长链非编码核糖核酸在肺结核疾病病程中的作用及研究进展

肺结核是由结核分枝杆菌感染人体肺部引起的传染性疾病,在结核病中最为常见。由于早期诊断不及时、误诊、治疗不当、延误治疗以及患者自身免疫状况等因素可促使结核病进展为重症,增加患者死亡风险。长链非编码核糖核酸(long non-coding RNA,lnc RNA)已成为影响疾病诊断、治疗和预后的潜在新型分子,且在肺结核领域诊治方面展示出了很大的潜力和优势,其中部分研究探讨了lnc RNA在监测肺结核向重症发展过程中的潜在作用。本文就lnc RNA在肺结核疾病进展中发挥的生物学功能进行综述,探讨lnc RNA作为肺结核向重症进展的分子生物标志物和诊治靶点的前景。

术前血清V-set和免疫球蛋白结构域4以及长链非编码核糖核酸SBF2反义RNA1与肾结石患者经皮肾镜取石术后急性肾损伤的关系

目的探讨术前血清V-set和免疫球蛋白结构域4(VSIG4)以及长链非编码核糖核酸(LncRNA)SBF2反义RNA1(SBF2-AS1)与肾结石患者经皮肾镜取石术后急性肾损伤(AKI)的关系。方法选择2020年1月—2022年12月本院收治的109例肾结石患者为研究对象。术前检测患者血清VSIG4水平以及LncRNA SBF2-AS1表达,术后记录AKI发生情况。采用多因素Logistic回归模型分析肾结石患者经皮肾镜取石术后发生AKI的影响因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析VSIG4、LncRNA SBF2-AS1预测肾结石患者经皮肾镜取石术后发生AKI的价值。结果本研究中,术后发生AKI者16例。AKI组血清VSIG4水平低于非AKI组,LncRNA SBF2-AS1表达高于非AKI组,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,术前高尿酸水平、术前高LncRNA SBF2-AS1表达、较长的手术时间、术中低血压是肾结石患者经皮肾镜取石术后发生AKI的危险因素(P<0.05),术前高VSIG4水平是保护因素(P<0.05)。术前血清VSIG4、LncRNA SBF2-AS1水平预测肾结石患者经皮肾镜术后发生AKI的曲线下面积分别为0.854、0.705,二者联合预测的曲线下面积为0.948,大于各指标单独预测(Z=1.995、2.958,P<0.05)。结论肾结石患者术前血清VSIG4水平降低、LncRNA SBF2-AS1表达增高与经皮肾镜取石术后AKI的发生有关,联合检测术前VSIG4、LncRNA SBF2-AS1可预测术后AKI的发生风险。

长链非编码RNA LINC00926调控微小RNA-331-3p对前列腺癌细胞增殖和迁移的影响

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)LINC00926对前列腺癌细胞增殖和迁移的影响及分子机制。方法:前列腺癌组织和癌旁组织LINC00926表达用LncRNADisease数据库分析。采用RT-qPCR检测正常前列腺上皮RWPE-1细胞和前列腺癌细胞株22Rv1、PC3、C4-2B、LNCaP、DU-145中LINC00926的表达。选取LINC00926表达最高的前列腺癌DU-145细胞,分别转染LINC00926小干扰RNA(si-LINC00926组)和阴性对照RNA(si-NC组)。采用CCK-8法、划痕实验检测DU-145细胞增殖和迁移能力。双荧光素酶报告基因实验检测LINC00926与miR-331-3p的靶向结合。采用RT-qPCR检测DU-145细胞中miR-331-3p表达。采用Western blot检测Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路相关蛋白表达。结果:前列腺癌组织LINC00926表达水平高于癌旁组织(P<0.05)。与RWPE-1细胞比较,LINC00926在前列腺癌22Rv1、PC3、DU-145、C4-2B、LNCaP细胞中表达水平升高,且DU-145细胞表达最高(均P<0.05)。si-NC组LINC00926表达水平高于si-LINC00926组(P<0.05)。于24、48、72、96 h,si-LINC00926组DU-145细胞增殖能力低于si-NC组(均P<0.05)。与si-NC组比较,si-LINC00926组DU-145细胞迁移能力下降(P<0.05)。LINC00926-WT和miR-331-3p共转染荧光素酶相对活性低于LINC00926-WT和miR-NC共转染(P<0.05)。si-NC组miR-331-3p表达水平低于si-LINC00926组(P<0.05)。与si-NC组比较,si-LINC00926组DU-145细胞中β-连环蛋白(β-catenin)、细胞髓细胞瘤病毒癌基因同源物蛋白(c-myc)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、周期蛋白依赖激酶3(CDK3)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白表达水平降低(均P<0.05)。结论:LINC00926在前列腺癌组织和细胞中高表达,下调LINC00926可能通过靶向miR-331-3p抑制前列腺癌细胞的增殖和迁移能力。

