锌_7-与镉_7-金属硫蛋白对羟自由基损伤大鼠红细胞膜保护作用的比较

用电子自旋共振自旋标记物氮氧自由基硬脂酸和马来酰亚胺标记大鼠红细胞膜脂和膜蛋白，测定膜脂流动性和膜蛋白构象改变，以硫代巴比妥酸法测定脂质过氧化产物丙二醛含量．结果表明，锌7-与镉7-金属硫蛋白对羟自由基引起的膜脂流动性减低、脂质过氧化反应增强双膜蛋白构象改变有明显抑制作用，而且，前者的作用明显强于后者．

锌_7与镉_7－金属硫蛋白清除羟自由基的比较

分离及纯化兔肝金属硫蛋白制备去金属金属硫蛋白、锌７与镉７金属硫蛋白．在不同ｐＨ条件下，比较后二者清除羟自由基能力；在ｐＨ６条件下，比较锌７－金属硫蛋白与有关蛋白和无机锌盐清除羟自由基效果．结论是在近生理ｐＨ条件下锌７－金属硫蛋白清除羟自由基能力远强于镉７－金属硫蛋白．金属硫蛋白清除羟自由基的能力主要来源于蛋白中处于还原态的流基．

锌_7-金属硫蛋白对深Ⅱ度烧伤创面脂质过氧化反应的影响

背景:研究表明锌-金属硫蛋白具有明显的清除氧自由基和保护生物大分子的功能。目的:观察锌7-金属硫蛋白对大鼠深Ⅱ度烧伤创面脂质过氧化反应的影响及在创面愈合中的作用。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2008-10/2009-01在解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所第二研究室完成。材料:健康雄性Wistar大鼠78只,随机分为2组,锌7-金属硫蛋白保护组、生理盐水组各36只,各组观察时相点为伤后12,24,48h及7,14,21d,每时相点6只。方法:将大鼠背部置于98℃水中8s,造成大鼠背部15%的深Ⅱ度烫伤创面。2组均于伤后即刻给药,锌7-金属硫蛋白保护组与生理盐水组分别外敷单层纱布浸润的浓度为1×10-5mol/L的锌7-金属硫蛋白以及等渗盐水,第1天每4h换药1次,第2,3天每8h换药1次,此后每日换药1次,直至创面愈合。主要观察指标:伤后7d开始采用硬纸片质量间接法测创面愈合率。伤后各时相点取创面组织标本(创面已愈合则取瘢痕组织),分别测羟脯氨酸、丙二醛含量和超氧化物歧化酶活性。结果:伤后7,14,18,21d锌7-金属硫蛋白组创面愈合率高于生理盐水组(P<0.05);且锌7-金属硫蛋白组伤后48h,7d,14d,超氧化物歧化酶活性降低程度和丙二醛含量升高程度与生理盐水组比较差异有显著性意义(P<0.05);锌7-金属硫蛋白组在伤后48h,7d羟脯氨酸含量减少程度显著低于生理盐水组(P<0.05),且在14d时含量已接近正常水平。结论:锌7-金属硫蛋白对大鼠深Ⅱ度烧伤创面有促愈合作用,其促愈机制与使用锌7-金属硫蛋白后创面脂质过氧化反应程度减轻有关。

锌转运体ZNT7在小鼠视网膜的定位分布

目的研究锌转运体-7(zinc transporter 7,ZNT7)在小鼠视网膜的定位和分布。方法应用免疫组织化学技术检测CD-1小鼠视网膜内的ZNT7免疫反应产物的表达。结果ZNT7在小鼠视网膜内分布广泛,在神经节细胞和色素上皮细胞内ZNT7免疫阳性反应产物的表达最丰富,在无长突细胞和视神经纤维层中ZNT7免疫阳性反应产物为中等程度的表达,在内网层、外网层和光感受器外节中ZNT7免疫阳性染色较淡,在外核层和光感受器内节中ZNT7几乎没有表达。结论ZNT7可能在维持视网膜锌稳态过程中起到重要的作用。

