错配修复蛋白表达缺陷结直肠癌区域淋巴结转移的危险因素分析

目的探讨错配修复蛋白表达缺陷(dMMR)结直肠癌患者区域淋巴结(RLN)转移的危险因素。方法回顾性分析2012年1月至2016年12月于中国医学科学院肿瘤医院接受手术治疗的357例dMMR结直肠癌患者的临床病理资料,采用单因素和多因素分析,分析临床病理因素与RLN转移的关系。结果357例患者中,男204例,女153例;中位年龄56岁。61.6%(220/357)的肿瘤位于右半结肠,仅16.2%(58/357)的肿瘤位于直肠。单因素分析结果显示,肿瘤大小、肿瘤分化程度、脉管瘤栓、癌结节、术后病理T分期(pT)、阴性淋巴结总数和MSH6蛋白的表达情况均与RLN转移有关(均P<0.05)。15例高分化及13例pT1期dMMR患者均无RLN转移。多因素分析显示,肿瘤分化程度(OR=2.582,95%CI为1.567~4.274,P<0.001)、pT分期(OR=3.778,95%CI为1.448~12.960,P=0.015)和MSH6蛋白的表达情况(OR=2.188,95%CI为1.159~4.401,P=0.021)是RLN转移的独立影响因素。结论在dMMR结直肠癌患者中,术后T分期、肿瘤分化程度和MSH6蛋白的表达情况是RLN转移的独立影响因素,通过术前评估有望进一步提高预测RLN转移的准确性。

胃癌微卫星不稳定与错配修复蛋白表达的缺失

目的:分析胃癌组织微卫星不稳定性、错配修复蛋白表达以及二者的关系,探讨胃癌发生的分子生物学机制. 方法:胃腺癌及癌旁组织标本56例,高分化癌22例,中低分化癌34例,早期癌20例,中晚期癌36例,常规酚-氯仿法提取DNA,选取基因组上的五个微卫星位点BAT-26、D17S261、D3S1283、D2S123和D3S1611, 进行PCR扩增,扩增产物加入GeneScan 500 size stan- dard共同热变性后,用60 g/L的SLPA添加8mol/L尿素做筛分递质的毛细管电泳进行分析.被检测的五个微卫星位点如出现两个或两个以上位点的不稳定,定为微卫星的高度不稳定(MSI-H),一个位点出现不稳定、定为微卫星的低度不稳定(MSI-L),没有位点出现不稳定、定为微卫星稳定(MSS).石蜡切片常规免疫组织化学SP方法检测hMLH1和hMSH2蛋白的表达,肿瘤组织上皮细胞核不着色,而周围组织上皮细胞核着色判定为hMLH1或hMSH2 蛋白表达的缺失. 结果:在56例胃腺癌中,有14例(25%)表现为MSI-H, 14例(25%)有错配修复蛋白表达的缺失.在14例MSI-H的胃癌组织中,11例(79%)有hMLH1或hMSH2表达的缺失,42例MSI-L/MSS的胃癌组织仅3例(7%)有hMLH1 或hMSH2表达的缺失.胃癌的MSI-H与错配修复蛋白表达的缺失高度相关(P<0.01).其中的22例高分化腺癌有7例(32%)表现为MSI-H、6例(27%)有错配修复蛋白表达的缺失,34例中低分化腺癌7例(21%)表现为MSI-H、8例(24%)有错配修复蛋白表达的缺失,20例早期腺癌有1例(5%)表现为MSI-H、3例(15%)有错配修复蛋白表达的缺失,36例中晚期腺癌13例(36%)表现为MSI-H、11例(31%)有错配修复蛋白表达的缺失.微卫星不稳定性在中晚期胃癌明显高于早期胃癌(P<0.05),但在不同分化程度的胃癌差异不明显;MMR蛋白表达缺失在高分化与低分化以及早期与中晚期的胃癌均无显著性差异. 结论:细胞错配修复功能缺陷与部分胃癌的发生有关,而与胃癌的生物学行为无关;胃癌的微卫星不稳定性随着肿瘤的演进而增加.

