长波紫外线对人黑素瘤细胞中视蛋白3的表达及细胞增殖的影响

目的研究长波紫外线对人黑素瘤细胞中视蛋白3(OPN3)的表达及对细胞增殖的影响。方法利用不同剂量的UVA分别照射人黑素瘤细胞系(A375细胞和MV3细胞)后,通过5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(EdU)实验及细胞增殖与活性检测试剂(CCK-8)检测照射前后细胞的增殖情况,实时荧光定量(RT-qPCR)分别检测细胞中视蛋白(OPN)的mRNA表达水平;利用慢病毒技术分别沉默和过表达A375细胞和MV3细胞中的OPN3,采用EdU实验及CCK-8方法检测细胞的增殖水平;沉默A375细胞和MV3细胞中OPN3后进行UVA照射,通过EdU及CCK-8方法检测照射前后细胞增殖的变化;采用转录组测序技术检测过表达及沉默OPN3的MV3细胞中差异基因的表达,并进行KEGG富集相关信号通路分析,免疫印迹法(Western blot)验证Hippo信号通路相关蛋白的表达情况。结果与Control组相比,UVA照射组中的细胞增殖能力明显增强(P<0.05);RT-qPCR结果显示,OPN1、OPN2、OPN3、OPN4以及OPN5在A375和MV3细胞中均有表达,其中OPN3的转录表达水平水平均明显高于其他OPN(P<0.05);UVA照射组中A375和MV3细胞OPN3蛋白表达水平明显升高,沉默OPN3的表达后,A375和MV3细胞的增殖能力减弱,过表达OPN3后A375和MV3细胞的增殖能力增强(P<0.05);沉默人黑素瘤细胞(A375细胞和MV3细胞)OPN3后经UVA照射,细胞增殖能力较单纯照射UVA时降低(P<0.05);沉默及过表达MV3细胞中OPN3的表达后,RNA-seq测序结果筛选出141个差异基因,KEGG分析筛选差异基因富集信号通路9条,其中-Log10(FDR)值最高的为Hippo信号通路;沉默OPN3后,检测到LATS1表达水平增加,p-YAP、YAP、RhoA蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论UVA可促进人黑素瘤细胞系(A375细胞和MV3细胞)OPN3的表达,并通过Hippo信号通路调控细胞的增殖过程。

补骨脂素长波紫外线和窄谱中波紫外线治疗寻常性银屑病临床疗效观察

目的:观察补骨脂素长波紫外线(PUVA)和窄谱中波紫外线(NB-UVB)治疗寻常性银屑病的临床疗效及其影响因素。方法:分别采用PUVA和311nmNB-UVB照射治疗146例寻常性银屑病患者,并以银屑病面积和严重度指数(PASI)评价疗效,分析照射剂量等对疗效和复发的影响。结果:NB-UVB治疗寻常性银屑病的疗效与PUVA相当,NB-UVB组患者的治疗时间明显短于PUVA组,NB-UVB组患者1年内复发率高于PUVA组。结论:NB-UVB治疗寻常性银屑病与PUVA相比,不良反应较少,起效较快。

补骨脂素加长波紫外线诱导NB4细胞凋亡及对Fas/FasL基因表达影响的研究

目的探讨自中药补骨脂中提取的补骨脂素(psoralen,PSO)加长波紫外线(ultraviolet A,UVA)诱导人白血病细胞NB4凋亡及对Fas/FasL基因表达的影响。方法以NB4细胞为研究对象,采用流式细胞术、透射电镜、定量PCR等方法观察不同浓度的PSO,在不同时间的波长为360 nm的UVA照射下,细胞凋亡率、细胞超微结构以及细胞Fas/FasL基因、蛋白表达水平的变化。结果(1)补骨脂素加长波紫外线(PUVA)可诱导NB4细胞凋亡,当PSO浓度为10、20、40、80μg/mL时,UVA照射5 min的细胞凋亡率分别为(26.57±0.42)%、(30.67±0.11)%、(34.90±0.30)%、(24.63±0.38)%,凋亡率呈剂量-时间依赖性,两因素间有交互作用。(2)电镜下观察经PUVA处理后的NB4细胞超微结构,可见明显的凋亡形态学改变特征。(3)PUVA可上调NB4细胞Fas基因、蛋白的表达水平,并呈剂量-时间依赖性,在基因水平两因素间有交互作用,在蛋白水平两因素无交互作用。(4)PUVA可下调NB4细胞FasL基因、蛋白的表达水平,并呈剂量-时间依赖性,且两因素间有交互作用。结论PUVA可诱导白血病细胞NB4发生凋亡,Fas/FasL系统是PUVA诱导NB4细胞发生凋亡的作用途径之一。

