阻,与HG组相比,HG+RAP组NRK-52E细胞中E-钙黏蛋白(E-cadherin)的蛋白表达增多,α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、胶原蛋白Ⅲ(Col-Ⅲ)的蛋白表达减少(P<0.05),而HG+CQ组结果相反;免疫共沉淀实验发现Snail1与p62存在蛋白互作;联合CHX和MG-132后,HG+DMSO/RAP组中Snail1蛋白衰减速度加快。结论在DM大鼠肾组织和高糖培养的肾小管上皮细胞中,自噬受抑后使Snail1通过自噬降解减少,诱导EMT及ECM沉积增多,促进了肾脏纤维化的发生。

锌指转录因子1与风湿性心脏病心房颤动患者心房纤维化的关系

目的 探讨锌指转录因子1 （Snail1）及上皮间质转化（EMT）机制在风湿性心脏病心房颤动患者心房纤维化中可能发挥的作用.方法 选择2015年9月至2016年3月入住我院心外科并确诊为风湿性心脏病准备行换瓣手术的19例患者,在换瓣术中取约200 mg的右心房肌肉组织,按术前心律分为窦律（SR）组9例和房颤（AF）组10例.观察心肌细胞的形态变化采用HE染色,心房纤维化的程度比较使用Masson染色观察,western blot和RT-PCR测定心房肌组织中Snail1的表达水平.结果 房颤组和窦律组之间性别、年龄、左室射血分数、心功能分级、吸烟情况比较无统计学差异（P＜0.05）;左心房内径（LAD）窦律组为（44.441±7.13）mm,房颤组为（54.50±5.02）mm,两者比较差异有统计学意义（P＜0.05）;心房胶原容积分数（CVF）窦律组为0.123,房颤组为0.407,两组比较差异具有统计学意义（P＜0.01）.Snail1的mRNA表达水平及蛋白表达水平窦律组分别为1.001和0.341,房颤组分别为1.566和0.579,两者分别比较差异均具有统计学意义（P＜0.01）.结论 风湿性心脏病心房颤动患者心房肌组织中Snail1表达增加,EMT可能被激活,从而促进房颤患者的心房纤维化,在房颤的发生和维持中发挥重要作用.

急性髓细胞白血病模型小鼠B细胞易位基因1和Ikaros家族锌指转录因子1表达水平及相关性分析

目的:探讨急性髓细胞白血病(AML)模型小鼠B细胞易位基因1(BTG1)和Ikaros家族锌指转录因子1(IKZF1)表达水平,并进行相关性分析。方法:36只小鼠随机等分为模型A组、模型B组和对照组。模型A组和模型B组分别经尾静脉注射HL60细胞1×10^(7)/只、5×10^(6)/只,对照组注射等量0.9%氯化钠溶液。采用Western blot检测骨髓组织BTG1和IKZF1蛋白相对表达水平,并与体重、红细胞、血小板及白细胞CD33阳性率进行相关性分析。结果:模型A组和模型B组小鼠在接种第7、14、28天的体重、血小板低于对照组,红细胞高于对照组(均P<0.05),但模型A组与模型B组上述指标比较无统计学差异(均P>0.05)。模型A组和模型B组接种第28天白细胞CD33阳性率高于对照组,BTG1和IKZF1蛋白相对表达水平低于对照组(均P<0.05),但模型A组与模型B组上述指标比较无统计学差异(均P>0.05)。Pearson相关性分析显示,AML小鼠BTG1、IKZF1蛋白相对表达水平与白血病CD33阳性率、体重、红细胞、血小板均存在相关性(均P<0.05)。结论:BTG1、IKZF1蛋白在AML模型小鼠呈高表达,且表达水平与小鼠体重、外周血及肿瘤浸润程度存在相关性。

