棘孢木霉与30%霜霉·嘧菌酯协同防治烟草镰刀菌根腐病

为筛选防治烟草镰刀菌根腐病高效、安全的复配剂,采用菌丝生长速率法测定生防棘孢木霉Tr-0111、化学杀菌剂30%霜霉·嘧菌酯对尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)的毒力及两者的相容性,同时测定两者混配对尖孢镰刀菌的毒力系数,并通过盆栽试验评价其对烟草镰刀菌根腐病的防治效果。结果表明,30%霜霉·嘧菌酯和棘孢木霉Tr-0111对尖孢镰刀菌均具有较强的毒力,其EC50值分别为0.0643 mL/L、2.36×10^(2)cfu/mL,且两者相容性好。除V30%霜霉·嘧菌酯∶V_(Tr-0111)=4∶6时无增效作用,其他8个混配比例均具有增效作用,其中V_(30%霜霉·嘧菌酯)∶V_(Tr-0111)=7∶3时增效比率最高,为1.16,抑菌率为68.37%。盆栽试验结果表明,V_(30%霜霉·嘧菌酯)∶V_(Tr-0111)=5∶5时,对烟草镰刀菌根腐病的防效最好,为78.18%,其次为7∶3和1∶9,防效分别为77.27%和72.73%,均显著高于单一使用30%霜霉·嘧菌酯和棘孢木霉Tr-0111。因此,可以将0.0643 mL/L 30%霜霉·嘧菌酯和2.36×10^(2)cfu/mL棘孢木霉Tr-0111以5∶5比例混匀复配应用于烟田防治烟草镰刀菌根腐病,减少化学农药使用。

新型苜蓿镰刀菌根腐病病原菌FIESC分离及菌株生物学特性测定

为明确北京市顺义区苜蓿(Medicago sativa L.)镰刀菌根腐病的病原菌种类,本研究采用常规组织分离法对发病苜蓿样品进行病原菌分离纯化;利用形态学特征观察结合多基因序列分析(rDNA-ITS,EF-1α和RPB2)的系统发育树对病原菌进行鉴定,并按照柯赫法则测定菌株致病性;采用菌丝生长速率法,测定强致病镰刀菌的生物学特性及杀菌剂的抑制作用。结果表明,本研究共分离获得26株菌株,7株鉴定为镰刀菌,分别属于Fusarium incarnatum-equiseti species complex(FIESC)中的F.ipomoeae,F.compactum和F.flagelliforme以及锐顶镰刀菌F.acuminatum和腐皮镰刀菌F.solani,其中MsF1(F.ipomoeae)的致病力最强,接种苜蓿幼苗发病的病情指数为64.33。生物学特性测定表明,MsF1在温度30℃、pH值为6~10、低氮条件下最适合生长,可耐受150 g·L^(-1)的NaCl胁迫;异菌脲对其抑制效果不明显,供试浓度下抑制率低于10%,而咯菌腈对其半数效应浓度(Median effect concentration,EC 50)为0.142μg·m·L^(-1)。本研究首次报道FIESC可侵染紫花苜蓿引起镰刀菌根腐病,为苜蓿根腐病的多样性研究和田间有效防治提供科学依据和理论支撑。

烟草镰刀菌根腐病抗性鉴定方法研究

为获得不同烟草品种镰刀菌根腐病抗性的鉴定方法,采用镰刀菌粗毒素幼芽接种、孢子悬浮液培养、带菌菌谷接种、离体叶片菌饼接种、草酸局部注射等5种方法对4个品种(小黄金1025、中烟100、长脖黄、664-01)的镰刀菌抗病性进行了研究。结果表明,镰刀菌毒素液胁迫法可以鉴定品种的抗感程度,适宜体系毒素浓度为8%,处理时间6 d;镰刀菌孢子悬浮液接种法可以鉴定品种的抗感程度,适宜体系孢子液浓度为107个/mL,处理时间4 d;带菌菌谷接种也可以鉴定品种的抗感程度,适宜体系菌谷比例为20%,处理时间9 d;离体叶片用菌饼和草酸液处理,能区分品种的抗感性,但不能区分品种的抗感程度。研究结果认为孢子悬浮液接种法和带菌菌谷接种与其他3种方法相比可以准确评价品种对镰刀菌根腐病的抗感性。