不稳定型心绞痛患者血清长链非编码RNA OIP5-AS1和微小RNA-137水平与心功能及心血管不良事件的相关性分析

目的探讨不稳定型心绞痛(UA)患者血清长链非编码RNA(lncRNA)OIP5-AS1和微小RNA-137(miR-137)水平与心功能及心血管不良事件的相关性。方法选取2022年5月至2023年8月海南省第二人民医院收治的102例UA患者为观察组。另选取本院同期102名体检健康者为对照组。UA患者根据随访6个月心血管不良事件发生情况分为发生组(n=35)和未发生组(n=67)。采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测血清lncRNA OIP5-AS1、miR-137水平;利用Pearson法分析UA患者血清lncRNA OIP5-AS1与miR-137的相关性及lncRNA OIP5-AS1、miR-137与心功能指标的相关性;Logistic回归模型分析影响UA患者发生心血管不良事件的潜在因素;受试者工作特征曲线评估血清lncRNA OIP5-AS1、miR-137水平预测UA患者发生心血管不良事件的效能。结果观察组患者血清miR-137水平、左心室舒张末期内径(LVEDD)均明显高于/大于对照组,血清lncRNA OIP5-AS1、左心室射血分数(LVEF)水平均明显低于对照组(均P<0.001)。发生组患者血清miR-137水平、LVEDD均明显高于/大于未发生组,血清lncRNA OIP5-AS1、LVEF水平均明显低于未发生组(均P<0.001)。血清lncRNA OIP5-AS1与miR-137呈负相关(r=-0.555,P<0.001)。血清lncRNA OIP5-AS1与LVEDD呈负相关(r=-0.441,P<0.001),与LVEF呈正相关(r=0.479,P<0.001);血清miR-137与LVEDD呈正相关(r=0.466,P<0.001),与LVEF呈负相关(r=-0.472,P<0.001)。miR-137、LVEDD升高是影响UA患者发生心血管不良事件的风险因素,而lncRNA OIP5-AS1、LVEF水平升高是其保护因素(均P<0.05)。血清lncRNA OIP5-AS1、miR-137水平单独预测与二者联合预测UA患者发生心血管不良事件的曲线下面积分别为0.845、0.832、0.924,二者联合优于血清lncRNA OIP5-AS1(Z=2.146、P=0.032)、miR-137(Z=2.114、P=0.035)各自单独预测。结论发生心血管不良事件的UA患者血清lncRNA OIP5-AS1水平降低、miR-137水平升高,血清lncRNA OIP5-AS1、miR-137是影响UA患者发生心血管不良事件的潜在因素,且二者联合在预测UA患者发生心血管不良事件方面展现出更高的效能。

长链非编码RNA编码微肽的鉴定和功能研究进展

随着翻译组测序、多肽组学和生物信息学分析等技术的快速发展,人们发现大量长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)含有可编码功能性微肽的短开放阅读框。这些由lncRNA编码的微肽不仅参与调控骨骼肌的生理功能、胚胎发育和神经细胞发育,还对多种癌症的发生与发展、炎症反应及心血管疾病产生影响。研究这些微肽的功能对于深入理解生命活动的调控机制具有重要的科学意义,也为相关疾病的防治提供新的思路与方向。概述了鉴定lncRNA编码微肽的常用方法,以及这些微肽功能的最新研究进展,以期为后续研究提供参考。

