长链非编码RNA核富集转录本1对瘢痕成纤维细胞增殖、凋亡和迁移的影响

背景:已有研究阐明核富集转录本1(nuclear enriched abundant transcript 1,NEAT1)下调抑制了瘢痕成纤维细胞的进展,但具体机制尚不完全清楚。目的:探讨长链非编码RNA NEAT1调节miR-136-5p/泛素特异性蛋白酶4(ubiquitin specific protease 4,USP4)轴对瘢痕成纤维细胞生物学行为的影响。方法:将瘢痕成纤维细胞分为5组:si-NC组、空白对照组、si-NEAT1组、si-NEAT1+miR-136-5p inhibitor组、si-NEAT1+inhibitor-NC组,qRT-PCR检测NEAT1、miR-136-5p表达;CCK-8法及EDU染色检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞凋亡情况;划痕愈合实验检测细胞迁移情况;Western blot检测USP4、p27、Bax、基质金属蛋白酶9、α-平滑肌肌动蛋白、Ⅰ型胶原蛋白α1链蛋白表达;双荧光素酶实验检测NEAT1与miR-136-5p、miR-136-5p与USP4的关系。结果与结论:①与si-NC组比较,si-NEAT1组NEAT1表达、A450值、EDU阳性细胞百分比、划痕愈合率以及USP4、基质金属蛋白酶9、α-平滑肌肌动蛋白、Ⅰ型胶原蛋白α1链蛋白表达降低(P<0.05),miR-136-5p表达、细胞凋亡率及p27、Bax蛋白表达升高(P<0.05);②miR-136-5p inhibitor逆转了沉默NEAT1对瘢痕成纤维细胞生物学行为的影响;③miR-136-5p与NEAT1、miR-136-5p与USP4存在靶向调控关系。结果表明,沉默NEAT1可能通过调控miR-136-5p/USP4轴抑制瘢痕成纤维细胞的增殖和迁移,诱导其凋亡。

血清长链非编码RNA肺癌相关转录本1、微RNA-514b-3p、甲胎蛋白检测对早期肝癌根治术后复发的预测价值分析

目的探究血清长链非编码RNA肺癌相关转录本1(lncRNA LUCAT1)、微RNA-514b-3p(miR-514b-3p)、甲胎蛋白(AFP)表达水平对预测早期肝细胞癌(HCC)病人根治术后复发的临床价值。方法选取2016年3月至2019年6月西安市中心医院诊治的130例Ⅰ~Ⅱ期HCC病人为研究对象,对所有早期HCC病人随访3年,按其行根治术后是否复发分为未复发组(n=92)和复发组(n=38)。检测并比较复发组、未复发组早期HCC病人血清lncRNA LUCAT1、miR-514b-3p、AFP水平;受试者操作特征曲线(ROC曲线)分析血清lncRNA LUCAT1、miR-514b-3p、AFP对早期HCC病人根治术后复发的预测价值;多因素logistic回归分析早期HCC病人根治术后复发的影响因素;Pearson法分析根治术后复发的早期HCC病人血清lncRNA LUCAT1表达水平与miR-514b-3p的关系。结果与未复发组[0.99±0.33、(17.42±3.67)μg/L、1.01±0.34]相比,复发组早期HCC病人血清lncRNA LUCAT1(1.87±0.63)、AFP水平(25.38±5.18)μg/L升高(P<0.05),miR-514b-3p水平(0.56±0.19)降低(P<0.05)。血清lncRNA LUCAT1、miR-514b-3p、AFP预测早期HCC病人根治术后复发的曲线下面积(AUC)分别为0.81、0.68、0.83,且血清lncRNA LUCAT1、AFP联合预测早期HCC病人根治术后复发的AUC为0.93,灵敏度为93.8%,特异度为84.8%。血清lncRNA LUCAT1、miR-514b-3p联合预测AFP阴性病人根治术后复发的AUC为0.91,高于二者单独预测(P<0.05);血清lncRNA LUCAT1、miR-514b-3p单独及联合预测AFP阳性病人根治术后复发的AUC与AFP单独预测相比,差异无统计学意义(P>0.05)。AFP、lncRNA LUCAT1是影响早期HCC病人根治术后复发的独立危险因素(P<0.05),miR-514b-3p是独立保护因素(P<0.05)。根治术后复发的早期HCC病人血清lncRNA LUCAT1水平与miR-514b-3p水平呈负相关(P<0.05),且lncRNA LUCAT1与miR-514b-3p存在结合位点。结论根治术后复发的早期HCC病人血清lncRNA LUCAT1水平较高,miR-514b-3p水平较低,血清lncRNA LUCAT1与AFP联合检测更有利于临床预测早期HCC病人根治术后复发情况,且血清lncRNA LUCAT1、miR-514b-3p联合预测AFP阴性病人根治术后复发的效能更高。