广东韶关烟区烟草镰刀菌根腐病病原鉴定及致病性分析

为明确广东韶关烟草镰刀菌根腐病菌种类及致病力,在珠玑、始兴、南雄和乌茎采集根腐病样本,用组织分离法分离病原菌,盆栽接种带菌麦粒测定其致病性,观察菌株形态,基于EF-1α和β-Tub基因序列构建发育树鉴定病原菌。结果表明,获得45株镰刀菌,通过形态特征和分子技术鉴定为茄病镰刀菌Fusarium solani、共享镰刀菌F.commune、藤仓镰刀菌F.fujikuroi和尖孢镰刀菌F.oxysporum,分别占比42.22%,26.67%、20.00%和11.11%,对烟草均有致病性,强弱排列为F.commune≈F.fujikuroi>F.oxysporum>F.solani。本研究可为广东韶关地区烟草镰刀菌根腐病的防治提供依据。

云南省烟草镰刀菌根腐病病原鉴定

【背景和目的】烟草镰刀菌根腐病(Fusarium root rot)影响烟叶产量和品质,为明确云南省烟草镰刀菌根腐病病原种类。【方法】采用组织分离法分离病原并进行单孢纯化;结合形态学和分子生物学rDNA-ITS与EF-1α序列鉴定病原;采用灌根接种法测定病原菌的致病性。【结果】获得的300个菌株在PDA平板上均呈絮状,菌丝白色、紫色或粉红色,大型分生孢子无色、多孢、多为镰刀形;小型分生孢子无色、多无隔,呈椭圆形或纺锤形。经序列比对将300菌株鉴定为7个种,其中227株为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum),占比75.7%;43株为茄病镰刀菌(F. solani);16株为共享镰刀菌(F. commune);8株为木贼镰刀菌(F. equiseti);3株为层出镰刀菌(F. proliferatum);2株芬芳镰刀菌(F. redolens)和1株轮枝镰刀菌(F. verticillioides)。【结论】云南省烟草镰刀菌根腐病病原为尖孢镰刀菌、茄病镰刀菌、共享镰刀菌、木贼镰刀菌、层出镰刀菌、芬芳镰刀菌和轮枝镰刀菌,其中尖孢镰刀菌为优势菌。

基于非靶向代谢组学的烟草镰刀菌根腐病和黑胫病拮抗链霉菌及其代谢产物的鉴定

针对烟草两种土传病害病原菌—镰刀根腐病菌Fusarium oxysporum和黑胫病菌Phytophthora parasitica,本实验室前期从烟草根际土壤中筛选得到1株具有良好生防作用的链霉菌,结合形态学、生理生化特性及分子生物学分析,将其鉴定为淀粉酶产色链霉菌Streptomyces diastatochromogenes。通过对该生防菌发酵液进行色谱-质谱联用(LC/MS)非靶向代谢组学分析,确定其重要代谢产物为茴香霉素。利用高效液相色谱对产物进行验证及含量测定,表明每克粗提物中含有茴香霉素423.98μg。菌丝生长抑制试验结果表明,茴香霉素对镰刀根腐病菌和黑胫病菌的EC_(50)值分别为1556.36和40.74μg/m L。本研究为烟草镰刀菌根腐病和黑胫病的生物防治提供了新的方法,并为其代谢产物—茴香霉素的进一步利用提供了有价值的理论基础。

烟草镰刀菌根腐病研究初报

通过田间和室内接种症状观察，首次报道烟草镰刀菌根腐病在贵州的发生情况，对其田间症状、病原菌特点作了描述。

烟草镰刀菌根腐病拮抗细菌的筛选鉴定及促生防病效果

为挖掘对烟草镰刀菌根腐病具有较强拮抗作用的生防菌株,采用稀释涂布平板法从健康烟株根际土壤中分离纯化对烟草镰刀菌根腐病(Fusarium root rot)主要病原具有一定拮抗作用的细菌,进行形态学、生理生化特征和16S rDNA序列分析鉴定,并测定促生防病效果。经平板对峙测定,筛选出2株对烟草镰刀菌根腐病病原具有较好抑制作用的菌株YX53和YX72,对茄病镰刀菌(F.solani)的抑制效率分别为83.66%和73.54%,对尖孢镰刀菌(F.oxysporum)的抑制效率分别为57.57%和55.89%;2菌株无菌发酵滤液对病原孢子萌发抑制率为84.82%~100%,其挥发性化合物可抑制病原菌丝生长或产孢,且对烟草疫霉菌(Phytophthora nicotianae)、根串珠霉菌(Thielaviopsis basicola)等也有抑制效果。鉴定结果表明,YZ53和YX72分别为蜡样芽孢杆菌Bacillus cereus和枯草芽孢杆菌B. subtilis。经2菌株处理的烟苗胚根增长率分别达到了67.86%和161.61%,盆栽烟苗根长、最大叶面积、鲜质量等均有所增加;YX53盆栽防病效果在89.47%以上,YX72在99.53%以上。

