圣云蓝莓果中锦葵色素-3-半乳糖苷的结构鉴定

采用体积分数60%(pH3.0)的乙醇在恒温水浴(40℃)条件下提取圣云蓝莓花色苷,将所得浓缩液经AB-8大孔树脂纯化,40℃减压浓缩,真空干燥得到紫黑色粉末,再经过制备型高效液相色谱分离获得单体化合物。经紫外光谱、红外光谱、质谱、1H和13C核磁共振、薄层色谱对单体化合物进行结构鉴定,确定此化合物为锦葵色素-3-半乳糖苷。

氯化锦葵色素-3-半乳糖苷对TNF-α诱导内皮细胞炎症的抑制作用

目的:研究氯化锦葵色素-3-半乳糖苷对细胞肿瘤坏死因子(tumour necrosis factor-α,TNF-α)诱导人脐静脉内皮细胞(human vascular umbilical endothelial cells,HUVEC)所产生炎症的抑制作用。方法:设立分组,空白组(二甲基亚砜)、10μg/L TNF-α刺激组、浓度为1、10、50、100μmol/L氯化锦葵色素-3-半乳糖苷+10μg/L TNF-α刺激组,通过酶联免疫吸附剂测定方法检测细胞上清中可溶性细胞间黏附因子(intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1)蛋白含量的变化;用实时荧光定量聚合酶链式反应检测细胞中ICAM-1 mRNA表达量变化;Western blotting检测ICAM-1及核因子κB抑制蛋白(IκBα)蛋白含量的变化;通过免疫荧光方法测定核转录因子κB(nuclear transcription factor-κB,NF-κB)核异位的变化。结果:氯化锦葵色素-3-半乳糖苷呈浓度依赖性的抑制TNF-α诱导HUVEC相应蛋白表达,同时结果显示抑制作用与NF-κB信号通路有关。结论:氯化锦葵色素-3-半乳糖苷抑制TNF-α诱导HUVEC的炎症反应。一般心血管疾病产生的原因中包括因促炎症因子引起的内皮功能障碍及产生的炎症,氯化锦葵色素-3-半乳糖苷的抗炎症作用为防治心血管疾病提供了一定的理论基础。

红豆越橘果实中3-半乳糖矢车菊色素的提取、分离及结构鉴定

红豆越橘经压榨处理以后,在恒温水浴(60℃)条件下用体积分数为85%的乙醇浸提、浓缩。将所得浓缩液进行梯度洗脱提纯,然后从30%乙醇的浓缩液中获单体化合物Ⅰ。经过薄层层析、反相高效液相色谱、质谱、13C核磁共振对化合物Ⅰ进行结构鉴定,确定此物质为3 半乳糖 矢车菊色素。

培养人视网膜色素上皮细胞中β-半乳糖苷酶活性研究

目的 观察培养人视网膜色素上皮 (RPE)细胞中复制衰老相关的 β 半乳糖苷酶活性。 方法 在培养的RPE细胞中 ,以传代次数 ( 5、10、2 0 )和取材供体的年龄 ( 2 6、44、5 7岁 )分组 ,进行标准化的 β 半乳糖苷酶活性和细胞增殖能力检测。结果 培养RPE细胞中 β 半乳糖苷酶活性阳性细胞数量随传代次数的增加而增加 ,在 2 0代的细胞中 ,阳性细胞的数量为 87%± 1 2 % ,明显高于第 5代和第 10代细胞 (P <0 0 5 )。而细胞的增殖能力明显下降 (P <0 0 5 )。结论 培养RPE细胞复制衰老的发生与细胞传代次数和取材年龄相关 。

大肠癌组织中β-半乳糖苷结合蛋白-3与β-葡萄糖醛酸苷酶表达的意义

目的:通过观察β-半乳糖苷结合蛋白-3(Galectin-3)与β-葡萄糖醛酸苷酶(β-G)在大肠癌组织中的表达,与大肠癌的生物学特征进行比较,以探讨其临床意义.方法:采用SP免疫组织化学方法检测98例临床新鲜标本,其中包括15例癌旁正常大肠黏膜组织及83例大肠癌组织中galectin-3和β-G的表达情况,并进行两种蛋白的表达相关性分析.结果:Galectin-3和β-G蛋白在浸润程度深、分化程度低及Dukes分期较晚的大肠癌组织中的表达高于浸润程度浅(0.15±0.03 vs 0.16±0.05,P=0.02)、分化程度高(0.15±0.012 vs 0.16±0.03,P=0.03)及Dukes分期较早(0.18±0.06 vs 0.17±0.05)的大肠癌组织(P<0.05);在大肠癌组织中,ga-lectin-3的表达和β-G的表达呈正相关(r=0.628,P<0.01).结论:Galectin-3和β-G的异常表达在大肠癌的发生、发展中起着重要作用,具有一定的诊断价值.