DNA错配修复蛋白hMLH1在大肠癌组织中的表达及其与大肠癌分化的关系

目的:了解错配修复蛋白hMLH1在大肠癌组织中的表达及其与大肠癌分化的关系。方法:应用SP免疫组织化学法对65例大肠癌组织病理切片进行免疫组化分析。结果:大肠癌旁正常组织hMLH1的表达阳性率为80%,明显高于癌组织hMLH1的表达阳性率46.2%(P<0.01);高分化、中分化和低分化大肠癌组织中hMLH1的表达率分别为68.2%、44.1%和22.2%,高分化大肠癌与低分化大肠癌之间hMLH1的表达存在显著性差异(0.01<P<0.05),但高分化大肠癌与中分化大肠癌、中分化大肠癌与低分化大肠癌之间hMLH1的表达无显著性差异(P>0.05)。结论:hMLH1表达水平与大肠癌的发生及分化相关,大肠癌分化程度越低,hMLH1表达水平越低。

胃癌细胞错配修复基因hMSH2蛋白的表达特点

[目的]探讨错配修复基因hMSH2蛋白在胃癌细胞中的表达特点及意义。[方法]免疫组织化学SP法检测138例胃癌标本hMSH2基因的表达情况。[结果]胃癌hMSH2蛋白表达强度及表达部位均与胃癌分化程度无显著相关关系(P >0 .0 5 ) ;hMSH2蛋白表达强度在核表达及核、浆同时表达者明显强于浆表达者(P <0 .0 5 )。[结论]hMSH2蛋白不能有效地进入核内发挥作用可能是导致错配修复功能下降的另一原因。

结直肠癌DNA错配修复蛋白和微卫星不稳定性与P53蛋白表达关系的研究

结直肠癌是消化系统常见的恶性肿瘤,病死率较高,预后不良。近年来随着分子靶向治疗研究的不断深入,许多研究证实微卫星不稳定性（microsatellite instability,MSI）与肿瘤的发生、发展有着密切的关系,推测其可能是肿瘤发生的机制之一。MSI是DNA错配修复蛋白（MMR）功能缺失导致的一种基因突变,这种错配修复缺陷可导致4个错配修复基因MSH2,MLH1,MSH6和PMS2的失活。

错配修复蛋白表达水平与肾细胞癌预后

目的 研究错配修复基因hMLH1和hMSH2在不同肾组织中的表达水平及其对肾癌预后的预测。方法采用免疫组织化学方法检测71例肾癌组织及其癌周正常组织,31例肾良性病变组织石蜡标本中hMLH1、hMSH2的表达水平,同时收集所有标本的详细病理学资料,将蛋白表达水平与病理结果进行对比。结果 hMLH1和hMSH2的表达水平在肾良性病变中均明显高于癌组织和癌周正常组织,在高分化肾癌中均明显高于低分化肾癌,1年内无复发组显著高于1年内复发组;hMSH2在无转移组中的表达显著高于有转移组,而hMLH1在有无转移组的表达差异无显著性意义。结论 hMLH1、hMSH2两种修复蛋白在肾癌和肾良性病变组织中的表达水平有明显差异,且与肿瘤分化程度和肿瘤复发密切相关;hMSH2与肾癌转移有关,hMLH1与转移的关系不明显。hMSH2和hMLH1蛋白表达水平对肾癌预后有一定的预测作用。

错配修复蛋白表达缺失子宫内膜癌的临床病理特征分析

目的:分析并总结错配修复(MMR)蛋白表达缺失子宫内膜癌(EC)的临床病理特征。方法:选取2018年1月至2020年6月在江门市中心医院治疗的105例EC患者为研究对象。收集其年龄、体重、身高、病史、肿瘤个人史及家族史、肿瘤病理组织学分型、肿瘤是否累及或发生于子宫体下段、肌层浸润深度、有无脉管浸润、有无淋巴结转移、肿瘤内部及周围淋巴细胞浸润情况、免疫组化表达情况等资料,并根据MMR蛋白的表达情况,结合临床资料分析MMR蛋白表达缺失EC的临床病理特征。结果:在105例患者中,MMR蛋白表达缺失患者共有27例(占25.71%),MLH1、MSH2、MSH6、PMS2表达缺失率分别为14.29%、5.71%、9.52%、17.14%,其中PMS2表达缺失患者最多;MLH1、PMS2同时表达缺失率为13.33%,MSH2、MSH6同时表达缺失率为5.71%;MLH1、MSH2、PMS2三者同时表达缺失率为0.95%;在27例MMR蛋白表达缺失患者中,年龄>50岁患者的MMR蛋白表达缺失率低于年龄≤50岁患者(P<0.05);体质指数(BMI)<25患者的MMR蛋白表达缺失率高于BMI≥25患者(P<0.05);肿瘤累及或发生于子宫体下段患者的MMR蛋白表达缺失率高于肿瘤未累及或发生于子宫体下段患者(P<0.05);肿瘤淋巴细胞浸润患者的MMR蛋白表达缺失率高于无淋巴细胞浸润患者(P<0.05);有无高血压史、有无糖尿病史、不同病理组织学分型、不同肌层浸润深度、有无肿瘤家族史和肿瘤个人史患者的MMR蛋白表达缺失率比较无统计学差异(P>0.05)。结论:EC患者MMR蛋白表达缺失更常见于非肥胖女性、肿瘤累及或发生于子宫体下段者、50岁以下年龄者以及肿瘤淋巴细胞浸润者。