甜菜幼苗抗镰刀菌根腐病性鉴评方法研究

选用抗病性不同的5个甜菜品种在温室条件下对幼苗进行混合接种镰刀菌,评价其对甜菜镰刀菌根腐病的抗病性;同时进行田间自然发病鉴定。两次温室接种鉴定的结果和田间自然发病鉴定的结果相同,抗病性由高到低的顺序依次为:甜菜多倍体7号、多粒、山东单04、ZD204、杂优202单粒。认为甜菜抗镰刀菌根腐病性可以用温室接种的方法进行早期鉴定。

基于FUNGuild的镰刀菌根腐病发病烟株根际真菌群落研究

为了解镰刀菌根腐病发病烟株与未发病烟株在根际真菌群落结构与功能上的差异,联合应用高通量测序和FUNGuild技术研究了镰刀菌根腐病发病烟株与未发病烟株根际土壤中的真菌群落,结果表明:(1)镰刀菌根腐病发病烟株根际真菌群落的Shannon指数为4.14,而未发病烟株则高达4.71,未发病烟株根际真菌群落多样性显著高于发病烟株,镰刀菌根腐病发病烟株与未发病烟株根际土壤中的真菌群落在组成上有显著差异;(2)镰刀菌根腐病发病烟株根际真菌以病理营养型为主,占54.64%,而未发病烟株根际真菌则以腐生营养型为主,占46.10%;(3)镰刀菌根腐病发病烟株根际的病原菌相对丰度为30.73%,显著高于未发病烟株的1.12%,镰刀菌在病原菌群落中占绝对优势地位。高通量测序与FUNGuild联用可对土传病害感病烟株的根际优势病原真菌群落进行准确鉴定,可为烟草病害的防控提供科学参考。

烟草镰刀菌根腐病病原菌的鉴定及其对5种杀菌剂的敏感性分析

为筛选防治烟草镰刀菌根腐病的有效农药,降低该病害对烟叶产量和质量的影响,采用显微观察、进化树分析以及接种鉴定的方法,对从河南省襄城县烟草镰刀菌根腐病发病烟株根部分离出的病原菌NC-11进行形态学鉴定、分子鉴定及致病性鉴定,并选用5种杀菌剂对其进行毒力测定,对其中抑菌效果最好的杀菌剂进行田间防效验证。结果表明,从烟草镰刀菌根腐病发病烟株根部分离出的病原菌NC-11为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporium)。供试5种杀菌剂对NC-11菌丝生长的抑制作用存在显著差异,以62.5 g/L精甲·咯菌腈悬浮种衣剂的抑制效果最好,其EC50为0.186 2 mg/L,对病原菌的菌丝生长抑制率最高可达97.27%;68%精甲霜·锰锌水分散粒剂的抑制效果最差,其EC50为203.152 2 mg/L,质量浓度为1 000.00 mg/L时对病原菌的菌丝生长抑制率最高为66.53%。田间验证结果表明,62.5 g/L精甲·咯菌腈悬浮种衣剂在首次施药46 d后相对防效达72.69%。因此,可将62.5 g/L精甲·咯菌腈悬浮种衣剂作为防治烟草镰刀菌根腐病的首选药剂。

烟草镰刀菌根腐病防治药剂的筛选

为筛选防治烟草镰刀菌根腐病高效、安全的复配剂或包衣剂,采用菌丝生长速率法测定了10种内吸性化学杀菌单剂和10种生物杀菌单剂(共20种)对烟草主要致病菌尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)的室内生物活性,并通过盆栽试验验证其防治效果。毒力测定结果表明,20种杀菌剂均对烟草尖孢镰刀菌有不同程度的抑制作用,化学杀菌剂的抑制效果整体较生物杀菌剂的抑制效果显著,化学杀菌剂中500 g/L氟啶胺SC、25%戊唑醇WP、40%苯醚甲环唑SC、20%抑霉唑EW的EC;分别为0.0571、0.1187、0.3280、0.4459μg/mL;生物杀菌剂中1.8%阿维菌素EC、5%香芹酚AS、0.01%芸苔素内酯EC的EC;分别为10.3870、18.8732、32.3437μg/mL。盆栽试验结果表明,氟啶胺8000倍液、戊唑醇2000倍液、苯醚甲环唑1200倍液和芸苔素内酯原液的盆栽防效较高,分别为51.51%、75.75%、62.12%和62.12%。因此,可选择氟啶胺、戊唑醇、苯醚甲环唑和芸苔素内酯用于复配剂、包衣剂的研发以及田间烟草镰刀菌根腐病常规化学药剂的轮换使用和综合防控。

