石南藤镇痛活性部位筛选及其纯化

目的筛选石南藤镇痛活性部位,并对其进行纯化。方法采用阳离子树脂富集纯化活性部位,HPLC法测定墙草碱含量。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测醋酸扭体小鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6、PGE2水平。结果墙草碱在0.0198~0.1980 mg/mL范围内线性关系良好(r>0.9999),平均加样回收率为103.09%,RSD为1.75%。最优纯化工艺为取2 BV 0.4 g/mL上样液,以2 BV/h体积流量流过树脂,5 BV 70%乙醇以2 BV/h体积流量洗脱,墙草碱纯度3.52%,得率20.63%,除杂率79.37%。阳离子洗脱液部位可有效减少小鼠疼痛扭体次数,降低1L-1β、TNF-α水平(P<0.01)。结论HPLC法准确稳定,重复性好,阳离子树脂纯化效率高,操作性强,工艺简便,可用于纯化具有镇痛活性的石南藤,其镇痛机制可能与减少炎症因子的释放有关。

一种滇白珠富含水杨酸甲酯糖苷抗炎镇痛活性部位提取富集方法的探索

目的以活性成分为指标,优化滇白珠抗炎镇痛活性部位(ARF)提取富集工艺。方法以水杨酸甲酯三糖苷(MSTG-B)为指示性成分对滇白珠水杨酸甲酯糖苷类成分进行提取及富集,确定最佳提取和洗脱溶剂。选用Thermo Hypersil Gold C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.2%乙酸溶液为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0 ml/min,检测波长为294nm,建立滇白珠ARF部位的HPLC指纹图谱。结果滇白珠药材的最佳提取溶剂为30%乙醇溶液,经大孔树脂AB-8富集后的35%乙醇洗脱部位为ARF部位。所测定的3个不同产地的滇白珠样品,其ARF部位的指纹图谱相似度和方法学考察均符合要求。结论 ARF部位提取富集方法工艺稳定,重现性好。