长链非编码RNA X染色体失活特异转录物和微小RNA-146-5p在甲状腺癌中的表达及临床意义

目的探讨甲状腺癌组织中长链非编码RNA(LncRNA)X染色体失活特异转录物(XIST)、微小RNA-146-5p(miR-146-5p)的表达及其诊断价值。方法选取甲状腺癌患者92例为研究对象,均行手术切除术,术中收集甲状腺癌组织和癌旁正常组织。分析LncRNA XIST、miR-146-5p水平与患者临床病理特征之间的关系。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估LncRNA XIST、miR-146-5p单独及联合对甲状腺癌的诊断价值。结果甲状腺癌组织中LncRNA XIST表达水平为(0.65±0.17),低于癌旁组织的(1.02±0.18),miR-146-5p表达水平为(2.56±0.87),高于癌旁组织的(1.07±0.25),差异有统计学意义(P<0.05)。临床分期Ⅲ~Ⅳ期、发生颈部淋巴结转移的甲状腺癌患者肿瘤组织中LncRNA XIST表达水平低于临床分期Ⅰ~Ⅱ期、未发生颈部淋巴结转移的甲状腺癌患者,miR-146-5p表达水平高于临床分期Ⅰ~Ⅱ期、未发生颈部淋巴结转移的甲状腺癌患者,差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线结果显示,LncRNA XIST、miR-146-5p二者联合诊断甲状腺癌的曲线下面积(AUC)大于LncRNA XIST、miR-146-5p单独诊断,差异有统计学意义(P<0.05)。结论甲状腺癌组织中LncRNA XIST表达下调,miR-146-5p表达上调,二者与临床分期、颈部淋巴结转移有关,并对甲状腺癌有一定的诊断价值。

长链非编码RNA X失活特异转录物调控miR-340-5p对卵巢癌细胞上皮间质转化的影响

目的探讨长链非编码RNA X失活特异转录物(lncRNA XIST)通过调控miR-340-5p对卵巢癌细胞上皮间质转化(EMT)的影响。方法实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测卵巢癌组织和细胞系中lncRNA XIST和miR-340-5p表达水平。A2780细胞分为Control组、si-NC组、si-lncRNA XIST组、si-lncRNA XIST+NC inhibitor组、si-lncRNA XIST+miR-340-5p inhibitor组。双荧光素酶实验证实lncRNA XIST和miR-340-5p的调控关系;划痕实验和Transwell法检测迁移和侵袭能力;RT-qPCR、Western blot和免疫荧光染色分析EMT标志蛋白(E-cadherin、N-cadherin、Vimentin)的mRNA和蛋白表达。结果在卵巢癌组织和细胞系中,lncRNA XIST高表达,miR-340-5p低表达(P<0.05)。选择lncRNA XIST表达最高的A2780细胞作为转染对象。lncRNA XIST能够直接靶向下调miR-340-5p表达(P<0.05)。转染si-lncRNA XIST后,lncRNA XIST水平、划痕愈合率、侵袭细胞数和N-cadherin、Vimentin表达降低,E-cadherin表达升高(P<0.05);共转染si-lncRNA XIST和miR-340-5p inhibitor后上述指标均得到逆转(P<0.05)。结论lncRNA XIST通过下调miR-340-5p促进卵巢癌细胞EMT。

调控X染色体失活中的长链非编码RNA——JPX

在哺乳动物中,可以通过X染色体失活（X chromosome inactivation,XCI）抑制一条X染色体的转录,达到基因数量在不同性别间的平衡。控制XCI的区域称为X染色体去活化中心（X-inactivation center,Xic）,分布着大量的非编码RNA。

