缺氧缺血性脑损伤新生大鼠内源性一氧化碳变化及锡原卟啉的干预作用

目的 探讨内源性一氧化碳 (CO)在新生大鼠缺氧缺血性脑损伤 (HIBD)中的作用机制及锡原卟啉的保护作用。方法 取7日龄新生SD大鼠30只 ,平均分成3组,1组为正常对照组 ,另2组为干预组和非干预组 ,分别于HIBD模型建立后立即腹腔注射锡原卟啉和9g/L氯化钠溶液 ,24h后用分光光度法检测全血一氧化碳血红蛋白 (COHb)水平 ,然后对脑组织进行HE染色 ,在光镜下观察脑组织病理变化。 结果 非干预组血COHb水平为7.54 %±0.72% ,高于正常对照组 (0.88%±0.07% )和干预组 (1.15%±0.21% ,均P<0.01)。干预组脑组织病变发生率 (30% )低于非干预组 (80% ,P<0.01)。结论 CO可能作为一种内源性介质参与新生大鼠HIBD的发病过程 ,锡原卟啉对HIBD具有保护和治疗作用。

锡-原卟啉防治新生儿高胆红素血症的实验研究——体内分布的测定

新生儿高胆红素血症传统疗法有换血、光疗和酶诱导剂,但这些方法只能降低已经形成的未结合胆红素(UCB)浓度。设想根本的解决方法是在胆红素未形成之前,以阻断UCB的产生,使其血清中浓度不致升高,临床不出现高未结合胆红素血症为目标,达到优生优育的目的,从而探索出锡-原卟啉(Sn-

锡－原卟啉与胆红素代谢的研究进展

自发现人工合成锡－原卟啉（Ｓｎ－ｐｒｏｔｏｐｏｒｐｈｙｒｉｎＳｎＰＰ）能有效抑制体内血红素加氧酶活力而降低胆红素产率后，对ＳｎＰＰ的生化特性及其代谢的研究，展示了ＳｎＰＰ表现形式及其与蛋白质联结间相互作用，以及ＳｎＰＰ、血红素和胆红素三者分别与蛋白质联结的关系。并知ＳｎＰＰ对血红素加氧酶有双重调节机制和ＳｎＰＰ对组织细胞内血红素及其代谢酶的影响，以及临床试用表明，ＳｎＰＰ能有效降低血清胆红素水平，从而减少了新生儿高胆红素血症发病数和患儿光疗时间，能起到更新和补充新生儿高胆红素血症的防、治作用。

新生鼠缺氧缺血性脑损伤和内源性一氧化碳、糖皮质激素的关系

【目的】研究内源性一氧化碳(carbon monoxide,CO)、内源性糖皮质激素(glucocorticoid,GC)、环磷鸟苷(cGMP)在新生鼠缺氧缺血性脑损伤中的作用及锡原卟啉(SnPP)对其的治疗前景。【方法】制备缺氧缺血性脑损伤(hypoxia-ischemic brain damage,HIBD)新生鼠模型和锡原卟啉治疗模型。利用分光光度法测定新生大鼠HIBD后血一氧化碳血红蛋白(COHb)和GC含量,放免法检测脑cGMP水平,并观察脑组织形态学变化。【结果】HIBD组在2、12、24 h GC含量、COHb及cGMP水平与对照组相比显著增高(P<0.01);SnPP组COHb含量及cGMP水平明显低于HIBD组(P<0.01),但仍显著高于对照组(P<0.01)。脑组织病理改变显示HIBD组呈重度改变,SnPP组的病理改变明显减轻。【结论】HIBD后GC、CO和cGMP明显增高;而SnPP可抑制CO活性,使CO和cGMP水平下降,减轻脑损伤,表明GC、CO、cGMP系统在缺氧缺血的病理生理过程起着重要作用。

血红素氧合酶-1/一氧化碳系统在肺纤维化大鼠中的表达及药物干预

目的研究血红素氧合酶-1(HO-1)/一氧化碳(CO)系统在肺纤维化大鼠中的表达及药物干预影响,为肺纤维化的诊治提供一种新方法。方法应用健康Wistar大鼠60只,随机分为4组,分别为对照组、肺纤维化组(纤维化组)、肺纤维化加HO-1特异激动剂组(加强组)、肺维化加HO-1特异抑制剂组(抑制组)。检测各个模型组中大鼠肺组织与血清中HO-1/CO体系表达情况,分析HO-1/CO体系在大鼠肺纤维化中的作用,以及药物对肺纤维化程度的影响。结果在对照组中,HO-1与COHb在大鼠肺组织和血清中低表达,且两者差异无统计学意义(P>0·05),在单纯组、加强组、抑制组中,与对照组相比,HO-1与COHb在大鼠肺组织和血清中均高表达,以加强组为重,抑制组最低,两者差异具有统计学意义(P<0·05)。结论HO-1/CO系统参与了大鼠肺纤维化形成过程,通过对其的干预,可以改变大鼠肺纤维化的程度,为肺纤维化的诊断与治疗的提供新途径。

