干酪乳杆菌发酵人参茎叶提取物对锦鲫免疫及抗氧化功能的影响

为了研究干酪乳杆菌发酵人参茎叶提取物对锦鲫的免疫及抗氧化功能的影响,实验先用3%、4%、5%、6%(记为L3、L4、L5、L6)的干酪乳杆菌菌液发酵人参茎叶提取物,再分别添加到基础饲料(记为L0)中,对初始平均体重为(25.00±0.05)g的锦鲫进行为期5周的饲喂实验。周期性取样,采集锦鲫血清、肝胰脏、中肾、脾脏和全肠,以检测相关免疫指标的变化。在饲喂实验结束后进行嗜水气单胞菌攻毒保护性实验。结果显示,与L0组相比,L5组碱性磷酸酶(AKP)、免疫球蛋白M(IgM)、溶菌酶(LZM)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量显著升高,L5组丙二醛(MDA)含量显著低于L0组。各组织中IL-10、TNF-α、TGF-β、IFN-γ、IL-1β基因表达水平均有不同程度的升高,表现出时空差异,其中IL-10的基因水平表达升高更为敏感。在攻毒保护性实验中,L5组的存活率达到30%,相较于其他组而言存活率最高。研究表明,本实验条件下,当干酪乳杆菌的接种量为5%时,人参茎叶提取物发酵对锦鲫的应用效果最好,能够提高锦鲫抗氧化能力及免疫相关基因的表达,并对降低嗜水气单胞菌的感染有较好的预防作用。

聚苯乙烯微塑料和纳米氧化锌对锦鲫的复合生物效应

纳米金属氧化物和微塑料均为典型的颗粒态污染物,对水生生态系统存在安全风险,但目前鲜有研究两者对水生生物的复合效应.为探究聚苯乙烯微塑料(Polystyrene Microplastic,PS MPs)与纳米氧化锌(ZnO Nanoparticles,ZnO NPs)复合作用下的生物响应,以锦鲫(Carassius auratus)为受试生物,将其暴露在ZnO NPs(1 mg·L^(-1)),PS MPs(1 mg·L^(-1),10 mg·L^(-1)),ZnO NPs+PS MPs (1 mg·L^(-1)+1 mg·L^(-1)与1 mg·L^(-1)+10 mg·L^(-1))中14 d.测定了两种颗粒物的水合粒径、Zeta电位、水体Zn2+含量、Zn在锦鲫各组织中的富集量和肝脏氧化损伤指标.结果显示,与PS MPs复合后,ZnO NPs在水体中的团聚性和稳定性增加,与高浓度PS MPs复合后水中Zn2+含量降低;锦鲫各组织中Zn的富集量大小为:肠>眼>鳃>肌肉>性腺>脑,与1 mg·L^(-1)PS MPs复合降低了脑部对Zn的富集,与10 mg·L^(-1)PS MPs复合提高了眼部Zn含量;肝脏中超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase)活性和活性氧(Reactive Oxygen Species)水平无明显变化,而低浓度复合组(1 mg·L^(-1)ZnO NPs+1 mg·L^(-1)PS MPs)丙二醛(Malonaldehyde)含量显著高于其他组,两种颗粒态污染物复合表现为毒性增强作用.综合以上指标,PS MPs可通过改变ZnO NPs的水体聚集性、稳定性与离子释放,从而改变其在锦鲫体内的富集特性,增强对肝脏的氧化损伤.

鲫腹膜分布、组织学及光照对其影响研究

腹膜在脊椎动物中普遍存在,由间皮细胞构成,通过结缔组织的支持作用形成的一层膜状组织,具有润滑、支持和保护等功能。鱼类有腹膜且分布有色素细胞,本研究选取常见经济鱼类鲫(Carassius auratus)为实验对象,采用组织学方法研究其腹膜分布及色素细胞形态特征,并探究光照条件对鲫腹膜色素细胞的影响。结果显示:(1)鲫腹膜呈黑色,腹腔腹壁内侧、心腹隔膜靠近腹腔一侧有明显分布,腹腔腹壁内侧黑色腹膜在腹腔上方延伸包裹性腺后相连覆于鳔下侧。(2)鲫腹膜黑色素细胞为黑色的树突状细胞。(3)鲫腹腔腹壁内侧腹膜的石蜡组织切片显示黑色素细胞连续分布形成黑色色素带,细胞核椭圆形、呈蓝紫色;扫描电镜下腹膜组织凹凸不平,由嵴组成多角形的网状结构;透射电镜下黑色素细胞有细胞核和黑素小体,黑素小体分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ四个时期。(4)不同光照影响鲫腹腔腹壁内侧腹膜黑色素细胞的形态,光照组黑色素细胞胞体变大、分支变粗,呈色变深;黑暗组黑色素细胞胞体变小、分支变细长。本研究为鱼类腹膜系统研究提供理论参考。