长链非编码RNA XIST在系统性红斑狼疮患者外周血CD4+T细胞表达降低并与疾病活动度负相关

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)X连锁X染色体特异性失活转录本(XIST)在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血CD4+细胞亚群中的表达,并分析其临床意义。方法募集50例SLE患者和30例健康人,比较SLE组和健康对照组CD4+T细胞中XIST表达情况。根据系统性红斑狼疮疾病活动度指数(SLEDAI)评分情况将50例SLE患者分为稳定期SLE组(SLEDAI评分<5分,n=19)和活动期SLE组(SLEDAI评分≥5分,n=31)。比较稳定期SLE组和活动期SLE组CD4+T细胞中XIST表达情况。分析活动期SLE患者CD4+T细胞中XIST表达水平与SLEDAI的相关性。根据是否合并狼疮肾炎,将31例活动期SLE患者分为无合并狼疮肾炎组(n=17)和合并狼疮肾炎组(n=14),比较两组CD4+T细胞中XIST表达情况。绘制CD4+T细胞中XIST诊断SLE和合并狼疮肾炎的受试者工作特征(ROC)曲线。结果与健康对照组相比,SLE组CD4+T细胞XIST表达显著降低。与稳定期SLE组相比,活动期SLE组CD4+T细胞中XIST表达显著降低。相关性分析显示,活动期SLE患者CD4+T细胞中XIST表达水平与SLEDAI评分呈负相关。活动期SLE患者中,与无合并狼疮肾炎组相比,合并狼疮肾炎组CD4+T细胞中XIST表达显著降低。ROC曲线结果显示,CD4+T细胞中XIST在诊断SLE及是否合并狼疮肾炎中具有良好效能。结论SLE患者CD4+T细胞中XIST表达显著降低,其表达水平与疾病活动度密切相关,而且在诊断SLE及SLE合并狼疮肾炎方面具有良好效能。

宫颈癌组织长链非编码RNA XIST、小分子RNA miR-101-3p表达变化及其意义

目的观察宫颈癌组织长链非编码RNA(LncRNA)X染色体失活特异转录子(XIST)、小分子RNA miR-101-3p表达变化,并探讨其临床意义。方法选取91例宫颈癌患者的宫颈癌组织标本为观察组,癌旁正常组织(距离宫颈癌组织>5cm且经病例检查证实为正常组织)标本为对照组。采用实时荧光定量PCR法检测两组标本中的XIST、miR-101-3p表达,并分析其与宫颈癌临床病理参数的关系。结果观察组、对照组XIST表达量分别为8.97±3.56、7.01±3.82,miR-101-3p表达量分别为8.24±4.22、10.15±3.97。观察组XIST表达量高于对照组(P<0.05),miR-101-3p表达量低于对照组(P<0.05)。Pearson积矩相关分析结果显示宫颈癌组织miR-101-3p、XIST表达量呈负相关性(r=-0.716,P<0.05)。肿瘤最大径≥4 cm、FIGO分期Ⅲ+Ⅳ期、低分化、有淋巴结转移的宫颈癌组织中miR-101-3p表达量分别低于于肿瘤最大径<4 cm、FIGO分期Ⅰ+Ⅱ期、中高分化、无淋巴结转移的宫颈癌组织(P均<0.05),XIST表达量分别高于于肿瘤最大径<4 cm、FIGO分期Ⅰ+Ⅱ期、中高分化、无淋巴结转移宫颈癌组织(P均<0.05)。结论宫颈癌组织XIST表达升高、miR-101-3p表达降低。检测宫颈组织XIST、miR-101-3p有助于宫颈癌的病情判断。