DNA错配修复蛋白表达缺失与胃癌临床病理特征相关性的meta分析

目的利用meta分析综合评价DNA错配修复蛋白表达缺失(dMMR)与胃癌临床病理特征的相关性。方法使用关键词系统检索PubMed、Web of Science、Embase数据库、知网、万方以及维普数据库中关于DNA错配修复(MMR)蛋白表达与胃癌临床病理特征的相关研究,检索从建库开始至2021年6月。依据Cochrane筛选文献及提取数据,根据纽卡斯尔-渥太华量表(NOS)评价纳入文献的质量,最后利用Review Manager 5.4.1进行meta分析。结果共纳入13项研究,5075例胃癌患者,其中dMMR患者530例,占比为10.44%。meta分析结果显示,肿瘤位置与dMMR有显著相关性(OR=0.60,95%CI=0.47~0.76,P<0.0001);劳伦分型与dMMR有显著相关性(OR=2.56,95%CI=1.49~4.39,P=0.0007);dMMR与无淋巴结转移胃癌有显著相关性(OR=1.40,95%CI=1.12~1.75,P=0.003);TNM分期与dMMR无显著相关性(OR=1.47,95%CI=0.88~2.44,P=0.14);伴有淋巴管浸润的胃癌与dMMR有显著相关性(OR=1.70,95%CI=1.23~2.36,P=0.001)。所有亚组纳入文献均不存在发表偏倚(P>0.05)。结论dMMR的胃癌患者具有显著的临床病理特征,对诊断及临床治疗具有重要的价值。

错配修复蛋白表达缺失在子宫内膜癌中的临床病理意义

目的:探究错配修复(MMR)蛋白表达缺失在子宫内膜癌(EC)中的临床病理意义。方法:选取惠州市第一人民医院2019年3月至2022年12月收集的EC患者术后石蜡包埋子宫内膜组织标本50例,采用免疫组织化学检测法检测MMR蛋白表达,包含MLH1、MSH2、MSH6及PMS2,观察MMR蛋白表达缺失率,对不同年龄及EC病理特征的MMR蛋白表达缺失情况进行比较。结果:(1)50例EC患者MMR蛋白表达缺失发生率为36.00%。MMR蛋白MLH1、MSH2、PMS2、MSH6表达缺失率分别为22.00%、6.00%、30.00%、6.00%,其中单项缺失4例(8.00%),两项表达缺失14例(18.00%)。(2)≤50岁EC患者MMR蛋白缺失表达率(56.00%)高于>50岁EC患者(16.00%),差异具有统计学意义(P<0.05)。(3)不同细胞分化程度、肌层浸润程度及淋巴结转移情况患者MMR蛋白表达缺失情况比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:MMR蛋白在EC中表达缺失率较高,以PMS2表达缺失为主,且MMR蛋白表达缺失率在≤50岁EC患者中更高,故需重视对年轻女性EC早期筛查。

