干酪乳杆菌发酵人参茎叶提取物对锦鲫免疫及抗氧化功能的影响

为了研究干酪乳杆菌发酵人参茎叶提取物对锦鲫的免疫及抗氧化功能的影响,实验先用3%、4%、5%、6%(记为L3、L4、L5、L6)的干酪乳杆菌菌液发酵人参茎叶提取物,再分别添加到基础饲料(记为L0)中,对初始平均体重为(25.00±0.05)g的锦鲫进行为期5周的饲喂实验。周期性取样,采集锦鲫血清、肝胰脏、中肾、脾脏和全肠,以检测相关免疫指标的变化。在饲喂实验结束后进行嗜水气单胞菌攻毒保护性实验。结果显示,与L0组相比,L5组碱性磷酸酶(AKP)、免疫球蛋白M(IgM)、溶菌酶(LZM)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量显著升高,L5组丙二醛(MDA)含量显著低于L0组。各组织中IL-10、TNF-α、TGF-β、IFN-γ、IL-1β基因表达水平均有不同程度的升高,表现出时空差异,其中IL-10的基因水平表达升高更为敏感。在攻毒保护性实验中,L5组的存活率达到30%,相较于其他组而言存活率最高。研究表明,本实验条件下,当干酪乳杆菌的接种量为5%时,人参茎叶提取物发酵对锦鲫的应用效果最好,能够提高锦鲫抗氧化能力及免疫相关基因的表达,并对降低嗜水气单胞菌的感染有较好的预防作用。

聚苯乙烯微塑料和纳米氧化锌对锦鲫的复合生物效应

纳米金属氧化物和微塑料均为典型的颗粒态污染物,对水生生态系统存在安全风险,但目前鲜有研究两者对水生生物的复合效应.为探究聚苯乙烯微塑料(Polystyrene Microplastic,PS MPs)与纳米氧化锌(ZnO Nanoparticles,ZnO NPs)复合作用下的生物响应,以锦鲫(Carassius auratus)为受试生物,将其暴露在ZnO NPs(1 mg·L^(-1)),PS MPs(1 mg·L^(-1),10 mg·L^(-1)),ZnO NPs+PS MPs (1 mg·L^(-1)+1 mg·L^(-1)与1 mg·L^(-1)+10 mg·L^(-1))中14 d.测定了两种颗粒物的水合粒径、Zeta电位、水体Zn2+含量、Zn在锦鲫各组织中的富集量和肝脏氧化损伤指标.结果显示,与PS MPs复合后,ZnO NPs在水体中的团聚性和稳定性增加,与高浓度PS MPs复合后水中Zn2+含量降低;锦鲫各组织中Zn的富集量大小为:肠>眼>鳃>肌肉>性腺>脑,与1 mg·L^(-1)PS MPs复合降低了脑部对Zn的富集,与10 mg·L^(-1)PS MPs复合提高了眼部Zn含量;肝脏中超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase)活性和活性氧(Reactive Oxygen Species)水平无明显变化,而低浓度复合组(1 mg·L^(-1)ZnO NPs+1 mg·L^(-1)PS MPs)丙二醛(Malonaldehyde)含量显著高于其他组,两种颗粒态污染物复合表现为毒性增强作用.综合以上指标,PS MPs可通过改变ZnO NPs的水体聚集性、稳定性与离子释放,从而改变其在锦鲫体内的富集特性,增强对肝脏的氧化损伤.

毒死蜱对锦鲫性腺的影响及其在鱼组织中的富集

采用半静态法,在测定毒死蜱对锦鲫急性毒性的基础上,分析了亚致死剂量(96 h-LC50的1/5、1/10、1/20、1/40)作用30 d,毒死蜱对锦鲫(Carassius auratus)的性腺指数(GSI)的影响,并考察了毒死蜱暴露过程和清水恢复过程中锦鲫不同组织对毒死蜱的富集作用,为评价毒死蜱环境生态风险提供依据。结果表明,毒死蜱对锦鲫的96 h-LC50为1.400 mg/L,0.280 mg/L的毒死蜱能够显著抑制雄性锦鲫性腺的发育,毒死蜱在其肌肉和肝脏中的富集量在处理后20 d左右达到累积和释放的动态平衡,组织中的富集量为肝脏>肌肉,清水恢复30 d各组织富集量顺序保持不变。