锌指转录因子snai1高表达质粒构建和稳定株的筛选

背景:研究表明Snai1和E-钙黏素在肿瘤组织中有负向表达关系,且与Snai1与CDH1启动子区box盒结合,抑制CDH1基因转录。目的:构建针对snai1的高表达载体,建立稳定转染的细胞株。方法:根据GenBank中snai1的基因序列人工合成snai1全序列,将合成好的序列装入Pmd-18T载体并转化感受态细胞DH5α,进行阳性克隆筛选。测序验证重组克隆中基因序列正确后,用EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切Pmd-18T/snai1质粒,将所得的snai1全基因片段转入pcDNA3.1(+)空质粒,构建pcDNA(+)/snai1真核表达质粒,同时构建阴性对照质粒,并分别对结肠腺癌细胞HT-29进行转染,最后利用G418进行稳定表达株的筛选,并采用RT-PCR和Western blot鉴定宿主细胞内snai1基因的表达情况。结果与结论:成功构建了真核表达质粒pcDNA(+)/snai1,顺利转染结肠癌细胞HT-29后于600mg/LG418浓度时筛选21d得到snai1基因稳定表达株,构建的snai1基因正义表达质粒pCDNA3.1(+)/snai1转染宿主细胞后可促进snai1基因的表达。

miR-200c/ZEB1/E-cadherin轴在胆管癌转移侵袭中的作用及对胆管癌预后评估的价值

目的:探讨微小RNA-200c(miR-200c)/锌指转录因子(ZEB1)/E-钙黏蛋白(E-cadherin)在胆管癌(HCCA)转移、侵袭中的作用及对HCCA预后评估的临床价值。方法:选取2020年08月至2022年12月间我院收治的胆管癌患者36例为研究对象,同时选取胆管良性疾病患者(胆总管结石或胆管良性狭窄)20例作为对照。采用原位杂交、实时荧光定量PCR检测miR-200c在HCCA患者组织及血清中的表达;生存曲线分析miR-200c表达与总生存期的相关性;Transwell实验检测细胞的迁移及侵袭能力;免疫印迹检测ZEB1及E-cadherin蛋白的表达。体内研究构建裸鼠成瘤实验,采用免疫组化检测ZEB1及E-cadherin蛋白的表达;Tunel技术检测组织中的凋亡情况。受试者工作特征(ROC)曲线评估生物标志物对胆管癌预后的诊断效能。结果:miR-200c低表达于HCCA组织及血清中;生存曲线分析显示,miR-200c表达与患者的总生存期呈正相关性,TNM分期与患者的总生存期呈负相关性;miR-200c mimics抑制了胆管癌细胞的迁移和侵袭能力,并降低ZEB1表达而诱导E-cadherin表达;转染ZEB1逆转miR-200c的作用效应,促进胆管癌细胞的迁移和侵袭特性,抑制胆管癌细胞的凋亡。CA199、CEA和miR-200c联合检测诊断胆管癌预后的ROC曲线下面积为0.892,灵敏度0.8611,特异度0.8000。结论:miR-200c/ZEB1/Ecadherin轴参与胆管癌的转移侵袭;CA199、CEA和miR-200c联合检测对胆管癌预后的诊断效能良好,对临床胆管癌的治疗策略具有重要指导价值。

上皮性卵巢癌组织中WWOX蛋白、转录因子Elf5和Snail1、上皮间质转化标志分子的表达观察

目的观察上皮性卵巢癌组织中WWOX蛋白、转录因子Elf5和Snail1、上皮间质转化(EMT)标志分子的表达变化,并探讨其意义。方法收集300例上皮性卵巢癌患者的卵巢癌组织及其癌组织相对应的癌旁组织,免疫组化法分别检测上述组织中的WWOX蛋白、Elf5、Snail1及EMT标志分子E-cadherin、N-Cadherin、Vimentin。对卵巢癌组织及癌旁组织中上述指标的表达作比较,分析卵巢癌组织中上述指标的表达与卵巢癌FIGO分期、组织学类型、病理学分级和淋巴结转移等临床病理参数的关系,分析卵巢癌组织中上述各指标的表达关系,分析卵巢癌组织中WWOX蛋白、Elf5表达与卵巢癌患者预后的关系。结果 WWOX蛋白、Elf5和E-cadherin在卵巢癌组织中阳性表达率低、癌旁组织阳性表达率高,Snail1、N-cadherin、Vimentin在卵巢癌组织中阳性表达率高、癌旁组织中阳性表达率低;卵巢癌组织及癌旁组织中WWOX蛋白、Elf5、Snail1、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin的表达相比,P均<0.05。卵巢癌组织中上述指标的表达水平与上皮性卵巢癌病理分期、病理学分级及淋巴结转移有关(P均<0.05)。卵巢癌组织WWOX蛋白与Elf5的表达呈正相关(r=0.291,P<0.05),WWOX蛋白与Snail1、N-cadherin、Vimentin的表达呈负相关(r分别为-0.785、-0.482、-0.706,P均<0.05),WWOX蛋白与E-cadherin表达呈正相关(r=0.759,P<0.05),Elf5与Snail1、N-cadherin、Vimentin的表达呈负相关(r分别为-0.816、-0.465、-0.738,P均<0.05),Elf5与E-cadherin表达呈正相关(r=0.726,P<0.05)。卵巢癌组织中WWOX蛋白与Elf5阳性表达的患者生存率高于阴性者(P<0.05);卵巢癌组织中WWOX蛋白和Elf5的表达均为影响卵巢癌患者预后的独立因素(P均<0.05)。结论上皮性卵巢癌患者卵巢癌组织中WWOX蛋白、转录因子Elf5和Snail1、EMT标志分子的表达发生变化,而且其表达存在相关性,WWOX蛋白及Elf5的表达与上皮性卵巢癌患者的生存及预后相关。