长链非编码RNA核富集转录子1对胃癌SGC7901细胞迁移、侵袭、自噬的影响及机制研究

目的:分析长链非编码RNA(lncRNA)核富集转录子1(NEAT1)通过调控丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路对胃癌SGC7901细胞迁移、侵袭及自噬的影响。方法:人胃癌SGC7901细胞传代培养后分为对照组、过表达组和沉默组。对照组为不做任何处理,过表达组给予lncRNA NEAT1过表达质粒转染,沉默组给予lncRNA NEAT1沉默质粒转染。鉴定lncRNA NEAT1转染效率,分析沉默lncRNA NEAT1对人胃癌SGC7901细胞迁移、侵袭、自噬、MAPK信号通路蛋白表达量的影响。结果:与对照组比较,过表达组lncRNA NEAT1表达量、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、MMP-2、细胞外信号调节激酶(ERK)蛋白表达量增加,上皮性钙黏附素(E-cadherin)、Beclin-1、Ⅱ型/Ⅰ型微管相关蛋白1轻链3(LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ)、p38、c-Jun氨基末端激酶(JNK)蛋白表达量降低;沉默组lncRNA NEAT1表达量、MMP-9、MMP-2、ERK蛋白表达量降低,E-cadherin、Beclin-1、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、p38、JNK蛋白表达量增加(均P<0.05)。与过表达组比较,沉默组lncRNA NEAT1表达量、MMP-9、MMP-2、ERK蛋白表达量降低,E-cadherin、Beclin-1、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、p38、JNK蛋白表达量增加(均P<0.05)。结论:抑制lncRNA NEAT1可有效抑制胃癌细胞的迁移、侵袭、自噬,其机制可能与调控MAPK信号通路有关。

精神分裂症病人外周血长链非编码RNA核富集转录本1表达与临床症状相关性分析

目的探讨长链非编码RNA核富集转录本1(lncRNA NEAT1)在精神分裂症(sch)病人外周血中的表达与临床症状的相关性。方法选择2019年6月至2022年3月在菏泽市第三人民医院及河北医科大学第一医院精神科收治的sch病人73例作为观察对象(sch组),另选取同期在该两家医院体检人员(无精神病障碍史及无精神疾病家族史)68例作为对照组,采用阳性与阴性症状量表(PANSS)评估病人临床症状,采用蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评估病人认知功能,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测外周血单核细胞(PBMC)中lncRNA NEAT1表达水平,Spearman法分析lncRNA NEAT1与PANSS评分、MoCA评分的相关性,受试者操作特征(ROC)曲线分析lncRNA NEAT1水平对sch的诊断价值。结果对照组和sch组病人外周血lncRNA NEAT1表达水平分别为1.05±0.21、0.73±0.15,差异有统计学意义(P<0.001);ROC曲线分析显示:lncRNA NEAT1的曲线下面积为0.82,截断值为0.89,灵敏度为79.45%,特异度为73.93%;相关性分析表明:lncRNA NEAT1与PANSS量表总分和阴性症状量表评分呈负相关(r=−0.40、−0.49,P<0.05),且与MoCA量表中执行能力、注意力、延迟记忆和总分呈负相关(r=−0.38、−0.40、−0.40、−0.42,P<0.05)。结论lncRNA NEAT1在sch病人外周血中表达水平降低,与sch病人精神症状和认知功能有关,可能参与sch的发生发展。