北方地区鲫鱼池塘生态养殖技术措施

鲫(Carassius auratus)是深受广大消费者喜爱的大宗淡水鱼类,其人工养殖前景看好。文章介绍了北方地区鲫的池塘生态养殖技术措施,主要包括对养殖池塘进行标准化改造、选良种及配套适宜养殖模式、选择优质饲料合理投喂、重视池塘水质调控和加强鲫鱼病害防治等,供各地参考。

开口饵料与蓝花长尾鲫生长及存活率的相关性

利用干法授精对蓝花长尾鲫(Carassius auratus)进行人工繁殖试验,待蓝花长尾鲫仔鱼孵化后,投喂丰年虾、水蚯蚓和人工配合饲料3种开口饵料。结果表明,蓝花长尾鲫的受精率和孵化率分别为89.85%和80.48%;丰年虾组的初次开口率和成活率分别为98.89%和98.91%,水蚯蚓组的初次开口率和成活率分别为94.44%和97.33%,人工配合饲料组的初次开口率和成活率分别为74.44%和98.24%;水蚯蚓组和丰年虾组的初次开口率显著高于人工配合饲料组(P<0.05),水蚯蚓组与丰年虾组的初次开口率无显著差异(P>0.05);水蚯蚓组、丰年虾组和人工配合饲料组3组的肥满度存在显著差异(P<0.05),但3组的成活率差异不显著(P>0.05)。建议蓝花长尾鲫仔鱼培育前期投喂适口的丰年虾,中后期在丰年虾基础上搭配使用人工配合饲料来降低养殖成本。

丁香酚慢性麻醉对红鲫血液生理及肝脏hsp70和hsp90mRNA表达量的影响

为研究丁香酚慢性麻醉对红鲫(Carassius auratus)血液生理及肝脏中应激基因hsp70和hsp90mRNA相对表达量的影响,试验设置丁香酚处理组和对照组,用15 mg/L丁香酚处理平均体质量(61.9±3.66)g红鲫12 h。试验结果表明,经12 h麻醉后,试验组红鲫除游动变缓外,其它行为表现正常,未出现死亡现象;麻醉组红鲫血液中皮质醇含量、乳酸脱氢酶活力显著下降,而血糖和K^(+)、Na^(+)浓度却显著上升。基因定量结果显示,麻醉组红鲫肝脏中hsp70和hsp90mRNA相对表达量显著高于对照组。综上所述,15 mg/L丁香酚处理12 h内对红鲫未造成明显损伤,可用于其保活运输。

锦鲫幼鱼的社群等级地位及其与标准代谢率、血糖和临界游泳能力的关系

在(25.0±0.5)℃实验室条件下,考查标记后体重相近的30尾锦鲫幼鱼(3.5±0.1g)的标准代谢(standard metabolic rate,SMR),然后将实验鱼分为10个组(每组3尾);分别以好斗行为和摄食成功率两个指标将各组实验鱼评估为3个不同的社群等级;再分别测定各等级地位实验鱼的SMR、血糖浓度和临界游泳速度(critical swimming speed,Ucrit)。结果显示:锦鲫幼鱼3个等级地位由高到低的摄食成功率分别为(51.2±1.61)%、(29.3±1.87)%、(19.5±0.73)%;好斗行为指标得分分别为(8.1±0.30)、(1.9±0.30)、0.0,两个评估指标均存在显著性差异(P<0.05);Ucrit分别为(35.5±0.22)、(33.7±0.66)、(29.8±1.02)cm/s,血糖浓度分别为(3.4±0.22)、(4.2±0.30)、(4.5±0.33)mmol/L(P<0.05);而评估前、后各等级之间实验鱼的SMR均没有显著差异(P>0.05)。结果表明:锦鲫幼鱼存在着明显社群等级分化的现象;好斗行为和摄食成功率两个指标分别对社群等级地位的评估结果具有显著的一致性;实验鱼等级地位越高其游泳能力越强,血糖浓度越低;这一现象提示,高等级地位的鱼受到较低的社群胁迫且具有较高的生理适合度。