长链非编码RNA XIST可能通过miR-22/NLRP3促进喉鳞癌细胞增殖

目的:探讨长链非编码RNA X染色体失活特异转录本(XIST)通过miR-22/NLRP3通路对喉鳞状细胞癌(LSCC)增殖的影响。方法:RT-PCR检测34例LSCC患者癌组织和癌旁组织中XIST的表达;CCK-8法和平板细胞克隆形成实验检测肿瘤细胞增殖活性;Western blot检测蛋白表达水平。荧光素酶报告分析法验证XIST对miR-22/NLRP3的靶向作用。用XIST siRNA慢病毒治疗BALB/c肿瘤小鼠,观察肿瘤生长变化。结果:与癌旁组织相比,LSCC组织中XIST表达水平较高(P<0.05)。肿瘤分期越高,XIST表达水平越高(P<0.05)。下调XIST表达可抑制肿瘤细胞增殖(P<0.05)。荧光素酶报告分析结果显示,XIST可通过靶向miR-22调节NLRP3。抑制XIST后,miR-22表达水平显著上调(P<0.05),下调XIST表达或miR-22过表达可导致NLRP3表达上调(P<0.05)。用shXIST慢病毒干预LSCC小鼠后,肿瘤体积和重量明显缩小,肿瘤增殖抗原Ki-67和NLRP3表达水平降低(P<0.05)。结论:XIST过表达可通过调控miR-22/NLRP3通路促进LSCC增殖,靶向XIST可能为LSCC的治疗提供新的方向。

长链非编码RNA的研究进展

长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是一类转录本长度超过200 nt(核苷酸单位)的功能性RNA分子,可在表观遗传水平、转录水平和转录后水平调控基因的表达,广泛参与机体的生理和病理过程。目前发现的参与哺乳动物基因活动的lncRNA已有上千个,但有关lncRNA的功能机制及其与疾病的关系尚不完全明了。本文就lncRNA的功能研究进展及lncRNA在临床疾病发生发展中的作用作一综述。

长链非编码RNA研究进展

长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)是一类长度超过200 bp但不翻译成蛋白质的功能性RNA分子。lncRNA功能复杂,可通过多种机制可在表观遗传水平、转录水平和转录后水平调控基因的表达,广泛参与机体的生理和病理过程。目前,在生物体中已发现超过11万lncRNA基因,但lncRNA分子结构、作用的机制以及生物学功能尚未完全阐明。本文就lncRNA研究进展进行综述。

长链非编码RNA染色体失活特异转录本靶向调控微小RNA-106a-5p影响肾癌细胞增殖和凋亡的研究

目的探讨长链非编码RNA染色体失活特异转录本(lncRNA XIST)靶向调控微小RNA(miRNA,miR)-106a-5p对肾癌细胞增殖和凋亡的影响及其机制。方法通过实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测人肾癌ACHN、Caki-1、Caki-2和786-O细胞和正常肾脏上皮细胞HK-2中XIST的表达水平。将体外培养的Caki-2细胞分为Empty组(转染空白载体)和XIST组(转染XIST过表达载体),采用RT-qPCR检测各组细胞中XIST和miR-106a-5p的表达水平,噻唑蓝(MTT)法和流式细胞仪检测各实验组细胞增殖和凋亡。采用双荧光素酶报告基因实验检测XIST和miR-106a-5p的靶向结合关系。将miR-106a-5p激动剂与XIST过表达质粒共转染后观察上调miR-106a-5p表达对XIST过表达的Caki-2细胞增殖和凋亡的影响。多组间比较使用单因素方差分析,组间多重比较采用学生纽曼·基尔斯(Student-Newman-Keuls,SNK)-q,两组间比较采用独立样本t检验。结果与HK2细胞比较,ACHN、Caki-1、Caki-2和786-O细胞中XIST的表达水平明显降低(相对表达量分别为0.516±0.031、0.605±0.021、0.241±0.024、0.355±0.042,t=11.666、11.321、20.321、12.992,P均<0.05)。与Empty组比较,过表达XIST组细胞中XIST的表达水平升高(相对表达量为175.829±1.021,t=20.471,P<0.05)、细胞增殖能力降低(为对照组0.759倍,t=6.388,P<0.05)、细胞凋亡增加(为对照组1.304倍,t=11.371,P<0.05),而细胞中miR-106a-5p的表达水平明显降低(相对表达量为0.415±0.035,t=13.717,P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验证实miR-106a-5p可与XIST靶向结合。转染miR-106a-5p激动剂成功上调miR-106a-5p表达后,过表达XIST对Caki-2细胞增殖的抑制作用及促凋亡作用明显逆转。结论过表达XIST可通过靶向调控miR-106a-5p抑制肾癌Caki-2细胞增殖并促进其凋亡。

