长链非编码RNA核富集转录本1对瘢痕成纤维细胞增殖、凋亡和迁移的影响

背景:已有研究阐明核富集转录本1(nuclear enriched abundant transcript 1,NEAT1)下调抑制了瘢痕成纤维细胞的进展,但具体机制尚不完全清楚。目的:探讨长链非编码RNA NEAT1调节miR-136-5p/泛素特异性蛋白酶4(ubiquitin specific protease 4,USP4)轴对瘢痕成纤维细胞生物学行为的影响。方法:将瘢痕成纤维细胞分为5组:si-NC组、空白对照组、si-NEAT1组、si-NEAT1+miR-136-5p inhibitor组、si-NEAT1+inhibitor-NC组,qRT-PCR检测NEAT1、miR-136-5p表达;CCK-8法及EDU染色检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞凋亡情况;划痕愈合实验检测细胞迁移情况;Western blot检测USP4、p27、Bax、基质金属蛋白酶9、α-平滑肌肌动蛋白、Ⅰ型胶原蛋白α1链蛋白表达;双荧光素酶实验检测NEAT1与miR-136-5p、miR-136-5p与USP4的关系。结果与结论:①与si-NC组比较,si-NEAT1组NEAT1表达、A450值、EDU阳性细胞百分比、划痕愈合率以及USP4、基质金属蛋白酶9、α-平滑肌肌动蛋白、Ⅰ型胶原蛋白α1链蛋白表达降低(P<0.05),miR-136-5p表达、细胞凋亡率及p27、Bax蛋白表达升高(P<0.05);②miR-136-5p inhibitor逆转了沉默NEAT1对瘢痕成纤维细胞生物学行为的影响;③miR-136-5p与NEAT1、miR-136-5p与USP4存在靶向调控关系。结果表明,沉默NEAT1可能通过调控miR-136-5p/USP4轴抑制瘢痕成纤维细胞的增殖和迁移,诱导其凋亡。

长链非编码RNA核富集转录子1对胃癌SGC7901细胞迁移、侵袭、自噬的影响及机制研究

目的:分析长链非编码RNA(lncRNA)核富集转录子1(NEAT1)通过调控丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路对胃癌SGC7901细胞迁移、侵袭及自噬的影响。方法:人胃癌SGC7901细胞传代培养后分为对照组、过表达组和沉默组。对照组为不做任何处理,过表达组给予lncRNA NEAT1过表达质粒转染,沉默组给予lncRNA NEAT1沉默质粒转染。鉴定lncRNA NEAT1转染效率,分析沉默lncRNA NEAT1对人胃癌SGC7901细胞迁移、侵袭、自噬、MAPK信号通路蛋白表达量的影响。结果:与对照组比较,过表达组lncRNA NEAT1表达量、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、MMP-2、细胞外信号调节激酶(ERK)蛋白表达量增加,上皮性钙黏附素(E-cadherin)、Beclin-1、Ⅱ型/Ⅰ型微管相关蛋白1轻链3(LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ)、p38、c-Jun氨基末端激酶(JNK)蛋白表达量降低;沉默组lncRNA NEAT1表达量、MMP-9、MMP-2、ERK蛋白表达量降低,E-cadherin、Beclin-1、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、p38、JNK蛋白表达量增加(均P<0.05)。与过表达组比较,沉默组lncRNA NEAT1表达量、MMP-9、MMP-2、ERK蛋白表达量降低,E-cadherin、Beclin-1、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、p38、JNK蛋白表达量增加(均P<0.05)。结论:抑制lncRNA NEAT1可有效抑制胃癌细胞的迁移、侵袭、自噬,其机制可能与调控MAPK信号通路有关。

精神分裂症病人外周血长链非编码RNA核富集转录本1表达与临床症状相关性分析

目的探讨长链非编码RNA核富集转录本1(lncRNA NEAT1)在精神分裂症(sch)病人外周血中的表达与临床症状的相关性。方法选择2019年6月至2022年3月在菏泽市第三人民医院及河北医科大学第一医院精神科收治的sch病人73例作为观察对象(sch组),另选取同期在该两家医院体检人员(无精神病障碍史及无精神疾病家族史)68例作为对照组,采用阳性与阴性症状量表(PANSS)评估病人临床症状,采用蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评估病人认知功能,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测外周血单核细胞(PBMC)中lncRNA NEAT1表达水平,Spearman法分析lncRNA NEAT1与PANSS评分、MoCA评分的相关性,受试者操作特征(ROC)曲线分析lncRNA NEAT1水平对sch的诊断价值。结果对照组和sch组病人外周血lncRNA NEAT1表达水平分别为1.05±0.21、0.73±0.15,差异有统计学意义(P<0.001);ROC曲线分析显示:lncRNA NEAT1的曲线下面积为0.82,截断值为0.89,灵敏度为79.45%,特异度为73.93%;相关性分析表明:lncRNA NEAT1与PANSS量表总分和阴性症状量表评分呈负相关(r=−0.40、−0.49,P<0.05),且与MoCA量表中执行能力、注意力、延迟记忆和总分呈负相关(r=−0.38、−0.40、−0.40、−0.42,P<0.05)。结论lncRNA NEAT1在sch病人外周血中表达水平降低,与sch病人精神症状和认知功能有关,可能参与sch的发生发展。

