海南省两地红带锥蝽体内锥虫的感染情况和分子特征

探讨海南省红带锥蝽中感染锥虫的分子流行特征,为锥虫病的防治提供依据。2020—2021年在海南省采集红带锥蝽,设计属通用引物,采用PCR扩增锥虫18S小亚基核糖体RNA基因(18S rDNA),电泳阳性结果测序,阳性率的比较采用卡方检验。对阳性样本进行18S rDNA和热休克蛋白70基因(HSP70)序列比对和遗传变异分析。2020—2021年在海南昌江黎族自治县和五指山市共采集锥蝽143只,经实验室鉴定均为红带锥蝽。锥虫18S rDNA扩增,共获得51份锥虫阳性样本,锥虫阳性率为35.66%,其中五指山和昌江地区红带锥蝽锥虫阳性率分别为52.00%和26.88%。对51份18S rDNA测序分析,结果表明:海南省红带锥蝽感染锥虫分为两类,一类与Trypanosoma conorhini 18S rDNA(XR_003828665.1)序列一致性高达100.00%;另一类与T.conorhini(XR_003828665.1)序列一致性为95.79%左右,为T.conorhini地理株。对两类阳性样品进行HSP70扩增克隆测序获得9条阳性样品HSP70的核酸序列。构建系统发育树,结果表明:T.conorhini分为两群,一群与T.conorhini(XR_003828665.1,AJ012411.1)亲缘关系更近,同为一个分支;另一群单独聚为一支。本次对海南省昌江、五指山两地红带锥蝽的调查显示:T.conorhini野生型阳性率为6.29%,T.conorhini地理株的阳性率为29.37%。本次调查的海南地区红带锥蝽感染的锥虫均为T.conorhini,并出现了T.conorhini地理株,且其为优势虫株。

红带锥蝽性别决定基因doublesex的克隆及表达分析

Doublesex是昆虫性别决定级联通路上的关键基因,其在控制昆虫性别分化中起着重要的作用。本研究旨在克隆、鉴定美洲锥虫病重要媒介红带锥蝽(Triatoma rubrofasciata)的性别决定基因doublesex(Trdsx),分析其不同发育时期的表达谱。基于红带锥蝽基因组数据库,比对Trdsx相关片段,分别以雌雄红带锥蝽cDNA为模板,采用PCR方法克隆Trdsx基因,利用生物信息软件对所得序列进行结构域预测、氨基酸序列比对和进化树分析。根据Trdsx特异性表达引物,利用real time RT-PCR方法研究其在红带锥蝽不同发育时期及雌雄个体的表达谱。从红带锥蝽雌、雄成虫中克隆获得一个雌、雄共有的Trdsx cDNA全长开放性读码框序列,命名为TrdsxB。TrdsxB长度为948 nt,编码315个氨基酸。结构域分析发现TrdsxB包含锌离子结合序列、具有保守的锌螯合残基C2H2C4的DM结构域和参与泛素介导的蛋白水解序列的UBA结构域。TrdsxB在卵中高表达,随后逐渐减少,在四期若虫降至最低,之后再次升高。TrdsxB雌、雄锥蝽中存在表达差异。本研究获得了红带锥蝽性别决定基因doublesex(TrdsxB)的全长开放性读码框序列,TrdsxB具有保守的结构域,其在雌、雄锥蝽体内存在表达差异。本研究结果将为红带锥蝽的性别调控机制和生物防制研究提供理论基础。