长链非编码RNA与骨性关节炎

背景:骨性关节炎作为中老年常见疾病,发病机制尚不清晰。长链非编码RNA通过多种途径参与骨性关节炎发病过程,如调控翻译、促进或者抑制mRNA表达、吸附miRNA等。目的:综述多种长链非编码RNA在骨性关节炎中的作用机制及研究进展。方法:检索中国知网、万方数据库、维普数据库、PubMed、Web of Science和Sciencedirect数据库,以“osteoarthritis,degenerative joint disease,degenerative arthritis,OA,LncRNA,long non-coding RNA,long noncoding RNA,long intergenic non-coding RNA”为英文检索词,以“骨性关节炎,骨关节炎,OA,长链非编码RNA,长链非编码核糖核酸,LncRNA”为中文检索词,检索1976年至2024年5月发表的所有相关文献,并对其进行筛选、归纳、分析、总结,最后纳入93篇文献进行综述。结果与结论:①收集了目前与骨性关节炎关系研究较多且较深入的25种长链非编码RNA;②长链非编码RNA可以充当miRNA的分子海绵,作为竞争性内源性RNA竞争性吸附miRNA,进而影响下游靶点;③长链非编码RNA可以调控软骨细胞的凋亡与增殖、软骨细胞外基质降解以及炎症反应等生理病理进程;④长链非编码RNA有望成为骨性关节炎临床诊断及治疗预后的生物标志物和潜在治疗靶点,未来可能会成为骨性关节炎临床治疗的新策略。

长链非编码RNA MALAT1与微小核糖核酸-146a相互作用对子痫前期滋养细胞功能的影响

目的:探讨长链非编码RNA(long noncoding RNA,LncRNA)转移相关肺腺癌转录本1(metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript 1,MALAT1)与微小核糖核酸(microRNA,miRNA)-146a相互作用在对子痫前期(preecampsia,PE)滋养细胞功能的影响及机制研究。方法:体外培养绒毛膜癌细胞JEG-3细胞,分4组对JEG-3细胞进行转染,分别为Control、sh-MALATl、miR-146a-5p inhibitor和sh-MALATI+miR-146a-5p inhibitor组,其中sh-MALATl组转染sh-MALATl,miR-146a-5p inhibitor组转染miR-146a-5p inhibitor,sh-MALATl+inhibitor组共同转染sh-MALATl与miR-146a-5p inhibitor,Control组加入等量空载体。通过QPCR检测mRNA水平;生物信息预测MALATl与miR-146a-5p的靶向关系;通过CCK8实验检测各组质粒转染JEG-3细胞后对其增殖能力的影响;利用Western Blot技术检验不同方式处理后,JEG-3细胞内蛋白的表达量变化。结果:sh-MALATl明显降低MALATl并提高miR-146a-5p在JEG-3细胞mRNA水平。sh-MALATl抑制JEG-3细胞增殖能力;miR-146a-5p inhibitor促进细胞增殖能力,减弱sh-MALATl产生的影响。同时,sh-MALATl减弱滋养细胞中TRAF6、VEGR、MMP2蛋白的表达,而miR-146a-5p inhibitor可增强其表达,并减弱sh-MALATl的抑制作用。结论:MALATl与miR-146a可相互作用对子痫前期滋养细胞生物学行为产生影响。

长链非编码脱氧核糖核酸在脑血管疾病中的研究进展

血管损伤和修复的失衡可导致脑血管疾病的发生和发展,如脑供血动脉狭窄、颅内动脉瘤等。从基因层面直至蛋白层面的表达,均参与该病理生理过程。在这种多层面分子调控中,蛋白的表达按照脱氧核糖核酸（deoxyribonucleic acid,DNA）转录到核糖核酸（ribonucleic acid,RNA）,然后表达成蛋白的顺序进行;然而,仅有1%的基因能够真正编码成表达蛋白的RNA,

