血清长链非编码RNA肺癌相关转录本1、微RNA-514b-3p、甲胎蛋白检测对早期肝癌根治术后复发的预测价值分析

目的探究血清长链非编码RNA肺癌相关转录本1(lncRNA LUCAT1)、微RNA-514b-3p(miR-514b-3p)、甲胎蛋白(AFP)表达水平对预测早期肝细胞癌(HCC)病人根治术后复发的临床价值。方法选取2016年3月至2019年6月西安市中心医院诊治的130例Ⅰ~Ⅱ期HCC病人为研究对象,对所有早期HCC病人随访3年,按其行根治术后是否复发分为未复发组(n=92)和复发组(n=38)。检测并比较复发组、未复发组早期HCC病人血清lncRNA LUCAT1、miR-514b-3p、AFP水平;受试者操作特征曲线(ROC曲线)分析血清lncRNA LUCAT1、miR-514b-3p、AFP对早期HCC病人根治术后复发的预测价值;多因素logistic回归分析早期HCC病人根治术后复发的影响因素;Pearson法分析根治术后复发的早期HCC病人血清lncRNA LUCAT1表达水平与miR-514b-3p的关系。结果与未复发组[0.99±0.33、(17.42±3.67)μg/L、1.01±0.34]相比,复发组早期HCC病人血清lncRNA LUCAT1(1.87±0.63)、AFP水平(25.38±5.18)μg/L升高(P<0.05),miR-514b-3p水平(0.56±0.19)降低(P<0.05)。血清lncRNA LUCAT1、miR-514b-3p、AFP预测早期HCC病人根治术后复发的曲线下面积(AUC)分别为0.81、0.68、0.83,且血清lncRNA LUCAT1、AFP联合预测早期HCC病人根治术后复发的AUC为0.93,灵敏度为93.8%,特异度为84.8%。血清lncRNA LUCAT1、miR-514b-3p联合预测AFP阴性病人根治术后复发的AUC为0.91,高于二者单独预测(P<0.05);血清lncRNA LUCAT1、miR-514b-3p单独及联合预测AFP阳性病人根治术后复发的AUC与AFP单独预测相比,差异无统计学意义(P>0.05)。AFP、lncRNA LUCAT1是影响早期HCC病人根治术后复发的独立危险因素(P<0.05),miR-514b-3p是独立保护因素(P<0.05)。根治术后复发的早期HCC病人血清lncRNA LUCAT1水平与miR-514b-3p水平呈负相关(P<0.05),且lncRNA LUCAT1与miR-514b-3p存在结合位点。结论根治术后复发的早期HCC病人血清lncRNA LUCAT1水平较高,miR-514b-3p水平较低,血清lncRNA LUCAT1与AFP联合检测更有利于临床预测早期HCC病人根治术后复发情况,且血清lncRNA LUCAT1、miR-514b-3p联合预测AFP阴性病人根治术后复发的效能更高。

长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录本1在急性冠状动脉综合征患者外周血中的表达及临床意义

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)在急性冠状动脉综合征(ACS)患者外周血中的表达及临床意义。方法:连续选取2015年1月至2018年12月就诊于新疆医科大学第一附属医院心脏中心并确诊为ACS的患者159例为ACS组,另选取本院体检中心同时期进行健康体检、冠状动脉增强CT检查证实无冠心病的患者148例为对照组。提取两组患者的外周血单个核细胞,采用实时荧光定量多聚酶链式反应(qRT-PCR)法检测MALAT1的表达水平,并分析MALAT1表达水平与ACS的相关性及其对ACS的诊断预后预测价值。结果:与对照组相比,ACS组患者外周血MALAT1表达水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,外周血MALAT1表达水平与ACS独立相关(OR=1.193,95%CI:1.037~1.372,P=0.014)。ROC曲线分析显示,外周血MALAT1表达水平对于ACS的诊断具有一定的价值(AUC=0.664,95%CI:0.600~0.720)。Kaplan-Meier生存曲线分析显示,平均随访(558±223)d期间,外周血MALAT1高表达水平(≥0.816)ACS患者的MACE累积发生率高于外周血MALAT1低表达水平(<0.816)ACS患者(39.05%vs.30.61%,P<0.05)。结论:ACS患者外周血中MALAT1的表达水平显著升高,外周血MALAT1表达水平对于ACS的诊断及预后预测具有潜在的临床价值。