老年子宫内膜样腺癌癌组织神经纤毛蛋白2、E盒结合锌指蛋白1对血管生成的作用

目的检测老年子宫内膜样腺癌患者术后组织中神经纤毛蛋白(NRP)2、转录因子E盒结合锌指蛋白(ZEB)1的表达及其对白细胞分化抗原(CD)34阳性的血管生成的作用。方法 133例老年子宫内膜样腺癌患者手术后存留的蜡块及临床资料为研究组,70例老年子宫脱垂或子宫肌瘤患者行子宫全切术后的宫颈组织作为对照组,应用免疫组化方法检测两组中NRP2、ZEB-1的表达和CD34标记的微血管密度(MVD),关注其相关性及临床意义。结果研究组NRP2、ZEB-1蛋白表达阳性率和MVD明显高于对照组,研究组NRP2、ZEB-1表达和MVD均与肿瘤的TNM分期、浸润、脉管累犯和Ki67指数密切相关(P均<0.05)。NRP2、ZEB-1和MVD均具有正相关性。结论子宫内膜样腺癌组织中NRP2、ZEB-1高表达和MVD可以有效促进肿瘤的发生和进展,NRP2和ZEB-1对CD34阳性的血管生成可能有一定促进作用。

高糖诱导肾小管上皮细胞发生上皮-间质转化过程中Snail 1对IGF-1表达的影响

目的研究锌指转录因子1(Snail 1)对高糖诱导的发生上皮-间质转化(epithelial to mesenchymal transition,EMT)的大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)中胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor 1,IGF-1)表达的影响,探讨糖尿病肾脏病发生机制及Snail 1与自分泌IGF-1的相关性。方法大鼠近端肾小管上皮细胞系(NRK-52E),分组如下:对照组、高糖组、高糖+NT组、高糖+siRNA组。分别于培养48 h、72 h收获细胞。用免疫荧光、原位杂交等方法检测细胞Snail 1、IGF-1、E-钙黏蛋白(E-cadherin)和纤维连接蛋白(fibronectin,FN)mRNA及蛋白的表达。结果与对照组相比,高糖组细胞IGF-1、Snail 1和FN的mRNA及蛋白表达明显增加,差异有统计学意义(P<0.01)。E-cadherin的mRNA及蛋白表达明显减少,差异有统计学意义(P<0.01);与高糖组相比,高糖+siRNA组细胞IGF-1、Snail 1和FN的mRNA及蛋白表达明显减少,差异有统计学意义(P<0.01),E-cadherin的mRNA及蛋白表达明显增加,差异有统计学意义(P<0.01);与高糖组相比,高糖+NT组IGF-1、Snail 1、E-cadherin和FN的mRNA及蛋白表达,差异无统计学意义(P>0.05)。Spearman's相关性分析显示,NRK-52E细胞中Snail 1与IGF-1蛋白的表达呈正相关(r=0.936,P<0.05)。结论高糖诱导肾小管上皮细胞发生EMT的过程中Snail 1可能通过调节IGF-1促进糖尿病肾脏病肾脏纤维化。