长链非编码核糖核酸KCNQ1重叠转录物1、Runt相关转录因子3与急性心肌梗死的关系

目的 探讨急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)患者血清长链非编码RNA KCNQ1重叠转录物1(long non-coding RNA KCNQ1 overlapping transcript 1,lncRNA KCNQ1OT1)、Runt相关转录因子3(Runt-related transcription factor 3,Runx3)表达水平及意义。方法 选取2019年1月至2020年4月在德阳市人民医院住院治疗的231例AMI患者为研究对象(AMI组),AMI患者按美国纽约心脏病协会心功能分级标准分为Ⅱ级组72例、Ⅲ级组81例、Ⅳ级组78例;同期选取229例健康体检者作为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(realtime fluorescence quantitative polymerase chain reaction,fqRT-PCR)法检测血清lncRNA KCNQ1OT1、Runx3表达水平;酶联免疫吸附(ELISA)法检测氨基末端脑钠肽前体(N-terminal pro-brain natriuretic peptide,NT-proBNP)、肌酸激酶(creatine kinase,CK)、肌酸激酶同工酶(creatine kinase isoenzymes,CK-MB)、心肌肌钙蛋白(cardiac troponin,cTn)I、肌红蛋白(myoglobin,MYO)浓度;超声心动图检查左心室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)、左心室舒张末期内径(left ventricular end-diastolic diameter,LVEDD)、左心室收缩末期内径(left ventricular end-systolic diameter,LVESD);分析AMI患者血清lncRNA KCNQ1OT1、Runx3表达水平与心功能指标的相关性;分析血清lncRNA KCNQ1OT1、Runx3表达水平对AMI的诊断价值;分析影响AMI发生的因素。结果AMI组患者lncRNA KCNQ1OT1(1.54±0.36 vs. 1.01±0.26)、LVESD[(52.68±6.74)mm vs.(42.73±6.52)mm]、LVEDD[(61.79±6.03)mm vs.(51.62±5.32)mm]、NT-proBNP[(292.23±34.27)ng/L vs.(96.27±23.42)ng/L]、CK[(746.82±210.55)U/L vs.(70.32±15.48)U/L]、CK-MB[(156.95±49.87)U/L vs.(1.25±0.37)U/L]、cTnI[(27.48±7.92)ng/mL vs.(1.13±0.26)ng/mL]、MYO[(678.94±159.78)ng/mL vs.(12.45±2.73)ng/mL]浓度高于对照组,Runx3(0.67±0.20 vs.1.02±0.24)、LVEF(43.26%±4.31%vs. 56.38%±5.12%)低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。心功能Ⅳ级组lncRNA KCNQ1OT1、LVESD、LVEDD、NT-proBNP、CK、CK-MB、cTnI、MYO高于Ⅲ级组和Ⅱ级组,Runx3、LVEF低于Ⅲ级组和Ⅱ级组,差异有统计学意义(P<0.05);Ⅲ级组lncRNA KCNQ1OT1、LVESD、LVEDD、NT-proBNP、CK、CK-MB、cTnI、MYO高于Ⅱ级组,Runx3、LVEF低于Ⅱ级组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清lncRNA KCNQ1OT1、Runx3表达水平与病变支数、Gensini积分有关,且随着病变支数、Gensini积分增加,lncRNA KCNQ1OT1表达水平升高、Runx3表达水平降低(P<0.05)。AMI患者血清lncRNA KCNQ1OT1与Runx3表达水平呈负相关(r=-0.584;P<0.05);lncRNA KCNQ1OT1与LVESD、LVEDD、NT-proBNP、CK、CK-MB、cTnI、MYO呈正相关,与LVEF呈负相关(P<0.05);Runx3与LVESD、LVEDD、NT-proBNP、CK、CK-MB、cTnI、MYO呈负相关,与LVEF呈正相关(P<0.05)。血清lncRNA KCNQ1OT1、Runx3水平诊断AMI的曲线下面积(AUC)分别为0.859、0.743,特异度分别为81.6%、74.7%,敏感度分别为76.1%、78.3%;两者联合诊断的曲线下面积为0.901,特异度为92.0%,敏感度为73.9%。lncRNA KCNQ1OT1是影响AMI发生的独立危险因素(P<0.05),Runx3是影响AMI发生的保护因素(P<0.05)。结论 血清lncRNA KCNQ1OT1、Runx3参与AMI的发生、发展,二者表达水平对AMI的诊断可能具有重要意义。