孕前超重/肥胖孕妇胎盘中长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录本1对母婴代谢的影响研究

背景孕前肥胖会给母体及胎儿带来一系列影响,其机制可能与母胎代谢异常有关,因此,探讨其机制对于改善胎儿预后至关重要。目的探讨孕前不同BMI孕妇胎盘中与肥胖及血糖代谢相关因子的改变。方法选取2019年在首都医科大学附属北京世纪坛医院分娩的单胎孕妇100例为研究对象,通过电子病历系统收集研究对象的临床资料,将孕妇按体质量分为孕前低体质量/正常体质量组(57例)和孕前超重/肥胖组(43例)。采用反转录-聚合酶链反应检测孕妇胎盘组织长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录本1(LncRNA MALAT1)、血液淀粉样抗原3(SAA3)、白介素6(IL-6)mRNA表达。结果研究对象年龄22~43岁,平均年龄(32.7±4.2)岁;其中初产妇61例,妊娠期糖尿病(GDM)患者21例,低体质量14例,正常体质量43例,超重26例,肥胖17例。孕前超重/肥胖组GDM比例、新生儿体质量高于孕前低体质量/正常体质量组,妊娠期增重低于孕前低体质量/正常体质量组(P<0.05)。孕前超重/肥胖组孕妇胎盘组织LncRNA MALAT1 mRNA表达量高于孕前低体质量/正常体质量组(P<0.05)。孕前肥胖孕妇胎盘组织中LncRNA MALAT1、SAA3、IL-6的mRNA表达量高于孕前正常体质量孕妇(P<0.05)。结论孕前过高的BMI对妊娠期母婴的影响更大,掩盖了妊娠期控制体质量增加的效果。在肥胖孕妇中,LncRNA MALAT1可能通过SAA3、IL-6调节葡萄糖和脂肪稳态,涉及炎症变化和氧化应激,从而影响胎儿代谢,值得进行更深入的探索。

长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录本1对巨噬细胞极化影响的研究

目的研究长链非编码RNA(lnc RNA)肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)对巨噬细胞极化的影响。方法采用佛波酯诱导人THP-1细胞分化为成熟的巨噬细胞,IFN-γ/LPS刺激诱导M1型极化,IL-4刺激诱导M2型极化,采用实时荧光定量PCR(RT-q PCR)检测各组细胞中MALAT1的表达。si RNA干扰巨噬细胞MALAT1表达,加入IL-4继续诱导M2型极化,RT-q PCR检测极化相关基因表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测TNF-α、IL-12、CCL22、IL-10的水平。si RNA干扰M2型巨噬细胞MALAT1表达,研究其对M2极化表型的影响。结果 MALAT1在M2型巨噬细胞中表达显著升高,M1向M2极化改变MALAT1表达升高,而M2向M1极化改变MALAT1表达降低。MALAT1干扰后,IL-4诱导的M2型巨噬细胞TNF-α、IL-12分泌升高,CCL22、IL-10分泌降低;CXCL10、CXCL11、HLA-DR表达升高,CCL17、CCL18、CD163表达降低。M2型巨噬细胞MALAT1干扰后,TNF-α、IL-12分泌升高,CCL22、IL-10分泌降低。结论 MALAT1参与调控巨噬细胞极化,干扰MALAT1表达有效抑制M2型巨噬细胞极化,促进M1型巨噬细胞极化。

长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)与乳腺癌淋巴结转移的关系

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)与乳腺癌淋巴结转移的关系。方法收集新疆医科大学附属肿瘤医院乳腺外科一病区2018年10-12月收治的乳腺癌住院患者20例,采用乳腺手术+前哨淋巴结活检术,病理诊断为乳腺浸润性癌,用前哨淋巴结(SLN)探测仪,术中冰冻示SLN有转移条件的患者对腋窝淋巴结(ALN)进行常规的清扫。获得同时满足SLN(+)及ALN(+)的乳腺癌患者12例,分别取SLN、ALN及乳腺癌组织、癌旁组织。采用Trizol法提取各组织的总RNA,采用分光光度仪定量计算RNA,进行RNA反转录,采用RT-PCR法检测lncRNA的表达,用2-△△ct法计算LncRNA MALAT1的相对表达量。结果各组织中MALAT1相对表达量有明显差异(P<0.05),MALAT1在SLN中的表达明显高于癌旁组织与癌组织(P<0.05)。乳腺癌组织中MALAT1的表达量明显高于癌旁组织和ALN组织(P<0.05)。MALAT1表达与淋巴结转移率呈正相关(r=0.784,P<0.05),但与远处转移和淋巴结转数目不相关。结论 MALAT1在乳腺前哨淋巴结及癌组织中有异常高表达,其检测对乳腺癌淋巴结转移有一定的价值。

长链非编码RNA前列腺癌相关转录物1在肿瘤进展中的作用

癌症是一种与多种基因突变、表观遗传变异、染色体易位、缺失和扩增相关的复杂疾病。非编码RNA(ncRNA)是一类新兴的转录本,由基因组编码,但大多数不会翻译成蛋白质。虽然没有翻译,但ncRNAs是各种细胞和生理功能的重要参与者。特别是长链非编码RNA(长度>200 nt的ncRNA)在调节染色质动力学、基因表达、生长、分化和发育中起着关键作用。现有的研究发现人类基因组编码超过28 000种不同的长链非编码RNA(lncRNA),然而其中有许多仍然尚未被发现及研究。现被发现的一些特定lncRNA表现出发育和组织特异性表达模式。