脑胶质瘤组织中长链非编码RNA核旁斑组装转录本1、微小RNA-149-5p的表达与临床病理特征和预后的相关性

目的 探讨脑胶质瘤组织中长链非编码RNA核旁斑组装转录本1(long non-coding RNA nuclear paraspeckle assembly transcript1,Lnc RNANEAT1)、微小RNA-149-5p(micro RNA-149-5p,mi R-149-5p)的表达与临床病理特征和预后的相关性。方法 选取2014年1月至2017年6月上海中医药大学附属曙光医院收治的103例脑胶质瘤患者为研究对象。分析脑胶质瘤组织与瘤旁组织中的LncRNA NEAT1、mi R-149-5p表达水平、LncRNA NEAT1与miR-149-5p表达水平的相关性以及Lnc RNA NEAT1、mi R-149-5p的表达水平与脑胶质瘤患者临床病理特征的关系。以脑胶质瘤组织中LncRNANEAT1表达量的平均值为分界线将患者分为LncRNA NEAT1高表达组(≥1.69,49例)和Lnc RNA NEAT1低表达组(<1.69,54例);以脑胶质瘤组织中miR-149-5p表达量的平均值为分界线将患者分为miR-149-5p高表达组(≥1.04,53例)和mi R-149-5p低表达组(<1.04,50例)。分析Lnc RNA NEAT1、mi R-149-5p表达水平与脑胶质瘤患者术后5年总生存率的关系。分析脑胶质瘤患者术后5年预后不良的影响因素。结果 脑胶质瘤组织中Lnc RNA NEAT1的表达量为1.69±0.33,显著高于瘤旁组织中的1.19±0.15(t=14.175,P<0.001);脑胶质瘤组织中miR-149-5p的表达量为1.04±0.28,显著低于瘤旁组织中的1.82±0.44(t=15.337,P<0.001)。Pearson相关性分析结果显示,脑胶质瘤组织中Lnc RNA NEAT1与mi R-149-5p的表达水平呈显著负相关(r=-0.728,P<0.001)。Lnc RNA NEAT1、mi R-149-5p的表达水平均与分化程度、WHO分级显著相关(P<0.05)。Kaplan-Meier生存曲线分析结果显示,Lnc RNANEAT1高表达组患者术后5年的总生存率显著低于LncRNA NEAT1低表达组(χ^(2)=16.601,P<0.001);miR-149-5p高表达组患者术后5年的总生存率显著高于miR-149-5p低表达组(χ2=19.768,P<0.001)。单因素分析结果显示,低分化、WHO分级为Ⅲ~Ⅳ级、LncRNANEAT1≥1.69、miR-149-5p≥1.04与脑胶质瘤患者预后不良显著相关(P<0.05);多因素Cox回归分析结果显示,低分化、WHO分级为Ⅲ~Ⅳ级、Lnc RNA NEAT1≥1.69为脑胶质瘤患者预后不良的独立危险因素(P<0.05),miR-149-5p≥1.04为脑胶质瘤患者预后不良的独立保护因素(P<0.05)。结论 脑胶质瘤组织中的Lnc RNA NEAT1高表达,miR-149-5p低表达,二者表达水平与分化程度、WHO分级密切相关,且均为脑胶质瘤患者术后5年预后不良的独立影响因素。

长链非编码RNA-核富集转录本1对创伤性脑损伤小鼠的神经保护作用及其可能机制

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)核富集转录本1(NEAT1)的表达对创伤性脑损伤(TBI)后神经功能和神经元凋亡的影响及其可能机制。方法将90只C57BL/6J小鼠按随机数字表法分为假手术组、空白对照组、空载病毒1组和2组及NEAT1上调组和NEAT1下调组,每组15只。构建小鼠控制性皮层撞击(CCI)模型模拟TBI状态,并通过侧脑室内注射腺病毒载体对NEAT1水平进行干预。采用神经功能缺失评分(NSS)及Morris水迷宫试验评估空白对照组、NEAT1上调组和NEAT1下调组小鼠伤后1周内及14~21d时神经功能变化。Western blot检测空白对照组小鼠皮层含死亡结构域的p53诱导蛋白1(Pidd 1)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)-2、caspase-9和caspase-3在伤后6 h、1,3,7 d的表达。TUNEL法检测空白对照组、NEAT1上调组和NEAT1下调组伤后第3天小鼠神经元凋亡情况及免疫荧光半定量分析Pidd1的表达及定位。Western blot检测假手术组、空白对照组、空载病毒组、NEAT1上调组及NEAT1下调组小鼠伤后第3天Pidd1、caspase-2、细胞色素c(Cyt c)和caspase-3蛋白表达量。结果与空白对照组[(4.9±1.0)分]比较,NEAT1上调组伤后第1天NSS[(3.5±0.7)分]显著降低(P<0.01),NEAT1下调组[(5.0±1.5)分]显著升高(P<0.01)。Morris水迷宫试验显示,与空白对照组[(20.1±5.6)s]比较,伤后第19天NEAT1上调组寻找平台时间[(10.9±2.8)s]缩短(P<0.05),NEAT1下调组寻找平台时间[(30.7±6.2)s]延长(P<0.01)。Western blot提示,空白对照组Pidd1、caspase-2、caspase-9和caspase-3在伤后第3天表达明显升高(P<0.01)。通过TUNEL得到伤后第3天NEAT1上调组神经元凋亡率[(18.0±2.7)%]明显下降,而NEAT1下调组[(63.0±8.6)%]明显升高(P<0.01)。伤后第3天免疫荧光提示,与空白对照组比较,NEAT1上调组神经元胞质中Pidd1蛋白表达[(22.7±2.2)%]减少(P<0.01),而NEAT1下调组[(72.7±7.0)%]显著增加(P<0.01)。伤后第3天Western blot显示,与空白对照组比较,NEAT1上调组Pidd1(0.5±0.0)、capsase-2(0.3±0.0)、Cyt c(0.5±0.0)及caspase-3(0.4±0.0)的表达明显减少(P<0.01);而NEAT1下调组结果则完全相反。结论TBI后NEAT1通过调控Pidd1-caspase-2-Cyt c,减少caspase-3活化,抑制神经元凋亡,这可能是TBI后NEAT1保护神经功能的机制之一。