急性胰腺炎病人血清长链非编码RNA核富集转录体1、Toll样受体2表达变化及临床意义研究

目的探讨急性胰腺炎(AP)病人血清长链非编码RNA核富集转录体1(LncRNA NETA1)、Toll样受体2(TLR2)表达及临床意义。方法选取2017年5月至2020年12月石家庄平安医院收治的AP病人125例为研究对象,根据急性生理学和慢性健康状况评价Ⅱ(APACHEⅡ)对AP病人进行评分,并将病人分为轻症组56例,重症组69例;根据住院期间重症组AP病人预后情况,将病人分为预后不良25例,预后良好44例。同期选取该院健康体检者130例为健康组。实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测血清LncRNA NETA1水平,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清TLR2水平;Pearson相关性分析探索AP病人血清LncRNA NEAT1、TLR2水平相关性及二者与病人APACHEⅡ评分的关系;受试者操作特征曲线(ROC曲线)分析血清LncRNA NEAT1、TLR2对AP病人重症的评估价值。结果与健康组比较,AP组血清LncRNA NEAT1(2.16±0.31比1.00±0.00)、TLR2水平[(6.43±1.05)µg/L比(0.59±0.24)µg/L]升高(P<0.05);与轻症组比较,重症组AP病人血清LncRNA NEAT1(2.31±0.33比1.98±0.27)、TLR2水平[(6.89±1.16)µg/L比(5.86±0.92)µg/L]升高(P<0.05);与预后良好组比较,预后不良组重症AP病人血清LncRNA NEAT1(2.43±0.36比2.14±0.27)、TLR2水平[(7.12±1.24)µg/L比(6.45±1.02)µg/L]升高(P<0.05);Pearson相关性分析结果表明,AP病人血清LncRNA NEAT1、TLR2呈正相关(r=0.65,P<0.05),二者与病人APACHEⅡ评分均呈正相关(r=0.50、0.52,P<0.05);ROC曲线结果显示,血清LncRNA NEAT1水平、TLR2单独及联合评估AP病人重症的曲线下面积(AUC)分别为0.73[95%CI:(0.64,0.82)]、0.75[95%CI:(0.67,0.84)]、0.88[95%CI:(0.82,0.94)],血清LncRNA NEAT1联合TLR2水平预测AP病人重症的AUC明显大于二者单独预测(P<0.05)。结论AP病人血清LncRNA NEAT1、TLR2表达水平显著升高,且与病人严重程度和预后有关,临床上检测LncRNA NEAT1、TLR2表达可能有助于AP病人的病情评估。

脑胶质瘤组织中长链非编码RNA核旁斑组装转录本1、微小RNA-149-5p的表达与临床病理特征和预后的相关性

目的 探讨脑胶质瘤组织中长链非编码RNA核旁斑组装转录本1(long non-coding RNA nuclear paraspeckle assembly transcript1,Lnc RNANEAT1)、微小RNA-149-5p(micro RNA-149-5p,mi R-149-5p)的表达与临床病理特征和预后的相关性。方法 选取2014年1月至2017年6月上海中医药大学附属曙光医院收治的103例脑胶质瘤患者为研究对象。分析脑胶质瘤组织与瘤旁组织中的LncRNA NEAT1、mi R-149-5p表达水平、LncRNA NEAT1与miR-149-5p表达水平的相关性以及Lnc RNA NEAT1、mi R-149-5p的表达水平与脑胶质瘤患者临床病理特征的关系。以脑胶质瘤组织中LncRNANEAT1表达量的平均值为分界线将患者分为LncRNA NEAT1高表达组(≥1.69,49例)和Lnc RNA NEAT1低表达组(<1.69,54例);以脑胶质瘤组织中miR-149-5p表达量的平均值为分界线将患者分为miR-149-5p高表达组(≥1.04,53例)和mi R-149-5p低表达组(<1.04,50例)。分析Lnc RNA NEAT1、mi R-149-5p表达水平与脑胶质瘤患者术后5年总生存率的关系。分析脑胶质瘤患者术后5年预后不良的影响因素。结果 脑胶质瘤组织中Lnc RNA NEAT1的表达量为1.69±0.33,显著高于瘤旁组织中的1.19±0.15(t=14.175,P<0.001);脑胶质瘤组织中miR-149-5p的表达量为1.04±0.28,显著低于瘤旁组织中的1.82±0.44(t=15.337,P<0.001)。Pearson相关性分析结果显示,脑胶质瘤组织中Lnc RNA NEAT1与mi R-149-5p的表达水平呈显著负相关(r=-0.728,P<0.001)。Lnc RNA NEAT1、mi R-149-5p的表达水平均与分化程度、WHO分级显著相关(P<0.05)。Kaplan-Meier生存曲线分析结果显示,Lnc RNANEAT1高表达组患者术后5年的总生存率显著低于LncRNA NEAT1低表达组(χ^(2)=16.601,P<0.001);miR-149-5p高表达组患者术后5年的总生存率显著高于miR-149-5p低表达组(χ2=19.768,P<0.001)。单因素分析结果显示,低分化、WHO分级为Ⅲ~Ⅳ级、LncRNANEAT1≥1.69、miR-149-5p≥1.04与脑胶质瘤患者预后不良显著相关(P<0.05);多因素Cox回归分析结果显示,低分化、WHO分级为Ⅲ~Ⅳ级、Lnc RNA NEAT1≥1.69为脑胶质瘤患者预后不良的独立危险因素(P<0.05),miR-149-5p≥1.04为脑胶质瘤患者预后不良的独立保护因素(P<0.05)。结论 脑胶质瘤组织中的Lnc RNA NEAT1高表达,miR-149-5p低表达,二者表达水平与分化程度、WHO分级密切相关,且均为脑胶质瘤患者术后5年预后不良的独立影响因素。