非小细胞肺癌组织中长链非编码RNA结肠癌相关转录子1的表达及临床意义

目的探讨非小细胞肺癌组织中长链非编码RNA结肠癌相关转录子1(lncRNA CCAT1)的表达及临床意义。方法收集2018年1月至2019年12月于我院就诊的100例非小细胞肺癌患者术后癌组织及癌旁正常组织,采用RT-qPCR法检测样本中lncRNA CCAT1的表达,并分析其与非小细胞肺癌发生进展的相关性。设计合成lncRNA CCAT1质粒,转染A549细胞,检测转染后lncRNA CCAT1的表达,采用流式细胞术分析转染细胞的凋亡情况,采用噻唑蓝(MTT)实验法检测转染细胞的增殖能力。结果非小细胞肺癌组织中lncRNA CCAT1的相对表达量为(4.13±0.79),明显高于癌旁正常组织(2.28±0.56),二者比较差异显著(P<0.05)。RT-qPCR结果提示,与转染空载体阴性对照组和未转染对照组比较,转染lncRNA CCAT1质粒的A549细胞中lncRNA CCAT1表达较低(P<0.05)。流式细胞术结果提示,与转染空载体阴性对照组和未转染对照组比较,转染48h后lncRNA CCAT1质粒的A549细胞凋亡比例明显较低(P<0.05)。MTT结果提示,与转染空载体阴性对照组和未转染对照组比较,转染48h、72h、96h后lncRNA CCAT1质粒的A549细胞增殖能力均较高(P<0.05)。不同临床分期、淋巴结转移与非小细胞肺癌组织中lncRNA CCAT1的表达存在差异(P<0.05)。结论 lncRNA CCAT1在非小细胞肺癌组织中呈高表达,其或将成为非小细胞肺癌的潜在治疗靶点。

长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录本1表达影响裸鼠骨肉瘤增殖的病理改变

目的探讨长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录本1(MALAT-1)表达对裸鼠皮下植入的骨肉瘤增殖和病理学形态的影响。方法使用慢病毒感染构建MALAT-1稳定低表达的骨肉瘤U2OS细胞系,qPCR法验证MALAT-1表达的改变。将12只4~6周龄的雄性裸鼠随机平均分为实验组和对照组,实验组皮下植入MALAT-1稳定低表达的骨肉瘤U2OS细胞,对照组皮下植入空载慢病毒处理的骨肉瘤U2OS细胞。分别在植入后第3、6、9、12、15、18、21天测定并记录两组裸鼠皮下骨肉瘤的体积。植瘤后第21天处死裸鼠,完整取出骨肉瘤称重,通过H-E染色观察骨肉瘤病理学形态,免疫组织化学染色观察增殖细胞核抗原(PCNA)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果与对照组相比,实验组的肿瘤生长更慢,植瘤21 d后的体积、质量均小于对照组(P均<0.01)。H-E染色结果显示,实验组肿瘤基质成分增多,肿瘤细胞密集程度降低。免疫组织化学染色结果显示,实验组PCNA阳性染色积分光密度(IOD)中位数为8531.03、阳性细胞占比为29.3%(1758/6000),对照组IOD中位数为27548.23、阳性细胞占比为56.5%(3392/6000),实验组PCNA表达程度较对照组下降,差异均有统计学意义(P均<0.05);实验组VEGF阳性染色IOD为18179.490±18299.433、阳性细胞占比为51.0%(3063/6000),对照组IOD为15850.632±9341.063、阳性细胞占比为50.0%(3001/6000),两组VEGF表达程度差异无统计学意义(P均>0.05)。结论抑制骨肉瘤中长链非编码RNA MALAT-1的表达可以延缓肿瘤的生长,降低肿瘤的侵袭性,促进实体瘤中肿瘤细胞的坏死。