金丝桃苷和异鼠李素-3-O-半乳糖苷对照品的制备方法

目的建立金丝桃苷和异鼠李素-3-O-半乳糖苷对照品的制备方法。方法结合萃取、聚酰胺柱层析、重结晶等方法对吴茱萸甲醇提取物进行分离纯化,通过MS、1HNMR、13CNMR、HPLC等波谱学方法对其分离产物进行结构鉴定和含量测定。结果该法分离所得金丝桃苷和异鼠李素-3-O-半乳糖苷的纯度分别为99.6%和98.0%。结论该方法简便,产品纯度高,可作为中药药效物质基础研究中的对照品。

β-半乳糖苷结合蛋白-3在胃癌组织中的表达及临床意义

探讨β- 半乳糖苷结合蛋白 3在不同分化程度的胃癌组织中表达及其与胃癌生物学行为的关系。方法 采用 S-P 法,检测β 半乳糖苷结合蛋白-3 在 64 例胃癌组织中的表达情况,并采用HPIAS-2000图像分析软件进行定量分析。结果 64例胃癌中β 半乳糖苷结合蛋白-3阳性表达55例,总阳性率为85.9%,46%表现出核染色。β 半乳糖苷结合蛋白 3 在正常组织中的平均吸光度为0.1497±0.01488,高、中和低分化胃癌组织中平均吸光度分别为0.1713±0.02147、0.1873±0.03130和0.2538±0.12160。β-半乳糖苷结合蛋白-3在不同分化程度的胃癌组织中都强表达,均和正常组织有显著性差异(P<0.001);β- 半乳糖苷结合蛋白 3的阳性表达与胃癌分化程度、以及淋巴结转移有关。结论 β-半乳糖苷结合蛋白-3在胃癌组织中表达率高,与胃癌细胞的转移、浸润、生长和黏附有关,是预测胃癌转移的一个较有价值的指标。

半乳糖苷凝集素-3与肥胖及2型糖尿病

肥胖及2型糖尿病是代谢紊乱相关的慢性低度系统炎症状态。半乳糖苷凝集素-3(galectin-3)是一种β-半乳糖苷结合蛋白,在炎症、信号转导、细胞增殖与分化等过程中发挥重要作用。新近的研究表明,半乳糖苷凝集素-3在患肥胖和2型糖尿病的人及鼠类体内高表达,对鼠类体脂的沉积、脂肪细胞分化、血糖浓度、胰岛素敏感性、葡萄糖耐受性和系统炎症等具有重要影响。本文综述了半乳糖苷凝集素-3的结构、分布及其对肥胖和2型糖尿病的调控作用与分子机制,以期为研发针对半乳糖苷凝集素-3靶点的新药提供重要思路和参考。

人α-半乳糖苷酶转导克服异种移植HAR的小鼠实验研究

α 半乳糖苷酶可以特异地清除半乳糖α 1,3 半乳糖抗原 (Galα1,3Galantigen) ,此抗原是引起异种器官移植超急性排斥反应 (HyperacuteRejection ,HAR)的主要异种抗原 .将构建好的α半乳糖苷酶转基因载体通过显微注射的方式注入小鼠受精卵 ,培育出了转基因小鼠 .结果表明 ,转基因小鼠的心、肝、肾、脾、肺组织中均有人α 半乳糖苷酶基因的表达 ,其表达可以有效减少小鼠器官表面Galα1,3Gal抗原的表达水平 ,可以降低转基因小鼠脾细胞对补体介导的杀伤作用的敏感性 .研究表明人源α半乳糖苷酶基因可用于研制不表达Galα1,3Gal抗原的转基因动物 ,从而可以降低异种器官移植HAR的反应强度 。

金边桑叶中矢车菊素-3-O-(2″-没食子酰基)-β-吡喃半乳糖苷的提取分离及结构鉴定

采用醇提水沉法富集金边桑叶中的总花色苷,运用Sephadex LH-20凝胶柱色谱、制备型高效液相色谱等技术对花色苷主成分矢车菊素-3- O -(2″-没食子酰基)-β-吡喃半乳糖苷(Cy3galloylGa)进行分离,使用紫外光谱(UV)、超高效液相色谱-电喷雾串联质谱(UPLC-ESI-MS/MS)以及核磁共振波谱等技术对其结构进行鉴定,并利用薄层色谱、高效液相色谱等方法分析Cy3galloylGa纯度。结果表明,Cy3galloylGa纯度为97.3%,基本满足质量控制等相关研究的需要。