锦鲫幼鱼的社群等级地位及其与标准代谢率、血糖和临界游泳能力的关系

在(25.0±0.5)℃实验室条件下,考查标记后体重相近的30尾锦鲫幼鱼(3.5±0.1g)的标准代谢(standard metabolic rate,SMR),然后将实验鱼分为10个组(每组3尾);分别以好斗行为和摄食成功率两个指标将各组实验鱼评估为3个不同的社群等级;再分别测定各等级地位实验鱼的SMR、血糖浓度和临界游泳速度(critical swimming speed,Ucrit)。结果显示:锦鲫幼鱼3个等级地位由高到低的摄食成功率分别为(51.2±1.61)%、(29.3±1.87)%、(19.5±0.73)%;好斗行为指标得分分别为(8.1±0.30)、(1.9±0.30)、0.0,两个评估指标均存在显著性差异(P<0.05);Ucrit分别为(35.5±0.22)、(33.7±0.66)、(29.8±1.02)cm/s,血糖浓度分别为(3.4±0.22)、(4.2±0.30)、(4.5±0.33)mmol/L(P<0.05);而评估前、后各等级之间实验鱼的SMR均没有显著差异(P>0.05)。结果表明:锦鲫幼鱼存在着明显社群等级分化的现象;好斗行为和摄食成功率两个指标分别对社群等级地位的评估结果具有显著的一致性;实验鱼等级地位越高其游泳能力越强,血糖浓度越低;这一现象提示,高等级地位的鱼受到较低的社群胁迫且具有较高的生理适合度。

PFOS暴露对锦鲫自发运动与潜在游泳能力的影响

全氟辛烷磺酸（Perfluorooctane sulfonate，PFOS）是全氟化合物（Perfluorinated compounds，PFCs）家族中具有代表性的一种新型持久性有机污染物（Persistent Organic Pollutants，POPs），现已被发现广泛存在于各种环境介质、动植物体与人体中。

摄食水平对锦鲫幼鱼特殊动力作用的影响

特殊动力作用(SDA)是指动物摄食后代谢增加的现象,相关参数和功率曲线在动物生理生态学上具有重要的意义。本研究在25℃水温条件下,测定0%、0.50%、1.00%、2.00%和4.00%体重等不同摄食水平的锦鲫幼鱼在摄食前和摄食后的耗氧率。结果发现锦鲫幼鱼摄食后耗氧率显著增加(p<0.05),约在摄食后2h达到峰值。0.50%、1.00%、2.00%和4.00%体重等4个摄食组的摄食代谢峰值(耗氧率)分别为(96.15±7.74)、(100.72±7.29)、(117.72±7.23)和(173.22±14.20)mg·kg-.1h-1,其中4.00%摄食水平组显著高于其他摄食水平组(p<0.05);SDA时间分别为(6.29±0.68)、(7.14±0.85)、(7.33±1.23)和(9.20±1.36)h,各摄食水平组之间没有显著差异;SDA总耗能分别为(1.42±0.18)、(1.58±0.20)、(2.63±0.60)和(5.33±0.76)kJ.kg-1,其中4.00%摄食水平组的SDA总耗能显著高于其他摄食水平组(p<0.05);SDA系数分别为(4.60±0.52)%、(2.54±0.34)%、(2.07±0.45)%和(2.17±0.30)%,0.50%摄食水平组的SDA系数显著高于其他摄食水平组(p<0.05)。研究结果表明锦鲫幼鱼摄食后的功率曲线呈典型的"三角型",这与其经常摄食的生活习性和较低的营养等级地位相适应。

亚致死剂量二嗪农对锦鲫的毒性效应及鱼体富集研究

采用半静态法测定了二嗪农对锦鲫的急性毒性,并以AChE活性为毒性指标,研究了亚致死作用剂量(96h-LC50的1/5、1/10、1/20、1/40)下持续暴露30 d和在清水中恢复30 d时二嗪农对锦鲫的慢性毒性效应,以及锦鲫不同组织对二嗪农的富集作用,为评价二嗪农环境生态风险提供依据。结果表明:二嗪农对锦鲫的96h-LC50为11.04 mg/L,乙酰胆碱酯酶活性的抑制率随剂量的增加而增大,最高抑制率可达91%;酶活恢复过程缓慢,最高恢复率仅为21.6%;组织中的富集量大小依次为肝>肉,恢复30d后各组织仍有二嗪农残留且富集大小顺序保持不变。