血清长链非编码RNA核富集转录体1及可溶性细胞间黏附分子1水平与冠状动脉慢血流现象的关系

目的 探讨血清长链非编码RNA核富集转录体1(NEAT1)及可溶性细胞间黏附分子1(sICAM-1)水平与冠状动脉慢血流现象(CSFP)的关系。方法 选择2020年8月至2022年2月在四川省遂宁市中心医院疑诊为冠状动脉粥样硬化性心脏病而行冠状动脉造影检查的患者,以其中造影未见明显病变的110例为研究对象,将心肌梗死溶栓试验(TIMI)血流分级2级及以下且无冠状动脉狭窄、诊断为CSFP的70例患者作为CSFP组,以TIMI血流分级3级且无冠状动脉明显狭窄者40例作为对照组。利用荧光定量聚合酶链反应法检测血清NEAT1表达,酶联免疫吸附试验法检测血清sICAM-1表达。比较2组NEAT1及sICAM-1表达差异。Pearson线性相关分析方法分析血清NEAT1及sICAM-1水平与冠状动脉TIMI平均血流帧数的相关性。采用多因素Logistic回归方法分析CSFP的危险因素。采用受试者工作特征曲线分析血清NEAT1、sICAM-1单独及联合检测对CSFP的诊断效能。结果 CSFP组血清NEAT1、sICAM-1表达水平高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,血清NEAT1、sICAM-1表达与冠状动脉TIMI平均血流帧数呈显著正相关(r=0.456、0.503,均P<0.001)。血清NEAT1与sICAM-1的表达水平呈显著正相关(r=0.541,P<0.001)。有吸烟史、血清NEAT1、sICAM-1水平升高是CSFP的独立危险因素,白蛋白升高是CSFP的保护因素(均P<0.05)。血清NEAT1、sICAM-1单独及联合检测诊断CSFP的曲线下面积分别为0.698(95%置信区间:0.591~0.736)、0.789(95%置信区间:0.734~0.832)、0.836(95%置信区间:0.802~0.885),联合检测诊断CSFP的曲线下面积显著高于血清NEAT1、sICAM-1单独检测(Z=2.061、P=0.039,Z=6.403、P<0.001)。结论 CSFP患者血清NEAT1、sICAM-1水平升高。有吸烟史、血清NEAT1、sICAM-1水平升高是CSFP的独立危险因素,白蛋白升高是CSFP的保护因素。血清NEAT1、sICAM-1联合检测对CSFP具有较高的诊断价值。

长链非编码RNA在急性肺损伤中的作用及分子调控机制研究进展

急性肺损伤(ALI)是临床上常见的危重症之一。长链非编码RNA(lncRNA)是一类长度超过200个核苷酸的非蛋白质编码RNA,在染色质形成、转录和转录后翻译等基因表达水平直接或间接参与ALI的发生发展。lncRNA核富集丰富转录物1、lncRNA HOX转录反义基因间RNA及lncRNA牛磺酸上调1等lncRNA可作为竞争性内源RNA,与miR-26a-5p、miR-17-5p及miR-34b-5p等微小RNA结合,调节Wnt1诱导的信号通路蛋白1、Rho关联含卷曲螺旋结合蛋白激酶1蛋白及自噬相关蛋白等下游相关蛋白的表达,参与ALI的发生发展。LncRNA可能通过调控DNA甲基化、组蛋白修饰,在表观遗传水平参与ALI的发生发展;L通过组装转录激活因子和抑制因子,调节白细胞介素6(IL-6)、IL-17、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3/9等蛋白质的转录,在转录水平参与ALI的发生发展;与多种RNA结合蛋白相互作用,在转录后水平调控ALI的发生发展。