β-乳香酸-3-O-β-D-半乳糖苷的合成

目的从我国传统中药资源中寻求和开发更好的抗肿瘤药物。方法通过糖化学手段和有机合成方法修饰和改性中药化学成分的结构。结果合成出β-乳香酸-3-O-β-D-半乳糖苷。结论1H-NMR和13C-NMR结构表征。

表达β-半乳糖苷酶的gal B16肿瘤模型的建立及其在肿瘤DNA疫苗研究中的应用

本文工作的目的是建立以β-半乳糖苷酶为标志性抗原的小鼠黑色素瘤模型,并进行肿瘤免疫的研究。我们首先在pcDNA3质粒中引入一个β-半乳糖苷酶编码基因从而建立转染质粒p3gal。p3gal转染小鼠黑色素瘤细胞B16后,再通过G418筛选及X-Gal细胞染色得到表达β-半乳糖苷酶的galB16细胞株。接着用该细胞株成功地在C57小鼠上建立了表达β-半乳糖苷酶的galB16肿瘤模型。并在此模型上观察了β-半乳糖苷酶编码基因作为DNA疫苗抑制galB16肿瘤生长的作用。

作用于种属差异性表位的细菌α-半乳糖苷酶(EmGalase)的鉴定和研究

对脑膜炎败血伊丽莎白金菌进行糖苷酶功能基因组分析发现,该菌存在一个GH27家族α-半乳糖苷酶基因。克隆该基因并表达蛋白后,利用人工合成的pNP底物研究其酶学性质,发现该酶具有α连接的半乳糖(α-galactose,α-Gal)底物特异性,酶反应pH为3.0~8.0,反应温度为4~45 ℃。用不同寡糖底物进一步确定,该酶能够酶切直链末端α-1,3、1,4、1,6Gal。在猪红细胞上进行的酶切实验显示,该酶能够高效清除存在于猪红细胞表面的末端Gal α 1-3Gal表位。末端α-半乳糖基化修饰在免疫与感染中发挥着重要的生物学作用,作用于种属差异性表位的细菌α-半乳糖苷酶的发现将为该领域的研究提供一个新的工具,为缓解异种输血中的超急性免疫排斥反应提供一种可能。

磁共振成像灌注参数与COL5A2、Galectin-3的相关性及对食管癌的诊断价值

目的探讨磁共振成像(MRI)灌注参数与V型胶原蛋白α2链(COL5A2)、半乳糖苷凝集素-3(Galectin-3)的相关性及对食管癌的诊断价值。方法选取2020年12月—2021年12月我院收治的疑似食管癌患者100例,以内镜和活检病理检查为金标准,最终确诊为食管癌患者的55例为观察组,其余45例食管炎病变患者为对照组。所有患者行磁共振成像检查及COL5A2、Galectin-3水平测定,对比两组MRI灌注参数,分析食管癌患者MRI灌注参数与肿瘤标志物水平的相关性,分析MRI灌注参数对食管癌的诊断价值。结果与对照组相比,观察组K^(trans)、K_(ep)、V_(e)水平较高(P<0.05);与Ⅰ~Ⅱ期食管癌患者相比,Ⅲ~Ⅳ期食管癌患者K trans、K ep、V e水平较高(P<0.05);与Ⅰ~Ⅱ期食管癌患者相比,Ⅲ~Ⅳ期食管癌COL5A2、Galectin-3水平升高(P<0.05);食管癌患者K^(trans)、K_(ep)、V_(e)、COL5A2、Galectin-3均与病情分期呈正相关(P<0.05);K^(trans)、K_(ep)、V_(e)均与COL5A2、Galectin-3水平呈正相关,差异具有统计学意义(P<0.05);与磁共振成像、COL5A2、Galectin-3单一诊断相比,联合诊断对食管癌的预测价值较高(P<0.05)。结论MRI灌注参数与血清Galectin-3、COL5A2三者联合检测准确度及灵敏度较高于单一检测,弥补了单一检测的不足,三者联合对不同分期食管癌患者具有一定的诊断价值。