广州市锥蝽侵害及叮咬状况调查与分析

目的了解并分析广州市锥蝽分布情况、被锥蝽叮咬的散在案例的具体状况以及美洲锥虫病感染状况。方法在广州各区对锥蝽进行调查,采集虫体,对采集到的疑似昆虫进行形态学鉴定;对被锥蝽叮咬者进行问卷调查并采血,用快速检测试剂和ELISA方法检测美洲锥虫病抗体。结果在广州11个区中,有10个区采集到锥蝽,共184只,其中成虫135只(雌∶雄为56∶79),若虫49只;经形态学鉴定,均为红带锥蝽;此次调查中,发现11个区均有被叮咬者,共46人(男∶女为26∶20),农村地区有27例;被叮咬者中出现较为严重过敏反应症状者为5人,占10.9%;被叮咬者中对锥蝽的知晓率为23.9%。叮咬大多为偶发,均为锥蝽自行飞入房中进行;对被叮咬者血清检测美洲锥虫病抗体均为阴性。结论锥蝽在广州分布广泛,叮咬事件时有发生,需进行环境改造,加强卫生管理,清除其孳生地;群众对于锥蝽有关知识了解不足,需加强健康教育工作,增强主动防护意识;对于可疑的美洲锥虫病携带者进行筛查是防止美洲锥虫病入侵中国的重要措施。

广东省首次红带锥蝽分布调查与分析

目的了解红带锥蝽在广东省的地理分布、形态学特征和分子生物学特征。方法选取粤西地区和珠江三角洲地区8个地市共23个县(市、区)开展调查,采取光诱法和人诱法进行搜捕。对捕获的锥蝽进行形态学和分子生物学鉴定,提取锥蝽基因组DNA,PCR扩增细胞色素b(Cytb)基因,测序并进行序列比对。结果调查共捕获红带锥蝽273只,其中若虫36只,成虫237只,分布在广东省的8个地市共23个县(市、区)。经形态学特征和基因序列分析,采集到的锥蝽为红带锥蝽,与广西合浦红带锥蝽Cytb基因(GenBank:MH368018.1)序列同源性最高,为94.91%。调查共收集到9起锥蝽叮咬人的事件报告。结论红带锥蝽广泛分布于广东省粤西地区和珠三角地区,居民被叮咬的事件时有发生,应加强对红带锥蝽的监测和控制。

恰加斯病传播媒介红带锥蝽的研究进展

恰加斯病(又称美洲锥虫病)是一种由克氏锥虫引起的人畜共患病,该病潜伏期长、确诊率低,目前没有疫苗可以预防,且病程发展到晚期无特效药物,故有学者称其为"新型艾滋病"。在过去20年中,恰加斯病已经从主要流行区拉丁美洲蔓延到其他非流行国家,同时,其主要传播媒介之一的红带锥蝽在全球分布广泛,包括我国部分潮湿温暖的南方地区。因此,本文从红带锥蝽的分布特征、生物学、分子生物学等方面对其研究进展进行全面综述,以期为我国输入性恰加斯病的防治提供参考依据。

红带锥蝽的实验室人工饲养和部分生物学特性观察

目的建立一套规范完整的实验室红带锥蝽人工饲养技术和方法,为了解红带锥蝽的生活史、分子生物学特性、锥蝽传播疾病及防控的研究提供参考资料。方法在温度(28±1)℃,相对湿度(70±5)%的恒温恒湿培养箱中12 h光照和12 h黑暗条件下,以昆明鼠为唯一饲血动物,对红带锥蝽进行实验室人工饲养。结果红带锥蝽在人工饲养环境下可完成整个生活史的发育。红带锥蝽完成一个世代需126～153 d,Ⅰ～Ⅴ龄期若蝽、成蝽各期均在鼠体嗜血。结论通过实验室人工饲养,成功进行了红带锥蝽的繁殖。