长链非编码RNA核富集转录本1对瘢痕成纤维细胞增殖、凋亡和迁移的影响

背景:已有研究阐明核富集转录本1(nuclear enriched abundant transcript 1,NEAT1)下调抑制了瘢痕成纤维细胞的进展,但具体机制尚不完全清楚。目的:探讨长链非编码RNA NEAT1调节miR-136-5p/泛素特异性蛋白酶4(ubiquitin specific protease 4,USP4)轴对瘢痕成纤维细胞生物学行为的影响。方法:将瘢痕成纤维细胞分为5组:si-NC组、空白对照组、si-NEAT1组、si-NEAT1+miR-136-5p inhibitor组、si-NEAT1+inhibitor-NC组,qRT-PCR检测NEAT1、miR-136-5p表达;CCK-8法及EDU染色检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞凋亡情况;划痕愈合实验检测细胞迁移情况;Western blot检测USP4、p27、Bax、基质金属蛋白酶9、α-平滑肌肌动蛋白、Ⅰ型胶原蛋白α1链蛋白表达;双荧光素酶实验检测NEAT1与miR-136-5p、miR-136-5p与USP4的关系。结果与结论:①与si-NC组比较,si-NEAT1组NEAT1表达、A450值、EDU阳性细胞百分比、划痕愈合率以及USP4、基质金属蛋白酶9、α-平滑肌肌动蛋白、Ⅰ型胶原蛋白α1链蛋白表达降低(P<0.05),miR-136-5p表达、细胞凋亡率及p27、Bax蛋白表达升高(P<0.05);②miR-136-5p inhibitor逆转了沉默NEAT1对瘢痕成纤维细胞生物学行为的影响;③miR-136-5p与NEAT1、miR-136-5p与USP4存在靶向调控关系。结果表明,沉默NEAT1可能通过调控miR-136-5p/USP4轴抑制瘢痕成纤维细胞的增殖和迁移,诱导其凋亡。

急性心肌梗死患者外周血长链非编码核糖核酸NEAT1表达水平与病情及预后的相关性分析

目的:研究急性心肌梗死(AMI)患者外周血长链非编码核糖核酸(lncRNA) NEAT1表达水平与病情及预后的相关。方法:选择2017年6月至2018年6月期间,在我院接受经皮冠状动脉介入术(PCI)的104例AMI患者,同期在我院体检且一般资料与AMI患者匹配的70例志愿者作为对照组,检测外周血lncRNA NEAT1的表达水平,收集AMI患者的临床资料、随访AMI患者PCI后主要不良心血管事件(MACE),分析不同lncRNA NEAT表达水平AMI患者临床特征及MACE累积发生率的差异。结果:AMI组患者外周血中lncRNA NEAT1的表达水平明显高于对照组(P<0.05);AMI组中lncRNA NEAT1表达水平≥中位数患者的CK-MB峰值、肌钙蛋白T(c Tn T)峰值、Gensini评分、SYNTAX II评分、左心室舒张末期容积(LVEDV)、MACE累积发生率均高于lncRNA NEAT1表达水平<中位数患者,LVEF、E/A均低于lncRNA NEAT1表达水平<中位数患者(P<0.05);AMI组中lncRNA NEAT1表达水平≥中位数和<中位数患者的性别比、年龄、BMI、合并高血压、合并糖尿病、合并高脂血症和血运重建等,差异无统计学意义(P>0.05)。外周血lncRNA NEAT1表达水平对AMI患者PCI后发生MACE具有预测价值。结论:AMI患者外周血lncRNA NEAT1表达上调与病情加重、预后恶化有关。

长链非编码核糖核酸在心脏发育及心血管疾病中的作用研究进展

长链非编码核糖核酸(long noncoding RNA,lncRNA)是一类长度大于200个核苷酸的非编码RNA。研究表明lncRNA能以RNA的形式在多种层面上(表观遗传、转录及转录后水平)调控基因的表达,参与了细胞凋亡、增殖,发育等重要生物学过程。近年来,lncRNA在心血管疾病中的作用获得关注。现将lncRNA在心脏发育及心血管疾病中的作用作一综述。