长链非编码RNA转移相关肺腺癌转录本1及微小RNA-874对气道平滑肌细胞功能改善的调控

目的探讨长链非编码RNA转移相关肺腺癌转录本1(lncRNA MALAT1)与微小RNA-874(miR-874)在血小板衍生因子(PDGF)-BB处理的气道平滑肌细胞(ASMCs)中的表达与功能。方法采用PDGF-BB处理ASMCs建立哮喘细胞模型。将ASMCs分为正常培养的对照组(Control组)、PDGF-BB处理的PDGF-BB组[再根据处理时间分为PDGF-BB(6 h)组、PDGF-BB(12 h)组、PDGF-BB(28 h)组、PDGF-BB(24 h)组)]、PDGF-BB处理的转染sh-MALAT组(PDGF-BB+sh-MALAT组)、PDGF-BB处理的转染sh-NC组(PDGF-BB+sh-NC组)、PDGF-BB处理的转染miR-874 mimics组(PDGF-BB+miR-874 mimics组)、PDGF-BB处理的转染miR-NC组(PDGF-BB+miR-NC组)、PDGF-BB处理的共转染sh-NC与miR-NC组(PDGF-BB+sh-NC+miR-NC组)、PDGF-BB处理的共转染sh-MALAT1与miR-NC组(PDGF-BB+sh-MALAT1+miR-NC组)、PDGF-BB处理的共转染sh-MALAT1与miR-874 inhibitor组(PDGF-BB+sh-MALAT1+miR-874 inhibitor组)。将MALAT-WT或MALAT-MUT序列和miR-874 mimics或miR-NC共同转染入psi-CHECK2荧光素酶报告载体中,并将共转染的细胞分为miR-874 mimics+MALAT-WT组、miR-NC+MALAT-WT组、miR-874 mimics+MALAT-MUT组和miR-NC+MALAT-MUT组。采用RT-PCR检测MALAT1、miR-874表达水平,采用CCK-8法检测吸光度值代表细胞增殖能力,采用Transwell实验计算迁移细胞数代表细胞迁移能力,采用ELISA试验检测IL-1β、IL-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平。使用在线数据库starbase预测MALAT和miR-874之间的潜在结合位点,采用双荧光素酶报告系统检测各组ASMCs中荧光素酶活性。结果Control组、PDGF-BB(6 h)组、PDGF-BB(12 h)组、PDGF-BB(18 h)组及PDGF-BB(24 h)组细胞MALAT1相对水平依次升高,miR-874相对水平依次降低(P<0.05)。与Control组比较,PDGF-BB组、PDGF-BB+sh-NC组及PDGF-BB+sh-MALAT1组、PDGF-BB+miR-NC组及PDGF-BB+miR-874 mimics组细胞增殖能力、迁移能力及细胞上清液中IL-1β、IL-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平均明显增强;与PDGF-BB组比较,PDGF-BB+sh-MALAT1组及PDGF-BB+miR-874 mimics组细胞上述能力与指标水平均明显降低(P<0.05)。与miR-NC+MALAT1-WT组细胞比较,miR-874 mimics+MALAT1-WT组细胞荧光素酶活性显著降低;与Control组比较,转染sh-MALAT1后细胞miR-874表达水平明显升高(P<0.05)。与sh-NC+miR-NC组比较,PDGF-BB+sh-NC+miR-NC组、PDGF-BB+sh-MALAT1+miR-NC组和PDGF-BB+sh-MALAT1+miR-874 inhibitor组细胞增殖能力与迁移能力均明显升高;与PDGF-BB+sh-NC+miR-NC组比较,PDGF-BB+sh-MALAT1+miR-874 inhibitor组细胞上述能力均明显降低(P<0.05)。结论通过降低细胞增殖、迁移和炎症因子分泌可抑制MALAT1/miR-874轴表达,在PDGF-BB诱导的ASMCs中发挥保护作用。

长链非编码RNA膀胱癌相关转录因子1通过调控miR-5590-3p/SMAD5信号轴抑制喉鳞状细胞癌的增殖和侵袭

目的 探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)膀胱癌相关转录因子1(bladder cancer-associated transcript 1,BLACAT1)在喉鳞状细胞癌(简称喉鳞癌)中的表达及其对喉鳞癌细胞增殖、侵袭的影响及分子机制。方法 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测45例喉鳞癌组织和对应的癌旁组织中BLACAT1和miR-5590-3p的表达,分析BLACAT1表达与临床病理学参数的关系。将BLACAT1 siRNA、对照siRNA及阴性对照和miR-5590-3p模拟物转染喉鳞癌Hep-2细胞,采用qRT-PCR检测BLACAT1、miR-5590-3p和母亲DPP同源物5(果蝇)[mothers against DPP homolog 5(Drosophila),SMAD5]的表达,CCK-8和Transwell小室检测Hep-2细胞增殖和侵袭的变化,双荧光素酶报告基因检测miR-5590-3p与BLACAT1和SMAD5之间的相互作用。结果 喉鳞癌组织中BLACAT1的表达水平(8.483±0.995)显著高于癌旁组织(1.099±0.019),差异有统计学意义(t=5.765,P<0.001)。在有淋巴结转移的喉鳞癌组织中BLACAT1的表达水平(12.50±1.772)显著高于无淋巴结转移组织(6.268±1.997),差异有统计学意义(t=3.319,P=0.0018)。BLACAT1的表达与淋巴结转移和组织学分级密切相关(P<0.01)。抑制BLACAT1的表达能够显著抑制Hep-2细胞的增殖和侵袭能力。miR-5590-3p在喉鳞癌组织中的表达水平显著低于癌旁组织,且miR-5590-3p表达的上调能够显著抑制Hep-2细胞的增殖和侵袭能力。此外,BLACAT1和SMAD5是miR-5590-3p的直接作用靶点,下调BLACAT1表达能促进Hep-2细胞中miR-5590-3p的表达和抑制SMAD5的表达,而miR-5590-3p模拟物能抑制Hep-2细胞中SMAD5的表达。结论 BLACAT1/miR-5590-3p/SMAD5调控轴可能在喉鳞癌细胞的增殖和侵袭中发挥重要作用,因而可能成为喉鳞癌患者潜在的治疗靶点。