大蒜根系分泌物对烟草镰刀菌根腐病的控制作用

为探讨大蒜根系分泌物对烟草尖孢镰刀菌的抑菌活性,采用琼脂法培养大蒜,利用气相色谱-质谱技术(GC-MS)测定其主要成分,研究大蒜根系分泌物对烟草尖孢镰刀菌根腐病的影响。对菌丝生长速率和孢子萌发的测定表明,当大蒜根系分泌物粗提物浓度为1 g/mL时,其菌丝生长抑制率为30.56%,孢子萌发抑制率高达100.00%。大蒜根系分泌物主要成份2,6-二异丙基苯酚和邻苯二甲酸二丁酯分别对其菌丝生长和孢子萌发具有较强的抑菌作用。邻苯二甲酸二丁酯的防控效果较好,其浓度为5 mmol/L,接菌21 d后其病情指数为55.00,防控效果达32.38%。大蒜根系分泌物及主要成分对尖孢镰刀菌所引起的烟草根腐病有显著的抑制作用,这为研制含大蒜成分的植物保护剂和间作套种大蒜防控烟草尖孢镰刀菌根腐病提供科学参考。

云南省烟草镰刀菌根腐病菌遗传多样性分析

【背景和目的】尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)引起的根腐病是烟草主要的土传病害,在云南烟区普遍发生。为分析云南省不同地理来源尖孢镰刀菌的遗传差异性和亲缘关系。【方法】采用ISSR(inter-simple sequence repeat)和SRAP(sequence-related amplified polymorphism)分子标记技术分析40株菌株遗传多样性。【结果】(1)采用ISSR技术,供试的7条引物共扩增出53条条带,其中多态性条带44条,平均多态性条带83.02%。菌株间的遗传相似系数为0.49~0.96,存在遗传背景差异。遗传相似系数为0.68时,40株菌株可分为3个类群。(2)采用SRAP技术,供试的7对引物共扩增出44条条带,其中多态性条带32条,平均多态性条带72.73%,菌株间的遗传相似系数为0.55~0.96。遗传相似系数为0.70时,40株菌株可分为3个类群,结果与ISSR一致。【结论】云南省烟草尖孢镰刀菌菌株间遗传差异大,ISSR和SRAP分子标记技术可用于烟草尖孢镰刀菌的遗传多样性分析。

烟草镰刀菌根腐病研究进展

镰刀菌根腐病是烟草苗期的一种次级病害,在烟草苗期到大田生长期均可发病,控制其危害对烤烟的可持续发展相当重要。详细介绍了烟草镰刀菌根腐病的病害症状、病原菌、侵染循环、发病机制,并对目前烟草镰刀菌根腐病的防治方法及防治展望进行阐述,旨在为研究此病提供参考。

不同紫花苜蓿种质对镰刀菌根腐病的抗病性评价

利用蘸根接种法将三线镰刀菌、木贼镰刀菌、变红镰刀菌和锐顶镰刀菌四种内蒙古地区苜蓿根腐病的主要致病菌接种于42个国内外苜蓿品种并根据病情指数(0、0~20、20~40、40~60、>60)划分抗性级别,结果表明:对四种镰刀菌均表现高抗、中抗、中感和高感的品种分别有1、1、10和0个;对其中三种镰刀菌表现高抗、中抗、中感和高感的品种分别有0、6、9和4个;对其中两种镰刀菌表现为高抗、中抗、中感和高感的品种分别有1、4、9和5个;对单一镰刀菌表现为高抗、中抗、中感和高感的品种分别有2、7、10和3个;未发现免疫品种。