血红素氧合酶在脑膜炎中的差异性表达及SnPP的保护作用

目的研究血红素氧合酶(HO)在脑膜炎大脑中的改变及其与游离铁增加的内在关联,探讨锡原卟啉对脑源性游离铁增加的抑制作用。方法利用新生Wistar大鼠制作脑膜炎动物模型。采用免疫荧光组织化学检测血红素氧合酶1和2在大脑中的表达及其产物胆红素的分布。采用免疫印迹方法对血红素氧合酶1和2进行定量分析。锡原卟啉皮下注射后利用Ferene-S方法检测脑内游离铁含量变化。结果与对照组相比,HO-1蛋白水平在感染组中显著上升,且与脑游离铁有共存关系,HO-2表达水平低且保持恒定。锡原卟啉抑制HO-1产物胆红素的产生和游离铁增加。结论大鼠脑膜炎病变过程中脑游离铁的增加是脑源性的,由HO-1分解血红素产生。锡原卟啉能够显著抑制血红素氧合酶活性,从而抑制脑膜炎病变过程中游离铁的产生。

大鼠HO-1表达质粒构建、活力检测及抗HUVEC凋亡的作用研究

异种移植排斥反应的主要特征为内皮细胞发生Ⅱ型激活,引起黏附分子、细胞因子和前促凝分子等基因高表达,造成血管收缩、白细胞黏附、激活、聚集和血栓形成,最终导致内皮细胞凋亡。保护基因HO-1通过抑制前炎症反应及免疫调抑作用以保护异种移植器官。因此,通过构建含剪切的野生型大鼠HO-1 cDNA的表达型质粒,用DOTAP包裹转入HUVEC中表达,测定表达量及表达产物活性;采用TNF-α诱导细胞凋亡,以及Heme和SnPP分别刺激细胞,诱导和抑制细胞内HO-1表达量,流式细胞仪测定细胞凋亡率,明确HO-1的抗细胞凋亡作用。结果显示HO-1在HUVEC中高度表达,活力为对照组5倍;TNF-α诱导细胞凋亡,但Heme处理后细胞凋亡率下降至20%以下,而SnPP处理后细胞凋亡率显著上升,最高达到95%以上,并且HO-1基因表达抑制时细胞凋亡率是诱导时的5-20倍。本实验表明Heme处理后HO-1表达上调,具有显著抗细胞凋亡作用,细胞凋亡率与HO-1表达量呈负相关,提示HO-1通过抑制细胞凋亡,对细胞有保护作用。

血红素加氧酶-1抗人血管内皮细胞凋亡的实验研究

目的 转染pcDNA3HO1入人血管内皮细胞（HUVEC）并表达，研究血红素加氧酶-1（HO-1）保护细胞凋亡的作用。方法 将构建好的质粒用DOTAP包裹转入细胞中表达：用CCLR破碎细胞后，SDS-PAGE鉴定表达量，采用TNF-α诱导细胞凋亡，以流式细胞仪测定细胞的凋亡率；采用Hemin和SnPP，分别刺激细胞，促进和抑制HO-l在细胞中的表达。结果 经Hemin处理后细胞的凋亡率均在20％以下，而SnPP处理后细胞的凋亡率大幅上升，最高可达到95％以上。实验数据显示HO-1基因表达被抑制时细胞凋亡率是诱导时的5～20倍。结论 细胞凋亡率与质粒转染效率和HO-l表达量均成反比，提示HO-l对细胞有保护作用，可以抑制细胞凋亡，存临床具有广泛的应用前景。

新生儿黄疸150例诊治体会

目的探讨新生儿黄胆的诊断和治疗体会。方法回顾性分析2009年1月-2011年12月于我院治疗的新生儿黄胆的临床资料,分析其诊断、治疗中的注意事项。结果本组150例患儿经药物配合蓝光治疗,显效64例,有效86例,无效0例,总有效率为100%;平均黄疸消退时间(4.4±1.2)d;所有患儿均在(7.2±0.8)d内痊愈出院,整体效果满意。结论对新生儿黄疸施以药物配合蓝光的治疗方法,可有效促使胆红素的下降并改善患儿黄疸临床症状,临床疗效肯定,值得推广应用。