抑制长链非编码RNA MALAT1对糖脂毒性诱导的内皮细胞功能障碍的影响及可能机制

目的:探讨糖脂毒性环境中抑制长链非编码RNA(lnc RNA)人类肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)的表达水平对人脐静脉内皮细胞功能影响的分子机制。方法:用葡萄糖和棕榈酸处理人脐静脉内皮细胞,建立体外糖脂毒性内皮细胞模型,并分为对照组、高糖高脂组、高糖高脂对照组以及小干扰RNA(si-RNA)干预的高糖高脂+si-MALAT1组、高糖高脂+si-丝裂原活化蛋白激酶1(si-MAPK1)组。应用实时荧光定量PCR检测MALAT1、MAPK1的mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法检测自噬、线粒体融合分裂、凋亡、通路相关蛋白的表达水平;免疫荧光共聚焦定位检测自噬及溶酶体相关蛋白的荧光共定位情况;透射电镜观察内皮细胞中自噬溶酶体的数目;线粒体探针染色检测线粒体形态;免疫荧光检测细胞内活性氧(ROS)的产生;流式细胞仪检测各组细胞的凋亡;细胞增殖及划痕实验检测不同时间点各组细胞的增殖及迁移能力;血管形成试验检测各组细胞中新生血管数量。结果:与对照组相比,高糖高脂组、高糖高脂对照组的MALAT1 mRNA、磷酸化的丝裂原活化蛋白激酶1(p-MAPK1)的表达水平增加,磷酸化的哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)的表达水平下降,P均<0.05。与高糖高脂对照组相比,高糖高脂+si-MALAT1组微管相关蛋白1A/1B-轻链3(LC3)、螯合体1(p62)、ROS、剪切后活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleaved caspase-3)、BCL-2相关X蛋白(BAX)、p-MAPK1的表达水平均下降,线粒体融合蛋白视神经萎缩蛋白1(OPA1)、BCL-2、p-mTOR的表达水平均增加,P均<0.05;LC3和溶酶体相关膜蛋白2(LAMP2)蛋白的荧光共定位阳性颗粒增加(P均<0.01),溶酶体数目减少;细胞增殖、迁移、成管能力均增加(P均<0.01)。与高糖高脂对照组相比,高糖高脂+si-MAPK1组内皮细胞中p-MAPK1的表达下降,p-mTOR的表达上升(P均<0.01)。结论:抑制MALAT1表达,可降低糖脂毒性环境中线粒体的自噬水平,减少内皮细胞的凋亡及改善内皮细胞的功能,可能与调节MAPK1/mTOR信号通路有关。

长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录本1及其在肿瘤转移中的作用

肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)是一种长度约8 000 nt的长链非编码RNA(lncRNA),其在3'端构成"三螺旋"结构,保护自身免遭降解,在功能上一定程度取代了多聚腺苷酸[poly(A)]。MALAT1的表达受到TAR DNA结合蛋白43(TDP-43)、DiGeorge综合征危象区基因8蛋白(DGCR8)及后垂体激素等多个不同层面的调控。MALAT1介导包括丝氨酸/精氨酸(SR)蛋白向具有转录活性的基因位点聚集,从而控制选择性剪切;也可导致生长基因改变核内位置,有效激活转录单元。此外,癌细胞中MALAT1呈高水平表达,并与Wnt/β-连环蛋白信号通路、Bcl-2家族等密切关联,是癌细胞侵袭和转移的重要因素。同时,MALAT1通过MYB相关蛋白B(B-MYB)和异质核糖核蛋白C(hnRNP C)影响细胞周期和有丝分裂,造成癌细胞增殖。lncRNA无论作为癌症诊断和预后标志物,还是新型治疗靶点,都将为癌症的诊断和治疗带来新的突破口。

长链非编码RNA人肺腺癌转移相关转录1与结直肠癌发生发展的研究进展

人肺腺癌转移相关转录子1(MALAT1)作为长链非编码RNA(lncRNA)家族成员之一,在人结直肠癌组织中的表达较癌旁组织显著上升,与肿瘤的分期、淋巴结转移、浸润深度、总体生存期、无病生存期等密切相关。MALAT1作为竞争性内源性RNA与miR-508-5p、miR-324-3p、miR-126-5、miR-101-3p等相互作用,从而影响结直肠癌细胞的增殖、凋亡、迁移侵袭、上皮—间质转化、化疗耐药等。MALAT可能作为一种新的结直肠癌生物标志物,并有望作为诊断和预后指标。但MALAT1参与肿瘤发生发展的胞内信号转导途径、与其他分子相互作用的具体机制目前仍不十分清楚。