红带锥蝽各发育阶段形态特征观察

目的描述和比较红带锥蝽各发育阶段的形态特征。方法现场捕获红带锥蝽成虫,实验室饲养获得卵和若虫,置解剖镜下观察,测量卵长度、卵中部粗、卵盖直径、卵盖中部高,测量若虫和成虫的体长、头长、头宽、眼前部长、眼后部长、复眼间距、单眼间距、触角各节长、喙各节长、前胸背板长、前胸背板前叶长、前胸背板后叶长、胸部最大宽度、腹部最大宽度和前翅芽(前翅)长。并将本研究中观察的红带锥蝽成虫与《医学昆虫学》和《中国蝽类昆虫鉴定手册》中记载的锥猎蝽亚科的全园蝽属和红猎蝽属昆虫及锥猎蝽属的华锥猎蝽进行形态学比较。结果红带锥蝽生活史包括卵、Ⅰ～Ⅴ龄若虫和成虫。卵呈长椭圆形,平均大小为1.838 mm×0.976 mm,具卵盖,发育后期可见红色眼点。若虫至成虫体长呈递增状态,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ龄若虫和成虫的平均体长依次为2.546、 4.834、 7.127、 10.258、 17.062和21.787 mm;Ⅲ龄若虫开始出现翅芽并逐渐伸长,至成虫发育为翅;Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ龄若虫前翅芽和成虫前翅平均长度依次为0.584、 1.261、 3.832和13.359mm;Ⅰ～Ⅳ龄若虫无单眼,Ⅴ龄若虫可见单眼痕迹,至成虫发育为单眼一对。红带锥蝽与全园蝽属和红猎蝽属昆虫可通过头部形状和触角着生部位鉴别。红带锥蝽头长适中,触角着生于眼和唇基之间;而全园蝽属的头部粗短,触角着生于眼的直前方;红猎蝽属的头部狭长,触角着生于头前部近唇基处。红带锥蝽与华锥猎蝽可通过头及前胸背板是否具颗粒、前胸背板前角和小盾片顶端的形态鉴别。红带锥蝽的头及前胸背板密布小颗粒,前胸背板前角较长,小盾片顶端刺尖削;而华锥猎蝽的头及前胸背板无颗粒,但具显著的皱纹,前胸背板前角较短,小盾片顶端不尖削。结论红带锥蝽各发育阶段的形态特征显著,其成虫的形态特征可与全园蝽属、红猎蝽属昆虫及锥猎蝽属的华锥猎蝽鉴别。

不同气候情景下红带锥蝽在中国潜在适生区预估

目的明确不同气候情景下红带锥蝽在中国的潜在适生区,为红带锥蝽预防控制规划提供参考。方法使用ENMtool和ArcGIS 10.5软件筛选红带锥蝽在全球的分布点数据;用maxent 3.4.4和R 3.6.0语言软件根据环境变量贡献率、刀切法以及变量相关性分析对气候变量进行筛选;使用R语言软件计算模型调控倍频和特征组合用以调整最大熵模型(MaxEnt)参数;利用MaxEnt模型预估历史气候情境和未来不同气候情景条件下红带锥蝽在中国的潜在分布范围。结果共筛选出73个红带锥蝽分布点;MaxEnt模型结果中,训练遗漏率与理论遗漏率吻合度高,模型曲线下面积(AUC)值为0.990。MaxEnt模型预估历史情景下红带锥蝽潜在适生区分布在我国华南地区,在未来低等强迫(ssp126)和中高等强迫(ssp370)情景下,总适生区面积分别呈现出下降与小幅上升趋势,但是高适生区面积整体上升。结论随着气候变化,红带锥蝽在我国的的潜在适生区范围将从广东、广西、海南、台湾4省扩大到江西、湖北、安徽、湖南、福建、云南、四川、西藏等省(自治区),其中江西北部地区将有可能存在红带锥蝽的高适生区。研究为我国红带锥蝽的防治、监测、预警提供了理论依据。