长链非编码RNA通过p38MAPK信号通路直接或间接影响骨质疏松症

背景:近年来大量的研究发现长链非编码RNA参与骨质疏松症的发生和发展。p38MAPK信号通路参与骨髓间充质干细胞、成骨细胞以及破骨细胞的分化等过程而参与骨质疏松症的发展,而长链非编码RNA可通过影响p38MAPK信号通路,直接或间接参与骨质疏松症的发生及发展过程。目的:综述长链非编码RNA通过p38MAPK信号通路,直接或间接影响骨质疏松症的进展,为长链非编码RNA在骨质疏松症中预防和治疗提供一个新思路。方法:检索PubMed、中国知网和万方数据库的相关文献,以“长链非编码RNA,骨质疏松,间充质干细胞,成骨细胞,破骨细胞,p38信号通路”为中文检索词,以“long non-coding RNA,osteoporosis,mesenchymal stem cells,osteoblasts,osteoclast,p38 signaling pathway”为英文检索词,排除陈旧、重复以及可信度低的观点,将检索到的文献进行归纳、总结和分析,选取76篇具有代表性的文章。结果与结论:(1)长链非编码RNA通过多种途径参与骨质疏松症的防治,包括促进骨髓间充质干细胞的成骨分化、促进成骨细胞分化和成骨细胞分泌活性、抑制破骨细胞增殖和对骨的吸收作用,以及调节成骨相关细胞通路的激活或抑制,激活p38MAPK信号通路延缓骨质疏松症进展,抑制该信号通路抑制破骨细胞的吸收作用,从而影响骨质疏松的发生和发展。(2)相应长链非编码RNA的过表达或低表达会通过p38MAPK信号通路来影响成骨细胞和破骨细胞的增殖或分化,调节骨重塑过程,进而影响骨质疏松症的发生和发展。大量的基础研究结果显示,长链非编码RNA和p38MAPK信号通路或许可以成为骨质疏松症治疗中的潜在应用和临床转化价值;且相应的长链非编码RNA过表达或低表达慢病毒、转染质粒,相应的p38MAPK信号通路抑制剂等在体外细胞实验及动物模型中都被证实有靶向调控作用。(3)因此,通过靶向调控长链非编码RNA和p38MAPK信号通路来调节骨髓间充质干细胞的分化和功能,或通过长链非编码RNA和p38MAPK信号通路来抑制破骨细胞的增殖分化,或许能提供一种创新的治疗策略,可以延缓骨质疏松症的进展。

长链非编码核糖核酸GAS8-AS1在甲状腺乳头状癌组织中的表达

目的比较长链非编码核糖核酸(lncRNA)GAS8-AS1在甲状腺乳头状癌患者术前和术后的表达水平,探讨lncRNA GAS8-AS1作为生物标志物用于甲状腺乳头状癌临床诊断的可行性。方法入组81例甲状腺乳头状癌患者作为试验组,66例结节性甲状腺肿患者作为对照组;采集术前和术后1 a的血液样本并收集术中的肿瘤组织,运用荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测血液、肿瘤组织中lncRNA GAS8-AS1表达水平,比较术前和术后1 a血液、肿瘤组织中lncRNA GAS8-AS1表达的差异。结果术前,试验组患者血液中lncRNA GAS8-AS1相对表达量较对照组明显减少(P<0.05)。术前,试验组患者肿瘤组织中lncRNA GAS8-AS1相对表达量与其血液中的相对表达量相近(P>0.05),且较对照组血液中的相对表达量明显降低(P<0.05)。术后1 a,试验组患者血液中lncRNA GAS8-AS1的相对表达量较术前明显升高(P<0.05),且与对照组血液中的相对表达量相近(P>0.05)。结论lncRNA GAS8-AS1可以作为生物标志物在甲状腺乳头状癌的临床诊断和术后监测过程中起到关键作用。

长链非编码RNA LINC01370对黑色素瘤细胞增殖和侵袭的影响及机制实验研究

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)LINC01370对黑色素瘤细胞增殖和侵袭的影响及其作用机制。方法:采用Cancer LncRNA Census数据库比较黑色素瘤组织和正常皮肤组织中LINC01370表达差异。RT-qPCR检测人表皮黑色素细胞HEM和黑色素瘤细胞(VMM5A、WM266-4、A2058、A-375)中LINC01370的表达水平,选取表达水平最低的细胞进行后续实验。将LINC01370高表达质粒和对照质粒转染至A2058细胞,分为LINC01370组和NC组。采用克隆形成实验检测A2058细胞增殖能力,Transwell实验检测A2058细胞能力,Western blot检测A2058细胞中增殖和侵袭蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验验证LINC01370和miR-1246的靶向关系。采用RT-qPCR检测A2058细胞中miR-1246表达。结果:LINC01370在黑色素瘤组织中的表达水平低于正常皮肤组织(P<0.01)。LINC01370在VMM5A、WM266-4、A2058、A-375细胞中的表达水平低于HEM细胞,且A2058细胞表达水平最低(均P<0.05)。与NC组比较,LINC01370组A2058细胞LINC01370表达水平升高(P<0.01)。与NC组比较,LINC01370组A2058细胞增殖能力、侵袭细胞数以及细胞周期蛋白依赖性激酶3(Cdk3)、细胞周期蛋白C(Cyclin C)、转化生长因子-β(TGF-β)、叉头框C2(FOXC2)蛋白表达水平降低(均P<0.01)。miR-1246与LINC01370-WT质粒共转染的相对荧光素酶活性低于miR-NC与LINC01370-WT质粒共转染(P<0.01)。与NC组比较,LINC01370组A2058细胞miR-1246表达水平降低(P<0.01)。结论:LINC01370在黑色素瘤组织及细胞中低表达,LINC01370可能通过敲低miR-1246表达抑制黑色素瘤细胞的增殖和侵袭。

