子痫前期病人长链非编码RNA H19和长链非编码RNA HAND2-AS1表达水平与胰岛素抵抗的相关性研究

目的检测子痫前期病人胎盘组织、血清长链非编码RNA H19(LncRNA H19)与长链非编码RNAHAND2-AS1(Ln⁃cRNA HAND2-AS1)表达水平,并分析其与病人胰岛素抵抗(IR)的相关性。方法将2021年1—12月在唐山市妇幼保健院建卡的子痫前期孕妇105例作为子痫前期组,根据子痫前期孕妇严重程度分为轻度子痫前期组与重度子痫前期组,另选取同期孕周、年龄相符的健康孕妇97例作为对照组,收集所有孕妇身体质量指数(BMI)、孕周、收缩压、舒张压、空腹胰岛素(FINS)、空腹血糖(FBG)等一般资料,并计算稳态模型的IR指数(HOMA-IR);实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法测定孕妇血清、胎盘组织中LncRNA H19,LncRNA HAND2-AS1水平;比较对照组与子痫前期组、轻度子痫前期组与重度子痫前期组间血清、胎盘组织LncRNA H19、LncRNA HAND2-AS1水平;Pearson法分析子痫前期孕妇血清、胎盘组织LncRNA H19、LncRNA HAND2-AS1与HOMA-IR的相关性。结果子痫前期组病人收缩压、舒张压高于对照组(P<0.05),且重度子痫前期病人收缩压、舒张压高于轻度子痫前期病人,孕周低于轻度子痫前期病人(P<0.05);与对照组相比,子痫前期组孕妇24 h尿蛋白、FBG[(5.84±0.97)mmol/L比(4.22±0.70)mmol/L]、FINS[(13.37±2.23)mU/L比(7.52±1.25)mU/L]、HOMI-IR水平(3.47±0.57比1.41±0.23)升高(P<0.05),且重度子痫前期孕妇24 h尿蛋白、FBG[(6.90±1.15)mmol/L比(5.24±0.85)mmol/L]、FINS[(13.97±2.32)mU/L比(13.05±2.17)mU/L]、HOMI-IR水平(4.27±0.71比3.03±0.50)高于轻度子痫前期孕妇(P<0.05);与对照组相比,子痫前期组孕妇血清、胎盘组织Ln⁃cRNA H19(2.52±1.42比1.01±0.15,3.75±0.62比1.02±0.17)与LncRNA HAND2-AS1水平(1.98±0.33比1.01±0.15,2.87±0.47比1.02±0.17)升高(P<0.05),且重度子痫前期孕妇血清、胎盘组织LncRNA H19(2.84±0.47比2.34±0.39,4.28±0.71比3.45±0.57)与LncRNA HAND2-AS1水平(2.59±0.43比1.63±0.27,3.56±0.59比2.49±0.41)高于轻度子痫前期孕妇(P<0.05);子痫前期病人血清与胎盘组织间LncRNA H19水平呈正相关(r=0.55,P<0.05),血清与胎盘组织间LncRNA HAND2-AS1水平呈正相关性(r=0.65,P<0.05)。子痫前期孕妇血清、胎盘组织LncRNA H19水平分别与HOMI-IR呈正相关(r=0.53、0.59,P<0.05);血清、胎盘组织LncRNA HAND2-AS1水平分别与HOMI-IR呈正相关(r=0.60、0.61,P<0.05)。结论子痫前期病人血清、胎盘组织LncRNA H19、LncRNA HAND2-AS1高表达,二者与IR密切相关,可能通过影响IR参与子痫前期发生发展。

长链非编码RNA尿路上皮癌相关1基因与脓毒症患者炎症因子严重程度及预后的关系

目的探索长链非编码RNA尿路上皮癌相关1(lncRNA UCA1)基因与脓毒症患者炎症因子、严重程度及28天死亡关系。方法收集2022年1月至2023年12月期间中国人民解放军联勤保障部队第九六○医院收治的174例脓毒症患者临床资料。按照与脓毒症患者性别相同,年龄相差1岁之内1∶1配对收集同期健康体检者作为对照组。通过实时荧光定量(RT-qPCR)法检测外周血单核细胞中lncRNA UCA1水平。酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、IL-17、细胞间黏附分子1(ICAM1)和血管细胞黏附分子1(VCAM1)水平。使用COX风险比例回归模型分析影响脓毒症患者28天病死率相关危险因素。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,评估独立危险因素预测脓毒症患者28天死亡的效能。结果与对照组比较,脓毒症患者lncRNA UCA1水平更高(Z=76.235,P<0.001)。脓毒症患者lncRNA UCA1与TNF-α(r=0.384)、IL-6(r=0.308)、IL-17(r=0.472)、ICAM1(r=0.361)和VCAM1(r=0.492)水平、APACHEⅡ(r=0.393)和SOFA评分(r=0.427)均呈正相关(P均<0.001),而对照组中lncRNA UCA1与上述参数均无相关性(P均>0.05)。LncRNA UCA1水平升高(HR=2.186,P=0.007)、年龄增加(HR=1.245,P=0.011)、真菌感染(HR=19.259,P=0.010),C-反应蛋白(CRP)升高(HR=1.334,P=0.036)及APACHEⅡ评分增加(HR=1.245,P=0.017)是脓毒症患者28天死亡的独立危险因素。ROC曲线分析可见lncRNA UCA1(AUC=0.757)、APACHEⅡ评分(AUC=0.865)、CRP(AUC=0.731)及年龄(AUC=0.616)均可预测脓毒症患者28天死亡情况。结论脓毒症患者lncRNA UCA1水平升高,IncRNA UCA1与多种促炎细胞因子、疾病严重程度和不良预后相关。