左右半结肠癌肿瘤组织中KRAS、NRAS、BRAF状态及错配修复蛋白表达与临床病理特征的关系

目的:探讨左右半结肠癌肿瘤组织中KRAS、NRAS、BRAF状态及错配修复蛋白表达与临床病理特征的关系。方法:选取2018年1月-2022年5月福建医科大学附属南平第一医院收治的149结肠癌患者作为研究对象,所有患者均采集病理标本开展荧光定量PCR扩增法及免疫组织化学法检测KRAS、NRAS、BRAF基因突变状态及错配修复蛋白表达,分析左右半结肠癌患者与KRAS、NRAS、BRAF状态、错配修复蛋白表达、临床病理特征间关系。结果:左右半结肠癌患者KRAS、NRAS基因突变方面相比,差异均无统计学意义(P>0.05);右半结肠癌患者BRAF基因突变率[13.11%(8/61)]高于左半结肠癌[2.27%(2/88)],差异有统计学意义(P<0.05);右半结肠癌患者MLH1[16.39%(10/61)]、MSH6[13.11%(8/61)]、PMS2蛋白缺失率[21.31%(13/61)]均高于左半结肠癌[2.27%(2/88)、1.14%(1/88)、3.41%(3/88)],差异均有统计学意义(P<0.05);左右半结肠癌患者年龄、体重指数、家族史、分化程度、脉管癌栓及临床分期方面相比,差异均无统计学意义(P>0.05);右半结肠癌患者女性占比[60.66%(37/61)]、肿瘤≥5 cm占比[57.38%(35/61)]均高于左半结肠癌患者[34.09%(30/88)、26.14%(23/88)],神经侵犯占比[16.39%(10/61)]低于左半结肠癌患者[31.82%(28/88)],差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:左右半结肠癌患者在KRAS、NRAS、BRAF状态、错配修复蛋白表达及临床病理特征间存在一定差异性,右半结肠癌患者女性较多,且BRAF基因突变率高、MLH1、MSH6、PMS2蛋白缺失率高,但左半结肠癌神经侵犯风险高,还需依据疾病特征制定个体化治疗方案,以改善患者预后。

错配修复蛋白表达与散发性结直肠癌患者临床病理特点及预后的关联分析

目的探讨散发性结直肠癌(SCC)患者中错配修复蛋白(MMRP)表达与其临床病理特点及预后的关联。方法 97例散发性结直肠癌患者,根据MMRP表达情况分为缺失组(17例)与正常组(80例)。比较两组临床病理特点与预后情况。结果根据病理结果 ,发现MMRP表达缺失17例,归为缺失组, MMRP表达正常80例,归为为正常组;MMRP表达缺失率为17.53%。两组性别、病理类型比较差异无统计学意义(P>0.05),两组肿瘤直径、病理淋巴结和转移(TNM)分期、分化程度、淋巴结转移比较,差异有统计学意义(P<0.05)。随访1年时,缺失组患者1年无病生存率64.71%(11/17)高于正常组的37.50%(30/80),差异有统计学意义(χ2=4.2527, P=0.0392<0.05);缺失组总生存率94.12%(16/17)高于正常组的70.00%(56/80),差异有统计学意义(χ2=4.2629, P=0.0389<0.05)。结论散发性结直肠癌患者中MMRP表达和患者的临床病理特点有关,而且MMRP表达缺失与正常者在预后上有一定的差异,因此做好散发性结直肠癌患者MMRP表达检测对于医师判断病情,评估预后有着重要临床意义。

错配修复蛋白表达率在子宫内膜癌临床病理特征中的变化

目的分析错配修复蛋白表达率在子宫内膜癌临床病理特征中的变化。方法选取医院子宫内膜癌患者术后石蜡包埋子宫内膜组织标本69例,经免疫组织化学法检测错配修复蛋白表达,包括MLH1、MSH2、MSH6、PMS2。分析错配修复蛋白表达缺失情况、不同年龄段错配修复蛋白表达缺失情况、错配修复蛋白表达与子宫内膜癌临床病理特征关系。结果错配修复蛋白表达缺失发生率为21. 74%(15/69)。错配修复蛋白MLH1、MSH2、PMS2、MSH6表达缺失率分别为7. 25%(5/69)、14. 49%(10/69)、4. 35%(3/69)、13. 04%(9/69)。≤50岁患者错配修复蛋白缺失表达率为39. 29%,高于> 50岁患者的9. 76%(P <0. 01)。细胞分化级别高、肌层浸润程度深及淋巴结转移患者的错配修复蛋白表达缺失率升高,差异有统计学意义(P <0. 05);不同病理类型、手术病理分期患者在错配修复蛋白表达缺失率相比,差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论错配修复蛋白表达缺失在子宫内膜癌诊断中应用价值较高,且错配修复蛋白表达缺失率在患者低龄、细胞分化级别高、肌层浸润程度深及淋巴结转移中升高。