毛蕊花糖苷调控Snail1表达在糖尿病肾脏疾病中上皮细胞-间质转化中的作用

目的观察高糖环境中毛蕊花糖苷对肾小管上皮细胞-间质转化(EMT)的作用及相关蛋白的表达,探讨其肾脏保护的可能机制。方法通过建立糖尿病肾脏疾病大鼠模型,观察大鼠一般状态检测肾脏组织α平滑肌肌动蛋白(SMA)、锌指转录因子(Snail)1的表达。结果药物处理的糖尿病大鼠肾组织α-SMA、Snail1表达均明显高于正常对照组,但显著低于未用药物处理的糖尿病组;蛋白尿水平显著降低,恶化的肾功能得到显著改善;药物组血肌酐、血尿素氮、尿蛋白明显低于糖尿病组,明显高于正常对照组(P<0.05)。结论毛蕊花糖苷可能通过下调Snail1的表达,抑制机体的过度免疫应激从而抑制EMT,起到延缓肾功能恶化的作用。

锌指结构转录因子1在结直肠癌组织的表达及其临床意义

目的探讨人结直肠癌中锌指结构转录因子1（ZEB1）的表达及临床意义。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应检测结直肠癌组织和癌旁组织中ZEB1基因表达。免疫组织化学方法检测84例结直肠癌和23例正常结直肠组织中ZEB1蛋白表达水平。结果ZEB1 mRNA在结直肠癌中表达水平（0．638±0．057）显著高于癌旁组织（0．183±0．052），差异有统计学意义（P〈0．05）。ZEB1蛋白在结直肠癌组织中阳性表达率（67．5％）明显高于癌旁组织（8．7％），差异有统计学意义（P〈0．05）。ZEB1表达与淋巴结转移和远处转移明显相关。结论ZEB1在结直肠癌中高表达，为独立的临床病理因素，并与疾病预后明显相关。

基于TLR4/NF-κB/Snail1信号通路的槲皮素对糖尿病大鼠肾脏疾病的实验

本文基于TLR4/NF-κB/Snail1信号通路,通过采用一次性腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,随机分为正常对照组、糖尿病模型组、阳性对照组和槲皮素组并进行对比分析。实验结果表明:槲皮素对糖尿病大鼠的肾脏保护作用可通过调控肾脏TLR4/NF-κB/Snail1信号通路,减轻炎症反应抑制肾脏纤维化。

Gli1对TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞间质转分化和胶原合成的影响

目的探讨锌指转录因子1(Gli1)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的肾小管上皮细胞间质转分化和胶原合成的影响。方法培养肾小管上皮细胞NRK-52E,分为Control、TGF-β1(TGF-β1诱导)、sh-NC+TGF-β1(转染阴性对照shRNA,TGF-β1处理)和sh-Gli1+TGF-β1(转染Gli1 shRNA,TGF-β1处理)组共4组,应用qRT-PCR和Western blot分别检测细胞中Gli1表达水平,ELISA检测细胞培养液上清中纤维连接蛋白(FN)和Ⅰ型胶原酶(ColⅠ)水平,Western blot检测细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ras相关C3肉毒素底物1(Rac1)蛋白表达水平。结果TGF-β1组肾小管上皮细胞中Gli1 mRNA和蛋白表达量均高于Control组;肾小管上皮细胞中Gli1 mRNA和蛋白表达量,TGF-β1和sh-NC+TGF-β1组均高于sh-Gli1+TGF-β1组;FN和ColⅠ水平,Control组均低于TGF-β1、sh-NC+TGF-β1和sh-Gli1+TGF-β1组,TGF-β1和sh-NC+TGF-β1组均高于sh-Gli1+TGF-β1组;α-SMA和Rac1蛋白表达,Control组均低于TGF-β1、sh-NC+TGF-β1和sh-Gli1+TGF-β1组,TGF-β1和sh-NC+TGF-β1组均高于sh-Gli1+TGF-β1组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论下调Gli1减弱TGF-β1条件下肾小管上皮细胞间质转分化和胶原合成水平。