长链非编码RNA膀胱癌相关转录本1、癌症易感性候选物9在恶性胸腔积液中的表达及诊断价值

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)膀胱癌相关转录本1(BLACAT1)、癌症易感性候选物9(CASC9)在恶性胸腔积液中的表达及诊断价值。方法选取96例胸腔积液患者,其中良、恶性胸腔积液患者各48例。采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测良恶性胸腔积液中BLACAT1和CASC9的相对表达量,比较不同临床特征肿瘤患者恶性胸腔积液中BLACAT1、CASC9的相对表达量。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,计算曲线下面积(AUC),评估癌胚抗原(CEA)、细胞角质蛋白19片段抗原21-1(CYFRA21-1)、BLACAT1、CASC9单独及联合检测对恶性胸腔积液的诊断效能。结果恶性胸腔积液中BLACAT1、CASC9的相对表达量均明显高于良性胸腔积液(P﹤0.01)。年龄﹥65岁肿瘤患者恶性胸腔积液中CASC9的相对表达量高于年龄≤65岁患者(P﹤0.05)。CEA单独检测诊断恶性胸腔积液的AUC为0.918(95%CI:0.863~0.974),高于BLACAT1、CASC9、CYFRA21-1,此时的灵敏度、特异度分别为87.2%、81.2%。BLACAT1+CASC9+CEA联合检测诊断恶性胸腔积液的AUC为0.938(95%CI:0.888~0.989),高于BLACAT1+CASC9、BLACAT1+CASC9+CYFRA21-1联合检测的AUC,此时的灵敏度、特异度分别为91.5%、81.2%。结论BLACAT1、CASC9在恶性胸腔积液中表达明显上调,对恶性胸腔积液具有较好的诊断效能,BLACAT1+CASC9与CEA联合检测能够进一步提高诊断效能。

难治性肺炎支原体肺炎患儿血清长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录因子1和烟酰胺核苷酸反义转氢酶RNA1检测的临床意义

目的探讨难治性肺炎支原体肺炎(refractory Mycoplasma pneumoniae pneumonia,RMPP)患儿血清长链非编码核糖核酸(long non-coding ribonucleic acid,LncRNA)肺腺癌转移相关转录因子1(metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript 1,MALAT1)、烟酰胺核苷酸反义转氢酶RNA1(nicotinamide nucleotide transhydrogenase-antisense RNA1,NNT-AS1)检测的临床意义。方法选择2018年1月1日~2021年1月1日辽宁省健康产业集团阜新矿总医院收治的200例肺炎支原体肺炎患儿,其中43例为RMPP(RMPP组),157例为普通肺炎支原体肺炎(普通肺炎组),另选择100例健康儿童为对照组。检测血清LncRNA MALAT1和LncRNA NNT-AS1表达水平以及炎性因子[C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、降钙素原(procalcitonin,PCT)、白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)]水平。分析血清LncRNA MALAT1和LncRNA NNT-AS1表达水平与炎性因子水平的相关性。收集临床资料,分析影响RMPP发病的影响因素,比较不同疗效RMPP患儿血清LncRNA MALAT1和LncRNA NNT-AS1表达水平的差异。结果RMPP组、普通肺炎组和对照组血清LncRNA MALAT1(3.26±0.85,1.32±0.41和1.05±0.37)和LncRNA NNT-AS1(3.38±0.92,1.41±0.40和1.06±0.39)水平比较差异均有统计学意义(F=335.693,335.828,均P<0.05),血清CRP(45.24±2.01 mg/L,19.02±3.27 mg/L和3.26±0.77 mg/L),PCT(1.58±0.52μg/L,0.82±0.16μg/L和0.31±0.09μg/L),IL-8(42.77±8.84μg/L,26.35±5.91μg/L和13.02±3.79μg/L)和TNF-α(9.22±2.61μg/L,5.02±1.49μg/L和3.32±0.96μg/L)水平比较差异均有统计学意义(F=4207.164,457.187,410.300,214.875,均P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示血清LncRNA MALAT1,LncRNA NNT-AS1表达水平均与CRP,PCT,IL-8,TNF-α水平呈正相关(r=0.715~0.922,均P<0.05)。Logistic逐步回归分析结果显示肺大片实变影[OR(95%CI)=2.212(1.396~3.506)]、CRP高表达[OR(95%CI)=2.111(1.313~3.392)]、LncRNA MALAT1高表达[OR(95%CI)=1.826(1.189~2.805)]、LncRNA NNT-AS1高表达[OR(95%CI)=1.758(1.149~2.689)]是RMPP发病的危险因素(均P<0.05)。43例RMPP患儿治疗有效38例(有效组),无效5例(无效组),有效组血清LncRNA MALAT1(3.16±0.24)和LncRNA NNT-AS1(3.29±0.20)表达水平低于无效组(4.02±0.09,4.06±0.10),差异有统计学意义(t=7.869,8.406,均P<0.05)。结论LncRNA MALAT1和LncRNA NNT-AS1可能通过调节炎症反应参与RMPP发病,检测LncRNA MALAT1和LncRNA NNT-AS1表达可为RMPP治疗疗效评估提供参考。

