(R)-(+)-长叶薄荷酮对耐药结核分枝杆菌抑制作用及其生物被膜调控基因的影响

目的 研究(R)-(+)-长叶薄荷酮对耐药结核分枝杆菌体外抑制作用及其生物被膜调控基因Rv0024、Rv2872、Ra1362的影响。方法 通过聚合酶链反应(Polymerase chain reaction, PCR)筛选含生物被膜调控基因Rv0024、Rv2872、Ra1362的耐药结核分枝杆菌,采用刃天青显色法和液体培养计数法测定(R)-(+)-长叶薄荷酮对生物被膜介导的耐药结核分枝杆菌的最小抑菌浓度(Minimal inhibit concentration, MIC)和最低杀菌浓度(Minimum bactericidal concentration, MBC),应用反转录-聚合酶链式反应(Reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)检测(R)-(+)-长叶薄荷酮对耐药结核分枝杆菌生物被膜调控基因Rv0024、Rv2872、Ra1362的影响。结果 在3×10^(7) CFU/mL和3×10^(6) CFU/mL菌液浓度下,刃天青显色法测得(R)-(+)-长叶薄荷酮对耐药结核分枝杆菌的MIC和MBC分别为14.79、29.59 mg/mL;液体培养计数法测得(R)-(+)-长叶薄荷酮对耐药结核分枝杆菌的MIC_(90)和MBC分别为19.89、24.62 mg/mL。RT-PCR法结果表明长叶薄荷酮可抑制Rv0024、Ra1362的表达,促进Rv2872的表达(P<0.05)。结论 (R)-(+)-长叶薄荷酮通过调控耐药结核分枝杆菌生物被膜主要基因Rv0024、Rv2872、Ra1362的表达,达到抑制耐药结核分枝杆菌的生长的作用。

长叶薄荷酮对耐药大肠埃希菌生物被膜及其调控基因LuxS的影响

目的研究长叶薄荷酮对耐药大肠埃希菌生物被膜形成的抑制作用及其主要调控基因S-核糖基高半胱氨酸酶(S-ribosyl homocysteine lyase,LuxS)的影响。方法采用微量稀释和平板菌落计数法,检测长叶薄荷酮对耐药大肠埃希菌的体外抑菌活性。应用TTC和结晶紫半定量法检测长叶薄荷酮对耐药大肠埃希菌生物被膜形成的抑制作用。RT-PCR方法检测在长叶薄荷酮作用下,耐药大肠埃希菌生物被膜主要调控基因LuxS的变化。结果长叶薄荷酮对耐药大肠埃希菌的生长具有明显的抑制作用,其MIC和MBC分别是23.68、47.35 mg/mL;对其生物被膜形成的抑制作用较强,在94.70 mg/mL浓度下抑制率达到了52.36%,同时长叶薄荷酮明显抑制LuxS的表达(P<0.01)。结论长叶薄荷酮抑制耐药大肠埃希菌的生长和生物被膜的形成,下调LuxS的表达,这为进一步探索长叶薄荷酮抗生物被膜形成的机制奠定分子学基础。

R-(+)-长叶薄荷酮对腹腔感染耐药菌小鼠的抗炎作用

目的 明确腹腔感染耐药菌小鼠的半数致死浓度(LC50)和绝对致死浓度(LC100),探讨R-(+)-长叶薄荷酮对腹腔感染耐药菌小鼠的抗炎作用。方法 随机将小鼠分为正常对照组(NC组)、耐药菌株感染模型组(Model组)、R-(+)-长叶薄荷酮组(PU组,20 mg/kg)、头孢克肟组(CFM组,26 mg/kg),每组10只;除NC组外,其他试验组进行干预,连续3 d, 1次/d, Model组按照20 ml/kg经口灌胃食用油,PU组、CFM组分别给予等体积的R-(+)-长叶薄荷酮、头孢克肟,第3天给药后1 h,腹腔注射耐药大肠埃希菌(10 ml/kg),观察24、48 h后收集小鼠眼眶血、腹腔冲洗液、腹膜组织;采用全自动细胞分析仪进行血液、腹腔冲洗液的白细胞计数;瑞氏-吉姆萨染色观察血细胞形态变化;苏木精-伊红(HE)染色法观察腹腔组织病理形态变化。结果 腹腔感染耐药菌小鼠的LC50和LC100分别是1.50×10~8 CFU/ml、2.25×10~8 CFU/ml;与NC组相比,Model组小鼠腹腔内存在弥漫性炎症,腹腔充血、水肿;而PU组、CFM组小鼠腹腔内炎症、充血、水肿程度较Model组不明显;眼眶血白细胞计数表明PU组较NC组有所降低,较Model组、CFM组无统计学差异;腹腔冲洗液白细胞计数PU组低于Model组,较NC组增高,较CFM组无统计学差异,表明R-(+)-长叶薄荷酮对腹腔感染耐药菌小鼠具有抗炎作用(P<0.05);HE结果显示,PU组、CFM组腹膜组织结构完整,间皮细胞排列整齐,腹膜组织间质较NC组可见少量淋巴细胞浸润,相对于Model组腹膜组织结构更加完整,淋巴细胞浸润较少,表明R-(+)-长叶薄荷酮对腹腔耐药菌的感染具有显著的抗感染保护作用。结论 R-(+)-长叶薄荷酮对腹腔感染耐药菌小鼠具有一定抗炎作用,为R-(+)-长叶薄荷酮抗感染药理作用机制的探索提供一定的研究基础。

(-)-1R,2S,5R-8-(4-溴苯)薄荷醇的合成与表征

以R-(+)-长叶薄荷酮为起始原料,经1,4-加成、还原、溴代、水解等4步反应合成了标题化合物,总产率77%。其结构用1HNMR、13CNMR和IR进行了表征。

(-)-1R,2S,5R-8-(4-甲氧基苯)薄荷醇的合成表征

以R-(+)-长叶薄荷酮为起始原料,经1,4-加成、还原两步反应合成了手性辅助试剂标题化合物及其差向异构体(+)-1S,2S,5R-8-(4-甲氧基苯)薄荷醇,总产率83%。其结构经1HNMR和13CNMR进行了表征。

(+)-1R,2S,5R-8-β-萘基薄荷醇的合成研究

以R-(+)-长叶薄荷酮为起始原料,经1,4-加成、还原两步反应合成了手性辅助试剂标题化合物,总产率90%。其结构经IR、1HNMR、13CNMR和MS进行了表征。

(-)-1R,2S,5R-8-(4-甲氧基甲基苯)薄荷醇的合成表征

以R-(+)-长叶薄荷酮为起始原料,经1,4-加成、还原两步反应合成了手性辅助试剂(-)-1R,2S,5R-8-(4-甲氧基甲基苯)薄荷醇及其反向异构体(+)-1S,2S,5R-8-(4-甲氧基甲基苯)薄荷醇,总产率88%。其结构用1HNMR和13CNMR进行了表征。

抗HIV活性海洋天然产物Didemnaketals的合成研究——C1～C7片段的合成

以天然 ( +) 长叶薄荷酮为原料 ,通过分子内手性诱导 ,立体选择性地合成了具有抗艾滋病活性的化合物DidemnaketalA的C1～C7片段 ,( 3R ,4S ,6R) 3 ,4 二 (叔丁基二甲基硅氧基 ) 7 羟基 6 甲基 2 庚酮 .