细菌衍生黑素对长波紫外线诱导人皮肤成纤维细胞凋亡和坏死的保护

目的:探讨细菌衍生黑素(b-melanin)对长波紫外线(UVA)诱导人成纤维细胞凋亡和坏死产生的光保护作用,为今后将其用作皮肤光保护剂提供依据。方法:正常人成纤维细胞(NL-FB)和着色性干皮病患者成纤维细胞(XP-FB)经UVA照射12h后,以四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞存活率,Hoechst33258染色法观察早期凋亡细胞核形态学变化,二氯荧光素二酯(DCFH-DA)标记法测定细胞内活性氧基(ROS)水平。结果:UVA照射诱导细胞的半数致死剂量,XP-FB大约为30J/cm2,而NL-FB>40J/cm2。为了观察不同浓度(0,25,50,100,200,400,和800μg/mL)的b-melanin是否对细胞存在光保护作用,给予半数致死剂量(30J/cm2)UVA照射后,经100～400μg/mLb-melanin处理的XP-FB的细胞存活率均较未处理组明显增高(P<0.01),而NL-FB的细胞存活率变化不明显。细胞内ROS测定结果显示100、400μg/mL的b-melanin能明显清除UVA诱导产生的ROS。100μg/mL b-melanin即能阻止非致死剂量(16J/cm2)UVA照射诱导的早期凋亡细胞核改变。结论:b-melanin能对UVA诱导人成纤维细胞凋亡和坏死提供有效的光保护,这一作用很可能关系到b-melanin对ROS的清除。本研究还首次提出核酸切除修复机制缺陷的XP-FB是一敏感的可用于测试UVA光损伤作用的体外细胞模型。

菜地长波紫外线杀虫灯下昆虫多样性研究

采用市售长波紫外线太阳能LED杀虫灯对重庆露地种植模式下菜地趋光性昆虫进行诱捕试验,共捕集昆虫样本35科42种.明确了重庆露地种植模式下菜地长波紫外线灯下趋光性昆虫以鳞翅目Lepidoptera数量最多,其次是双翅目Diptera和鞘翅目Coleoptera,长波紫外线灯下优势种为摇蚊科Chironomidae莲藕潜叶摇蚊Stenochironomus nelumbus及螟蛾科Pyralidae甜菜白带野螟Hymenia recurvalis.从物种数来看,捕集到的昆虫以鞘翅目种类最多,其次是鳞翅目和半翅目Hemiptera.此外,双翅目昆虫优势集中性指数始终维持在较高水平,仅在2017年8月出现明显下降,达到最低值0.590 0.调查期间大部分时段菜地长波紫外线灯下昆虫物种组成达相似水平,其中以2016年8月与9月相似性水平最高,为0.837 8.从相异性指数来看,2016年6月与11月昆虫物种相异性最大,为0.729 7.

玉竹水提液对长波紫外线诱导人皮肤成纤维细胞损伤的保护作用

目的探讨玉竹水提液对长波紫外线(UVA)诱导的人皮肤成纤维细胞损伤的保护作用及其可能机制。方法用30 J/cm2的UVA照射人皮肤成纤维细胞建立光老化细胞模型,以不同浓度玉竹提取物处理光老化细胞,MTT法检测细胞活力,羟胺法检测细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性,比色法检测谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,TBA法检测丙二醛(MDA)含量。结果 UVA照射成纤维细胞后,细胞活力下降,SOD、GSH-Px活性降低,MDA含量升高(P<0.01),玉竹水提液中(100μg/ml)、高(200μg/ml)剂量组能显著提高成纤维细胞细胞活力、SOD、GSH-Px活性,降低MDA含量(P<0.05或P<0.01)。结论玉竹水提液可在一定程度上抑制UVA引起的成纤维细胞活性下降,其机制可能与其抑制氧化损伤和增强细胞抗氧化能力有关。