血清miR-98-5p、LncRNA XIST在急性呼吸窘迫综合征患儿中与疾病严重程度、预后的关系

目的:检测急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患儿血清中微小RNA(miR)-98-5p、长链非编码RNA(LncRNA)X染色体失活特异性转录因子(XIST)表达情况,并探究二者与疾病严重程度、预后的关系。方法:收集86例ARDS患儿为研究对象(研究组),同期健康体检儿童90名设为对照(对照组),参考柏林(2012年)ARDS病情严重程度诊断标准中动脉血氧分压/吸入氧浓度将ARDS患儿分为轻度组、中度组、重度组;另根据ARDS患儿28 d生存状况分为存活组和死亡组。实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测血清miR-98-5p、LncRNA XIST水平,绘制受试者工作特性(ROC)曲线分析血清中miR-98-5p、LncRNA XIST水平对ARDS患儿预后不良的预测价值;Kaplan-Meier生存曲线分析血清miR-98-5p、LncRNA XIST水平与ARDS患儿预后的关系;Pearson分析ARDS患儿血清中miR-98-5p与LncRNA XIST的相关性。结果:与对照组相比,研究组血清中miR-98-5p水平降低(P<0.01),LncRNA XIST水平升高(P<0.01)。与轻度组相比,中度组、重度组血清中miR-98-5p水平降低(P<0.05),LncRNA XIST水平升高(P<0.05);与中度组相比,重度组血清中miR-98-5p水平降低(P<0.05),LncRNA XIST水平升高(P<0.05)。与存活组相比,死亡组血清中miR-98-5p水平降低(P<0.01),LncRNA XIST水平升高(P<0.01)。ROC曲线显示,血清中miR-98-5p、LncRNA XIST水平预测ARDS患儿预后不良的ROC曲线下面积分别为0.771、0.764,截断值分别为0.54、1.97,其敏感性分别为76.1%、86.9%,特异性分别为73.7%、52.6%;血清中miR-98-5p联合LncRNA XIST预测ARDS患儿预后不良的ROC曲线下面积为0.888,其敏感性为77.6%、特异性为94.7%。miR-98-5p高表达者存活率35.14%高于低表达者12.24%(P<0.05),LncRNA XIST高表达存活率12.73%低于低表达者38.71%(P<0.01)。Pearson分析发现ARDS患儿血清中miR-98-5p与LncRNA XIST呈负相关关系(r=-0.411,P<0.05)。Starbase3.0预测发现LncRNA XIST与miR-98-5p存在结合位点。结论:ARDS患儿血清中miR-98-5p水平降低、LncRNA XIST水平升高,二者均与疾病严重程度、预后关系密切,且二者呈显著负相关,有望用于评估ARDS疾病严重程度、预后。

X染色体失活现象与机制

在雌性哺乳动物的体细胞中,两条X染色体中的一条总是被异染色质化而失活,这个现象称为X染色体失活。X染色体失活保证了性染色体上的基因剂量在雌性和雄性动物之间的平衡。它是许多生物学现象和疾病的生物学基础。本文简要介绍了X染色体失活的现象,基本生物学概念以及潜在机理,最后介绍了与之相关的疾病,例如X染色体数量异常和伴性遗传疾病的病理知识。