莪术含药血清抑制大鼠HSC中Gli1和β-catenin表达的机制研究

目的:研究莪术含药血清调节瘦素活化的大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC)中刺猬(hedgehog,Hh)信号通路锌指转录因子-1(glioma-associated oncogene homolog-1,Gli1)和Wnt信号通路关键因子β-连环蛋白(β-catenin)表达的机制。方法:按随机数字表法将30只清洁级sprague-dawley(SD)大鼠均分3组,分别给予莪术水煎剂、秋水仙碱、生理盐水灌胃取血制备含药血清。经高效液相色谱法(HPLC)检测血清中莪术成分。体外培养大鼠HSC,分为8组:空白组、模型组、Hh通路抑制剂组、莪术组、Hh通路抑制剂+莪术组、Hh通路激动剂组、Hh通路激动剂+莪术组、秋水仙碱组。除空白组外,其余各组均给予100 ng/m L瘦素诱导后,各组再给予相应药物干预24 h,MTT法检测HSC增殖情况,RT-PCR法检测Gli1 m RNA和β-catenin m RNA表达,Western blot及免疫荧光法检测Gli1和β-catenin蛋白表达。结果:与空白组比较,经瘦素活化的大鼠HSC中Gli1、β-catenin的m RNA和蛋白表达均明显增高(均P=0.000)。与模型组比较,Hh通路抑制剂、莪术含药血清分别干预及莪术含药血清与Hh通路抑制剂协同干预后,Gli1、β-catenin的m RNA和蛋白表达均明显降低(均P=0.000);秋水仙碱含药血清干预后,Gli1 m RNA和蛋白明显降低(P=0.000,P=0.007),β-catenin m RNA和蛋白表达均明显降低(均P=0.000);Hh通路激动剂干预后,Gli1、β-catenin的m RNA和蛋白表达均明显增高(均P=0.000)。与Hh通路激动剂组比较,用莪术含药血清干预Hh通路激动剂组后,Gli1、β-catenin的m RNA和蛋白表达均明显降低(均P=0.000)。结论:莪术含药血清可通过下调瘦素诱导活化的大鼠HSC中Gli1的表达,参与Hh信号通路抑制HSC的活化与增殖,并能通过下调Gli1的表达而下调Wnt信号通路关键因子β-catenin的表达,抑制HSC活化与增殖,从而抑制肝纤维化。

核转运蛋白α2(KPNA2)通过激活Snail 1信号通路促进胃癌细胞增殖和侵袭及迁移

目的研究核转运蛋白α2(KPNA2)在胃癌细胞中的表达、生物学作用及机制。方法采用基因表达谱相互作用分析(GEPIA)数据库分析胃癌患者肿瘤组织中KPNA2蛋白相对表达量。将KPNA2短发夹RNA转入至高表达KPNA2的MKN45胃癌细胞,将KPNA2质粒转入至MKN45胃癌细胞,在敲低和过表达KPNA2细胞中,采用CCK-8法检测细胞增殖,TranswellTM小室实验、创伤愈合实验检测细胞侵袭和迁移;实时定量PCR检测细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、增殖细胞核抗原(PCNA)、CD133、CD44、性别决定区Y框蛋白2(SOX2)、上皮钙黏蛋白(E-cadherin)、神经钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(vimentin)、基质金属蛋白酶2(MMP2)、MMP9的mRNA水平,Western blot法检测KPNA2、cyclinD1、PCNA、CD133、CD44、SOX2及Snail 1蛋白水平。结果KPNA2在胃癌组织高表达,过表达KPNA2能够促进MKN45胃癌细胞增殖、侵袭和迁移。同时促进胃癌细胞的cyclin D1、PCNA、CD133、CD44、SOX2、E-cadherin、N-cadherin、vimentin、MMP2、MMP9以及Snail 1的表达。结论KPNA2通过刺激上皮间质转化促进胃癌细胞的侵袭和迁移。

MicroRNA-192、ZEB1对膀胱癌上皮-间质转化的影响

目的探讨micro RNA-192(mi R-192)和锌指结构转录因子1(ZEB1)在膀胱癌组织中的表达及其意义。方法选取96例择期行手术治疗的膀胱癌患者作为膀胱癌组,同期留取外伤性膀胱破裂患者正常膀胱黏膜组织41例作为对照组,采用荧光定量聚合酶链反应检测不同组织中mi R-192和ZEB1基因的表达,Western blot检测不同组织中ZEB1、E-cadherin及Vimentin蛋白的表达,分析其相关性。结果膀胱癌组织中mi R-192表达水平低于对照组(P<0.05),而ZEB1 m RNA表达水平高于对照组(P<0.05)。膀胱癌组织中mi R-192和ZEB1 m RNA表达水平与病理学分级、TNM分期、淋巴结转移与否有关(P<0.05)。Western blot检测结果显示,膀胱癌组织中ZEB1和Vimentin蛋白表达水平高于对照组(P<0.05),而E-cadherin蛋白表达水平低于对照组(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,膀胱癌组织中mi R-192与ZEB1、Vimentin蛋白表达水平呈负相关(r=-0.279和-0.318,均P=0.000),与E-cadherin蛋白表达水平呈正相关(r=0.376,P=0.000)。结论 mi R-192在膀胱癌组织中呈低表达,mi R-192可能通过负性调控ZEB1促进上皮-间质转化过程,从而加速膀胱癌的浸润和转移。