长链非编码RNA467调控SATB1活性促进子宫内膜癌增殖、侵袭机制研究

目的:探讨长链非编码RNA467是否通过调控SATB1进而激活PI3K/Akt通路影响子宫内膜癌的进展。方法:通过搜索(http://starbase.sysu.edu.cn)找到与LINC00467相结合的靶mRNA(SATB1),培养正常子宫内膜细胞和HEC-1A、Ishikawa细胞,通过转染序列实验及RT-qPCR、Western blot等方法逐步验证LINC00467通过调控SATB1影响PI3K/Akt通路进而促进子宫内膜癌细胞增殖、迁移和侵袭。结果:敲低LINC00467表达后,SATB1表达下降,差异有统计学意义(P<0.01)。抑制SATB1后,p-Akt和p-PI3K表达下降,差异有统计学意义(P<0.01)。转染pcDNA3.1-SATB1后,p-Akt和p-PI3K表达上升,差异有统计学意义(P<0.01)。与空载组相比,sh-LINC00467#1组和sh-LINC00467#1+pcDNA3.1组p-Akt和p-PI3K表达量明显下降,EdU阳性细胞数明显减少,细胞克隆数明显减少,Bcl-2蛋白表达量明显下降,cleaved caspase 3蛋白表达量明显上升,细胞凋亡率明显增加,细胞迁移率明显下降,侵袭细胞数明显减少,差异均有统计学意义(P<0.01),而sh-LINC00467#1+pcDNA3.1-SATB1组p-Akt和p-PI3K表达量、EdU阳性细胞数、细胞克隆数、Bcl-2和cleaved caspase 3蛋白表达量、细胞凋亡率、细胞迁移率、侵袭细胞数均无明显降低,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:LINC00467通过促进SATB1进而激活PI3K/Akt通路促进子宫内膜癌细胞增殖、迁移和侵袭,抑制其凋亡。

长链非编码RNA前列腺癌相关转录物1促癌作用的研究进展

长链非编码RNA(lncRNA)在细胞的发育、分化及增殖过程中发挥重要作用,是调控基因表达的关键分子之一。研究表明,lncRNA的异常表达与多种肿瘤的发生、恶性进展及转移密切相关。前列腺癌相关转录物1(PCAT1)作为lncRNA的重要成员之一,已被证实在多种癌症中高表达,并参与多个生物学调控过程,从而促进癌症的发展。本文综述了lncRNA PCAT1在癌症发生与发展中的作用、机制及调控靶点,旨在为后续研究提供参考依据。

KRT18与mRNA及长链非编码RNA互作调控椎间盘髓核细胞损伤的机制

背景:椎间盘中差异表达的RNA结合蛋白在椎间盘退变中发挥着关键作用,其中RNA结合蛋白KRT18水平的降低与椎间盘退行性病变相关,但其在椎间盘髓核细胞中的具体作用尚未完全确定。目的:探讨KRT18与mRNA及长链非编码RNA结合互作对椎间盘髓核细胞的影响及机制。方法:对因腰部骨折或椎间盘退行性病变而接受椎间融合术的患者进行人体髓核组织取样获得正常髓核细胞和退变髓核细胞,并进行iRIP-seq、功能富集分析以及DNA微阵列分析,随后根据分析结果在髓核细胞中敲低KRT18,通过蛋白免疫印迹及qRt-PCR在蛋白和RNA水平检测相关基因水平的表达。结果与结论:通过iRIP-seq分析发现GUAAUC和AGCCUC序列中存在大量的KRT18结合位点,表明KRT18可参与调控RNA的转录、翻译、稳定性或在细胞信号传导途径中发挥作用。其能够与成熟的mRNA稳定结合,其中表达较高的基因包括CRLF1及IGFBP4等,同时与其结合的长链非编码RNA的峰值基因包括SNHG25、SNHG12、NEAT1、USP32、EIF4A2和CDH4,这些基因多涉及细胞凋亡、炎症等多种生物过程,并且能介导细胞外基质代谢的相关通路,KRT18能够调控它们的稳定性、转运、翻译、剪接等多个方面的功能,进而影响基因的表达和细胞功能。实验结果验证了在髓核细胞中敲低KRT18,细胞外基质代谢水平被抑制出现失衡,导致体外椎间盘退变。该研究首次从KRT18与mRNA及长链非编码RNA结合的角度探讨其调控机制,并推测了KRT18在椎间盘退变发病机制中的潜在功能,为今后KRT18关键功能的研究奠定了基础。