lncRNA KCNQ1OT1靶向调控miR-132-5p对帕金森病细胞损伤的保护机制

目的探究长链非编码RNA KCNQ1OT1(lncRNA KCNQ1OT1)靶向调控微小RNA-132-5p(miR-132-5p)对帕金森病细胞损伤的保护机制。方法SH-SY5Y细胞通过1-甲基-4-苯基吡啶阳离子(MMP+)诱导建立帕金森病细胞模型,检测SH-SY5Y细胞中lncRNA KCNQ1OT1、miR-132-5p表达、活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平、凋亡率及Bcl-2、Bax蛋白表达,验证lncRNA KCNQ1OT1、miR-132-5p的调控关系。结果与Con组相比,MMP+组lncRNA KCNQ1OT1、miR-132-5p表达量较高(P<0.05)。低表达lncRNA KCNQ1OT1、干扰miR-132-5p表达均可减轻MMP+诱导的SH-SY5Y细胞氧化应激及炎性损伤,抑制细胞死亡,lncRNA KCNQ1OT1靶向正调控miR-132-5p表达,miR-132-5p过表达逆转了lncRNA KCNQ1OT1低表达对MMP+诱导SK-N-SH细胞氧化应激、炎症损伤及凋亡。结论lncRNA KCNQ1OT1通过靶向抑制miR-132-5p表达减轻了MMP+诱导SK-N-SH细胞氧化应激、炎症损伤,抑制了细胞凋亡。

上皮性卵巢癌患者血清LncRNA KCNQ1OT1、 miR-506-3p水平变化及临床意义

目的 探讨上皮性卵巢癌(EOC)患者血清长链非编码核糖核酸(RNA)KCNQ1重叠转录物1(LncRNA KCNQ1OT1)、miR-506-3p水平变化。方法 选取2019年3月至2020年12月南京医科大学附属无锡人民医院收治的102例EOC患者作为EOC组,70例良性卵巢肿瘤患者作为良性组,以及体检的60例健康女性作为对照组。分析各组血清LncRNA KCNQ1OT1、miR-506-3p对EOC的诊断价值,以及EOC患者2年生存率、预后影响因素。结果 3组LncRNA KCNQ1OT1、miR-506-3p相对表达量比较差异有统计学意义(P<0.05)。EOC患者LncRNA KCNQ1OT1、miR-506-3p表达与国际妇产科学联盟(FIGO)分期、分化程度、淋巴结转移、腹膜转移有关(P<0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线分析显示,LncRNA KCNQ1OT1、miR-506-3p联合诊断EOC的价值较高,ROC曲线下面积(AUC)高于二者单独诊断。LncRNA KCNQ1OT1低表达组2年生存率高于高表达组(P<0.05),miR-506-3p高表达组高于低表达组(P<0.05)。FIGO分期Ⅲ~Ⅳ期、淋巴结转移、腹膜转移及血清LncRNA KCNQ1OT1上调、miR-506-3p下调是预后不良的危险因素(P<0.05)。结论 血清LncRNA KCNQ1OT1在EOC中上调、miR-506-3p下调,二者联合检测对EOC诊断效能较高,与患者不良预后有关,有望成为辅助评估病情和预后的生物学标志物。