长链非编码RNA X型染色体失活特异转录物在新疆哈萨克族2糖尿病患者外周血单个核细胞中的表达及与胰岛β细胞功能的关系

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)X染色体失活特异转录物(LncRNA XIST)在T2DM患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达及与胰岛β细胞功能的关系。方法收集新疆哈萨克族健康人群与T2DM患者外周静脉血行高通量测序筛选出差异性表达的LncRNA,选取新疆哈萨克族T2DM患者(T2DM组,n=30)及体检健康人群(NC组,n=30),测量身高、体重、WC、臀围、SBP、DBP,检测FPG、HbA_(1)c、FIns、TG、TC、HDL-C、LDL-C、血尿酸、BUN、血肌酐,计算BMI、WHR、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛β细胞功能指数及胰岛素敏感指数;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测受试者PBMC中LncRNA XIST表达水平。结果qRT-PCR检测结果显示,LncRNA XIST在T2DM组PBMC中的表达水平是NC组的3.75倍(P<0.05)。Pearson相关分析显示,新疆哈萨克族T2DM患者Lnc XIST基因表达水平与HOMA-IR呈正相关(P<0.05),与FIns呈负相关(P<0.01)。受试者工作特征(ROC)曲线显示,Lnc XIST的ROC曲线下面积为0.692(95%CI0.558~0.826,P<0.05)。结论新疆哈萨克族T2DM患者Lnc XIST基因表达水平与胰岛β细胞功能和IR有关;PBMC中LncRNA XIST表达升高可能参与新疆哈萨克族T2DM。

长链非编码RNA在生殖领域的研究进展

长链非编码RNA(IncRNAs)是一类转录本长度大于200 nt的RNA,它们通常不编码蛋白。与微小RNA(miRNA)、小干扰RNA(SiRNA)等其它非编码RNAs的作用方式不同的是,lncRNAs可以在多种层面上(表观遗传调控、转录调控以及转录后调控等)实现对基因表达的调控。在生殖领域,随着定向诱导基因组局部突变技术(tilling technology)和二代测序技术的发展,已发现部分lncRNAs与X染色体失活、配子成熟、胚胎发育等生物学事件及部分生殖系统疾病密切关联。本文将就lncRNAs在生殖领域的研究现状进行综述。

长链非编码RNA在急性髓系白血病中调控机制的研究进展

长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是指长度大于 200个核苷酸的非编码RNA,起初它被认为是基因组转录的"噪音",即RNA聚合酶II转录的副产物,并不具有生物学功能[1-2].但随着研究的深入,人们发现lncRNA参与了X染色体沉默、表观遗传调控、转录激活与干扰、细胞分化调节等多个关键的调控过程[3-5].

非小细胞肺癌长链非编码RNA X染色体失活特异转录本研究进展

肺癌又称原发性支气管癌,是起源于支气管黏膜或腺体的最常见的肺部原发性恶性肿瘤。依据组织病理类型,肺癌可分为小细胞癌(SCLC)和非小细胞癌(NSCLC)。NSCLC约占肺癌的85%,其发病机制目前尚不清楚。本研究就长链非编码RNA(lncRNA)X染色体失活特异转录本(XIST)参与NSCLC进展可能的机制进行综述,以期对深入研究NSCLC发生发展的机制提供新的思路。2016-01-01-2020-12-31检索PubMed、万方和中国知网数据库相关文献,纳入标准:lncRNA XIST参与NSCLC进展相关文献。排除标准:综述类文献;不同期刊重复发表文献。最终纳入38篇文献进行分析。lncRNA XIST是早期发现的lncRNAs之一,可调控机体多种生理病理学过程。目前,越来越多的研究结果表明,lncRNA XIST与NSCLC细胞的增殖、凋亡、上皮间质转化、表观遗传和耐药密切相关。lncRNA XIST诱导产生的miR-140依赖性的p53凋亡抑制蛋白(iASPP)可促进肿瘤的生长和耐药;而下调lncRNA XIST可促进活性氧(ROS)产生和核苷酸结合寡聚结构域含亮氨酸重复序列和含Pyrin结构域3(NLRP3)炎性小体激活,进而引起细胞焦亡;此外,lncRNA XIST可以增加RING1表达并增强Wnt/β-catenin信号通路表达促进NSCLC细胞分裂、转移和侵袭;lncRNA XIST还可通过表观遗传机制抑制Kruppel样因子2(KLF2)表达促进癌细胞增殖、迁移和侵袭;有趣的是,下调lncRNA XIST后可抑制多耐药基因(MDR1)和多耐药相关蛋白(MRP1)表达进而影响细胞耐药。因此,探索lncRNA XIST对肺癌发生发展的作用机制对NSCLC进入分子靶向治疗的新时代具有重要意义。