长链非编码RNA前列腺癌相关转录物1在肿瘤进展中的作用

癌症是一种与多种基因突变、表观遗传变异、染色体易位、缺失和扩增相关的复杂疾病。非编码RNA(ncRNA)是一类新兴的转录本,由基因组编码,但大多数不会翻译成蛋白质。虽然没有翻译,但ncRNAs是各种细胞和生理功能的重要参与者。特别是长链非编码RNA(长度>200 nt的ncRNA)在调节染色质动力学、基因表达、生长、分化和发育中起着关键作用。现有的研究发现人类基因组编码超过28 000种不同的长链非编码RNA(lncRNA),然而其中有许多仍然尚未被发现及研究。现被发现的一些特定lncRNA表现出发育和组织特异性表达模式。

长链非编码RNA核富集转录本1通过靶向微小RNA-761对缺氧/复氧大鼠星形胶质细胞损伤的影响

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)核富集转录本1(NEAT1)对缺氧/复氧(H/R)胶质细胞损伤的影响,及其机制是否与调控微小RNA-761(miR-761)有关。方法构建大鼠皮质星形胶质细胞H/R损伤模型。分为对照组、H/R组、H/R+小干扰RNA阴性对照(si-NC)组、H/R+si-NEAT1组、H/R+miR-NC组、H/R+miR-761组、H/R+si-NEAT1+miRNA抑制物(anti-miR-NC)组、H/R+si-NEAT1+anti-miR-761组。Real-time PCR分析NEAT1和miR-761的mRNA表达。流式细胞术分析细胞凋亡。试剂盒检测细胞中丙二醛(MDA)含量以及超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的活性。双荧光素酶报告基因实验和Real-time PCR分析NEAT1和miR-761靶向关系。实验重复3次。结果与对照组比较,H/R组细胞凋亡率和MDA含量显著升高,SOD和CAT活性显著降低,NEAT1表达显著升高,miR-761表达显著降低(P<0.05)。与H/R+si-NC组比较,H/R+si-NEAT1组细胞凋亡率和MDA含量显著降低,SOD和CAT活性显著升高(P<0.05)。与H/R+miR-NC组比较,H/R+miR-761组细胞凋亡率和MDA含量显著降低,SOD和CAT活性显著升高(P<0.05)。MiR-761是NEAT1的靶基因,NEAT1负调控miR-761表达。与H/R+si-NEAT1+anti-miR-NC组比较,H/R+si-NEAT1+anti-miR-761组细胞凋亡率、MDA含量显著升高,SOD和CAT活性显著降低(P<0.05)。结论干扰NEAT1表达通过上调miR-761对H/R损伤的星形胶质细胞具有保护作用。

长链非编码RNA KCNQ1重叠转录物1对肺鳞癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响

目的 检测长链非编码RNA(lncRNA)KCNQ1重叠转录物1(KCNQ1OT1)在肺鳞癌组织中的表达及其对肺鳞癌NCI-H266细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法 采用实时定量荧光PCR(RT-PCR)检测KCNQ1OT1基因在肺鳞癌组织中的表达。构建KCNQ1OT1基因的小干扰RNA(siRNA-KCNQ1OT1)并转染NCI-H266细胞,RT-PCR检测转染效果;MTT法检测NCI-H266细胞的增殖活力;划痕实验检测NCI-H266细胞的迁移能力;Transwell小室检测NCI-H266细胞的侵袭能力。结果 KCNQ1OT1基因在肺鳞癌组织中呈显著高表达(P<0.05),KCNQ1OT1的高表达与肺鳞癌分化程度、肿瘤体积、淋巴结转移以及TNM分期相关。si-KCNQ1OT1的转染能够显著下调NCI-H266细胞中KCNQ1OT1的表达(P<0.05),沉默KCNQ1OT1能够显著抑制NCI-H266细胞的增殖活力、迁移能力、侵袭能力(P<0.05)。结论 KCNQ1OT1基因的表达上调与肺鳞癌的发生、发展相关,沉默KCNQ1OT1能够显著抑制NCI-H266细胞的增殖以及迁移和侵袭能力。

宫颈癌患者血清长链非编码RNA-核富集转录体1的表达情况及临床意义

目的探讨宫颈癌患者血清长链非编码RNA(lncRNA)-核富集转录体1(NEAT1)的表达情况及临床意义。方法分别纳入52例宫颈癌患者为宫颈癌组、68例宫颈上皮内瘤变(CIN)患者为CIN组,另纳入50例健康女性为对照组。采用实时荧光定量PCR技术检测3组研究对象血清lncRNA-NEAT1的相对表达水平。比较3组血清lncRNA-NEAT1的相对表达水平,并分析血清lncRNA-NEAT1相对表达水平与宫颈癌患者临床病理特征的关系。结果宫颈癌组及CIN组患者血清lncRNA-NEAT1的相对表达水平高于对照组,且宫颈癌组患者血清lncRNA-NEAT1相对表达水平高于CIN组(P<0.05)。宫颈癌患者血清lncRNA-NEAT1相对表达水平与宫颈癌分化程度有关(P<0.05)。结论宫颈癌患者血清中lncRNA-NEAT1呈明显高表达,其与肿瘤分化程度有关,或可成为宫颈癌的有效标志物。