锦鲫致病性维氏气单胞菌的分离鉴定及耐药性分析

为鉴定长春市某水产养殖场发病锦鲫(Brocaded crucian)病原菌,本研究从患病锦鲫体内分离得到一株优势菌株,并对其进行了常规理化特性、分子生物学、人工感染试验及药敏检测。结果显示:分离菌株为革兰氏阴性短杆菌,其理化特性与维氏气单胞菌(A.veronii)特征相符,并且其16S r DNA基因、gyr B基因、dna J基因、rpo D基因与Gen Bank中A.veronii相应基因序列的同源性均高达99%,在系统进化树中与A.veronii聚为一族,将其命名为JLND-1611;人工感染试验结果显示,锦鲫感染7 d后全部死亡,临床症状与自然病例相似,而且对斑马鱼LD_(50)为1.51×10^(2.67)cfu/m L;毒力基因检测显示,从JLND-1611可以扩增出6种毒力因子:脂肪酶(lip)、核酸酶(exu)、密度感应系统调控基因(luxs)、粘附素(aha)、气溶素(aer)及氨酸蛋白酶(ser);综合检测结果表明该分离株为致病性A.veronii。药敏试验结果显示,分离株对19种抗菌药物中头孢曲松、头孢哌酮及多西环素等药物敏感。本研究为锦鲫感染A.veronii的鉴定及治疗药物的选取提供了参考依据。

池塘驯化培育日本锦鲫鱼种的试验报告

受市场大环境的影响,养殖鱼类的价格持续低迷,为摆脱这种局面,合理调整池塘养殖品种的结构,寻找新的渔业经济增长点,依据旅游、观光、垂钓等休闲渔业的需要,今年我县从山东引进耐低温、耐低氧,具有观赏和游钓价值的日本锦鲫乌仔4万尾,在连生乡靠山渔场用0.7hm^2鱼池,经105天的驯化饲养。

锦鲫幼鱼标准代谢率与生长性能的关联

为考察温水性鲤科鱼类在不同食物资源条件下标准代谢率(Standard metabolic rate,SMR)与其生长性能的关系,研究在(25.0±0.5)℃条件下测定体重相近的30尾锦鲫(Carassius auratus)幼鱼的SMR,将所有实验鱼置于多单元格水槽进行实验处理(摄食与饥饿)。实验时间为4周(0、7d、14d、21d和28d),包括两周的生长实验(0—14d)和两周的饥饿实验(15—28d)。摄食期间,于每天上午9:00和下午21:00用商业饲料对每尾鱼饱足投喂并记录投喂量。单尾鱼的体重和体长每隔1周测定一次,而SMR仅在第0、第14和第28天测定。结果显示:(1)锦鲫幼鱼在摄食期间的体重、体长以及SMR均明显上升,饥饿期间体重和SMR显著降低(P<0.05),但体长变化不明显;SMR不论摄食期间还是饥饿期间呈现较好的稳定性(二者P<0.05)。(2)锦鲫幼鱼在摄食期间开始时的SMR(测定Ⅰ)与摄食率(FR)、摄食转化率(FE)以及特定体重生长率(SGRBM)均无相关性,摄食期间结束时的SMR(测定Ⅱ)仅与FR呈正相关(P<0.05),但与FE以及SGRBM不相关。(3)摄食期间(饥饿期间)实验鱼的第一周日均体重增(减)量与第二周日均体重增(减)量呈正相关,其体重的增率与减率无显著差异(P>0.05)。(4)实验鱼在摄食期间的特定体重增长率(SGRBM)与饥饿期间的不相关(P>0.05),但摄食期间的特定SMR增长率(SGRSMR)与饥饿期间的呈负相关(P<0.05)。研究表明在实验室环境中锦鲫幼鱼的SMR具有稳定性,该种鱼的日均体重变化量保持相近,此形态变化特征与SMR不相关,并且该种鱼在实验起始时的SMR的个体差异未能预测其在实验室食物资源变动下生长性能的适应特征。

土霉素对日本锦鲫肝脏抗氧化防御系统的影响

土霉素(Oxytetrac ycline,简称OTC)是养殖业中广泛使用的药物之一,由于大量使用,已在水环境中不断被检出,其对水生生物及人类可能产生的影响已经引起人们广泛关注。采用室内染毒实验方法,研究了土霉素对典型淡水鱼类日本锦鲫肝脏抗氧化防御系统的影响,分析暴露于不同浓度(0、0.01、0.05、0.1、0.5、1.0、5.0、10mg·L-1)的OTC溶液15d后鱼体肝脏中ROS、MDA、SOD、CAT和谷胱甘肽等指标,探讨其潜在的致毒机制。结果表明,ROS信号强度在高浓度组(5mg·L-1和10mg·L-1)与对照相比分别减少44.2%和32.5%,呈显著性差异;MDA含量在0.1mg·L-1和5mg·L-1下显著减少,分别减少41.7%和52.3%;SOD活性在0.01mg·L-1下显著性增加32.4%,CAT和GST活性呈低浓度被诱导、高浓度被抑制的趋势;GSH和GSSG含量的变化趋势相似,呈先减少后增加的趋势(P<0.05)。上述结果表明低浓度OTC对日本锦鲫产生氧化应激,诱导了肝脏抗氧化防御系统,但高浓度下清除氧自由基的作用大于其氧化应激毒性,从而使得鱼体氧化应激程度减轻。抗氧化防御系统酶活性的变化只能间接反映污染物对生物造成应激效应的程度,要弄清楚OTC的致毒机制仍需进一步研究。