结直肠癌(CRC)中错配修复蛋白MLH1、MSH2、PMS2、MSH6及P53的表达及其临床意义

目的通过检测结直肠癌患者标本中5种不同错配修复蛋白因子的表达水平,探讨其临床意义。方法随机抽出2019年12月—2021年5月61例结直肠癌(CRC)病例作研究,经实验室病理检测MLH1、MSH2、PMS2、MSH6及P53的表达差异,并采用统计学软件完成相关性分析。结果4种错配修复蛋白缺失患者占比约18.03%(11/61),单种蛋白表达缺失占比最低为4.92%,最高为11.48%,MLH1、PMS2共同表达缺失为8.20%明显高于MSH2、MSH6共同表达缺失3.28%;P53蛋白表达阳性率47.54%(29/61)。4种错配修复蛋白表达所致微卫星不稳定与组织分型、TNM分期有关(χ^(2)=8.614、4.104,P=0.003、0.043),P53蛋白阳性表达与组织分型、TNM分期、淋巴结转移有关(χ^(2)=6.050、4.102、7.110,P=0.014、0.043、0.008);且P53蛋白表达阳性与微卫星不稳定呈现负性相关(r=-0.136,P<0.05)。结论CRC患者MLH1、PMS2蛋白缺失占比远高于MSH2、MSH6蛋白缺失,P53蛋白阳性表达与组织分型、分期、淋巴结转移有关;MLH1、MSH2、PMS2、MSH6及P53的表达与CRC发病和病情进展有一定关联。

免疫组织化学法检测结直肠癌四种DNA错配修复蛋白表达缺失对判断肿瘤微卫星状态的价值

目的分析免疫组织化学法检测结直肠癌四种DNA错配修复蛋白表达缺失在肿瘤微卫星状态判断中的价值。方法选择云南省红河州第三人民医院2018年9月~2019年9月收治的37例结直肠癌患者,对其病灶组织行切片处理,所有患者先行免疫组织化学法检测,后行PCR-毛细管电泳法检测,观察两种方式的诊断结果。结果常规切片免疫组织化学法检测结果:31例患者四种MMR蛋白呈现出弥漫强阳性表达,5例患者至少存在一种蛋白阴性表达,1例患者至少存在一种蛋白局灶阳性表达。组织芯片PCR-毛细管电泳法检测结果:30例患者四种MMR蛋白呈现出弥漫强阳性表达,6例患者至少存在一种蛋白阴性表达,1例患者至少存在一种蛋白局灶阳性表达。两种检测方式准确度、敏感度及特异度未有明显的组间差异(P>0.05)。结论通过免疫组织化学法检测结直肠癌四种DNA蛋白表达情况,在结直肠癌肿瘤微卫星状态的预测中敏感度和特异度较高,且具有一定的经济性,可有效筛选出结直肠癌,其较高的准确性能对优化治疗方案有关键作用。

错配修复蛋白的DNA微卫星不稳定性和缺陷:唯支持细胞综合症的一种新病因

微卫星不稳定性是某些类型癌症的特征,并存在于缺乏特异性DNA错配修复蛋白的啮齿类动物。这些无精子症小鼠表现与某些人类睾丸功能衰竭患者相同的精子发生缺陷。

脉络膜黑素瘤蛋白表达错配修复的改变和微卫星不稳性

目的：通过蛋白质微卫星不稳性（MSI）和错配修复（MMR）的改变证明脉络膜黑素瘤基因组的不稳定性，评估这些变化对肿瘤的临床病理特征有无关联。

人免疫缺陷病毒跨膜蛋白gp41在大肠杆菌中的表达

为研究廉价的 HIV血清学诊断系统 ,实现检测试剂国产化 ,用原核 p ET系统表达 HIV跨膜蛋白 gp41 .研究发现 ,全长及缺失 C端 1 / 3的 gp41在 E.coli中均不能有效表达 .仅保留 N端 1 / 3的 gp41 (包含 gp41主要抗原决定簇 ,5 94～ 61 3氨基酸 )有一定量的表达 ;通过金属螯合层析 ,产物得到部分纯化 ;Western blot显示产物有很好的反应原性 .推测 gp41在 E.coli中较低表达量可能与 m RNA的二级结构有关 .

猴免疫缺陷病毒SIV核心蛋白基因在大肠杆菌中表达的研究

应用多聚酶链反应（ＰＣＲ），直接从ＳＩＶ感染的猴艾滋病（ＳＡＩＤＳ）模型猴的外周血淋巴细胞总ＤＮＡ中扩增出７６７ｂｐ的ＳＩＶ核心蛋白Ｐ２７基因片段。扩增产物经ＥｃｏＲＩ及ＳａｌＩ双酶切后，克隆入相同酶切的表达质粒ｐＢＶ２２０中，获得含ＳＩＶ核心蛋白基因片段的重组质粒ｐＢＶＳＧ，并进行ＤＮＡ序列分析。用该重组质粒转化大肠杆菌ＤＨ５ａ经筛选、增殖及４２℃温度诱导，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ表明外源基因表达蛋白含量占菌体总蛋白１４．５％，Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ证实表达产物能被ＳＩＶＰ２７单克隆抗体及ＳＡＩＤＳ模型猴血清中特异性抗体识别。