长链非编码核糖核酸KCNQ1重叠转录物1、Runt相关转录因子3与急性心肌梗死的关系

目的 探讨急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)患者血清长链非编码RNA KCNQ1重叠转录物1(long non-coding RNA KCNQ1 overlapping transcript 1,lncRNA KCNQ1OT1)、Runt相关转录因子3(Runt-related transcription factor 3,Runx3)表达水平及意义。方法 选取2019年1月至2020年4月在德阳市人民医院住院治疗的231例AMI患者为研究对象(AMI组),AMI患者按美国纽约心脏病协会心功能分级标准分为Ⅱ级组72例、Ⅲ级组81例、Ⅳ级组78例;同期选取229例健康体检者作为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(realtime fluorescence quantitative polymerase chain reaction,fqRT-PCR)法检测血清lncRNA KCNQ1OT1、Runx3表达水平;酶联免疫吸附(ELISA)法检测氨基末端脑钠肽前体(N-terminal pro-brain natriuretic peptide,NT-proBNP)、肌酸激酶(creatine kinase,CK)、肌酸激酶同工酶(creatine kinase isoenzymes,CK-MB)、心肌肌钙蛋白(cardiac troponin,cTn)I、肌红蛋白(myoglobin,MYO)浓度;超声心动图检查左心室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)、左心室舒张末期内径(left ventricular end-diastolic diameter,LVEDD)、左心室收缩末期内径(left ventricular end-systolic diameter,LVESD);分析AMI患者血清lncRNA KCNQ1OT1、Runx3表达水平与心功能指标的相关性;分析血清lncRNA KCNQ1OT1、Runx3表达水平对AMI的诊断价值;分析影响AMI发生的因素。结果AMI组患者lncRNA KCNQ1OT1(1.54±0.36 vs. 1.01±0.26)、LVESD[(52.68±6.74)mm vs.(42.73±6.52)mm]、LVEDD[(61.79±6.03)mm vs.(51.62±5.32)mm]、NT-proBNP[(292.23±34.27)ng/L vs.(96.27±23.42)ng/L]、CK[(746.82±210.55)U/L vs.(70.32±15.48)U/L]、CK-MB[(156.95±49.87)U/L vs.(1.25±0.37)U/L]、cTnI[(27.48±7.92)ng/mL vs.(1.13±0.26)ng/mL]、MYO[(678.94±159.78)ng/mL vs.(12.45±2.73)ng/mL]浓度高于对照组,Runx3(0.67±0.20 vs.1.02±0.24)、LVEF(43.26%±4.31%vs. 56.38%±5.12%)低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。心功能Ⅳ级组lncRNA KCNQ1OT1、LVESD、LVEDD、NT-proBNP、CK、CK-MB、cTnI、MYO高于Ⅲ级组和Ⅱ级组,Runx3、LVEF低于Ⅲ级组和Ⅱ级组,差异有统计学意义(P<0.05);Ⅲ级组lncRNA KCNQ1OT1、LVESD、LVEDD、NT-proBNP、CK、CK-MB、cTnI、MYO高于Ⅱ级组,Runx3、LVEF低于Ⅱ级组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清lncRNA KCNQ1OT1、Runx3表达水平与病变支数、Gensini积分有关,且随着病变支数、Gensini积分增加,lncRNA KCNQ1OT1表达水平升高、Runx3表达水平降低(P<0.05)。AMI患者血清lncRNA KCNQ1OT1与Runx3表达水平呈负相关(r=-0.584;P<0.05);lncRNA KCNQ1OT1与LVESD、LVEDD、NT-proBNP、CK、CK-MB、cTnI、MYO呈正相关,与LVEF呈负相关(P<0.05);Runx3与LVESD、LVEDD、NT-proBNP、CK、CK-MB、cTnI、MYO呈负相关,与LVEF呈正相关(P<0.05)。血清lncRNA KCNQ1OT1、Runx3水平诊断AMI的曲线下面积(AUC)分别为0.859、0.743,特异度分别为81.6%、74.7%,敏感度分别为76.1%、78.3%;两者联合诊断的曲线下面积为0.901,特异度为92.0%,敏感度为73.9%。lncRNA KCNQ1OT1是影响AMI发生的独立危险因素(P<0.05),Runx3是影响AMI发生的保护因素(P<0.05)。结论 血清lncRNA KCNQ1OT1、Runx3参与AMI的发生、发展,二者表达水平对AMI的诊断可能具有重要意义。

长链非编码RNA Kcnq1ot1对小鼠糖尿病心肌病的作用

目的研究长链非编码RNA Kcnq1ot1在糖尿病心肌病中的作用及机制。方法C57BL/6小鼠分为对照组和糖尿病(DM)组,注射链脲佐菌素建立DM模型后喂养8周建立糖尿病心肌病模型。DM组小鼠注射慢病毒干扰Kcnq1ot1表达。qRT-PCR检测小鼠左心室Kcnq1ot1表达。超声心动图、HE和Masson染色评价小鼠左心室结构和功能,Western blot检测collagenⅠ、Ⅲ和TGF-β1/Smads通路表达水平。免疫组化、qRT-PCR和Western blot检测左心室NLRP3、caspase-1、IL-1β和GSDMD-N表达。结果与对照组相比,Kcnq1ot1在DM小鼠左心室中明显升高,注射Kcnq1ot1-shRNA慢病毒后被抑制。DM组小鼠心脏收缩和舒张功能明显下降,出现心肌细胞肥大及纤维化;干扰Kcnq1ot1后DM小鼠心脏功能和结构明显改善。此外,干扰Kcnq1ot1后胶原表达下调,TGF-β1/Smads通路被抑制,焦亡相关分子表达下调。结论LncRNA Kcnq1ot1在糖尿病心肌病小鼠中表达升高,干扰Kcnq1ot1能够通过抑制心肌焦亡,抑制TGF-β1/Smads通路,减轻糖尿病心肌间质纤维化,改善心脏结构和功能。