阿维菌素和氟虫腈对锦鲫的急慢性毒性效应

采用半静态法,利用2种非有机磷农药——阿维菌素和氟虫腈对锦鲫进行农药的急性和慢性毒性试验,并对其脑组织中的乙酰胆碱酯酶(AChE)和羧酸酯酶(CarE)的抑制情况进行研究。研究结果显示,2种农药对锦鲫96 h的LC50分别为0.109 9、0.113 1 mg/L,对鱼类均属于高毒农药。慢性试验(21 d)结果显示,阿维菌素和氟虫腈对2种解毒酶均有抑制作用,对乙酰胆碱酯酶最高抑制率达64.19%,对羧酸酯酶最高抑制率为35.21%,呈现出正相关的剂量-时间-效应关系。将锦鲫在清水中恢复7 d后,各处理酶活性都有一定程度的恢复。研究结果表明,这2种酶均可作为评价这2种非有机磷农药危害的生物标志物。

激光诱导锦鲫变异获得新品种的研究

首次报导了应用激光辐照锦鲫受精卵产生的生物效应研究.应用激光诱导锦鲫受精卵产生的变异培育出一个新品种——“双尾锦鲫”.

锦鲫Clock基因表达量分析中的内参基因稳定性比较

为研究锦鲫Clock基因表达量分析中的内参基因稳定性,采用qRT-PCR技术进行实时荧光定量分析,并用Ge Norm和Norm Finder软件对5个内参基因(RPL13,GAPDH,18 S rRNA,β-actin和RPS29)进行稳定性评估,筛选出不同组织中最适合的内参基因,以准确定量Clock基因的相对表达水平.实验结果表明,5个内参基因中,18 S rRNA在锦鲫的肌肉、心脏、肝脏中表达最稳定,β-actin在肠中表达最稳定,RPL13在肾中表达最稳定;根据筛选的内参基因定量Clock基因的相对表达水平发现,Clock基因在锦鲫肌肉中相对表达量最高,其次依次是肝脏、肾、肠,心脏中最低.本研究准确定量Clock基因,为锦鲫生物钟节律机制的下一步研究奠定了理论基础.

2种典型碳纳米管低浓度暴露诱发锦鲫组织损伤与肝脏氧化损伤效应研究

采用半静态染毒方法,研究了单壁碳纳米管(SWCNT)和羟基化多壁碳纳米管(MCWNT-OH)对锦鲫抗氧化防御系统的影响。结果表明,锦鲫经28 d不同质量浓度的SWCNT和MWCNT-OH(0,10,100和1000μg/L)暴露后,暴露组14 d鳃组织切片检查发现出现鳃动脉瘤、鳃细胞水肿、畸形生长等病理症状;然而在2种碳纳米管低浓度暴露下,锦鲫的肝脏切片没有观察到损伤,高浓度时肝脏有轻微空泡损伤。暴露期间锦鲫没有死亡,随着暴露天数的增加,2种碳纳米管都能对SOD和CAT酶产生抑制作用,高浓度组抑制明显,肝脏抗氧化系统受到损伤。指出,虽然碳纳米管的毒性较低,但其长期暴露对鱼类的影响仍需进一步关注。

锦鲫源豚鼠气单胞菌灭活疫苗的制备及免疫效果评价※

为研究豚鼠气单胞菌灭活疫苗对锦鲫的免疫效果,本试验通过甲醛灭活法制备的豚鼠气单胞菌AC-CY株灭活疫苗,对经免疫试验后的锦鲫进行不同免疫指标的检测,并在养殖的第35天检测免疫保护率。试验表明,溶菌酶浓度、碱性磷酸酶浓度、C4浓度、C3浓度和IgM抗体水平在第1次免疫后逐渐上升,在试验第14天达到免疫周期最大值。IL-1β、IFN-γ、TNF-α和IL-10在试验14 d相对表达量最高;血清杀菌能力比对照组显著提升。白细胞数量在试验14 d增多,吞噬能力达到最大。攻毒检测免疫保护率于免疫试验第35天进行,测得免疫保护率为77%。结果表明,豚鼠气单胞菌AC-CY株灭活疫苗免疫接种后可使锦鲫机体维持较高的免疫水平,并能够产生一定的免疫保护效果。