长链非编码RNA介导细胞凋亡干预骨质疏松症机制分析

骨质疏松症(osteoporosis,OP)可由过度饮酒、糖皮质激素滥用及雌激素缺乏等引起。随着全球老龄化进程的加剧,该病现已被视为主要的公共卫生问题之一。研究发现成骨细胞介导的骨生成与破骨细胞介导的骨破坏之间失衡是OP发生发展的关键机制。细胞凋亡作为经典的程序性死亡方式,极大地影响着OP的进展。有关代谢性骨病的最新研究表明,成人骨量的维持不仅受成骨细胞和破骨细胞功能的控制,还受细胞凋亡的调节。近年来,长链非编码RNA(lncRNAs)在疾病中的研究逐渐深入,可通过调控细胞增殖、凋亡和迁移等多种病理生理过程中发挥关键作用。研究表明,lncRNAs可通过调节骨髓基质细胞、成骨细胞和破骨细胞的凋亡过程来参与骨重建的动态平衡,可为OP的临床治疗提供新思路。但目前尚未有该领域的系统性的研究,该文通过检索中英文相关文献,系统综述了凋亡、lncRNAs在OP中的研究概况,列举了lncRNAs通过调控细胞凋亡以恢复骨稳态而治疗OP,旨在为临床防治OP提供新靶点。

长链非编码核糖核酸KCNQ1重叠转录物1、Runt相关转录因子3与急性心肌梗死的关系

目的 探讨急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)患者血清长链非编码RNA KCNQ1重叠转录物1(long non-coding RNA KCNQ1 overlapping transcript 1,lncRNA KCNQ1OT1)、Runt相关转录因子3(Runt-related transcription factor 3,Runx3)表达水平及意义。方法 选取2019年1月至2020年4月在德阳市人民医院住院治疗的231例AMI患者为研究对象(AMI组),AMI患者按美国纽约心脏病协会心功能分级标准分为Ⅱ级组72例、Ⅲ级组81例、Ⅳ级组78例;同期选取229例健康体检者作为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(realtime fluorescence quantitative polymerase chain reaction,fqRT-PCR)法检测血清lncRNA KCNQ1OT1、Runx3表达水平;酶联免疫吸附(ELISA)法检测氨基末端脑钠肽前体(N-terminal pro-brain natriuretic peptide,NT-proBNP)、肌酸激酶(creatine kinase,CK)、肌酸激酶同工酶(creatine kinase isoenzymes,CK-MB)、心肌肌钙蛋白(cardiac troponin,cTn)I、肌红蛋白(myoglobin,MYO)浓度;超声心动图检查左心室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)、左心室舒张末期内径(left ventricular end-diastolic diameter,LVEDD)、左心室收缩末期内径(left ventricular end-systolic diameter,LVESD);分析AMI患者血清lncRNA KCNQ1OT1、Runx3表达水平与心功能指标的相关性;分析血清lncRNA KCNQ1OT1、Runx3表达水平对AMI的诊断价值;分析影响AMI发生的因素。结果AMI组患者lncRNA KCNQ1OT1(1.54±0.36 vs. 1.01±0.26)、LVESD[(52.68±6.74)mm vs.(42.73±6.52)mm]、LVEDD[(61.79±6.03)mm vs.(51.62±5.32)mm]、NT-proBNP[(292.23±34.27)ng/L vs.(96.27±23.42)ng/L]、CK[(746.82±210.55)U/L vs.(70.32±15.48)U/L]、CK-MB[(156.95±49.87)U/L vs.(1.25±0.37)U/L]、cTnI[(27.48±7.92)ng/mL vs.(1.13±0.26)ng/mL]、MYO[(678.94±159.78)ng/mL vs.(12.45±2.73)ng/mL]浓度高于对照组,Runx3(0.67±0.20 vs.1.02±0.24)、LVEF(43.26%±4.31%vs. 56.38%±5.12%)低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。心功能Ⅳ级组lncRNA KCNQ1OT1、LVESD、LVEDD、NT-proBNP、CK、CK-MB、cTnI、MYO高于Ⅲ级组和Ⅱ级组,Runx3、LVEF低于Ⅲ级组和Ⅱ级组,差异有统计学意义(P<0.05);Ⅲ级组lncRNA KCNQ1OT1、LVESD、LVEDD、NT-proBNP、CK、CK-MB、cTnI、MYO高于Ⅱ级组,Runx3、LVEF低于Ⅱ级组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清lncRNA KCNQ1OT1、Runx3表达水平与病变支数、Gensini积分有关,且随着病变支数、Gensini积分增加,lncRNA KCNQ1OT1表达水平升高、Runx3表达水平降低(P<0.05)。AMI患者血清lncRNA KCNQ1OT1与Runx3表达水平呈负相关(r=-0.584;P<0.05);lncRNA KCNQ1OT1与LVESD、LVEDD、NT-proBNP、CK、CK-MB、cTnI、MYO呈正相关,与LVEF呈负相关(P<0.05);Runx3与LVESD、LVEDD、NT-proBNP、CK、CK-MB、cTnI、MYO呈负相关,与LVEF呈正相关(P<0.05)。血清lncRNA KCNQ1OT1、Runx3水平诊断AMI的曲线下面积(AUC)分别为0.859、0.743,特异度分别为81.6%、74.7%,敏感度分别为76.1%、78.3%;两者联合诊断的曲线下面积为0.901,特异度为92.0%,敏感度为73.9%。lncRNA KCNQ1OT1是影响AMI发生的独立危险因素(P<0.05),Runx3是影响AMI发生的保护因素(P<0.05)。结论 血清lncRNA KCNQ1OT1、Runx3参与AMI的发生、发展,二者表达水平对AMI的诊断可能具有重要意义。