KLF8及Snail1在结肠癌中的表达及意义

目的:探讨结肠癌组织中Krüppel样转录因子8(KLF8)、锌指蛋白转录因子1(Snail1)的表达及临床意义。方法:收集2015年11月—2017年11月70例结肠癌组织与30例癌旁正常组织,采用免疫组织化学法检测上述组织中KLF8、Snail1的表达情况,分析两者的相关性及临床病理特征的关系。结果:KLF8在结肠癌组织中的阳性表达率为71. 4%,高于癌旁正常组织20%,差异有统计学意义(P <0. 05); Snail1在结肠癌组织中的阳性表达率为54. 2%,高于癌旁正常组织的30%,差异有统计学意义(P <0. 05)。KLF8和Snail1在结肠癌组织中的表达与TNM分期、浸润深度及淋巴结转移有关(P <0. 05),与年龄、性别、肿瘤大小、分化程度无关(P> 0. 05)。在结肠癌组织中两者表达不存在相关性。结论:KLF8和Snail1在结肠癌组织中高表达,且两者之间不存在相关性,提示KLF8和Snail1两者通过不同的途径参与结肠癌的发生、发展过程。

微小RNA-192和锌指结构转录因子1在子宫内膜癌组织中的表达及意义

目的探讨微小RNA-192（miR-192）和锌指结构转录因子1（ZEBl）在子宫内膜癌组织中的表达及意义。方法选取子宫内膜癌组织59例、子宫肌瘤组织42例和正常子宫内膜组织42例，利用qRT—PCR检测miR-192及ZEBl在不同组织中的表达，Westernblot检测ZEBl蛋白在不同组织中的表达。结果子宫内膜癌患者组织中miR-192相对表达量（0．69±0．13）低于正常子宫内膜（1．03±0．21）和子宫肌瘤患者（0．98±0．17），差异均有统计学意义（t=10．983、8．572，均P〈0．05），子宫内膜癌患者组织中ZEBlmRNA相对表达量（0．47±0．08）和ZEB1蛋白表达量（1．13±0．24）均高于正常子宫内膜[（0．28±0．05）和（0．89±0．17）]和子宫肌瘤患者[（0．31±0．07）和（0．87±0．21）]，差异均有统计学意义（t=6．834、7．053，5．983、6．751，均P〈0．05）；miR-192和ZEBl在子宫内膜癌组织中表达均与FIGO分期和淋巴结转移有关（t=1．840、2．465，P〈0．05），Pearson相关分析显示，miR-192在子宫内膜癌组织中相对表达量与ZEBl相对表达量呈负相关（r=-0．402，P=0．002）。结论miR-192在子宫内膜癌患者组织中呈低表达，可能通过作用于ZEBl而参与子宫内膜癌浸润和转移过程。

