猪瘟抗体镧系荧光免疫层析法的建立

本研究以纯化的猪瘟病毒(CSFV)重组E2蛋白和纯化全病毒为抗原,用镧系元素铕(Eu)为荧光标记,建立了猪瘟抗体镧系荧光免疫层析快检法,经特异性、敏感性、重复性试验,表明该方法具有敏感性和特异性强、重复性好、快速、无辐射、高通量等优点,且操作简单、省时省力,该方法完全可以用于CSF抗体检测和免疫效价评估。

猪伪狂犬病gE、gB抗体镧系荧光免疫层析快检试剂盒的研制及效果评估

本试验以镧系元素铕(Eu)为荧光标记,用纯化的PRV-gE和PRV-gB表达蛋白抗原建立了检测猪伪狂犬病gE、gB抗体的镧系荧光免疫层析快检试剂盒。经特异性、敏感性、重复性试验及与同类产品的对比试验,得出该试剂盒特异性强、敏感性高、重复性好、符合率高,且质量稳定,保质期长,是实现猪伪狂犬病即时现场快速检测的一种血清学检测方法。

布鲁氏菌抗体镧系高敏荧光快速检测试剂盒的研制

本试验选用镧系元素铕(Eu)为荧光物质标记布鲁氏菌脂多糖抗原(LPS),建立了布鲁氏菌抗体高敏荧光免疫层析快速检测试剂盒(Bru-LFICA)。经相关试验验证,得出该试剂盒特异性强,敏感性高,重复性好,符合率高,且兼具操作方便,检测快速(15 min),价廉,不需特殊设备和专业技术人员等优点,特别适合于基层兽医站、养殖场的即时快速检测。

猪圆环病毒病抗体高敏荧光免疫层析快检试剂盒的研制

本试验以镧系元素铕(Eu)为荧光标记,用纯化的PCV-2表达蛋白抗原建立了检测猪圆环病毒病抗体的镧系荧光免疫层析快检试剂盒。经特异性、敏感性、重复性试验及与同类产品的对比试验,得出该试剂盒特异性强、敏感性高、重复性好、符合率高,且质量稳定,保质期长,是实现猪圆环病毒病即时现场快速检测的简单而实用的血清学检测方法。

猪蓝耳病抗体高敏荧光免疫层析快检试剂盒的研制

本试验以镧系元素铕(Eu)为荧光标记建立了检测猪蓝耳病病毒抗体的镧系荧光免疫层析快检试剂盒,经特异性、敏感性、重复性试验及与同类产品的比对试验,表明该试剂盒特异性强、敏感性高、重复性好、符合率高;且质量稳定,保质期长,是实现猪蓝耳病即时现场快速检测的简单而实用的血清学检测方法。

基于镧系高敏荧光的生物毒素现场快速检测方法的研究

目的利用时间分辨荧光技术建立一种可快速、准确地对蓖麻毒素、A型肉毒毒素及产气荚膜梭菌ε毒素进行定量检测的方法。方法首先合成了一种可见光激发的镧系荧光微球,通过比较不同粒径的铕离子荧光微球,筛选出最佳粒径的微球偶联标记效价最高的捕获抗体,分别与相应检测抗体平行组合,确定最优的配伍组合条件建立检测方法。其次,对该法的敏感性、精密性、定量能力和特异性进行评价。结果所建立的时间分辨荧光免疫层析法(TRFIC)可在20 min内完成对3种生物毒素的定性/定量检测。3种毒素的最低检出限均可达0.5 ng/ml,定量范围为0.5~50 ng/ml,3种毒素间及与黄曲霉毒素B_(1)、T-2毒素均无交叉反应,批内重复性和批间重复性变异系数均小于15%。结论该研究建立了一种基于可见光激发的TRFIC,在生物毒素的检测中获得了较高的最低检测限,与配套的小型便携式检测仪器一起使用,具有检测快速、可远程传输结果的优势,未来在生物反恐、生物武器核查等领域具有较高的应用价值和应用前景。

利用镧系荧光技术定量检测A型肉毒毒素

目的利用镧系荧光技术建立定量检测A型肉毒毒素方法,并验证该方法的检测效果。方法分别用A型肉毒毒素单克隆抗体和鸡IgY抗体标记镧系荧光纳米微球,在硝酸纤维素膜上包被A型肉毒毒素多克隆抗体作为检测线,包被山羊抗鸡IgY的IgG抗体作为质控线,建立A型肉毒毒素检测方法,分析方法的准确度、特异性、灵敏度和可重复性。结果建立的A型肉毒毒素镧系荧光法可在20 min内完成检测,灵敏度为5 IU/ml,与黄曲霉素B1、呕吐毒素、T2毒素、相思子毒素和蓖麻毒素无交叉反应,批内重复性和批间重复性变异系数均小于15%。结论镧系荧光法的建立为A型肉毒毒素快速、高效检测提供了可靠保障。