酶促酰化对锦葵啶葡萄糖苷呈色及热降解规律的影响

用刺葡萄果皮制备锦葵花色苷单体,以南极假丝酵母脂肪酶B(candila antarctica lipase B,CAL-B)催化锦葵啶-3,5-O-双葡萄糖苷酰化反应,对比研究酶促酰化前后锦葵葡萄糖苷的热降解动力学参数及呈色变化,探索花色苷外源酰基对其结构稳定性的影响。结果表明:锦葵啶葡萄糖苷以及酶促酰化产物在热处理条件下(60、80、100℃),其降解规律均符合一级反应动力学模型,但酶促酰化反应提高了锦葵啶葡萄糖苷的热稳定性。3个温度下酶促酰化锦葵啶葡萄糖苷半衰期比未酰化的样品分别延长3.67、1.3、0.3 h,酰化样品活化能Ea(70.167 7 k J/mol)大于未酰化样品Ea(68.658 7 k J/mol)。热处理后锦葵啶葡萄糖苷受热分解,导致花色苷含量降低,亮度L*值升高,红绿色调a*值降低,黄蓝色调b*值上升,经酶促酰化处理后的花色苷单体总体色差变化幅度较小。

锦葵啶葡萄糖苷酶促酰化反应体系的研究及效果评价

试验旨在建立锦葵啶葡萄糖苷酶促酰化反应的反应体系,探究酶促酰化反应的影响因素;探讨花色苷酶促酰化反应产物的亲脂性和稳定性。以酶活为指标筛选出最佳反应介质,以花色苷的残留率和色差确定最适合花色苷酶促酰化反应的脂肪酶、最佳酶添加量、最佳分子筛添加量和酰基供体。结果表明:二甲基四氢呋喃(2-MeTHF)为最佳反应介质;Candila antarctica脂肪酶B(CAL-B,Novozym 435)为最佳添加酶试剂;肉桂酸乙烯酯为最佳酰基供体;当反应体系加入2 mL脱水2-MeTHF、0.01 mmol锦葵啶葡萄糖苷、0.15 mmol肉桂酸乙烯酯时,酶和分子筛的最佳添加量分别为50 U和0.15 g。按照试验所建立的酶促酰化反应体系完成锦葵啶葡萄糖苷的酰化反应,对比酰化前后试样的紫外-可见光谱图,结果显示生成了酰化锦葵啶葡萄糖苷,证明了酶促酰化处理具有酰化效果。酰化反应后花色苷的亲脂性和稳定性显著提高,可以推断酰化是使花色苷稳定性提高的根本原因。研究结果可为花色苷结构稳定化提供借鉴。