何首乌二苯乙烯苷抑制长波紫外线诱导的HaCaT细胞氧化损伤

目的探讨二苯乙烯苷对长波紫外线(UVA)辐射HaCaT细胞氧化损伤的保护作用。方法从何首乌中提取二苯乙烯苷。UVA辐射强度为18J/cm2,用人角质形成细胞HaCaT构建体外细胞模型。MTT法测定细胞活力;酶生化法测定胞质超氧化物歧化酶(SOD),GSH-px活性及MDA水平;人氧化应激与抗氧化PCR芯片检测细胞内氧化应激及抗氧化基因mRNA的变化,通过实时定量PCR验证芯片结果。结果在18J/cm2UVA辐射下,给定浓度范围内的二苯乙烯苷能剂量依赖性提高胞质SOD和GSH-px活力,降低胞质MDA水平;基因芯片检测发现二苯乙烯苷可明显改变部分氧化应激及抗氧化基因的表达,并通过实时定量PCR验证其结果与基因芯片结果一致。结论二苯乙烯苷对UVA辐射的HaCaT细胞氧化损伤有一定的保护作用。其机制与清除自由基、提高抗氧化酶活性及改变相关基因表达有关。

黄芪甲苷抑制长波紫外线引起人成纤维细胞氧化损伤的研究

目的观察黄芪甲苷对长波紫外线(UVA)辐射引起的人成纤维细胞增殖活性变化及氧化损伤的影响。方法采用5、10J/cm2的UVA照射培养的成纤维细胞,加入黄芪甲苷干预处理,以四甲基偶氮唑蓝还原法(MTT法)检测细胞活性,比色法检测细胞上清液中的超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量变化。结果不同剂量UVA照射后24h,成纤维细胞出现增殖活性下降,活性下降程度与辐射强度成正比;黄芪甲苷干预处理可使细胞活性有一定程度恢复。UVA照射组的SOD明显下降、MDA上升,黄芪甲苷处理的细胞上清液中SOD活性明显增加,而MDA下降(P<0.05)。结论黄芪甲苷可在一定程度上抑制UVA引起的成纤维细胞活性下降,其机制可能与其抑制氧化损伤和增强细胞抗氧化能力有关。

长波紫外线照射皮肤成纤维细胞表皮生长因子受体的表达

背景:长波紫外线与人体皮肤老化关系密切,主要作用于表皮和真皮全层。目的:观察长波紫外线照射对体外培养的皮肤成纤维细胞的表皮生长因子受体表达的影响。方法:体外培养人成纤维细胞,将细胞分为对照组、长波紫外线照射5,10,20J/cm2组。照射24h后,分别用实时PCR和Western blot检测表皮生长因子受体mRNA和蛋白的表达情况。结果与结论:体外培养的皮肤成纤维细胞随着长波紫外线照射剂量的增加,表皮生长因子受体的mRNA与蛋白水平均显著增加,提示长波紫外线可以诱导成纤维细胞里的表皮生长因子的表达。

转化生长因子β1对长波紫外线照射皮肤成纤维细胞线粒体DNA 4977 bp缺失的影响

背景:长波紫外线与人体皮肤光老化关系密切,线粒体的损伤是细胞衰老和死亡的分子基础。目的:观察长波紫外线照射对体外培养的皮肤成纤维细胞的线粒体脱氧核糖核酸缺失损伤的影响,以及转化生长因子β1对长波紫外线引起的线粒体DNA缺失有无保护作用。为皮肤光老化研究提供实验依据。设计、时间及地点:实验于2007-03/2008-04于解放军第四军医大学西京医院全军整形外科研究所完成。材料:转化生长因子β1为PerProtech公司产品;线粒体DNA 4977 bp引物由上海生工合成;长波紫外线光源为北京光学仪器厂生产;紫外线辐照计为北京师范大学光电仪器厂生产。方法:收集20～23岁成年男性包皮环切术后的皮肤组织12例,体外培养成纤维细胞。将细胞分组为对照组、长波紫外线累计照射达到30,60,90J/cm2组,半定量PCR检测DNA 4977 bp缺失情况。不同质量浓度转化生长因子β1(0.1,1,10μg/L)干预长波紫外线累积照射达90J/cm2的皮肤成纤维细胞。主要观察指标:观察不同累积照射剂量产生的DNA 4977 bp缺失;观察累积照射剂量90J/cm2后不同浓度转化生长因子干预对DNA 4977 bp缺失的影响。结果:体外培养的皮肤成纤维细胞经长波紫外线照射,长波紫外线累积剂量为长波紫外线60J/cm2后发生线粒体DNA 4977 bp缺失,长波紫外线90J/cm2时缺失加重。吸光度值和PCR产物电泳及条带密度扫描结果显示,在照射前2h加入不同剂量转化生长因子处理后,大剂量组(10μg/L)线粒体DNA表达降低,中、小剂量组与长波紫外线照射组比较,差异无显著性意义。结论:一定剂量(10μg/L)转化生长因子对体外培养的成纤维细胞线粒体DNA缺失起到保护作用。