长链非编码RNA转移相关肺腺癌转录本1及微小RNA-874对气道平滑肌细胞功能改善的调控

目的探讨长链非编码RNA转移相关肺腺癌转录本1(lncRNA MALAT1)与微小RNA-874(miR-874)在血小板衍生因子(PDGF)-BB处理的气道平滑肌细胞(ASMCs)中的表达与功能。方法采用PDGF-BB处理ASMCs建立哮喘细胞模型。将ASMCs分为正常培养的对照组(Control组)、PDGF-BB处理的PDGF-BB组[再根据处理时间分为PDGF-BB(6 h)组、PDGF-BB(12 h)组、PDGF-BB(28 h)组、PDGF-BB(24 h)组)]、PDGF-BB处理的转染sh-MALAT组(PDGF-BB+sh-MALAT组)、PDGF-BB处理的转染sh-NC组(PDGF-BB+sh-NC组)、PDGF-BB处理的转染miR-874 mimics组(PDGF-BB+miR-874 mimics组)、PDGF-BB处理的转染miR-NC组(PDGF-BB+miR-NC组)、PDGF-BB处理的共转染sh-NC与miR-NC组(PDGF-BB+sh-NC+miR-NC组)、PDGF-BB处理的共转染sh-MALAT1与miR-NC组(PDGF-BB+sh-MALAT1+miR-NC组)、PDGF-BB处理的共转染sh-MALAT1与miR-874 inhibitor组(PDGF-BB+sh-MALAT1+miR-874 inhibitor组)。将MALAT-WT或MALAT-MUT序列和miR-874 mimics或miR-NC共同转染入psi-CHECK2荧光素酶报告载体中,并将共转染的细胞分为miR-874 mimics+MALAT-WT组、miR-NC+MALAT-WT组、miR-874 mimics+MALAT-MUT组和miR-NC+MALAT-MUT组。采用RT-PCR检测MALAT1、miR-874表达水平,采用CCK-8法检测吸光度值代表细胞增殖能力,采用Transwell实验计算迁移细胞数代表细胞迁移能力,采用ELISA试验检测IL-1β、IL-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平。使用在线数据库starbase预测MALAT和miR-874之间的潜在结合位点,采用双荧光素酶报告系统检测各组ASMCs中荧光素酶活性。结果Control组、PDGF-BB(6 h)组、PDGF-BB(12 h)组、PDGF-BB(18 h)组及PDGF-BB(24 h)组细胞MALAT1相对水平依次升高,miR-874相对水平依次降低(P<0.05)。与Control组比较,PDGF-BB组、PDGF-BB+sh-NC组及PDGF-BB+sh-MALAT1组、PDGF-BB+miR-NC组及PDGF-BB+miR-874 mimics组细胞增殖能力、迁移能力及细胞上清液中IL-1β、IL-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平均明显增强;与PDGF-BB组比较,PDGF-BB+sh-MALAT1组及PDGF-BB+miR-874 mimics组细胞上述能力与指标水平均明显降低(P<0.05)。与miR-NC+MALAT1-WT组细胞比较,miR-874 mimics+MALAT1-WT组细胞荧光素酶活性显著降低;与Control组比较,转染sh-MALAT1后细胞miR-874表达水平明显升高(P<0.05)。与sh-NC+miR-NC组比较,PDGF-BB+sh-NC+miR-NC组、PDGF-BB+sh-MALAT1+miR-NC组和PDGF-BB+sh-MALAT1+miR-874 inhibitor组细胞增殖能力与迁移能力均明显升高;与PDGF-BB+sh-NC+miR-NC组比较,PDGF-BB+sh-MALAT1+miR-874 inhibitor组细胞上述能力均明显降低(P<0.05)。结论通过降低细胞增殖、迁移和炎症因子分泌可抑制MALAT1/miR-874轴表达,在PDGF-BB诱导的ASMCs中发挥保护作用。