水晶彩鲫、红鲫、锦鲤、荷包红鲤杂交子代的生长和体色研究

利用人工授精的方法,进行水晶彩鲫、红鲫、锦鲤和荷包红鲤的相互杂交试验,测定各个杂交组合子代的成活率、生长速度和体色分离比例。结果表明:4种鱼能够相互杂交受精,孵出鱼苗。孵化率锦鲤自交最低为46.4%,其它组合为70%～80%;杂交鱼苗经28d的人工饲养,水晶彩鲫与荷包红鲤、锦鲤的正、反杂交,同其它杂交组合比较有明显的差别,其生长速度慢,个体之间差异大,成活率低;杂交子代的体型分为3类:鲫鱼型、鲤鱼型和鲤鲫型。鳞片反光组织(虹彩细胞或鸟粪素细胞)为2类:完全型、缺失型。体色分离复杂多样,水晶彩鲫与红鲫杂交是水晶彩鲫,红鲫与锦鲤、荷包红鲤杂交是青灰色鲤鲫杂种,水晶彩鲫与锦鲤、荷包红鲤杂交都会出现水晶彩色和青灰色鲤鲫杂种。

毒死蜱对锦鲫性腺的影响及其在鱼组织中的富集

采用半静态法,在测定毒死蜱对锦鲫急性毒性的基础上,分析了亚致死剂量(96 h-LC50的1/5、1/10、1/20、1/40)作用30 d,毒死蜱对锦鲫(Carassius auratus)的性腺指数(GSI)的影响,并考察了毒死蜱暴露过程和清水恢复过程中锦鲫不同组织对毒死蜱的富集作用,为评价毒死蜱环境生态风险提供依据。结果表明,毒死蜱对锦鲫的96 h-LC50为1.400 mg/L,0.280 mg/L的毒死蜱能够显著抑制雄性锦鲫性腺的发育,毒死蜱在其肌肉和肝脏中的富集量在处理后20 d左右达到累积和释放的动态平衡,组织中的富集量为肝脏>肌肉,清水恢复30 d各组织富集量顺序保持不变。

水晶彩鲫、红鲫和锦鲤的腹膜脏层黑色素观察

对水晶彩鲫（Carassius auratus transparent colored var．）、红鲫（C．a．red vat．）和锦鲤（Cyprinus carpio ornamental var．）腹膜脏层黑色素进行肉眼观察和密度分布统计。结果表明，这3种鱼的不同体色个体，腹膜脏层黑色素的密度不同。依据黑色素的密度，将其分为Ⅰ～Ⅵ级。水晶彩鲫的腹膜脏层黑色素密度：肉白a个体为Ⅰ级（无黑色素分布），肉白b和红白个体多数在Ⅰ～Ⅱ级，红色个体多数在Ⅰ～Ⅳ级，杂色个体多数在Ⅳ～Ⅵ级，密度表现出依次递增的趋势。红鲫的腹膜脏层黑色素密度：白色个体分布在Ⅲ级，红白个体分布在Ⅲ～Ⅳ级，红色个体分布在Ⅲ～Ⅴ级，杂色分布在Ⅳ～Ⅵ级，青灰色分布在Ⅴ～Ⅵ级，密度依次也表现出递增的趋势。锦鲤的腹膜脏层黑色素密度：体表没有黑色斑纹的红、黄、白、红白和黄白等个体为Ⅰ级，无黑色素分布；体表有黑色斑纹的红黑、黄黑、白黑和红白黑等个体多数有黑色素出现，主要分布在Ⅳ级。

PFOS暴露对锦鲫自发运动与潜在游泳能力的影响

全氟辛烷磺酸（Perfluorooctane sulfonate，PFOS）是全氟化合物（Perfluorinated compounds，PFCs）家族中具有代表性的一种新型持久性有机污染物（Persistent Organic Pollutants，POPs），现已被发现广泛存在于各种环境介质、动植物体与人体中。

摄食水平对锦鲫幼鱼特殊动力作用的影响

特殊动力作用(SDA)是指动物摄食后代谢增加的现象,相关参数和功率曲线在动物生理生态学上具有重要的意义。本研究在25℃水温条件下,测定0%、0.50%、1.00%、2.00%和4.00%体重等不同摄食水平的锦鲫幼鱼在摄食前和摄食后的耗氧率。结果发现锦鲫幼鱼摄食后耗氧率显著增加(p<0.05),约在摄食后2h达到峰值。0.50%、1.00%、2.00%和4.00%体重等4个摄食组的摄食代谢峰值(耗氧率)分别为(96.15±7.74)、(100.72±7.29)、(117.72±7.23)和(173.22±14.20)mg·kg-.1h-1,其中4.00%摄食水平组显著高于其他摄食水平组(p<0.05);SDA时间分别为(6.29±0.68)、(7.14±0.85)、(7.33±1.23)和(9.20±1.36)h,各摄食水平组之间没有显著差异;SDA总耗能分别为(1.42±0.18)、(1.58±0.20)、(2.63±0.60)和(5.33±0.76)kJ.kg-1,其中4.00%摄食水平组的SDA总耗能显著高于其他摄食水平组(p<0.05);SDA系数分别为(4.60±0.52)%、(2.54±0.34)%、(2.07±0.45)%和(2.17±0.30)%,0.50%摄食水平组的SDA系数显著高于其他摄食水平组(p<0.05)。研究结果表明锦鲫幼鱼摄食后的功率曲线呈典型的"三角型",这与其经常摄食的生活习性和较低的营养等级地位相适应。