结直肠癌组织中PLOD2、ZEB1表达变化及意义

目的探讨结直肠癌患者癌组织中赖氨酸羟化酶2(PLOD2)、转录因子E盒结合锌指蛋白1(ZEB1)表达变化及意义。方法选择结直肠癌患者82例,采用免疫组化法检测其癌组织及癌旁正常组织中PLOD2、ZEB1表达,分析二者相关性及其表达与患者临床病理参数间的关系。随访并比较不同PLOD2、ZEB1表达与患者5年总体生存率(OS)关系,多因素Cox回归分析影响患者5年OS的相关因素。结果结直肠癌及癌旁组织中PLOD2阳性表达率分别为56.10%(46/82)、15.85%(13/82),ZEB1阳性表达率分别为46.34%(38/82)、18.29%(15/82),结直肠癌及癌旁组织中PLOD2、ZEB1表达差异有统计学意义(P均<0.05)。Spearman相关性分析示,结直肠癌组织PLOD2与ZEB1表达呈正相关(r=0.280,P=0.011)。组织分化程度与癌组织PLOD2表达差异有统计学意义(P<0.05);肿瘤浸润深度、淋巴结转移、TNM分期与癌组织PLOD2、ZEB1表达差异有统计学意义(P均<0.05)。PLOD2阴性和阳性表达者5年OS分别为86.1%(31/36)、56.5%(26/46),差异有统计学意义(P<0.05);ZEB1阴性和阳性表达者5年OS分别为84.1%(37/44)、52.6%(20/38),差异有统计学意义(P<0.05)。多因素生存分析显示,TNM分期和PLOD2是影响患者5年OS独立影响因子(P均<0.05)。结论结直肠癌患者癌组织中PLOD2、ZEB1表达升高,检测二者表达有助于结直肠癌病情判断及患者预后评估。

E-cadherin以及转录因子ZEB1在乳腺癌中的表达及与ER、PR、HER-2及Ki-67表达的相关性

目的 研究E-钙黏蛋白(E-cadherin)、E盒结合锌指蛋白1(ZEB1)在乳腺癌组织中的表达水平及与雌激素受体(ER)、 孕激素受体(PR)、 人表皮生长因子受体2(HER-2)及肿瘤细胞增殖核抗原(Ki-67)表达的相关性.方法 采用免疫组化法检测108例乳腺癌患者癌组织及癌旁正常组织中E-cadher-in、ZEB1的表达水平,分析E-cadherin、ZEB1表达水平与乳腺癌临床病理学特征及HER-2、ER、Ki-67、PR表达的相关性.结果 E-cadherin在乳腺癌组织中阳性表达率明显低于癌旁正常组织(P<0.05);ZEB1在乳腺癌组织中阳性表达率明显高于癌旁正常组织(P<0.05);E-cadherin在乳腺癌中的表达与TNM分期、 病理组织学分类、 淋巴结转移、 年龄、 肿块直径及ER显著相关(P<0.05);ZEB1在乳腺癌中的表达与病理组织学分类、 淋巴转移、 组织学分级及HER-2、Ki-67显著相关(P<0.05).结论 E-cadherin在乳腺癌组织中呈低表达,且与ER显著相关;ZEB1在乳腺癌组织中呈高表达,且与HER-2、Ki-67显著相关.

蛇床子素对糖尿病肾病模型小鼠肾间质纤维化的预防作用

目的探讨蛇床子素(OST)对糖尿病肾病(DN)模型小鼠肾间质纤维化的影响。方法采用一次性尾静脉注射链脲佐菌素建立糖尿病小鼠模型,成功后继续喂养12周建立DN模型。将糖尿病模型小鼠分为模型组和OST低、中、高剂量(20、40、80 mg/kg)组,每组10只,糖尿病造模成功后每日灌胃相应药物或溶剂(模型组)1次,持续12周;同时设置正常对照组。末次灌胃后,检测各组小鼠空腹血糖、24 h尿蛋白、血肌酐(Scr)、尿素氮水平;Masson染色法观察肾间质区域胶原纤维的沉积情况;免疫组化染色法检测肾皮质中E-钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(vimentin)的表达;Western blot法检测肾皮质中卵泡抑素样蛋白1(Fstl1)、锌指转录因子1(Snail1)蛋白表达和蛋白激酶B(Akt)磷酸化水平(以p-Akt/Akt比值计)。结果与正常对照组比较,模型组小鼠空腹血糖、24 h尿蛋白、Scr、尿素氮水平,肾间质胶原纤维沉积占比,肾皮质中vimentin表达水平以及Fstl1、Snail1蛋白表达水平和p-Akt/Akt比值均显著升高(P<0.01),E-cadherin表达水平显著降低(P<0.01)。与模型组比较,OST各剂量组小鼠上述指标变化均显著逆转(P<0.05或P<0.01)。结论OST预防性用药可有效降低DN模型小鼠的空腹血糖,保护其肾功能,抑制肾小管上皮细胞间充质转分化,延缓肾间质纤维化进程,其作用机制可能与抑制Fstl1/Akt/Snail1通路有关。