急性胰腺炎病人血清长链非编码RNA核富集转录体1、Toll样受体2表达变化及临床意义研究

目的探讨急性胰腺炎(AP)病人血清长链非编码RNA核富集转录体1(LncRNA NETA1)、Toll样受体2(TLR2)表达及临床意义。方法选取2017年5月至2020年12月石家庄平安医院收治的AP病人125例为研究对象,根据急性生理学和慢性健康状况评价Ⅱ(APACHEⅡ)对AP病人进行评分,并将病人分为轻症组56例,重症组69例;根据住院期间重症组AP病人预后情况,将病人分为预后不良25例,预后良好44例。同期选取该院健康体检者130例为健康组。实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测血清LncRNA NETA1水平,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清TLR2水平;Pearson相关性分析探索AP病人血清LncRNA NEAT1、TLR2水平相关性及二者与病人APACHEⅡ评分的关系;受试者操作特征曲线(ROC曲线)分析血清LncRNA NEAT1、TLR2对AP病人重症的评估价值。结果与健康组比较,AP组血清LncRNA NEAT1(2.16±0.31比1.00±0.00)、TLR2水平[(6.43±1.05)µg/L比(0.59±0.24)µg/L]升高(P<0.05);与轻症组比较,重症组AP病人血清LncRNA NEAT1(2.31±0.33比1.98±0.27)、TLR2水平[(6.89±1.16)µg/L比(5.86±0.92)µg/L]升高(P<0.05);与预后良好组比较,预后不良组重症AP病人血清LncRNA NEAT1(2.43±0.36比2.14±0.27)、TLR2水平[(7.12±1.24)µg/L比(6.45±1.02)µg/L]升高(P<0.05);Pearson相关性分析结果表明,AP病人血清LncRNA NEAT1、TLR2呈正相关(r=0.65,P<0.05),二者与病人APACHEⅡ评分均呈正相关(r=0.50、0.52,P<0.05);ROC曲线结果显示,血清LncRNA NEAT1水平、TLR2单独及联合评估AP病人重症的曲线下面积(AUC)分别为0.73[95%CI:(0.64,0.82)]、0.75[95%CI:(0.67,0.84)]、0.88[95%CI:(0.82,0.94)],血清LncRNA NEAT1联合TLR2水平预测AP病人重症的AUC明显大于二者单独预测(P<0.05)。结论AP病人血清LncRNA NEAT1、TLR2表达水平显著升高,且与病人严重程度和预后有关,临床上检测LncRNA NEAT1、TLR2表达可能有助于AP病人的病情评估。

子宫内膜癌组织中长链非编码RNA核富含丰富的转录本1、微小RNA-29a的表达及临床意义

目的探讨子宫内膜癌(EC)组织中长链非编码RNA(LncRNA)核富含丰富的转录本1(NEAT1)、微小RNA(miR)-29a的表达及临床意义。方法选取2017年7月至2022年6月在郑州人民医院诊治的EC患者45例,检测癌组织和癌旁组织LncRNA NEAT1、miR-29a表达,并分析癌组织中LncRNA NEAT1、miR-29a表达与临床病理特征的关系,以及LncRNA NEAT1、miR-29a表达对EC的诊断价值。结果EC患者癌组织LncRNA NEAT1表达明显高于癌旁组织(t=7.951,P<0.001),miR-29a表达与癌旁组织比较明显较低(t=5.616,P<0.001)。肿瘤大小≥2cm、临床分期Ⅲ~Ⅳ期EC患者癌组织中LncRNA NEAT1表达高于肿瘤大小<2cm、临床分期Ⅰ~Ⅱ期EC(t=2.251,P=0.030;t=2.273,P=0.028);临床分期Ⅰ~Ⅱ期EC患者癌组织中miR-29a表达高于临床分期Ⅲ~Ⅳ期患者(t=3.091,P=0.003)。ROC曲线分析得出,LncRNA NEAT1、miR-29a、两者联合诊断测EC的AUC分别为0.861、0.700、0.934。在最佳临界值点对应的敏感性、特异性分别为:LncRNA NEAT1为62.2%、100.0%,miR-29a为100.0%、48.9%,两者联合为100.0%、75.6%。结论EC癌组织LncRNA NEAT1呈高表达,miR-29a呈低表达,均和临床分期有关,且前者还与肿瘤大小有关,LncRNA NEAT1、miR-29a联合可为诊断EC提供参考。