子宫肌瘤患者血清lncRNA MIAT和lncRNA XIST的表达及临床意义

目的 检测子宫肌瘤患者血清长链非编码RNA(lncRNA)心肌梗死相关转录本(MIAT)、lncRNA X染色体失活特异转录本(XIST)的水平,并探究二者与子宫肌瘤的关系以及对子宫肌瘤的诊断价值。方法 选取2018年5月至2022年5月在张家口市妇幼保健院就诊的120例子宫肌瘤患者作为子宫肌瘤组,选择同时期在本院进行体检的120例健康体检者作为对照组。比较两组研究对象的基线资料;实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测两组研究对象血清中lncRNA MIAT、lncRNA XIST表达水平;Pear?son相关性分析子宫肌瘤患者血清中lncRNA MIAT与lncRNA XIST表达水平的相关性;多因素logistic回归分析子宫肌瘤患病的影响因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线评价血清lncRNA MIAT、lncRNA XIST对子宫肌瘤的诊断价值。结果 两组研究对象肌瘤最大径、肌瘤数目、有无乳腺增生、流产次数、有无妇科疾病比较,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组比较,子宫肌瘤组血清中ln?cRNA MIAT、lncRNA XIST水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);肌瘤最大径≥5 cm、肌瘤数目≥2个、有乳腺增生、流产次数≥2次、有妇科疾病的子宫肌瘤患者血清中lncRNA MIAT、lncRNA XIST表达水平明显高于肌瘤最大径<5 cm、肌瘤数目<2个、无乳腺增生、流产次数<2次、无妇科疾病的子宫肌瘤患者,差异有统计学意义(P<0.05);Pearson相关性分析显示,子宫肌瘤患者血清中lncRNA MIAT、lncRNA XIST表达水平呈正相关(r=0.468,P<0.001);多因素logistic回归分析结果显示,lncRNA MIAT≥1.45(OR=1.678,95%CI:1.342~2.098)、lncRNA XIST≥1.35(OR=1.315,95%CI:1.033~1.673)是子宫肌瘤发生的危险因素(P<0.05);血清lncRNA MIAT、lncRNA XIST诊断子宫肌瘤的曲线下面积(AUC)分别为0.817、0.776,特异度分别为91.7%、86.7%,灵敏度分别为62.5%、71.7%,截断值分别为1.45、1.35,两者联合诊断子宫肌瘤的AUC为0.846,特异度为97.5%,灵敏度为61.2%。结论 子宫肌瘤患者血清中lncRNA MIAT、lncRNA XIST表达水平升高,二者与子宫肌瘤发生密切相关,二者联合对子宫肌瘤具有较高的辅助诊断价值。