长链非编码RNA DLX6-AS1调控喉癌细胞的机制研究

目的分析长链非编码RNA(lncRNA)DLX6-AS1通过调节miR-144诱导喉癌巨噬细胞M2极化对喉癌细胞的影响。方法从健康志愿者中分离外周血单核细胞PBMCs,从喉癌患者中分离肿瘤相关巨噬细胞TAMs,qRT-PCR检测PBMCs和TAMs中白细胞介素10(IL-10)、精氨酸酶1(Arg-1)、lncRNA DLX6-AS1与miR-144的表达。用白细胞介素4(IL-4)诱导人单核细胞白血病细胞THP-1巨噬细胞M2极化,qRT-PCR检测lncRNA DLX6-AS1、IL-10和Arg-1与CD163表达。下调lncRNA DLX6-AS1在Hep-2细胞中的表达量后,Hep-2细胞与THP-1细胞(M2型巨噬细胞)共培养48 h,CCK-8实验检测Hep-2细胞增殖活力,Transwell实验检测细胞侵袭数目,Western blot实验检测细胞上皮间质转化能力。生物信息学软件miRcode预测lncRNA DLX6-AS1与miR-144的结合位点,并进行双荧光素酶活性检测。过表达lncRNA DLX6-AS1与miR-144后,分别用CCK-8、Transwell和Western blot检测Hep-2细胞增殖、侵袭和上皮间质转化能力。结果与PBMCs相比,TAMs中IL-10和Arg-1的mRNA表达明显升高(P<0.01),lncRNA DLX6-AS1表达显著升高(P<0.01),miR-144表达显著降低(P<0.01)。与Control组相比,IL-4组THP-1巨噬细胞IL-10、Arg-1和CD163表达显著上调(P<0.01);与IL-4+si-NC组相比,IL-4+si-DLX6-AS1组THP-1巨噬细胞IL-10、Arg-1和CD163表达则显著下调(P<0.01)。与IL-4+si-NC组相比,IL-4+si-DLX6-AS1组Hep-2细胞活力显著下降(P<0.01),侵袭数目明显减少(P<0.01),N-cadherin表达显著下调(P<0.01),E-cadherin表达显著上调(P<0.01)。生物信息学分析发现,lncRNA DLX6-AS1与miR-144之间存在潜在的结合位点;双荧光素酶报告系统检测显示,lncRNA DLX6-AS1与miR-144之间存在直接相互作用。与pcDNA-3.1(+)+mimics NC组相比,pcDNA-DLX6-AS1+mimics NC组THP-1巨噬细胞内IL-10、Arg-1和CD163表达显著上调(P<0.01);与pcDNA-3.1(+)+miR-144 mimics组相比,pcDNA-DLX6-AS1+miR-144 mimics组THP-1巨噬细胞内IL-10、Arg-1和CD163表达显著上调(P<0.01)。与pcDNA-3.1(+)+miR-144 mimics组相比,pcDNA-DLX6-AS1+miR-144 mimics组Hep-2细胞活力及细胞侵袭数目显著增加(P<0.01),N-cadherin表达显著上调(P<0.01),E-cadherin表达显著下调(P<0.01)。结论lncRNA DLX6-AS1可通过调节miR-144诱导喉癌巨噬细胞M2极化,并促进喉癌细胞发展。

长链非编码RNA TUG1在宫颈癌中的研究进展

长链非编码RNA (lncRNA)是长度大于200 bp且无编码蛋白功能的RNA。研究发现lncRNA在转录、表观遗传学以及转录后水平等方面发挥重要的调控作用,调节机体的病理和生理过程。一些lncRNA在宫颈癌组织中异常表达,且在宫颈癌的发生过程中起到重要作用。而lncRNA TUG1也发现参与多种恶性肿瘤的发生发展,本文就lncRNA TUG1在宫颈癌发生、发展中的作用机制、治疗及预后进行综述。