长波紫外线对成纤维细胞胶原合成的影响

目的 探讨皮肤光老化的发生机理 ,并建立细胞水平的光老化模型。方法 应用正常人来源的单层培养皮肤成纤维细胞 ,长波紫外线照射 2天后 ,用MTT法检测其细胞增殖情况 ,3 H -脯氨酸检测其细胞胶原合成情况。结果 照射组与非照射组细胞增殖差异无显著性意义 (P >0 .0 5 ) ,而照射组细胞胶原合成比非照射组显著降低 (P <0 .0 0 1)。结论 在体外培养情况下 ,短期、小剂量长波紫外线对人成纤维细胞胶原生物合成有显著的抑制作用。

长波紫外线对小鼠朗格汉斯细胞生物学活性的影响

目的 研究体外长波紫外线 (UVA)对小鼠表皮朗格汉斯细胞 (LC)生物学活性的影响。方法 观察不同剂量的UVA对BALB/c小鼠表皮LC存活率、膜相关抗原 (Ia、B7 1、B7 2、CD40 )的表达及其抗原提呈功能的影响。结果 生理剂量的UVA (<80kJ/m2 )照射 ,对LC的存活率影响不明显 ,却能增加LC膜抗原的表达 ,促进其抗原提呈功能。超生理剂量的UVA则反之。结论 生理与非生理剂量的UVA对LC会产生不同的生物学效应 ,这可能是UVA调节机体免疫功能的分子基础。

防晒化妆品长波紫外线防护效果的仪器评价法

综述了对化妆品防晒效果的评价方法,重点介绍了仪器法对UVA防晒效果评价的研究进展,简述了UVA防晒效果的标识方法,所使用仪器的类型及样品的制备方法。并展望了未来UVA防晒效果评价方法的发展方向。

表没食子儿茶素没食子酸酯抑制长波紫外线诱导的HaCaT细胞氧化损伤和凋亡

目的:探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)是否能对长波紫外线(UVA)诱导的人角质形成细胞(HaCaT细胞)氧化损伤和凋亡起保护作用以及其可能的作用机制。方法:将HaCaT细胞分成空白组、EGCG组、UVA照射组以及UVA照射+EGCG组。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性,筛选最佳药物浓度;检测细胞上清液中的超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性以及丙二醛(MDA)含量变化;流式细胞仪检测细胞膜电位变化;末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法检测不同组细胞凋亡率。结果:UVA照射组的SOD和GSH-Px明显下降、MDA相应上升,线粒体膜电位下降,凋亡率上升(P<0.05)。EGCG处理的细胞UVA照射后其活性以及上清液中的SOD、GSH-Px活性相对于未加药UVA照射组明显增加,MDA相应下降;线粒体膜电位上升,细胞凋亡率明显下降(P<0.05)。结论:EGCG可以减少UVA诱导HaCaT细胞氧化损伤和细胞凋亡,其机制可能与增强抗氧化成分活性和减少氧自由基有关。

小剂量长波紫外线多次照射对人体皮肤的影响

目的:研究小剂量长波紫外线(UVA)辐射对人体皮肤的累积效应。方法:以10名志愿者的臀部作为受试部位,共分为3个区域:阴性对照区域,不进行照射;小剂量照射区域和阳性对照区域分别进行UVA照射,每周照射3次,连续13周,共39次。其中小剂量照射区域的累积剂量为50 J/cm^2;阳性对照区域的累积剂量为1 000J/cm^2。照射前后测定皮肤角质层含水量、经皮水分丢失(transepidermal water loss,TEWL)、pH值、皮肤颜色的L~*a~*b~*值和M、E值。取照射区皮肤组织进行苏木精-伊红染色、弹性纤维染色和免疫组化染色,观察表皮、角质层厚度、胶原纤维、弹性纤维的变化、基质金属蛋白酶(MMP)-1和人类长寿基因SIRT1的蛋白表达产物在UVA照射后的变化。结果:小剂量照射区域角质层含水量有下降趋势,TEWL有增加趋势,L~*值下降、M、a~*、E值升高,pH值无明显变化。皮肤的角质层和表皮厚度增加,真皮中的胶原纤维细碎、淡染,弹性纤维片断化。MMP-1和SIRT1的表达增加。结论:小剂量UVA照射可以引起皮肤光老化。