卡尼鄂拉蜂锌转运蛋白-7相似蛋白(ZnT-7-like)的基因克隆、抗体制备及差异表达

【目的】本研究旨在克隆卡尼鄂拉蜂Apis mellifera carnica锌转运蛋白-7相似蛋白(zinc transporter 7-like,ZnT-7-like)基因,制备ZnT-7-like多克隆抗体,了解该基因在卡尼鄂拉蜂王浆腺中不同时期的差异表达情况。【方法】运用RT-PCR法从卡尼鄂拉蜂王浆腺总RNA中扩增ZnT-7-like基因,进行生物信息学分析,为避开跨膜结构的干扰,选择克隆其部分序列(273 bp)作为多肽免疫序列。将其亚克隆入原核表达载体pGEX-4T-1,转入大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)中诱导表达获得融合蛋白,然后将融合蛋白纯化后免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,分别用间接ELISA和Western blot检测抗体的效价和特异性,最后采用实时荧光定量RT-PCR以及Western blot技术检测该基因在不同日龄成虫王浆腺中的相对表达量。【结果】克隆得到卡尼鄂拉蜂ZnT-7-like基因,大小为1 065 bp。SDS-PAGE电泳结果显示融合蛋白成功表达;制备的多克隆抗体效价高达1∶64 000,且具有很高的特异性。ZnT-7-like在卡尼鄂拉蜂5个日龄成虫中的转录情况存在较大差异,表现为3日龄成虫中的表达量极显著高于其他日龄(P<0.01),12日龄表达量最低,其他日龄间表达量两两差异显著(P<0.05)或极显著(P<0.01);ZnT-7-like蛋白表达与转录水平基本一致。【结论】成功克隆了卡尼鄂拉蜂ZnT-7-like基因,制备了兔抗蜂ZnT-7-like多克隆抗体,并在转录和翻译两个水平上测定了ZnT-7-like在卡尼鄂拉蜂王浆腺中不同时期的相对表达量。这些结果为深入研究卡尼鄂拉蜂ZnT-7-like基因的功能奠定了基础。

二氢卟吩P_6-6-(N-乙基)酰胺-7,γ-二甲酯锌的合成及对吲哚美辛诱发大鼠胃溃疡的保护作用

目的 研究二氢卟吩 P6 - 6 - (N -乙基 )酰胺 - 7,γ-二甲酯锌 ( )的合成及抗胃溃疡活性。方法 蚕沙糊状叶绿素经酸、碱降解反应制得紫红素 - 18( ) , 经乙胺解后重氮甲烷甲基化制得二氢卟吩 P6 - 6 - (N-乙基 )酰胺 - 7,γ-二甲酯 ( ) , 与醋酸锌络合制得 ;以 0 .2 %吲哚美辛 (2 0 mg/ kg) ip大鼠制备胃溃疡模型 ,并测定溃疡指数和溃疡个数。结果 的结构经 U V、IR、1 HNMR、FAB- MS及元素发射光谱确证。ip 80 m g/ kg有极显著降低吲哚美辛诱发的大鼠溃疡指数 (P<0 .0 1)和溃疡个数 (P<0 .0 1)。结论 为新化合物 , 的波谱数据系首次报道。 对吲哚美辛诱发的大鼠胃溃汤具有显著的保护作用 ,提示 是一种有开发前景的抗溃疡候选化合物 。

VPI-7分子筛的合成及生物学性能

采用水热法,通过调变反应溶胶的量合成了不同尺寸的不规则圆片状多孔锌硅分子筛VPI-7,并研究了其生物学性能.扫描电子显微镜观测结果表明,制备的样本由VPI-7条状晶体聚集成微球,并进一步相互交联形成微米级孔隙,其形貌可以促进钙磷化合物在样品表面的沉积,同时可以负载并缓释蛋白.细胞学检测结果表明,VPI-7分子筛有利于细胞黏附增殖,具有良好的生物相容性.

含锌废水处理新工艺

对高锌离子,高COD浓度的7-ACA废水,提出了一套较完整的去除锌离子,降低COD浓度的工艺方法;并对锌进行回收,重新制成醋酸锌晶体。

生酮饮食对新生期反复惊厥大鼠远期神经行为及大脑皮层内锌离子流入蛋白7表达的影响

目的 观察生酮饮食（ketogenic diet,KD）对三氟乙醚所诱导的新生期大鼠反复惊厥后远期神经行为损伤的影响及其大脑皮层内锌离子流入蛋白7（ZIP7）表达的变化.方法 24只8日龄SD大鼠,随机分为4组,分别为空白对照组（NS＋ND组）、对照生酮饮食组（NS＋KD组）、单纯惊厥组（RS＋ND组）、惊厥生酮饮食组（RS＋KD组）,每组n=6.于出生后31d进行前肢悬吊实验和旷场实验.于生后32 d各组大鼠断头取大脑皮层组织,采用免疫印迹技术（Western blot）检测ZIP7的表达.结果 （1）前肢悬吊实验中,RS＋ND组前肢悬吊时间[（19.17±2.48）s]较NS＋ND组[（32.67±2.42）s]明显缩短（P＜0.05）,RS＋KD组前肢悬吊时间[（26.25±2.87）s]较RS＋ND组明显延长（P＜0.05）.（2）旷场实验中,与NS＋ND组[（2.00±0.63）次]相比,RS＋ND组清洁次数[（4.00±0.63）次]明显增多（P＜0.05）;与RS＋ND组比较,RS＋KD组清洁次数[（2.17±0.75）次]明显减少（P＜0.05）.（3） Western blot结果显示,与NS＋ND组相比,RS＋ND组皮层ZIP7表达显著降低（P＜0.05）;与RS＋ND组相比,RS＋KD组皮层ZIP7表达明显升高（P＜0.05）.结论 新生期反复惊厥导致神经行为损伤,生酮饮食可能通过上调大脑皮层中ZIP7的表达改善神经行为。