长链非编码RNA在急性肺损伤中的作用及分子调控机制研究进展

急性肺损伤(ALI)是临床上常见的危重症之一。长链非编码RNA(lncRNA)是一类长度超过200个核苷酸的非蛋白质编码RNA,在染色质形成、转录和转录后翻译等基因表达水平直接或间接参与ALI的发生发展。lncRNA核富集丰富转录物1、lncRNA HOX转录反义基因间RNA及lncRNA牛磺酸上调1等lncRNA可作为竞争性内源RNA,与miR-26a-5p、miR-17-5p及miR-34b-5p等微小RNA结合,调节Wnt1诱导的信号通路蛋白1、Rho关联含卷曲螺旋结合蛋白激酶1蛋白及自噬相关蛋白等下游相关蛋白的表达,参与ALI的发生发展。LncRNA可能通过调控DNA甲基化、组蛋白修饰,在表观遗传水平参与ALI的发生发展;L通过组装转录激活因子和抑制因子,调节白细胞介素6(IL-6)、IL-17、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3/9等蛋白质的转录,在转录水平参与ALI的发生发展;与多种RNA结合蛋白相互作用,在转录后水平调控ALI的发生发展。

长链非编码RNA KCNQ1重叠转录物1对肺鳞癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响

目的 检测长链非编码RNA(lncRNA)KCNQ1重叠转录物1(KCNQ1OT1)在肺鳞癌组织中的表达及其对肺鳞癌NCI-H266细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法 采用实时定量荧光PCR(RT-PCR)检测KCNQ1OT1基因在肺鳞癌组织中的表达。构建KCNQ1OT1基因的小干扰RNA(siRNA-KCNQ1OT1)并转染NCI-H266细胞,RT-PCR检测转染效果;MTT法检测NCI-H266细胞的增殖活力;划痕实验检测NCI-H266细胞的迁移能力;Transwell小室检测NCI-H266细胞的侵袭能力。结果 KCNQ1OT1基因在肺鳞癌组织中呈显著高表达(P<0.05),KCNQ1OT1的高表达与肺鳞癌分化程度、肿瘤体积、淋巴结转移以及TNM分期相关。si-KCNQ1OT1的转染能够显著下调NCI-H266细胞中KCNQ1OT1的表达(P<0.05),沉默KCNQ1OT1能够显著抑制NCI-H266细胞的增殖活力、迁移能力、侵袭能力(P<0.05)。结论 KCNQ1OT1基因的表达上调与肺鳞癌的发生、发展相关,沉默KCNQ1OT1能够显著抑制NCI-H266细胞的增殖以及迁移和侵袭能力。

下调长链非编码RNA KCNQ1重叠转录物1表达对胃癌HGC-27细胞生长和顺铂敏感性的影响

背景胃癌(gastric cancer,GC)已成为威胁人类生命安全的恶性肿瘤之一,目前GC发生及发展的分子机制尚未完全阐明,长链非编码RNA(long-chain noncoding RNA,lncRNA)在肿瘤中异常表达并可能参与肿瘤发生及发展过程,但仍有部分lncRNA在GC发生及转移过程中的调控作用尚未阐明.目的探讨lncRNA KCNQ1重叠转录物1(KCNQ1 opposite strand/antisense transcript 1,KCNQ1OT1)对HGC-27细胞增殖、侵袭、迁移和顺铂敏感性的影响.方法将转染KCNQ1OT1-siRNA的HGC-27细胞作为KCNQ1OT1-siRNA组,转染阴性对照的HGC-27细胞作为NC-siRNA组,正常培养的细胞作为对照组.顺铂处理KCNQ1OT1-siRNA组、NC-siRNA组细胞后,采用细胞计数试剂盒法检测细胞活力并计算细胞的半数抑制浓度(half-maximal inhibitory concentration,IC50)值.采用实时荧光定量聚合酶链式反应、Transwell小室、流式细胞仪和免疫印迹法分别检测KCN Q1OT1表达水平、细胞增殖活力、侵袭与迁移、周期分布和细胞中上皮型钙黏蛋白(E-cadlherin)、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)、多药耐药关联蛋白1 (multidrug resistance associated protein1,MRP1)表达情况.结果与对照组比较,NC-siRNA组中各指标差异无统计学意义(P>0.05);与对照组或NC-siRNA组比较,KCNQ1OT1-siRNA组细胞中KCNQ1OT1表达水平、细胞在S期与G2/M期所占百分比和细胞增殖、侵袭、迁移能力以及细胞中N-cadherin、Vimentin蛋白表达水平均明显降低,而细胞在G0/G1期所占百分比和E-cadherin蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与NCsiRNA组比较,KCNQ1OT1-siRNA组P-gp蛋白水平显著降低(P<0.05),MRP1蛋白水平显著升高(P<0.05),IC50值明显降低(P<0.05).结论下调KCNQ1OT1表达可抑制HGC-27细胞增殖、侵袭、迁移并增强细胞对顺铂的敏感性.