长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录本1在恶性肿瘤中作用和应用的研究进展

长链非编码RNA(lncRNA)是内源性的长度超过200 nt的非编码RNA,其在细胞增殖、凋亡、代谢、迁移、血管生成、内皮功能障碍、内皮-间充质转化、细胞周期调节、细胞分化等诸多生物过程中发挥着重要作用。肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)是最早发现的lncRNA之一,本文主要从MALAT1的基本结构、功能作用及与肿瘤的关系几方面进行综述,总结了MALAT1在恶性肿瘤中作用和应用的研究进展。在肺癌患者中,MALAT1过表达与肺癌预后不良相关;在食管癌患者中,MALAT1可通过调节细胞周期增强食管癌的侵袭和转移能力;在宫颈癌患者中,MALAT1通过调节多种微小RNA促进肿瘤的增殖、迁移能力;目前MALAT1对乳腺癌的作用尚无定论,一些研究认为MALAT1促进乳腺癌细胞的增殖、转移能力,但另外一些研究认为MALAT1可以抑制乳腺癌的增殖、转移、侵袭能力。这些研究显示MALAT1有望成为有效的肿瘤生物标志物和未来的主要治疗靶点。

长链非编码RNA膀胱癌相关转录因子1通过微小RNA-142/自噬相关蛋白7调节自噬对喉癌细胞化疗耐药的影响

目的 探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)膀胱癌相关转录因子1(bladder cancer-associated transcript 1,BLACAT1)在喉鳞状细胞癌(laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC)细胞化疗耐药中的作用。方法 通过顺铂诱导喉癌细胞株Hep-2,建立顺铂耐药喉癌细胞模型(Hep-2/R)。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测细胞中lncRNA BLACAT1、微小RNA-142(microRNA-142,miR-142)和自噬相关蛋白7(autophagy-related protein 7,ATG7)mRNA的表达;Western blot检测细胞中ATG7、多药耐药蛋白1(multidrug resistance protein 1,MRP1)和微管相关蛋白1轻链3(microtubule associated protein 1 light chain 3,LC3)-II/LC3-I和Beclin 1的表达;MTT实验检测细胞活力。双荧光素酶报告基因实验分别检测BLACAT1和miR-142及miR-142和ATG7之间的靶向作用。结果 Hep-2/R组细胞中lncRNA BLACAT1表达水平(3.58±0.47)显著高于Hep-2组(1.00±0.06),差异有统计学意义(t=9.431,P<0.05)。Hep-2/R组细胞中miR-142表达水平(0.35±0.04)显著低于Hep-2组(1.00±0.05),差异有统计学意义(t=17.583,P<0.05)。与Vector组比较,pcDNA-BLACAT1组Hep-2细胞活力显著升高;与NC-siRNA组比较,BLACAT1-siRNA组Hep-2/R细胞活力显著降低。与WT-BLACAT1和NC mimic共转染组相比,WT-BLACAT1和miR-142共转染的细胞中萤光素酶活性显著降低(t=10.832,P<0.05);与Vector组比较,pcDNA-BLACAT1组细胞中miR-142表达显著降低;与WT-ATG7和NC mimic共转染组相比,WT-ATG7和miR-142共转染的细胞中萤光素酶活性显著降低(t=8.203,P<0.05);与NC mimic组比较,miR-142 mimic组细胞中ATG7蛋白水平均显著降低。使用自噬抑制剂3-MA处理Hep-2细胞后,pcDNA-BLACAT1显著促进自噬蛋白ATG7、LC3-II/LC3-I和Beclin 1的表达,miR-142 mimic处理后自噬蛋白水平降低。使用DDP处理Hep-2/R细胞后,BLACAT1-siRNA显著抑制Hep-2/R细胞活力和MRP1蛋白的表达,而miR-142 inhibitor逆转这一结果。结论 LncRNA BLACAT1通过miR-142/ATG7信号通路促进LSCC细胞的自噬和化疗耐药性。