亚致死剂量二嗪农对锦鲫的毒性效应及鱼体富集研究

采用半静态法测定了二嗪农对锦鲫的急性毒性,并以AChE活性为毒性指标,研究了亚致死作用剂量(96h-LC50的1/5、1/10、1/20、1/40)下持续暴露30 d和在清水中恢复30 d时二嗪农对锦鲫的慢性毒性效应,以及锦鲫不同组织对二嗪农的富集作用,为评价二嗪农环境生态风险提供依据。结果表明:二嗪农对锦鲫的96h-LC50为11.04 mg/L,乙酰胆碱酯酶活性的抑制率随剂量的增加而增大,最高抑制率可达91%;酶活恢复过程缓慢,最高恢复率仅为21.6%;组织中的富集量大小依次为肝>肉,恢复30d后各组织仍有二嗪农残留且富集大小顺序保持不变。

锦鲫致病性维氏气单胞菌的分离鉴定及耐药性分析

为鉴定长春市某水产养殖场发病锦鲫(Brocaded crucian)病原菌,本研究从患病锦鲫体内分离得到一株优势菌株,并对其进行了常规理化特性、分子生物学、人工感染试验及药敏检测。结果显示:分离菌株为革兰氏阴性短杆菌,其理化特性与维氏气单胞菌(A.veronii)特征相符,并且其16S r DNA基因、gyr B基因、dna J基因、rpo D基因与Gen Bank中A.veronii相应基因序列的同源性均高达99%,在系统进化树中与A.veronii聚为一族,将其命名为JLND-1611;人工感染试验结果显示,锦鲫感染7 d后全部死亡,临床症状与自然病例相似,而且对斑马鱼LD_(50)为1.51×10^(2.67)cfu/m L;毒力基因检测显示,从JLND-1611可以扩增出6种毒力因子:脂肪酶(lip)、核酸酶(exu)、密度感应系统调控基因(luxs)、粘附素(aha)、气溶素(aer)及氨酸蛋白酶(ser);综合检测结果表明该分离株为致病性A.veronii。药敏试验结果显示,分离株对19种抗菌药物中头孢曲松、头孢哌酮及多西环素等药物敏感。本研究为锦鲫感染A.veronii的鉴定及治疗药物的选取提供了参考依据。

池塘驯化培育日本锦鲫鱼种的试验报告

受市场大环境的影响,养殖鱼类的价格持续低迷,为摆脱这种局面,合理调整池塘养殖品种的结构,寻找新的渔业经济增长点,依据旅游、观光、垂钓等休闲渔业的需要,今年我县从山东引进耐低温、耐低氧,具有观赏和游钓价值的日本锦鲫乌仔4万尾,在连生乡靠山渔场用0.7hm^2鱼池,经105天的驯化饲养。