红带锥蝽实验条件下发育特征研究

目的研究红带锥蝽的发育历程,为其调查和防制提供参考依据。方法以福建省漳州市华安县湖坪村采集的红带锥蝽为研究对象,于2018年5月-2019年9月在温度26℃、相对湿度60%的实验室环境条件下进行饲养。以ICR小鼠为唯一供血源(供血3 d),观察并记录红带锥蝽各个发育阶段的孵化、吸血、蜕皮等情况。结果在设定的实验条件下,红带锥蝽可完成整个生活史,包括卵、Ⅰ~Ⅴ龄若虫和成虫等7个阶段,平均历时117.7 d。卵的孵化率为92.2%(391/424)。若虫和成虫均吸血,且每一龄若虫均需饱血才能蜕皮,雌性成虫需吸血才能产卵。Ⅰ~Ⅴ龄若虫的吸血率和蜕皮率分别为86.4%(338/391)和72.4%(283/391)、76.7%(217/283)和58.3%(165/283)、71.5%(118/165)和52.1%(86/165)、91.9%(79/86)和64.0%(55/86)、96.4%(53/55)和56.4%(31/55)。若虫的吸血量随龄期增长而逐渐增大,Ⅰ~Ⅴ龄若虫的平均吸血量分别为(2.9±11.0)、(8.0±3.0)、(14.9±8.8)、(85.4±17.8)、(101.6±54.2)mg,吸血后的平均体质量增重倍数分别为5.4±1.8、3.8±1.2、2.8±1.1、5.1±1.4、2.6±1.1。Ⅴ龄若虫平均吸血量最大,Ⅰ龄若虫吸血后平均体质量增重倍数最大。结论红带锥蝽在实验条件下通过动物饲血能完成生活史,可为相关研究提供实验平台。

我国红带锥蝽染色体核型及C带分析

目的对我国红带锥蝽进行核型及C带分析,了解其染色体数目、形态以及C带染色情况。方法以采自广东顺德的雄性红带锥蝽精巢组织为实验样本,通过滴片法制备中期染色体玻片,进行Giemsa染色和C带染色,显微镜下观察中期染色体形态;同时观察异染色质所在位置,进行显微拍照并记录每条染色体长臂、短臂和全长,分析红带锥蝽染色体核型和C带特点。结果雄性红带锥蝽染色体数目为2n=25,其中22条为常染色体,3条为性染色体,所有染色体相对长度范围为3.59%-12.76%,臂比值为1.06-1.24,着丝粒指数为44.76%-48.47%,所有染色体均为中着丝粒染色体(m),核型公式为2n=22m+X_(1)X_(2)Y。C带带型在不同染色体上分布有所不同:X染色体不含异染色质,整体呈淡染;Y染色体所有区域均含有异染色质,整体呈深染;常染色体两端存在异染色质区。结论我国雄性红带锥蝽染色体数目为2n=25,核型公式为2n=22m+X_(1)X_(2)Y,其C带染色中Y染色体呈深染、X染色体淡染、常染色体两端呈深染。本研究相关结果可望为研究红带锥蝽起源、演化及基因定位等奠定基础。

媒介锥蝽的研究进展及媒介潜能预测

锥蝽是一种重要的传播媒介,可以携带克氏锥虫,从而引起美洲锥虫病,该病多发于拉丁美洲,近年来开始在世界各地流行。随着全球经济一体化的进程,我国对外国际交流和合作不断深化。在此背景下,境外输入传染病的风险也将增高。由于我国也存在美洲锥虫病的传播媒介锥蝽,因此具有通过境外输入而引起我国继发传播的风险,可能严重威胁我国人民的身体健康和生命安全。本文主要回顾了国内外对媒介锥蝽的研究进展,探讨了我国本地锥蝽的媒介潜能,为我国输入性美洲锥虫病的防控提供参考。面对这些新问题、新挑战,在寄生虫病防控方面对我们提出新要求,本综述以"同一健康(one health)"理念开展寄生虫病的监测、防控和研究。

锥盾菱猎蝽生物学特性的研究

在湛江室内和室外对锥盾菱猎蝽进行了观察研究,记述了该天敌的形态特征、生物学特性和捕食量。

锥盾菱猎蝽生物学特性的研究

在室内和室外对锥盾菱猎蝽进行了观察研究 ,记述了该天敌的形态特征。

锥盾菱猎蝽生物学特性的研究

在湛江室内和室外对锥盾菱猎蝽进行了观察研究 ,记述了其形态特征、生物学特性和捕食量。结果表明 ,锥盾菱猎蝽在湛江 1年发生 2代 ,以 5龄若虫越冬 ;平均历期第一代为 1 31 .5d ,越冬代为 2 1 0 .5d ,若虫或成虫每天可捕食 1～ 2龄马尾松毛虫幼虫 1～ 6头。