LncRNA XIST和miR-101-3p在SLE患者外周血单核细胞中的表达及临床应用价值

目的分析长链非编码RNA(Lnc RNA)X染色体失活特异转录本(XIST)和微小RNA-101-3p(mi R-101-3p)在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单核细胞中的表达及临床应用价值。方法选取2019年4月至2021年10月在新乡市中心医院治疗的180例SLE患者作为观察组,选择同期180例健康体检者作为对照组。根据SLE疾病活动指数(SLEDAI)评分将观察组分为稳定期组80例和活动期组100例。采用实时荧光定量聚合酶链反应(q RT-PCR)法对患者外周血单核细胞中Lnc RNA XIST、mi R-101-3p的相对表达水平进行检测。分析Lnc RNA XIST与mi R-101-3p的相关性以及二者与SLEDAI评分的相关性;对影响SLE的因素进行logistic回归分析;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析Lnc RNA XIST、mi R-101-3p的表达对SLE的诊断价值。结果与对照组相比,观察组患者外周血单核细胞Lnc RNA XIST水平升高,mi R-101-3p水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05);活动期组患者较稳定期组外周血单核细胞中Lnc RNA XIST水平升高,mi R-101-3p水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05);患者外周血单核细胞Lnc RNA XIST与mi R-101-3p水平呈负相关(r=-0.410,P<0.05);Lnc RNA XIST水平与SLEDAI评分呈正相关(r=0.425,P<0.05),mi R-101-3p水平与SLEDAI评分呈负相关(r=-0.454,P<0.05);logistic回归分析显示,Lnc RNA XIST是影响SLE的危险因素(P<0.05),mi R-101-3p是影响SLE的保护因素(P<0.05);Lnc RNA XIST、mi R-101-3p联合诊断SLE的ROC曲线下面积为0.960,均优于其各自单独诊断(Z_(二者联合-Ln-c RNA XIST)=3.268,P=0.001;Z_(二者联合-mi R-101-3p)=2.584,P=0.005)。结论SLE患者外周血单核细胞Lnc RNA XIST水平升高,mi R-101-3p水平降低,与SLE疾病活动性有关,对SLE具有一定的诊断价值。

Xist lncRNA在X染色体相关疾病中的表达和意义

哺乳动物基因组转录大量RNA转录本,包括编码RNA和非编码RNA(ncRNA)。随着对非编码RNA研究的不断深入,越来越多的研究表明,长链非编码RNA(lncRNA)在细胞调控中发挥着重要作用。Xist lncRNA被认为在雌性动物细胞内能够起到剂量补偿(dosage compensation)作用,在许多疾病中检测出Xist lncRNA的异常表达,表明Xist lncRNA可能在多种疾病包括肿瘤的发生、发展中发挥重要作用。该文就Xist lncRNA在X染色体相关疾病中的分布和作用作一综述。

lncRNA XIST通过NF-κB/NLRP3炎性体通路影响急性肺损伤大鼠炎症反应和细胞凋亡

目的探讨长链非编码RNA-X染色体失活特异转录物(lncRNA XIST)通过核转录因子-κB/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NF-κB/NLRP3)炎性体通路对急性肺损伤(ALI)大鼠炎症反应和细胞凋亡的影响。方法利用脂多糖(LPS)构建ALI模型,将造模成功的SD大鼠分为ALI组、lncRNA XIST-NC组、lncRNA XIST-shRNA组和lncRNA XIST-shRNA+CHPG组,每组12只,另选12只作为Control组。lncRNA XIST-NC组和lncRNA XIST-shRNA组大鼠分别于造模后从尾静脉注射lncRNA XIST-NC和lncRNA XIST-shRNA质粒脂质体复合物,lncRNA XIST-shRNA+CHPG组大鼠在lncRNA XIST-shRNA组大鼠的基础上再注射0.5 mg/kg NF-κB/NLRP3炎性体通路激活剂CHPG,而Control组和ALI组大鼠则注射等量的Opti-MEM培养基。7 d后处死各组大鼠,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测lncRNA XIST水平;苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织病理变化;检测并计算肺湿/干比(W/D)和髓过氧化物酶(MPO)活力值;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清炎症因子肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6和IL-1β水平;末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口标记技术(TUNEL)染色观察肺组织细胞凋亡;Western印迹检测肺组织中活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶(Cleaved Caspase)-3、Caspase-3、NF-κB p65、p-NF-κB p65、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、NLRP3、Cleaved Caspase-1、Caspase-1表达。结果ALI组大鼠肺组织中lncRNA XIST水平明显高于Control组,lncRNA XIST-shRNA可显著降低lncRNA XIST表达(P<0.05)。与Control组比较,ALI组大鼠肺部炎症细胞明显增多,W/D值和MPO活力值明显增加,血清TNF-α、IL-6和IL-1β水平显著上升,凋亡率、凋亡蛋白Cleaved caspase-3及NF-κB/NLRP3炎性体通路相关蛋白p-NF-κB p65、ASC、NLRP3和Cleaved caspase-1表达均显著上调(P<0.05)。沉默lncRNA XIST可明显减少ALI大鼠肺部炎症细胞的数量,降低W/D、MPO活力值和肺组织细胞凋亡率,下调凋亡和通路相关蛋白的表达(P<0.05)。而NF-κB/NLRP3炎性体通路激活剂CHPG干预使lncRNA XIST-shRNA对ALI大鼠炎症反应、细胞凋亡和蛋白表达的抑制作用得到逆转(P<0.05)。结论沉默lncRNA XIST可能通过抑制NF-κB/NLRP3炎性体通路,改善ALI大鼠的炎症反应和细胞凋亡。