血清长链非编码RNA核富集转录体1及可溶性细胞间黏附分子1水平与冠状动脉慢血流现象的关系

目的 探讨血清长链非编码RNA核富集转录体1(NEAT1)及可溶性细胞间黏附分子1(sICAM-1)水平与冠状动脉慢血流现象(CSFP)的关系。方法 选择2020年8月至2022年2月在四川省遂宁市中心医院疑诊为冠状动脉粥样硬化性心脏病而行冠状动脉造影检查的患者,以其中造影未见明显病变的110例为研究对象,将心肌梗死溶栓试验(TIMI)血流分级2级及以下且无冠状动脉狭窄、诊断为CSFP的70例患者作为CSFP组,以TIMI血流分级3级且无冠状动脉明显狭窄者40例作为对照组。利用荧光定量聚合酶链反应法检测血清NEAT1表达,酶联免疫吸附试验法检测血清sICAM-1表达。比较2组NEAT1及sICAM-1表达差异。Pearson线性相关分析方法分析血清NEAT1及sICAM-1水平与冠状动脉TIMI平均血流帧数的相关性。采用多因素Logistic回归方法分析CSFP的危险因素。采用受试者工作特征曲线分析血清NEAT1、sICAM-1单独及联合检测对CSFP的诊断效能。结果 CSFP组血清NEAT1、sICAM-1表达水平高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,血清NEAT1、sICAM-1表达与冠状动脉TIMI平均血流帧数呈显著正相关(r=0.456、0.503,均P<0.001)。血清NEAT1与sICAM-1的表达水平呈显著正相关(r=0.541,P<0.001)。有吸烟史、血清NEAT1、sICAM-1水平升高是CSFP的独立危险因素,白蛋白升高是CSFP的保护因素(均P<0.05)。血清NEAT1、sICAM-1单独及联合检测诊断CSFP的曲线下面积分别为0.698(95%置信区间:0.591~0.736)、0.789(95%置信区间:0.734~0.832)、0.836(95%置信区间:0.802~0.885),联合检测诊断CSFP的曲线下面积显著高于血清NEAT1、sICAM-1单独检测(Z=2.061、P=0.039,Z=6.403、P<0.001)。结论 CSFP患者血清NEAT1、sICAM-1水平升高。有吸烟史、血清NEAT1、sICAM-1水平升高是CSFP的独立危险因素,白蛋白升高是CSFP的保护因素。血清NEAT1、sICAM-1联合检测对CSFP具有较高的诊断价值。

长链非编码RNA核富集转录本1通过靶向微小RNA-761对缺氧/复氧大鼠星形胶质细胞损伤的影响

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)核富集转录本1(NEAT1)对缺氧/复氧(H/R)胶质细胞损伤的影响,及其机制是否与调控微小RNA-761(miR-761)有关。方法构建大鼠皮质星形胶质细胞H/R损伤模型。分为对照组、H/R组、H/R+小干扰RNA阴性对照(si-NC)组、H/R+si-NEAT1组、H/R+miR-NC组、H/R+miR-761组、H/R+si-NEAT1+miRNA抑制物(anti-miR-NC)组、H/R+si-NEAT1+anti-miR-761组。Real-time PCR分析NEAT1和miR-761的mRNA表达。流式细胞术分析细胞凋亡。试剂盒检测细胞中丙二醛(MDA)含量以及超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的活性。双荧光素酶报告基因实验和Real-time PCR分析NEAT1和miR-761靶向关系。实验重复3次。结果与对照组比较,H/R组细胞凋亡率和MDA含量显著升高,SOD和CAT活性显著降低,NEAT1表达显著升高,miR-761表达显著降低(P<0.05)。与H/R+si-NC组比较,H/R+si-NEAT1组细胞凋亡率和MDA含量显著降低,SOD和CAT活性显著升高(P<0.05)。与H/R+miR-NC组比较,H/R+miR-761组细胞凋亡率和MDA含量显著降低,SOD和CAT活性显著升高(P<0.05)。MiR-761是NEAT1的靶基因,NEAT1负调控miR-761表达。与H/R+si-NEAT1+anti-miR-NC组比较,H/R+si-NEAT1+anti-miR-761组细胞凋亡率、MDA含量显著升高,SOD和CAT活性显著降低(P<0.05)。结论干扰NEAT1表达通过上调miR-761对H/R损伤的星形胶质细胞具有保护作用。

宫颈癌患者血清长链非编码RNA-核富集转录体1的表达情况及临床意义

目的探讨宫颈癌患者血清长链非编码RNA(lncRNA)-核富集转录体1(NEAT1)的表达情况及临床意义。方法分别纳入52例宫颈癌患者为宫颈癌组、68例宫颈上皮内瘤变(CIN)患者为CIN组,另纳入50例健康女性为对照组。采用实时荧光定量PCR技术检测3组研究对象血清lncRNA-NEAT1的相对表达水平。比较3组血清lncRNA-NEAT1的相对表达水平,并分析血清lncRNA-NEAT1相对表达水平与宫颈癌患者临床病理特征的关系。结果宫颈癌组及CIN组患者血清lncRNA-NEAT1的相对表达水平高于对照组,且宫颈癌组患者血清lncRNA-NEAT1相对表达水平高于CIN组(P<0.05)。宫颈癌患者血清lncRNA-NEAT1相对表达水平与宫颈癌分化程度有关(P<0.05)。结论宫颈癌患者血清中lncRNA-NEAT1呈明显高表达,其与肿瘤分化程度有关,或可成为宫颈癌的有效标志物。