长链非编码RNA NEAT1在妇产科疾病中的研究进展

核斑点旁组装转录1(NEAT1)是近年来发现的一种新型长链非编码RNA(lncRNA),由多发性内分泌肿瘤Ⅰ型转录位点转录生成。NEAT1可通过参与调节肿瘤细胞生长、迁移、侵袭、转移等,驱动肿瘤的发生和发展,是新型的诊断生物标志物和治疗靶标。本文对NEAT1在妇产科疾病中的研究进展进行综述,系统分析NEAT1在妇产科疾病发生发展中的作用机制,以期为妇产科疾病的病因机制研究及靶向治疗提供新的思路。

下调长链非编码RNA KCNQ1重叠转录物1表达对胃癌HGC-27细胞生长和顺铂敏感性的影响

背景胃癌(gastric cancer,GC)已成为威胁人类生命安全的恶性肿瘤之一,目前GC发生及发展的分子机制尚未完全阐明,长链非编码RNA(long-chain noncoding RNA,lncRNA)在肿瘤中异常表达并可能参与肿瘤发生及发展过程,但仍有部分lncRNA在GC发生及转移过程中的调控作用尚未阐明.目的探讨lncRNA KCNQ1重叠转录物1(KCNQ1 opposite strand/antisense transcript 1,KCNQ1OT1)对HGC-27细胞增殖、侵袭、迁移和顺铂敏感性的影响.方法将转染KCNQ1OT1-siRNA的HGC-27细胞作为KCNQ1OT1-siRNA组,转染阴性对照的HGC-27细胞作为NC-siRNA组,正常培养的细胞作为对照组.顺铂处理KCNQ1OT1-siRNA组、NC-siRNA组细胞后,采用细胞计数试剂盒法检测细胞活力并计算细胞的半数抑制浓度(half-maximal inhibitory concentration,IC50)值.采用实时荧光定量聚合酶链式反应、Transwell小室、流式细胞仪和免疫印迹法分别检测KCN Q1OT1表达水平、细胞增殖活力、侵袭与迁移、周期分布和细胞中上皮型钙黏蛋白(E-cadlherin)、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)、多药耐药关联蛋白1 (multidrug resistance associated protein1,MRP1)表达情况.结果与对照组比较,NC-siRNA组中各指标差异无统计学意义(P>0.05);与对照组或NC-siRNA组比较,KCNQ1OT1-siRNA组细胞中KCNQ1OT1表达水平、细胞在S期与G2/M期所占百分比和细胞增殖、侵袭、迁移能力以及细胞中N-cadherin、Vimentin蛋白表达水平均明显降低,而细胞在G0/G1期所占百分比和E-cadherin蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与NCsiRNA组比较,KCNQ1OT1-siRNA组P-gp蛋白水平显著降低(P<0.05),MRP1蛋白水平显著升高(P<0.05),IC50值明显降低(P<0.05).结论下调KCNQ1OT1表达可抑制HGC-27细胞增殖、侵袭、迁移并增强细胞对顺铂的敏感性.

长链非编码RNA富核转录本1和INK4位点反义非编码RNA在良恶性胸腔积液鉴别诊断中的临床价值

目的探讨长链非编码RNA富核转录本1(NEAT1)和INK4位点反义非编码RNA(ANRIL)在良恶性胸腔积液鉴别诊断中的临床价值。方法收集良性和恶性胸腔积液患者的胸腔积液标本各50例,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测胸腔积液中NEAT1和ANRIL的相对表达量,并依此构建受试者工作特征(ROC)曲线,获取曲线下面积(AUC)并确定临界(cut-off)值,评估NEAT1和ANRIL单独及联合检测对恶性胸腔积液的诊断效能,并与传统肿瘤标志物癌胚抗原(CEA)进行比较。比较不同临床特征恶性胸腔积液患者中NEAT1和ANRIL的相对表达量。结果NEAT1和ANRIL在恶性胸腔积液中的相对表达量均明显高于良性胸腔积液(P﹤0.01)。ROC曲线分析结果显示,NEAT1和ANRIL诊断恶性胸腔积液的AUC值分别为0.815(95%CI:0.732~0.897)和0.807(95%CI:0.723~0.890),均高于CEA诊断恶性胸腔积液的AUC值0.730(95%CI:0.629~0.831)。NEAT1和ANRIL联合检测诊断恶性胸腔积液的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确度均高于NEAT1、ANRIL和CEA单独诊断的结果。不同肿瘤组织来源、肺癌组织类型、性别、年龄、吸烟史、糖尿病或心血管病发生情况的恶性胸腔积液患者中NEAT1和ANRIL的相对表达量比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05)。结论NEAT1和ANRIL在恶性胸腔积液中的表达水平均高于良性胸腔积液。NEAT1和ANRIL表达水平的检测对良恶性胸腔积液的鉴别诊断具有一定的临床意义,有可能成为鉴别良恶性胸腔积液的生物标志物,联合检测NEAT1和ANRIL可进一步提高良恶性胸腔积液的诊断效能。