lncRNA XIST调控miR-92a/Smad7对急性脑梗死大鼠神经功能的影响

目的探讨长链非编码RNA染色体X失活特异转录物(lncRNA XIST)对微小核糖核酸(miR)-92a/信号转导分子(Smad)7轴的调控作用及对急性脑梗死(ACI)大鼠神经功能损伤的影响。方法90只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、ad-XIST组(尾静脉注射含lncRNA XIST过表达腺病毒的载体溶液)、ad-NC组(尾静脉注射不含lncRNA XIST过表达腺病毒的空载体溶液)、si-miR-92a组(尾静脉注射含miR-92a低表达序列的腺病毒载体)、si-NC组(尾静脉注射不含miR-92a低表达序列的空载体腺病毒溶液),每组15只。Longa法测定大鼠神经功能变化;2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)法测定脑梗死面积;尼氏及TUNEL法测定海马神经元形态变化及凋亡状况;实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)法测定海马组织lncRNA XIST、miR-92a mRNA表达;免疫组化法测定Smad7阳性表达水平。取小鼠原代海马神经元细胞,用连二亚硫酸钠诱导建立海马神经元缺血模型,随机分为对照组、模型组、si-XIST组、si-NC组、si-miR-92a组、si-NC-a组、si-XIST+si-miR-92a组,用噻唑蓝(MTT)法测定海马神经元增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡率;RT-qPCR法检测各组细胞lncRNAXIST、miR-92a表达;Western印迹法检测Smad7、核转录因子(NF)-κB、磷酸化(p)-NF-κB、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)3、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达。结果上调lncRNA XIST或沉默miR-92a,均可明显缓解ACI大鼠神经功能缺损、明显降低脑梗死面积、明显缓解海马神经元凋亡及坏死、明显上调海马组织神经元细胞胞质中Smad7阳性表达水平(P<0.05)。用连二亚硫酸钠+低糖培养可促进体外培养的海马神经元细胞凋亡并抑制其增殖(P<0.05),成功复制缺氧缺糖凋亡模型。下调lncRNA XIST可进一步促进海马神经元细胞凋亡,并促进miR-92a和促凋亡相关蛋白表达(P<0.05)。沉默miR-92a可逆转lncRNA XIST下调引起的海马神经元凋亡(P<0.05)。结论lncRNA XIST与miR-92a之间存在靶向负调控作用,上调lncRNA XIST,可靶向抑制miR-92a转录活化,进而上调Smad7表达,抑制NF-κB介导的凋亡途径活化,缓解ACI大鼠神经功能缺损及海马神经元凋亡。