长链非编码RNA在急性肺损伤中的作用及分子调控机制研究进展

急性肺损伤(ALI)是临床上常见的危重症之一。长链非编码RNA(lncRNA)是一类长度超过200个核苷酸的非蛋白质编码RNA,在染色质形成、转录和转录后翻译等基因表达水平直接或间接参与ALI的发生发展。lncRNA核富集丰富转录物1、lncRNA HOX转录反义基因间RNA及lncRNA牛磺酸上调1等lncRNA可作为竞争性内源RNA,与miR-26a-5p、miR-17-5p及miR-34b-5p等微小RNA结合,调节Wnt1诱导的信号通路蛋白1、Rho关联含卷曲螺旋结合蛋白激酶1蛋白及自噬相关蛋白等下游相关蛋白的表达,参与ALI的发生发展。LncRNA可能通过调控DNA甲基化、组蛋白修饰,在表观遗传水平参与ALI的发生发展;L通过组装转录激活因子和抑制因子,调节白细胞介素6(IL-6)、IL-17、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3/9等蛋白质的转录,在转录水平参与ALI的发生发展;与多种RNA结合蛋白相互作用,在转录后水平调控ALI的发生发展。

长链非编码RNA NEAT1在妇产科疾病中的研究进展

核斑点旁组装转录1(NEAT1)是近年来发现的一种新型长链非编码RNA(lncRNA),由多发性内分泌肿瘤Ⅰ型转录位点转录生成。NEAT1可通过参与调节肿瘤细胞生长、迁移、侵袭、转移等,驱动肿瘤的发生和发展,是新型的诊断生物标志物和治疗靶标。本文对NEAT1在妇产科疾病中的研究进展进行综述,系统分析NEAT1在妇产科疾病发生发展中的作用机制,以期为妇产科疾病的病因机制研究及靶向治疗提供新的思路。

长链非编码RNA核旁斑组装转录本1在妇科恶性肿瘤中的研究进展

长链非编码RNA(lncRNA)在多种人类疾病的发生发展过程中发挥重要调控作用。其中,lncRNA核旁斑组装转录本1(NEAT1)定位于人染色体11q13.1,是一类参与核旁斑结构形成和维持的lncRNA,参与调节多种细胞生物过程和生理过程。lncRNA NEAT1在恶性肿瘤中的表达异常升高,通过各种途径发挥重要的调控作用,尤其是参与妇科恶性肿瘤的增殖、凋亡、迁移、侵袭、耐药和放射抵抗等生物学行为,可能是新的诊断、靶向治疗以及预测风险和临床预后的生物标志物。现探讨lncRNA NEAT1在妇科恶性肿瘤的表达和作用机制,为进一步了解妇科恶性肿瘤提供新思路。

长链非编码RNA富核转录本1和INK4位点反义非编码RNA在良恶性胸腔积液鉴别诊断中的临床价值

目的探讨长链非编码RNA富核转录本1(NEAT1)和INK4位点反义非编码RNA(ANRIL)在良恶性胸腔积液鉴别诊断中的临床价值。方法收集良性和恶性胸腔积液患者的胸腔积液标本各50例,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测胸腔积液中NEAT1和ANRIL的相对表达量,并依此构建受试者工作特征(ROC)曲线,获取曲线下面积(AUC)并确定临界(cut-off)值,评估NEAT1和ANRIL单独及联合检测对恶性胸腔积液的诊断效能,并与传统肿瘤标志物癌胚抗原(CEA)进行比较。比较不同临床特征恶性胸腔积液患者中NEAT1和ANRIL的相对表达量。结果NEAT1和ANRIL在恶性胸腔积液中的相对表达量均明显高于良性胸腔积液(P﹤0.01)。ROC曲线分析结果显示,NEAT1和ANRIL诊断恶性胸腔积液的AUC值分别为0.815(95%CI:0.732~0.897)和0.807(95%CI:0.723~0.890),均高于CEA诊断恶性胸腔积液的AUC值0.730(95%CI:0.629~0.831)。NEAT1和ANRIL联合检测诊断恶性胸腔积液的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确度均高于NEAT1、ANRIL和CEA单独诊断的结果。不同肿瘤组织来源、肺癌组织类型、性别、年龄、吸烟史、糖尿病或心血管病发生情况的恶性胸腔积液患者中NEAT1和ANRIL的相对表达量比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05)。结论NEAT1和ANRIL在恶性胸腔积液中的表达水平均高于良性胸腔积液。NEAT1和ANRIL表达水平的检测对良恶性胸腔积液的鉴别诊断具有一定的临床意义,有可能成为鉴别良恶性胸腔积液的生物标志物,联合检测NEAT1和ANRIL可进一步提高良恶性胸腔积液的诊断效能。