长链非编码RNA核旁斑组装转录本1在妇科恶性肿瘤中的研究进展

长链非编码RNA(lncRNA)在多种人类疾病的发生发展过程中发挥重要调控作用。其中,lncRNA核旁斑组装转录本1(NEAT1)定位于人染色体11q13.1,是一类参与核旁斑结构形成和维持的lncRNA,参与调节多种细胞生物过程和生理过程。lncRNA NEAT1在恶性肿瘤中的表达异常升高,通过各种途径发挥重要的调控作用,尤其是参与妇科恶性肿瘤的增殖、凋亡、迁移、侵袭、耐药和放射抵抗等生物学行为,可能是新的诊断、靶向治疗以及预测风险和临床预后的生物标志物。现探讨lncRNA NEAT1在妇科恶性肿瘤的表达和作用机制,为进一步了解妇科恶性肿瘤提供新思路。

长链非编码RNA膀胱癌相关转录本1、癌症易感性候选物9在恶性胸腔积液中的表达及诊断价值

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)膀胱癌相关转录本1(BLACAT1)、癌症易感性候选物9(CASC9)在恶性胸腔积液中的表达及诊断价值。方法选取96例胸腔积液患者,其中良、恶性胸腔积液患者各48例。采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测良恶性胸腔积液中BLACAT1和CASC9的相对表达量,比较不同临床特征肿瘤患者恶性胸腔积液中BLACAT1、CASC9的相对表达量。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,计算曲线下面积(AUC),评估癌胚抗原(CEA)、细胞角质蛋白19片段抗原21-1(CYFRA21-1)、BLACAT1、CASC9单独及联合检测对恶性胸腔积液的诊断效能。结果恶性胸腔积液中BLACAT1、CASC9的相对表达量均明显高于良性胸腔积液(P﹤0.01)。年龄﹥65岁肿瘤患者恶性胸腔积液中CASC9的相对表达量高于年龄≤65岁患者(P﹤0.05)。CEA单独检测诊断恶性胸腔积液的AUC为0.918(95%CI:0.863~0.974),高于BLACAT1、CASC9、CYFRA21-1,此时的灵敏度、特异度分别为87.2%、81.2%。BLACAT1+CASC9+CEA联合检测诊断恶性胸腔积液的AUC为0.938(95%CI:0.888~0.989),高于BLACAT1+CASC9、BLACAT1+CASC9+CYFRA21-1联合检测的AUC,此时的灵敏度、特异度分别为91.5%、81.2%。结论BLACAT1、CASC9在恶性胸腔积液中表达明显上调,对恶性胸腔积液具有较好的诊断效能,BLACAT1+CASC9与CEA联合检测能够进一步提高诊断效能。

长链非编码RNAβ分泌酶1反义转录物在七氟醚诱发老年大鼠认知功能下降中的作用

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)β分泌酶1反义转录物(BACE1-AS)在七氟醚诱发老年大鼠认知功能下降中的作用。方法SPF级健康雄性SD老年大鼠64只,18月龄,体重480~580 g。采用随机数字表法分为四组:对照组(C组)、七氟醚组(S组)、七氟醚+阴性对照质粒组(SN组)和七氟醚+BACE1-AS抑制剂(siRNA-BACE1-AS)组(ST组),每组16只。SN组和ST组分别侧脑室注射阴性对照质粒和siRNA-BACE1-AS,C组和S组注射等体积PBS溶液,注射后1 d C组吸入30%氧气6 h,S组、SN组和ST组吸入3.6%七氟醚与30%氧气的混合气体6 h。气体吸入后1 d,采用水迷宫实验测实验第1~5天逃避潜伏期和实验第6天穿越平台次数。水迷宫实验结束后1 h内处死大鼠,取海马组织,采用ELISA法检测海马组织TNF-α、IL-1β、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)浓度,可见分光光度计法检测海马组织caspase-3活性,Western blot法检测海马组织Bax、Bcl-2和BACE1蛋白含量,RT-qPCR法检测海马组织lncRNA BACE1-AS、miR-124和BACE1 mRNA表达量,TUNEL法测定海马组织神经细胞凋亡百分比,苏木素伊红染色法观察海马组织病理结构。结果与C组比较,S组、SN组和ST组水迷宫实验第3~5天逃避潜伏期明显延长(P<0.05),实验第6天穿越平台次数明显减少(P<0.05),海马组织TNF-α、IL-1β和MDA浓度、BACE1和Bax蛋白含量、lncRNA BACE1-AS和BACE1 mRNA表达量、凋亡细胞百分比明显升高(P<0.05),SOD浓度、Bcl-2蛋白含量、miR-124 mRNA表达量明显降低(P<0.05),caspase-3活性明显增强(P<0.05)。与S组比较,ST组水迷宫实验第3~5天逃避潜伏期明显缩短(P<0.05),实验第6天穿越平台次数明显增多(P<0.05),海马组织TNF-α、IL-1β和MDA浓度、BACE1和Bax蛋白含量、lncRNA BACE1-AS和BACE1 mRNA表达量、凋亡细胞百分比明显降低(P<0.05),SOD浓度、Bcl-2蛋白含量、miR-124 mRNA表达量明显升高(P<0.05),caspase-3活性明显减弱(P<0.05)。S组和SN组上述指标差异均无统计学意义。结论长链非编码RNAβ分泌酶1反义转录物参与七氟醚诱导老年大鼠认知功能下降,其机制与神经细胞炎症、氧化应激损伤、调控miR-124和BACE1表达和促进细胞凋亡有关。