长链非编码RNA GAS5通过miR-135b-5p/APC轴抑制胶质瘤进展

目的探讨长链非编码RNA生长停滞特异性5(growth arrest-specific 5,GAS5)与miR-135b-5p和腺瘤性结肠息肉病基因(adenomatous polyposis coli,APC)轴之间的相互作用,以阐明其在胶质瘤增殖、转移、侵袭中的生物学功能。方法通过CGGA数据库分析GAS5表达水平与胶质瘤患者的生存率的关系;通过qRT-PCR检测GAS5在胶质瘤组织和细胞系中的表达水平;人类神经胶质瘤T98和A172细胞系分别用于过表达和敲低实验。通过转染来过表达或者沉默GAS5、miR-135b-5p和APC;通过Western blot与qRT‑PCR技术检测GAS5、miR-135b-5p、APC的表达水平;利用CCK-8实验检测胶质瘤细胞活力,通过Transwell和划痕实验分析肿瘤细胞运动活性;通过双荧光素酶报告基因实验验证miR-135b-5p与GAS5或APC的靶向关系。结果CGGA数据库分析显示GAS5低表达的胶质瘤患者的生存率显著降低(P<0.001)。Western blot与qRT‑PCR检测结果显示,分别与癌旁组织和正常人星形胶质瘤细胞系比较,GAS5在胶质瘤组织和胶质瘤细胞系中的表达下调(P<0.01);CCK-8、Transwell和划痕实验分析表明,与vector组比较,GAS5过表达抑制了胶质瘤细胞活力、侵袭和迁移(P<0.01);双荧光素酶报告基因实验证明,GAS5和miR-135b-5p之间存在结合位点,且二者mRNA表达水平呈负相关(P=0.019)。CCK-8、Transwell和划痕实验显示,GAS5对胶质瘤细胞生物学功能的影响是通过靶向miR-135b-5p完成的,APC过表达逆转了miR-135b-5p对胶质瘤细胞的促进作用(P<0.01);Western blot结果显示,与mimic_NC比较,miR-135b-5p升高能够抑制APC的表达(P<0.001),GAS5通过靶向miR-135b-5p上调APC的表达(P<0.01)。结论GAS5通过miR-135b-5p/APC轴共同抑制肿瘤发展,揭示了GAS5/miR-135b-5p/APC在胶质瘤发展中的分子调控机制。