中长波紫外线辐射诱导皮肤成纤维细胞上清液中微囊泡功能的检测

目的观察中长波紫外线辐射诱导皮肤成纤维细胞微囊泡的生成及其对人皮肤成纤维细胞形态及增殖活性的影响。方法使用不同剂量中长波紫外线辐射人皮肤成纤维细胞，提取细胞上清液中的微囊泡，利用透射电镜及Western免疫印迹法鉴定所获得的微囊泡，BCA法测定微囊泡蛋白的含量；将紫外线辐射后生成的微囊泡与正常成纤维细胞共孵育，使用倒置显微镜观察细胞形态，并使用细胞计数CCK-8法检测细胞增殖率。结果中长波紫外线辐射皮肤成纤维细胞促进微囊泡的生成和释放。紫外线辐射后的微囊泡直径多数在20～200nm之间，表面蛋白Alix，tsg101及CD9表达阳性。紫外线辐射后生成的微囊泡可导致人皮肤成纤维细胞形态发生改变，倒置显微镜下出现较多的细胞碎片，细胞体积变大，过度伸展，并使细胞增殖率降低。结论中长波紫外线辐射可诱导皮肤成纤维细胞释放微囊泡，后者是介导紫外线辐射旁效应的主要介质之一。

最小持续性黑化量用于长波紫外线防护效果评价的试验研究

目的:探讨在人体试验中以最小持续性黑化量(MPPD)作为判断长波紫外线(UVA)防护效果指标的可行性。方法:选择3种不同作用机制的防晒剂,按标准配方分别配制3个浓度系列的UVA防晒品,分别涂抹于受试者的背部皮肤,采用日光模拟器照射,测定每一个受试者的MPPD值并分别计算每一种测试样品的UVA防护系数,即PFA值。结果:与不具有防护效果的基质对照相比,每种防晒品的PFA值随浓度升高而升高,差异具有显著性。结论:在上述试验中,UVA防晒剂具有降低UVA辐射的作用,并且其浓度与防护效果呈线性关系。因此,用持续性黑化反应评价皮肤受到的UVA辐射是一种准确和重复性好的技术方法,以MPPD作为观察指标对防晒品的UVA防护效果进行人体试验评价是可靠和可行的。

吖啶橙与长波紫外线灭活血浆中f_2噬菌体的形态变化

目的 观察吖啶橙 (AO)与长波紫外线 (UVA)消毒血浆中f2 噬菌体后形态的变化。方法 以f2 噬菌体为试验病毒 ,通过AO与UVA单用及联用灭活病毒效果测定筛选二者协同作用的最佳条件 ,在此最佳消毒条件下利用透射电镜观察f2 噬菌体在消毒前后形态的变化。结果 经AO处理后再经UVA照射 ,能明显减少血浆中f2 噬菌体的滴度 ,两因素的T E值大于 1;经有效灭活病毒的剂量 ( 6μg mlAO +4 5 0 0J m2 UVA)消毒后与消毒前相比 ,血浆中大多数f2 噬菌体由球形变为纺锤状和丝状 ,且轮廓变得不清晰 ,电子密度降低。结论 AO与UVA两因素具有协同增效作用 ;消毒后f2 噬菌体的形态明显发生了变化 ,由球形变为纺锤状和丝状。

补骨脂素加长波紫外线光化学疗法诱导HL-60、K562细胞凋亡及对Fas、FasL表达的影响

目的探讨补骨脂素(PSO)加长波紫外线(PUVA)光化学疗法(UVA)诱导人白血病细胞HL-60、K562凋亡及对Fas、FasL表达的影响。方法以HL-60、K562细胞为研究对象,以细胞凋亡率、电镜下细胞超微结构改变以及细胞Fas、FasL在基因、蛋白水平的表达为检测指标,观察PSO加波长为360 nm的UVA对人白血病细胞诱导凋亡的作用以及部分作用途径,并采用多因素方差分析法进行统计学处理。结果PSO、UVA照射及PUVA均可诱导HL-60、K562细胞发生凋亡,PUVA的作用显著强于前两者。电镜下观察经PUVA处理后的HL-60、K562细胞超微结构,可见明显的凋亡形态学改变。PSO、UVA照射及PUVA均可上调HL-60、K562细胞Fas在基因、蛋白水平的表达,下调FasL在基因、蛋白水平的表达,PUVA的作用显著强于前两者。结论PUVA可诱导白血病细胞HL-60、K562发生凋亡,作用强于PSO及UVA照射。PUVA诱导HL-60、K562细胞凋亡的途径之一为上调细胞Fas基因表达水平,下调FasL基因表达水平。