长链非编码RNA在膜性肾病中的作用研究进展

在基因组非编码基因特异性的RNA分子表达产物中,长链非编码RNA(lncRNA)广泛参与代谢、免疫等关键病理生理过程,与肿瘤、心血管疾病、神经系统疾病等的发生发展密切相关。随着lncRNA种类数量的不断增加,其在肾脏疾病中的作用越来越受到关注。膜性肾病(MN)是我国常见的原发性肾小球肾炎,严重威胁人们的健康和生命。lncRNA,尤其是X非活性特异性转录物、浆细胞瘤变体易位1参与MN的发生发展。但目前关于lncRNA在MN中的作用机制研究较少,深入研究lncRNA在MN中的作用机制,可能为MN的诊断及治疗提供新的治疗靶点。

长链非编码RNA NEAT1调控miR-486/FOXO1轴参与椎间盘髓核细胞退变的机制研究

目的 :明确长链非编码RNA核富集转录本1(lncRNA NEAT1)、miR-486、FOXO1之间的相互关系,探讨三者在椎间盘退变(intervertebral disc degeneration,IDD)组织中的表达及相关性,阐明NEAT1通过调控miR-486/FOXO1轴参与IDD进展的具体机制。方法 :利用双荧光素酶报告基因、RNA结合蛋白免疫沉淀(RNA binding protein immunoprecipitation,RIP)试验等明确NEAT1、miR-486与叉头框蛋白O1(forkhead box protein O1,FOXO1)的生物学关系;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)、免疫印迹(Western blot)检测15例对照和30例IDD髓核组织中NEAT1、miR-486与FOXO1的表达,统计其与Pfirrmann分级的关系;采用白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)诱导法构建髓核细胞退变模型,NEAT1小干扰RNA(NEAT1 small interfering RNA,si-NEAT1)和过表达质粒转染髓核细胞构建细胞沉默或过表达模型;细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)和流式细胞术检测髓核细胞增殖和凋亡;RT-qPCR检测细胞NEAT1与miR-486表达;Western blot检测FOXO1及细胞外基质(extracellular matrix,ECM)中聚集蛋白聚糖(aggrecan)、二型胶原(collagenⅡ)、基质金属蛋白酶-13(matrix metalloproteinase,MMP-13)和含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样基质金属蛋白酶4 (a disintegrin-like and metalloproteinase with thrombospondin type l motifs 4,ADAMTS4)的表达。结果:NEAT1可通过碱基互补配对方式海绵吸附miR-486;miR-486靶向FOXO1的3′-非编码区(3′-UTR)抑制FOXO1蛋白表达。在IDD髓核组织中,NEAT1与FOXO1表达上调,与Pfirrmann分级呈显著正相关(P<0.001);而miR-486表达下调,与Pfirrmann分级呈显著负相关(P<0.001)。分子细胞学实验证实,IL-1β诱导髓核细胞退变后,NEAT1的过表达进一步促进了髓核细胞凋亡(P<0.01),加重了Aggrecan和CollagenⅡ的表达抑制(P<0.01),增强了MMP-13和ADAMTS4的表达(P<0.01);相比之下,NEAT1的沉默则逆转了髓核细胞凋亡(P<0.01),有效恢复了Aggrecan和CollagenⅡ表达(P<0.01),同时显著降低了MMP-13和ADAMTS4的表达(P<0.01)。结论:NEAT1调控miR-486/FOXO1分子轴并促进髓核细胞凋亡和ECM降解进而参与IDD病理机制过程。