慢性乙型肝炎患者血清β-catenin和lncRNA KCNQ1OT1表达及其在肝纤维化诊断中的应用价值

目的分析β-连环蛋白(β-catenin)、长链非编码RNA(lncRNA)KCNQ1OT1在慢性乙型肝炎患者血清中的表达变化及其在肝纤维化诊断中的应用价值。方法选取2020年1月—2021年1月空军军医大学第一附属医院消化内科收治慢性乙型肝炎患者90例,根据患者的肝纤维化程度分为无肝纤维化23例(S0组)、轻度肝纤维化42例(S1~S2组)、中重度肝纤维化25例(S3~S4组);另选取同期医院健康体检者30例为健康对照组。比较各组血清β-catenin、lncRNA KCNQ1OT1表达水平及肝纤维化指标;分析β-catenin、lncRNA KCNQ1OT1表达水平与肝纤维化程度及其指标的相关性;Logistic回归分析慢性乙型肝炎患者发生肝纤维化的影响因素;受试者工作特征曲线(ROC)分析血清β-catenin、lncRNA KCNQ1OT1水平对慢性乙型肝炎患者发生肝纤维化的预测价值。结果健康对照组、S0组、S1-S2组、S3-S4组血清β-catenin、lncRNA KCNQ1OT1水平依次升高(F/P=28.066/<0.001、25.173/<0.001);肝纤维化指标透明质酸(HA)、前胶原N端肽(PⅢP)、Ⅳ型胶原(CⅣ)、层黏连蛋白(LN)水平逐次升高(F/P=79.414/<0.001、119.630/<0.001、104.574/<0.001、96.631/<0.001)。血清β-catenin、lncRNA KCNQ1OT1水平均与肝纤维化程度呈显著正相关(r/P=0.598/0.001、0.643/0.009),血清β-catenin、lncRNA KCNQ1OT1水平与肝纤维化指标HA、PⅢP、CⅣ、LN呈显著正相关(β-catenin:r/P=0.483/0.016、0.456/0.013、0.641/0.006、0.519/0.008;lncRNA KCNQ1OT1:r/P=0.496/0.014、0.604/0.007、0.523/0.014、0.611/0.002)。血清β-catenin、lncRNA KCNQ1OT1、HA、PⅢP、CⅣ、LN升高是慢性乙型肝炎患者发生肝纤维化的危险因素[OR(95%CI)=1.564(1.205~2.030)、2.213(1.449~3.379)、1.816(1.261~2.615)、2.315(1.380~3.884)、1.564(1.161~2.107)、3.013(1.491~6.090)]。血清β-catenin、lncRNA KCNQ1OT1及二者联合预测慢性乙型肝炎患者发生肝纤维化的AUC为0.784、0.775、0.857,二者联合优于各自单独预测(Z/P=2.617/0.028、2.897/0.014)。结论慢性乙型肝炎患者血清β-catenin、lncRNA KCNQ1OT1水平与肝纤维化程度密切相关,二者联合检测对慢性乙型肝炎患者是否发生肝纤维化有较好参考价值。

血浆长链非编码RNA AFAP1-AS1和SOX2OT的表达对非小细胞肺癌的诊断价值

目的:探讨血浆长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1(actin filament-associated protein 1-antisense RNA1,AFAP1-AS1)和Y染色体性别决定基因簇2重叠转录本(sex-determining region of Y chromosome-box2 overlapping transcript,SOX2OT)表达水平对于非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的临床诊断价值。方法:留取48例NSCLC患者(NSCLC组)和48例良性肺病患者(对照组)血液标本,采用实时定量PCR检测lncRNA AFAP1-AS1和lncRNA SOX2OT相对表达水平,评价二者诊断NSCLC的可行性及效能,同时检测血清癌胚抗原水平。结果:NSCLC患者血浆lncRNA AFAP1-AS1和lncRNA SOX2OT表达水平显著高于对照组(t=6.236,5.680,P均<0.01),lncRNA AFAP1-AS1和lncRNA SOX2OT鉴别诊断NSCLC与良性肺病的受试者工作特征曲线下面积(AUC)分别为0.875(95%CI:0.804~0.947,P<0.05)和0.787(95%CI:0.691~0.883,P<0.05)。二者联合血清癌胚抗原可提高诊断的AUC。结论:NSCLC患者血浆中lncRNA AFAP1-AS1和lncRNA SOX2OT表达明显上调,二者联合血清癌胚抗原对NSCLC的诊断效能优于单独应用。