长链非编码RNA COLCA1对肺癌细胞增殖、凋亡和自噬的影响

目的探讨长链非编码RNA结直肠癌相关基因1(COLCA1)对肺癌细胞增殖、凋亡和自噬水平的影响。方法实时荧光定量PCR(qPCR)检测正常人肺支气管上皮细胞BEAS-2B和人肺癌细胞(SPc-A1、H1650、A549、H1975)的COLCA1水平。选择H1975细胞作为细胞实验研究对象并分为3组:空白对照组、阴性对照组(转染空质粒pcDNA3.1)和过表达组(转染COLCA1过表达质粒pcDNA3.1-COLCA1)。CCK-8法测定细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡情况,qPCR和Western blotting检测BCL2凋亡调节因子(Bcl-2)、细胞周期蛋白1(CCND1)、半胱氨酸蛋白酶3(CASP3)和自噬相关基因微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)的水平;免疫荧光检测细胞中LC3B的表达变化。结果肺癌细胞较BEAS-2B细胞的COLCA1水平降低(P<0.05)。与其余两组比较,过表达组的凋亡率及COLCA1、LC3B和CASP3水平升高,而细胞活力及Bcl-2和CCND1水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。空白对照组和阴性对照组上述指标的差异无统计学意义(P>0.05)。结论在肺癌组织和细胞中异常低表达的COLCA1能够通过促进细胞增殖及减少细胞凋亡和自噬的发生来促进肺癌恶性表型的发展,其有望成为肺癌诊治的靶点。

长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录因子1表达水平与颅内动脉瘤血管内治疗后复发的关系研究

目的探讨颅内动脉瘤患者血管内栓塞治疗后长链非编码RNA(lncRNA)肺腺癌转移相关转录因子(MALAT)1表达水平与复发的关系。方法选取2016年3月至2018年9月在杭州市第九人民医院就诊的168例颅内动脉瘤患者作为研究对象,根据血管内栓塞治疗2年内颅内动脉瘤是否复发分为复发组(n=31)和未复发组(n=137)。采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测lncRNA MALAT1表达水平,并分析其与复发的关系。结果复发组术前和术后lncRNA MALAT1表达水平均高于未复发组,差异均有统计学意义(P<0.05);1∶1倾向性评分匹配后,复发组术后lncRNA MALAT1表达水平高于未复发组,差异有统计学意义(P<0.05)。logistic回归分析结果显示,动脉瘤颈、Raymond分级、术后lncRNA MALAT1均为颅内动脉瘤患者血管内栓塞治疗后复发的独立风险因素(P<0.05)。限制性立方样条拟合logistic回归分析结果显示,术后lncRNA MALAT1与颅内动脉瘤患者血管内栓塞治疗后复发呈线性关系。结论颅内动脉瘤患者血管内栓塞治疗后lncRNA MALAT1表达水平降低。术后低lncRNA MALAT1提示颅内动脉瘤患者血管内栓塞治疗后复发风险低。

长链非编码RNA结肠癌相关转录因子1对肺腺癌细胞增殖和凋亡的调控作用及其机制

目的分析长链非编码RNA(LncRNA)结肠癌相关转录因子1(CCAT1)对肺腺癌细胞增殖和凋亡的影响,并基于锌指E盒同源结合蛋白1(ZEB1)探讨其潜在作用机制。方法取对数生长期的肺腺癌A549细胞,分为对照组、si-NC组、si-CCAT1组、CCAT1-NC组和CCAT1组。除对照组外,其余组分别转染si-NC、si-CCAT1、CCAT1 mimic NC以及CCAT1 mimic,转染48 h后,检测细胞中LncRNA CCAT1表达量、细胞存活率、细胞凋亡率,以及ZEB1、上皮钙黏蛋白(E-cad)和神经钙黏蛋白(N-cad)表达量。通过Starbase软件预测LncRNA CCAT1与ZEB1之间的靶向关系,并应用双荧光素酶报告基因法验证LncRNA CCAT1与ZEB1的靶向关系。结果(1)与对照组和si-NC组比较,si-CCAT1组LncRNA CCAT1表达量、细胞存活率、ZEB1和N-cad蛋白表达量降低,细胞凋亡率、E-cad蛋白表达量升高(均P<0.05)。与对照组、CCAT1-NC组、si-CCAT1组比较,CCAT1组LncRNA CCAT1表达量、ZEB1和N-cad蛋白表达量升高,细胞凋亡率、E-cad蛋白表达量降低(均P<0.05);此外,CCAT1组细胞存活率高于si-CCAT1组(P<0.05)。(2)ZEB1与CCAT1存在高度互补序列;转染CCAT1 mimic可明显降低ZEB1野生型质粒的相对荧光素酶活性,对ZEB1突变型质粒的相对荧光素酶活性无影响。结论LncRNA CCAT1可以促进肺腺癌细胞增殖、抑制细胞凋亡,其可能是通过上调ZEB1蛋白表达发挥作用。