河南烟区烟草镰刀菌根腐病病原鉴定及侵染烟草根系观察

为明确河南烟区烟草镰刀菌根腐病的病原组成结构及其侵染过程,通过形态学和分子生物学方法鉴定了从河南烟区分离的烟草镰刀菌根腐病病原菌,采用组织染色显微和荧光显微观察了病原菌对烟草根系的侵染过程。结果表明,豫南和豫西烟区尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)平均检出率最高,分别为53.04%和48.18%;其次是茄病镰刀菌(F.solani)和层出镰刀菌(F.proliferatum),平均检出率分别为33.62%、37.24%和6.67%、9.91%。豫中烟区茄病镰刀菌和尖孢镰刀菌的平均检出率相近,分别为46.19%和45.48%,各烟区均检出共享镰刀菌(F.commune)、三线镰刀菌(F.tricinctum)和藤仓镰刀菌(F.fujikuroi)等新的病原菌。尖孢镰刀菌可通过根系表皮细胞间隙、根毛、根系破损细胞处、侧根生长处等位点侵染植物组织;附着在植株根系表面的病原孢子萌发形成芽管,通过植物表皮细胞间隙及根毛顶端侵入烟草组织,之后芽管生长分化形成菌丝,菌丝沿皮层薄壁细胞间隙逐渐扩展延伸,进入维管束并大量繁殖,进而堵塞导管管腔,阻止水分及营养运输,造成植物病变。因此,尖孢镰刀菌、茄病镰刀菌和层出镰刀菌为河南各烟区镰刀菌根腐病的主要病原;尖孢镰刀菌可通过多种途径侵染烟草,病原菌在接触烟株根系早期开始侵染。

烟草镰刀菌根腐病(Fusarium spp.)拮抗菌L210的鉴定及生防潜力评价

为筛选烟草镰刀菌根腐病(Fusarium spp.)的高效拮抗菌株,通过平板对峙、盆栽和大田复筛试验,从平顶山烟区烟株根际土壤中分离筛选拮抗菌;利用形态观察、生理生化测试和16S rDNA序列分析对拮抗菌进行鉴定,并对拮抗菌抗镰刀菌根腐病的机理进行研究。结果表明:从10份土壤样品中共分离土壤微生物菌株512株,其中以L210菌株对镰刀菌根腐病抑制效果最好,平板对峙抑菌直径71.4 mm,抑菌率为68.2%;盆栽和大田防病试验的发病率分别为0、6%,病情指数分别为0、1.5,防治效果分别为100%和77.9%。初步鉴定L210菌株为液化沙雷氏菌(Serratia liquefaciens),其抑菌机理为溶解尖孢镰刀菌的菌丝,使其失去侵染能力,进而抑制病原菌的生长。菌株发酵液中含有几丁质酶和纤维素酶,可溶解病原菌的细胞壁,还可显著诱导提高烟苗中多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)等防御酶的活性。因此,菌株L210在烟草镰刀菌根腐病的生物防治中具有较大的应用潜力。

烟草镰刀菌根腐病研究进展

烟草是我国重要的经济作物之一,烟草镰刀菌根腐病作为一种世界性的烟草根茎病害,在我国危害程度正在逐年加重。部分地区已经成为主要的烟草根茎病害,严重影响了烟草的品质和产量,制约了烟草产业的可持续发展。为进一步科学防治烟草镰刀菌根腐病,从烟草镰刀菌根腐病的发生与为害、病原学特性及致病机理、诊断和鉴定方法、流行规律和防治措施等方面进行综述,以期为烟草镰刀菌根腐病的防控提供参考。

宁夏回族自治区马铃薯镰刀菌根腐病病原菌的分离鉴定与致病性测定

为明确宁夏回族自治区马铃薯镰刀菌根腐病的病原菌种类,2015-2018年从宁夏回族自治区固原市、吴忠市、中卫市和石嘴山市4个市12个区县采集马铃薯病样,采用组织分离法对病样进行分离纯化,利用形态学鉴定方法和基于rDNA-ITS与EF-1α序列分析的分子鉴定方法对分离物进行鉴定,并按照柯赫氏法则对其致病性进行测定。结果显示,经组织分离法共获得真菌菌株347株,其中230株镰刀菌属真菌菌株引起马铃薯镰刀菌根腐病,这些镰刀菌分属于5个种,分别为尖孢镰刀菌Fusarium oxysporum、茄病镰刀菌F. solani、锐顶镰刀菌F. acuminatum、木贼镰刀菌F. equiseti、接骨木镰刀菌F. sambucinum,这5种镰刀菌分别为67、29、50、39和45株,分离频率分别为29.13%、12.61%、21.73%、16.95%和19.56%;这5种镰刀菌的致病性有差异,其中接骨木镰刀菌和茄病镰刀菌的发病率分别为91.81%和99.99%,病情指数分别为69.56和82.23,均高于其它3种镰刀菌,是引起宁夏回族自治区马铃薯镰刀菌根腐病的优势病原菌。