美洲锥虫病——美洲新型艾滋病

美洲锥虫病,又称查加斯病,是由克氏锥虫引起的潜在致命的寄生虫性人兽共患病。除人外,在美洲200多种哺乳动物感染了克氏锥虫。人和动物感染的主要传播媒介为吸血昆虫——锥蝽,偶尔通过非吸血昆虫媒介机制传播,如输血、污染食品、母婴感染。该病的临床症状因感染阶段不同而异,早期急性期无症状或症状轻微,隐匿期亦无症状,慢性期的典型症状为渐进性慢性心脏和消化系统损害,持续终生,部分病例死亡。因克氏锥虫与人免疫缺陷病毒(HIV)的早期传播模式、漫长的潜伏期和难以治愈等方面极其相似,有专家将查加斯病称为"美洲的新艾滋病"。该病曾局限于美洲地区,但现已随人口迁移传播到欧洲等大陆,成为全球性疫病。在急性期,使用苄硝唑和硝呋替莫抗寄生虫药物治疗很有效;在慢性期,也可延迟或防止症状恶化,但仍有部分慢性病例最终发展成致命的心脏和消化道衰竭。查加斯病可通过病原鉴定、血清学和分子学技术进行诊断。目前尚无查加斯病疫苗,媒介昆虫控制是最有效的预防手段。论文详细介绍了美洲锥虫病的病原学、生活史、流行病学、临床症状、病理变化、诊断、治疗以及防控措施,以供参考。

传染病媒介动物——特别昆虫的研究现状

最近受到世界注目的虫媒传染病中,以疟疾、登革热、峡谷热、黄热病、西尼罗河脑炎(WNVE)等蚊传疾病居多。1998年纽约突然流行的WNVE被确定是首先在西半球出现的蚊媒性黄热病毒传染病,由于引起重症脑炎而使多数市民陷入恐慌。另外,疟疾以非洲各国为中心重新肆虐,登革热也正在中南美、东南亚、南太平洋各国流行。2000年,峡谷热在沙特和也门流行,死亡人数超过200。本文作者介绍了疟疾和锥虫病媒介昆虫的研究近况。

细胞遗传学用于锥猎蝽亚科物种分类的研究进展

恰加斯病(又名美洲锥虫病)是一种由鞭毛体原虫-克氏锥虫引起的人兽共患病,这种病的传播依赖于一类隶属半翅目、猎蝽科、锥猎蝽亚科的吸血昆虫。该亚科目前共包含154个物种,它们广泛分布于全球的各个国家。不同锥猎蝽亚科物种由于生活习性和耐受力的不同,它们的分布范围也有所差异,正确分类可以构建出不同物种在全球的分布范围,从而采取针对性措施,最大程度地控制恰加斯病的流行。传统的物种分类鉴定主要依赖于形态学观察,但对于一些在外形特征上具有较大相似性的物种来说,单纯依赖于形态学鉴定往往会产生一些错误,在这种情况下,就需要准确性更高的遗传学方法来进行确认。遗传学方法包括细胞遗传学与分子遗传学,细胞遗传学方法由于其方便、经济、准确等特点,成为锥猎蝽亚科物种的分类鉴定方法中最常用的方法。

利刃石林捕虫行动

马达加斯加是一个被时间遗忘的岛,这里的动植物仿佛来自另一个星球,你能见到身长不到1寸的变色龙,能使用回声定位的狐猴,还有像长颈鹿一样的甲虫。1亿多年前,马达加斯加岛就和其它大陆分离了,而位于西部的黥基自然保护区(Tsingyde Bemaraha Strict Nature Reserve)则是马达加斯加岛最难进入,最不为人知的区域。为了考察保护区独特的稀有昆虫,几位身怀绝技的昆虫学家从巴黎来到这里。