miR-452、LncRNA KCNQ1OT1在肝癌组织中的表达情况及与预后间关系分析

目的探讨微小RNA(miR)-452、长链非编码RNA KCNQ1OT1(LncRNA KCNQ1OT1)在肝癌患者瘤组织中的表达情况及预后的关系。方法选取2017年9月至2021年6月邯郸市第一医院收治的肝癌患者92例作为研究对象。对比患者肝癌组织及癌旁组织miR-452、LncRNA KCNQ1OT1水平,随访至2022年2月,统计患者预后生存情况,Cox比例风险回归模型分析预后的影响因素,绘制不同miR-452、LncRNA KCNQ1OT1表达患者Kaplan-Meier生存曲线。结果肝癌组织miR-452、LncRNA KCNQ1OT1水平高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05);患者1年、3年生存率分别为64.37%(56/87)、42.53%(37/87);校正原发疾病、临床分期、肿瘤最大径、肿瘤数量、分化程度、Child Pugh分级、合并肝硬化、血管侵犯后,miR-452及LncRNA KCNQ1OT1表达仍是肝癌患者预后的独立影响因素(P<0.05);拟合模型:h(t,X)=h0(t)exp(1.188X1+1.326X2),X1为miR-452,X2为LncRNA KCNQ1OT1,构建个体PI方程:PI=1.188X1+1.326X2;不同miR-452、LncRNA KCNQ1OT1表达患者生存曲线率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论肝癌患者组织miR-452、LncRNA KCNQ1OT1水平均呈异常高表达,且高表达情况与3年内高病死风险有关。

长链非编码RNA SPRY4-IT1对髓母细胞瘤增殖及侵袭转移的影响

目的:探讨长链非编码RNA SPRY4-IT1(Lnc RNA)对髓母细胞瘤增殖及侵袭转移的影响。方法:髓母细胞瘤Daoy细胞分为对照组和si-SPRY4-IT1组,分别利用脂质体Lipofectamine 2000将阴性对照荧光序列和SPRY4-IT1-si RNA转入细胞中,采用Real-time PCR检测转染后各组细胞中SPRY4-IT1的表达情况,CCK-8实验及平板克隆形成实验检测细胞增殖能力的变化,以细胞体外侵袭、迁移实验分别检测细胞侵袭、迁移能力的变化,Western blot检测SPRY4-IT1对基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9蛋白的影响。结果:si-SPRY4-IT1组SPRY4-IT1 m RNA表达水平、细胞体外增殖能力、细胞侵袭、迁移能力、细胞MMP-2蛋白表达均较对照组明显降低(P<0.05),而MMP-9蛋白表达未见明显变化。结论:干扰长链非编码RNA SPRY4-IT1在髓母细胞瘤Daoy细胞中的表达能显著抑制细胞的增殖、侵袭和迁移能力。

敲低长链非编码RNA AFAP1-AS1抑制TPC-1甲状腺乳头状癌细胞上皮间质转化及其侵袭和迁移

目的检测甲状腺乳头状癌组织长链非编码RNA(lncRNA)肌动蛋白丝相关蛋白1反义RNA1(AFAP1-AS1)的表达,敲低TPC-1甲状腺乳头状癌细胞AFAP1-AS1,研究其对TPC-1细胞上皮间质转化(EMT)的影响及相关分子机制。方法采用实时定量PCR检测60例甲状腺乳头状癌组织lncRNA AFAP1-AS1表达;利用RNA干扰技术(RNAi)敲低TPC-1甲状腺乳头状癌细胞AFAP1-AS1,设置AFAP1-AS1敲低(shAFAP1-AS1)组和阴性对照RNA(shNC)组及未转染的TPC-1细胞为对照组。通过集落形成实验检测TPC-1细胞集落形成能力、 TranswellTM侵袭实验检测细胞侵袭能力,划痕愈合实验检测细胞的迁移能力;通过实时定量PCR检测敲低AFAP1-AS1后,细胞上皮钙黏素(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)、β联蛋白(β-catenin)、锌指转录因子snail2的mRNA水平, Western blot法检测其蛋白水平。结果与癌旁组比较,甲状腺乳头状癌组中AFAP1-AS1 mRNA表达水平显著增加;敲低AFAP1-AS1后, TPC-1细胞的集落形成能力、侵袭和迁移能力均显著降低;与shNC组和对照组相比,敲低AFAP1-AS1后,细胞snail2、 vimentin和β-catenin的mRNA和蛋白表达显著降低,而E-cadherin的mRNA和蛋白表达显著增加。结论 lncRNA AFAP1-AS1在甲状腺乳头状癌组织高表达,敲低TPC-1细胞AFAP1-AS1后,癌细胞的集落形成能力、侵袭和迁移能力显著下调,可能与抑制细胞EMT过程有关。