G6PD缺陷通过Caspase-3和PARP-1诱导人黑色素瘤细胞凋亡

葡糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)在许多肿瘤细胞中高表达,但其发生的作用机理目前仍然不明确.以正常人表皮黑色素细胞(HEM)、野生型人黑色素瘤A375细胞(A375-WT)和G6PD缺陷的A375细胞(A375-G6PDΔ)为对象,经real-time PCR、Western印迹和紫外分光光度法分析显示,A375-WT细胞的mRNA、G6PD蛋白和G6PD活性分别是HEM细胞的1.89倍(P<0.05)、6.86倍(P<0.01)和2.30倍(P<0.05).Annexin V/PI流式细胞仪和Western印迹测定表明,A375-G6PDΔ的凋亡率是A375-WT的5.10倍(P<0.01),活化半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)增高1.84倍(P<0.01)以及89 kD多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-1(PARP-1)生成增加2.87倍(P<0.01).分光光度法分析显示,A375-G6PDΔ的NADPH和GSH分别降低了72.30%(P<0.01)和27.39%(P<0.05),并伴有75.43%的H2O2增高(P<0.01).结果提示,G6PD在黑色素瘤细胞中高表达和高活性,而敲减G6PD表达通过caspase-3和PARP-1信号诱发人黑色素瘤细胞凋亡,这为深入揭示黑色素瘤的发生机理提供了新思路。

半乳糖与α-乳香酸衍生物的合成

目的:从中药资源中寻求和开发更好的抗肿瘤药物。方法:通过糖化学手段修饰和改性中药化学成分的结构。结果:合成出α-乳香酸-3-O-β-D-半乳糖苷。结论:1H-NMR和13C-NMR表征其结构,本合成未见报道。

番石榴叶天然成分抑制3T3-L1细胞成脂分化的研究

目的观察番石榴叶天然成分槲皮素、槲皮素-3-O-(6″-芥子酸)-β-D-吡喃半乳糖苷(Quercetin-3-O-(6″-eru-coyl)-β-D-galactopyranoside,QEG)及槲皮素-3-O-(6″-阿魏酸)-β-D-吡喃半乳糖苷(Quercetin-3-O-(6″-feruloyl)-β-D-ga-lactopyranoside,QFG)对小鼠3T3-L1细胞成脂分化的影响。方法诱导3T3-L1细胞成脂分化,油红O染色法测定脂滴含量,实时定量PCR(Q-PCR)检测丝氨酸蛋白酶脂肪因子adipsin,CCTTA增强子结合蛋白α(C/EBPα)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、雌激素受体α(ERα)和雌激素受体β(ERβ)mRNA表达,Western blot检测C/EBPα和PPARγ的蛋白表达。结果 QFG和槲皮素都能抑制3T3-L1细胞成脂分化,而QEG对此没有作用。QFG能够剂量依赖性地抑制成脂分化,并且降低adipsin、C/EBPα和PPARγmRNA及后两者蛋白表达,而对ERα和ERβmRNA的表达没有影响。结论 QFG抑制细胞成脂分化的能力比槲皮素强,其作用主要是通过抑制C/EBPα和PPARγ的表达而实现的,而且可能与雌激素受体途径无关。

Galectin-3、Cytokeratin-19在甲状腺良、恶性肿瘤中的表达

甲状腺肿瘤是作为常见的内分泌腺肿瘤,在总人群中的发病率为6%~9%,大部分为良性,只有约7%为恶性。甲状腺癌的术前诊断现在主要有病史和体格检查,还有颈部B超、颈部CT平扫和I131同位素检查,但这些诊断手段对甲状腺良、恶性肿瘤的确诊特异性均不高。本文对甲状腺肿瘤进行术前细胞学检查(fine needle aspiration,FNA),并采用免疫组化的方法,

LI-cadherin和galectin-3在食管癌中的表达及其临床意义

目的探讨肝肠钙粘连蛋白(liver-intestine cadherin,CDH-17,LI-cadherin)和半乳糖苷凝集素-3(galectin-3)在食管癌组织中的表达及其临床意义。方法采用组织芯片技术和免疫组化SP法检测68例食管鳞癌组织和5例非癌食管黏膜组织中LI-cadherin和galectin-3的表达,并分析其与食管癌临床病理特征的关系。结果 LI-cadherin和galectin-3在食管癌中的阳性表达率分别为70.59%和73.53%,而在非癌食管黏膜组织中LI-cadherin不表达。LI-cadherin表达与浸润深度、淋巴结转移和TNM分期相关(P<0.05),而与分化程度无关(P>0.05)。galectin-3表达与分化程度、浸润深度和淋巴结转移相关(P<0.05),而与TNM分期无关(P>0.05)。LI-cadherin与galectin-3蛋白的表达呈显著正相关(r=0.417,P=0.001)。结论 LI-cadherin在食管癌组织中的高表达与浸润深度、淋巴结转移和TNM分期有关,可能作为一种新的判断转移和预后的标志物,有望成为食管癌治疗的新靶点。