Sr-β-TCP材料对脂肪干细胞生物学活性和成骨分化的影响

目的研究锶-β-磷酸三钙(Sr-β-TCP)对兔脂肪干细胞(Rabbit adipose-derived stem cells,rADSC)生物学活性和成骨分化的影响。方法取新西兰大白兔肩胛间区皮下脂肪,分离培养rADSCs,选取第3代rADSCs进行成骨诱导。制备β-TCP材料和Sr-β-TCP材料,将β-TCP材料和Sr-β-TCP分别与成骨诱导的rADSCs共培养,分为1%Sr-β-TCP组、3%Sr-β-TCP组、5%Sr-β-TCP组、β-TCP组、对照组(成骨诱导培养液)。MTT比色法检测rADSCs增殖情况,检测碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)活性及钙离子含量,蛋白质免疫印迹(Western blot)检测rADSCs成骨相关蛋白表达。结果与对照组和3%Sr-β-TCP组相比,β-TCP组、1%及5%Sr-β-TCP组d1、d3、d6、d8的OD值均下降(P<0.05);d3、d6、d8,5%Sr-β-TCP组OD值均低于β-TCP组、1%Sr-β-TCP组(P<0.05)。随着时间延长,各组光密度(OD)值均升高(P<0.05)。与对照组和β-TCP组相比,1%、3%Sr-β-TCP组钙离子含量,ALP活性,Notch3、pFAK、pERK1/2、RhoA表达升高,5%Sr-β-TCP组钙离子含量,ALP活性,Notch3、pFAK、pERK1/2、RhoA表达降低(P<0.05);3%Sr-β-TCP组钙离子含量,ALP活性,Notch3、pFAK、pERK1/2、RhoA表达高于1%、5%Sr-β-TCP组(P<0.05)。结论3%Sr-β-TCP材料能提高rADSCs生物学活性以及成骨分化能力,可能与Notch3/FAK/ERK1/2信号通路有关。