长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)与乳腺癌淋巴结转移的关系

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)与乳腺癌淋巴结转移的关系。方法收集新疆医科大学附属肿瘤医院乳腺外科一病区2018年10-12月收治的乳腺癌住院患者20例,采用乳腺手术+前哨淋巴结活检术,病理诊断为乳腺浸润性癌,用前哨淋巴结(SLN)探测仪,术中冰冻示SLN有转移条件的患者对腋窝淋巴结(ALN)进行常规的清扫。获得同时满足SLN(+)及ALN(+)的乳腺癌患者12例,分别取SLN、ALN及乳腺癌组织、癌旁组织。采用Trizol法提取各组织的总RNA,采用分光光度仪定量计算RNA,进行RNA反转录,采用RT-PCR法检测lncRNA的表达,用2-△△ct法计算LncRNA MALAT1的相对表达量。结果各组织中MALAT1相对表达量有明显差异(P<0.05),MALAT1在SLN中的表达明显高于癌旁组织与癌组织(P<0.05)。乳腺癌组织中MALAT1的表达量明显高于癌旁组织和ALN组织(P<0.05)。MALAT1表达与淋巴结转移率呈正相关(r=0.784,P<0.05),但与远处转移和淋巴结转数目不相关。结论 MALAT1在乳腺前哨淋巴结及癌组织中有异常高表达,其检测对乳腺癌淋巴结转移有一定的价值。

长链非编码RNA NEAT1在急性缺血性脑卒中的诊断价值

目的探讨血浆长链非编码RNA核富集丰富的转录本(LncRNA NEAT)1对急性缺血性脑卒中(AIS)的诊断价值。方法选取AIS患者83例(AIS组)。另设门诊体检正常者40例为对照组(NC组);采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测血浆LncRNA NEAT1的表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白细胞介素(IL)-8的水平,分析其与各临床指标的相关性;受试者工作特征(ROC)曲线分析LncRNA NEAT1对AIS的诊断价值。结果两组年龄、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、IL-8差异有统计学意义(P<0.05)。AIS组血浆LncRNA NEAT1的水平显著高于NC组(P<0.05)。相关分析显示LncRNA NEAT1与美国国立卫生研究院脑卒中量表(NIHSS)及IL-8均呈正相关。LncRNA NEAT1临界值为0.019,约登指数0.486,诊断AIS的敏感度为71.1%,特异度为77.5%;曲线下面积(AUC)为0.747,95%CI:0.657~0.837。结论外周血LncRNA NEAT1表达在一定程度上预测AIS的价值较高。

LncRNA KCNQ1OT1调控miR-10a-5p加重缺氧复氧H9c2细胞损伤的机制

目的探讨长非编码RNA KCNQ1重叠转录本1(KCNQ1OT1)调控缺氧复氧(H/R)心肌细胞(H9c2)增殖、凋亡的作用机制。方法成功建立H/R H9c2细胞模型;采用实时荧光定量反转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)、细胞计数试剂盒(CCK8)、膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素和碘化丙锭(Annexin V-FITC/PI)凋亡检测试剂盒、蛋白免疫印迹(Western blot)检测细胞中KCNQ1OT1、miR-10a-5p的表达、细胞活性、细胞凋亡率及P65、PHB、Bcl-2、Bax的蛋白表达;双荧光素酶报告基因检测实验检测细胞的荧光素酶活性。结果与H9c2组比较,H/R H9c2组细胞KCNQ1OT1表达显著升高,miR-10a-5p表达显著降低(P<0.05);过表达KCNQ1OT1或抑制miR-10a-5p具有相同的加重H/R对H9c2细胞的活性抑制、凋亡促进及P65、Bcl-2下调,PHB、Bax上调作用。miR-10a-5p明显抑制野生型KCNQ1OT1细胞的荧光活性,并负向调控KCNQ1OT1的表达。过表达miR-10a-5p部分逆转KCNQ1OT1对H/R H9c2细胞的活性抑制和凋亡促进作用。结论长链非编码RNA KCNQ1OT1抑制H/R H9c2细胞增殖,促进凋亡,其机制与靶向miR-10a-5p有关。

miR-212-3p靶向长链非编码RNA SCAMP1在胃癌中的差异表达

目的:探究miR-212-3p靶向LncRNA SCAMP1在胃癌中表达水平。方法:通过生物信息学分析,预测miR-212-3p靶向的LncRNA;运用COX风险模型,分析miR-212-3p相关的靶向LncRNA SCAMP1对胃癌患者生存时间的影响;采用实时定量PCR,检测人胃癌组织及远癌组织中miR-212-3p和LncRNA的表达水平。结果:LncRNA预测结果显示miR-212-3p靶向SCAMP1等21个LncRNA;COX风险模型显示miR-212-3p在胃癌中无统计学差异(P>0.05),SCAMP1在胃癌中有统计学差异(P<0.05),其表达升高不利于患者预后;实时定量PCR结果显示,miR-212-3p在远癌组织表达量高于胃癌组织(P<0.05);SCAMP1在远癌组织表达量低于胃癌组织(P<0.05)。结论:miR-212-3p相关的靶向LncRNA SCAMP1高表达不利于胃癌患者的预后。