锦鲫幼鱼标准代谢率与生长性能的关联

为考察温水性鲤科鱼类在不同食物资源条件下标准代谢率(Standard metabolic rate,SMR)与其生长性能的关系,研究在(25.0±0.5)℃条件下测定体重相近的30尾锦鲫(Carassius auratus)幼鱼的SMR,将所有实验鱼置于多单元格水槽进行实验处理(摄食与饥饿)。实验时间为4周(0、7d、14d、21d和28d),包括两周的生长实验(0—14d)和两周的饥饿实验(15—28d)。摄食期间,于每天上午9:00和下午21:00用商业饲料对每尾鱼饱足投喂并记录投喂量。单尾鱼的体重和体长每隔1周测定一次,而SMR仅在第0、第14和第28天测定。结果显示:(1)锦鲫幼鱼在摄食期间的体重、体长以及SMR均明显上升,饥饿期间体重和SMR显著降低(P<0.05),但体长变化不明显;SMR不论摄食期间还是饥饿期间呈现较好的稳定性(二者P<0.05)。(2)锦鲫幼鱼在摄食期间开始时的SMR(测定Ⅰ)与摄食率(FR)、摄食转化率(FE)以及特定体重生长率(SGRBM)均无相关性,摄食期间结束时的SMR(测定Ⅱ)仅与FR呈正相关(P<0.05),但与FE以及SGRBM不相关。(3)摄食期间(饥饿期间)实验鱼的第一周日均体重增(减)量与第二周日均体重增(减)量呈正相关,其体重的增率与减率无显著差异(P>0.05)。(4)实验鱼在摄食期间的特定体重增长率(SGRBM)与饥饿期间的不相关(P>0.05),但摄食期间的特定SMR增长率(SGRSMR)与饥饿期间的呈负相关(P<0.05)。研究表明在实验室环境中锦鲫幼鱼的SMR具有稳定性,该种鱼的日均体重变化量保持相近,此形态变化特征与SMR不相关,并且该种鱼在实验起始时的SMR的个体差异未能预测其在实验室食物资源变动下生长性能的适应特征。

土霉素对日本锦鲫肝脏抗氧化防御系统的影响

土霉素(Oxytetrac ycline,简称OTC)是养殖业中广泛使用的药物之一,由于大量使用,已在水环境中不断被检出,其对水生生物及人类可能产生的影响已经引起人们广泛关注。采用室内染毒实验方法,研究了土霉素对典型淡水鱼类日本锦鲫肝脏抗氧化防御系统的影响,分析暴露于不同浓度(0、0.01、0.05、0.1、0.5、1.0、5.0、10mg·L-1)的OTC溶液15d后鱼体肝脏中ROS、MDA、SOD、CAT和谷胱甘肽等指标,探讨其潜在的致毒机制。结果表明,ROS信号强度在高浓度组(5mg·L-1和10mg·L-1)与对照相比分别减少44.2%和32.5%,呈显著性差异;MDA含量在0.1mg·L-1和5mg·L-1下显著减少,分别减少41.7%和52.3%;SOD活性在0.01mg·L-1下显著性增加32.4%,CAT和GST活性呈低浓度被诱导、高浓度被抑制的趋势;GSH和GSSG含量的变化趋势相似,呈先减少后增加的趋势(P<0.05)。上述结果表明低浓度OTC对日本锦鲫产生氧化应激,诱导了肝脏抗氧化防御系统,但高浓度下清除氧自由基的作用大于其氧化应激毒性,从而使得鱼体氧化应激程度减轻。抗氧化防御系统酶活性的变化只能间接反映污染物对生物造成应激效应的程度,要弄清楚OTC的致毒机制仍需进一步研究。

锦鲫Clock基因表达量分析中的内参基因稳定性比较

为研究锦鲫Clock基因表达量分析中的内参基因稳定性,采用qRT-PCR技术进行实时荧光定量分析,并用Ge Norm和Norm Finder软件对5个内参基因(RPL13,GAPDH,18 S rRNA,β-actin和RPS29)进行稳定性评估,筛选出不同组织中最适合的内参基因,以准确定量Clock基因的相对表达水平.实验结果表明,5个内参基因中,18 S rRNA在锦鲫的肌肉、心脏、肝脏中表达最稳定,β-actin在肠中表达最稳定,RPL13在肾中表达最稳定;根据筛选的内参基因定量Clock基因的相对表达水平发现,Clock基因在锦鲫肌肉中相对表达量最高,其次依次是肝脏、肾、肠,心脏中最低.本研究准确定量Clock基因,为锦鲫生物钟节律机制的下一步研究奠定了理论基础.

阿维菌素和氟虫腈对锦鲫的急慢性毒性效应

采用半静态法,利用2种非有机磷农药——阿维菌素和氟虫腈对锦鲫进行农药的急性和慢性毒性试验,并对其脑组织中的乙酰胆碱酯酶(AChE)和羧酸酯酶(CarE)的抑制情况进行研究。研究结果显示,2种农药对锦鲫96 h的LC50分别为0.109 9、0.113 1 mg/L,对鱼类均属于高毒农药。慢性试验(21 d)结果显示,阿维菌素和氟虫腈对2种解毒酶均有抑制作用,对乙酰胆碱酯酶最高抑制率达64.19%,对羧酸酯酶最高抑制率为35.21%,呈现出正相关的剂量-时间-效应关系。将锦鲫在清水中恢复7 d后,各处理酶活性都有一定程度的恢复。研究结果表明,这2种酶均可作为评价这2种非有机磷农药危害的生物标志物。