三种色素和甲基睾丸酮对锦鲫的生长形体、体色和抗氧化能力的影响

本试验研究了在基础饲料中添加虾青素、叶黄素、B-胡萝卜素、甲基睾丸酮四种增色剂对锦鲫鱼生长、形体、体色和抗氧化功能的影响。将1050尾体重（1．0855±0．0254）g单色红锦鲫随机分为14个组，每组3个重复，每个重复25尾试验鱼，每种增色剂设3个梯度（50、100、200mg／kg），另设虾青素400mg／kg组和不加增色剂的对照组，试验期60d。结果表明：（1）除甲基睾丸酮对锦鲫体色无明显影响之外，四种增色剂对锦鲫的生长、体色、抗氧化能力有显著影响（P〈0．05），除了β-胡萝卜素50mg／kg对形体指标中的体长／体高，体重／体长，肥满度（CF）指标均显著高于对照组（P〈D．05），三种色素对锦鲫的形体指标无显著影响（P〉O．05）。甲基睾丸酮对形体指标中的体长／体高指标均显著低于对照组（P〈D．05），对体重／体长，肥满度（CF）指标均显著高于对照组（火D．05）；（2）甲基睾丸酮对于锦鲫的生长有明显的促进作用，增重率、特定生长率显著高于对照组，抗氧化能力低于对照组，其他增色剂组的增重率、特定生长率和抗氧化能力均低于对照组；（3）锦鲫体表的总色素含量排序为：叶黄素50mg／kg组〉叶黄素200mg／kg组〉叶黄素100mg／kg组〉虾青素400mg／kg组〉其他增色剂组〉对照组。因叶黄素的增色效果较好，且其价格低廉，故在本试验条件下建议将叶黄素作为锦鲫增红的最佳增色剂，其在饲料中的最佳添加量为50mg／kg。

力竭运动训练对锦鲫幼鱼无氧代谢能力的影响

将锦鲫(Carassius auratus)幼鱼20尾随机平均分成训练组和对照组,在25℃水温下每天饱足投喂1次;其中训练组实验鱼持续2周进行强度为每天2次的力竭运动训练;随后分别测量实验鱼力竭运动后的耗氧率并计算过量耗氧(EPOC);待力竭运动恢复8 h后再分别取样测量肌乳酸、肝乳酸的含量和肌肉中乳酸脱氢酶(LDH)、柠檬酸合成酶(CS)的活性。研究发现,力竭运动训练组与对照组的EPOC分别为(166.2±7.2)、(108.0±6.2)mg.kg-1,训练组显著高于对照组(p<0.05);肌乳酸含量分别是(17.4±0.8)、(25.4±1.7)μmol.g-1,训练组显著低于对照组(p<0.05);训练组实验鱼的肝乳酸含量、LDH和CS的活性与对照组之间均无显著差异。研究表明力竭运动训练有助于提高锦鲫幼鱼的无氧代谢能力;无氧代谢能力的提高可能与乳酸清除速率加快有关。

锦鲫的摄食代谢与运动代谢及其相互影响

为了探讨锦鲫(Carassius auratus)幼鱼摄食后特殊动力作用(SDA)的变化特征及运动代谢与摄食代谢之间的相互影响,实验首先灌喂锦鲫4%体重的饲料和等体积的纤维素(湿重),测定灌喂前后的耗氧率;另设灌喂饲料、灌喂纤维素、空腹组(对照组)3个组,测定3组的临界游泳速度(Ucrit)和运动耗氧率(MO2);然后在70%、0%临界游泳速度下,分别测定饱足摄食组和空腹组的耗氧率。结果显示:1灌喂饲料后代谢率快速上升,达到峰值后又迅速下降,代谢时间较短,没有一个相对稳定的平台期,灌喂纤维素后代谢率没有显著性变化(P>0.05)。提示锦鲫幼鱼的特殊动力作用功率曲线为一个典型的"三角型"模型,且在特殊动力作用总耗能中,生化特殊动力作用占特殊动力作用总耗能的绝大部分,而机械特殊动力作用只占特殊动力作用的极少部分。2锦鲫幼鱼在摄食后临界游泳速度显著下降(P<0.05),代谢率显著升高(P<0.05)。摄食后的运动过程中,代谢率从摄食开始到代谢率回落至空腹组代谢的标准误范围内的首个数据所对应的时间长度均为6.5 h,且摄食代谢无显著性差异。提示,对锦鲫幼鱼来说,摄食代谢降低了其运动能力,而运动代谢并没有影响摄食代谢。