锌转运体7基因沉默抑制APP转基因细胞APP表达和Aβ分泌

目的锌转运体7(ZnT7)在阿尔茨海默病(Alzheimer'sdisease,AD)患者脑内高表达并在老年斑内形成聚集效应。但其是否参与AD发病尚不清楚,本实验旨在探讨ZnT7基因沉默对APP转基因细胞APP/Aβ表达水平的影响。方法应用RNAi技术对APP转基因细胞进行ZnT7基因沉默,并采用RT-PCR,WesternBlot,免疫荧光,ELISA,MTT方法,分析ZnT7基因沉默对APP转基因细胞对APP蛋白的表达、Aβ分泌和细胞活力的影响。结果免疫荧光双标结果显示,ZnT7RNAi可明显抑制APP转基因细胞的ZnT7和APP表达;WesternBlot结果显示,ZnT7RNAi可明显抑制APP转基因细胞的APP蛋白表达;ELISA结果显示,ZnT7RNAi可明显抑制APP细胞转基因的Aβ分泌。结论 ZnT7可能参与细胞内APP代谢,ZnT7基因可作为AD治疗的一个潜在靶点。

妊娠期铅、镉暴露对新生大鼠海马BDNF及ZnT7蛋白表达的影响

目的探究妊娠期铅(Pb)、镉(Cd)暴露对新生大鼠海马脑源性神经营养因子(BDNF)及锌转移体7(ZnT7)蛋白表达的影响。方法妊娠SD大鼠分为4组:对照组(NC组,饮用蒸馏水)、Pb组(300 mg/L)、Cd组(10 mg/L)及Pb+Cd组(300 mg/L Pb+10 mg/L Cd),每组3只。采用饮水染毒,干预21 d。采集各组21 d龄新生大鼠的血液及海马组织样本,PE700Z型原子吸收光谱仪测定血液及海马组织Pb、Cd水平;水迷宫实验测定新生大鼠认知能力;蛋白免疫印迹(Western blot)法检测海马组织中BDNF及ZnT7蛋白水平;Pearson法分析Pb+Cd组新生大鼠海马组织中BDNF、ZnT7蛋白水平与血液、海马中Pb、Cd水平的相关性。结果与NC组比较,Pb组、Cd组及Pb+Cd组新生大鼠逃避潜伏期、进入盲端次数、海马组织中ZnT7蛋白水平显著增加,BDNF水平显著降低(P<0.05),其中以Pb+Cd组变化最明显。Pb+Cd组新生大鼠海马组织中BDNF水平与血液及海马组织Pb、Cd水平均呈负相关(P<0.05),ZnT7蛋白水平与血液及海马组织Pb、Cd水平均呈正相关(P<0.05)。结论妊娠期Pb、Cd暴露可协同降低新生大鼠认知能力,可能与海马BDNF表达降低,ZnT7蛋白表达升高有关。

超分子聚轮烷荧光探针测定痕量对苯二胺

利用荧光光谱研究了锌离子对百草枯-葫芦[7]脲包结物荧光性能的影响,发现锌离子能极大增强体系荧光。进一步研究表明对苯二胺对百草枯-葫芦[7]脲-锌离子三元络合物的荧光具有较强增敏作用,并且增敏程度与对苯二胺的加入量成正比。在初步探讨作用机理的基础上,以百草枯-葫芦[7]脲-锌离子三元络合物作为荧光探针,建立了环境污染物对苯二胺的检测方法。在最优条件下,对苯二胺的线性范围为0.04—28μmol·L-1,线性回归方程为F=751.98+299C(μmol·L-1),相关系数为r=0.9993,检出限为0.028μmol·L-1(n=11)。可能共存物干扰实验表明方法具有较好的选择性。本方法用于环境水样中痕量对苯二胺的检测,回收率为98.0%—100.4%,结果令人满意。