长链非编码RNA-肺腺癌转移相关转录因子1联合胃蛋白酶原对早期胃癌的诊断价值

目的检测早期胃癌病人血清中长链非编码RNA-肺腺癌转移相关转录因子1(lncRNA MALAT1)、胃蛋白酶原Ⅰ、Ⅱ(PGⅠ、PGⅡ)水平,并探讨lncRNA MALAT1、PGⅠ、PGⅡ在胃癌早期诊断中的价值。方法选取2017年3月至2019年4月入住荆门市中医医院并经胃镜及病理组织学检查最终确诊为胃癌的病人96例,其中TNM分期Ⅰ~Ⅱ病人67例(早期胃癌组),Ⅲ~Ⅳ病人29例(进展期胃癌组);同期选取82例健康体检者作为对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测血清中lncRNA MALAT1水平、胶乳免疫比浊法检测血清PGⅠ和PGⅡ水平;分析不同临床特征胃癌病人血清lncRNA MALAT1、PGⅠ、PGⅡ水平及lncRNA MALAT1与PGⅠ、PGⅡ水平的相关性;分析lncRNA MALAT1、PGⅠ、PGⅡ对早期胃癌的诊断价值。结果不同肿瘤分化、肿瘤大小、阳性淋巴结百分比、神经浸润、血管侵犯的胃癌病人血清lncRNA MALAT1、PGⅠ、PGⅡ水平比较,均差异无统计学意义(P>0.05);三组性别、年龄、体质量指数、饮酒比例、吸烟比例等比较,均差异无统计学意义(P>0.05);进展期胃癌组血清中lncRNA MALAT1、PGⅡ水平显著高于早期胃癌组和对照组,PGⅠ水平显著低于早期胃癌组和对照组(P<0.05);早期胃癌组血清中lncRNA MALAT1、PGⅡ水平显著高于对照组,PGⅠ水平显著低于对照组(P<0.05);胃癌病人血清中lncRNA MALAT1水平与PGⅡ呈正相关,与PGⅠ呈负相关(P<0.05);lncRNA MALAT1、PGⅠ、PGⅡ诊断早期胃癌病人的AUC分别为0.770、0.845、0.808,截断值分别为103.026、52.632、20.361μg/L,此时的特异度分别为89.0%、80.5%、65.9%,灵敏度分别为63.5%、75.0%、83.3%;lncRNA MALAT1、PGⅠ、PGⅡ联合诊断早期胃癌病人的AUC为0.888,特异度为81.3%,灵敏度为85.4%。结论lncRNA MALAT1、PGⅠ、PGⅡ可能参与胃癌的发病机制,三者联合检测对早期胃癌的诊断有较好的预警价值。

长链非编码RNA膀胱癌相关转录因子1通过微小RNA-142/自噬相关蛋白7调节自噬对喉癌细胞化疗耐药的影响

目的 探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)膀胱癌相关转录因子1(bladder cancer-associated transcript 1,BLACAT1)在喉鳞状细胞癌(laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC)细胞化疗耐药中的作用。方法 通过顺铂诱导喉癌细胞株Hep-2,建立顺铂耐药喉癌细胞模型(Hep-2/R)。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测细胞中lncRNA BLACAT1、微小RNA-142(microRNA-142,miR-142)和自噬相关蛋白7(autophagy-related protein 7,ATG7)mRNA的表达;Western blot检测细胞中ATG7、多药耐药蛋白1(multidrug resistance protein 1,MRP1)和微管相关蛋白1轻链3(microtubule associated protein 1 light chain 3,LC3)-II/LC3-I和Beclin 1的表达;MTT实验检测细胞活力。双荧光素酶报告基因实验分别检测BLACAT1和miR-142及miR-142和ATG7之间的靶向作用。结果 Hep-2/R组细胞中lncRNA BLACAT1表达水平(3.58±0.47)显著高于Hep-2组(1.00±0.06),差异有统计学意义(t=9.431,P<0.05)。Hep-2/R组细胞中miR-142表达水平(0.35±0.04)显著低于Hep-2组(1.00±0.05),差异有统计学意义(t=17.583,P<0.05)。与Vector组比较,pcDNA-BLACAT1组Hep-2细胞活力显著升高;与NC-siRNA组比较,BLACAT1-siRNA组Hep-2/R细胞活力显著降低。与WT-BLACAT1和NC mimic共转染组相比,WT-BLACAT1和miR-142共转染的细胞中萤光素酶活性显著降低(t=10.832,P<0.05);与Vector组比较,pcDNA-BLACAT1组细胞中miR-142表达显著降低;与WT-ATG7和NC mimic共转染组相比,WT-ATG7和miR-142共转染的细胞中萤光素酶活性显著降低(t=8.203,P<0.05);与NC mimic组比较,miR-142 mimic组细胞中ATG7蛋白水平均显著降低。使用自噬抑制剂3-MA处理Hep-2细胞后,pcDNA-BLACAT1显著促进自噬蛋白ATG7、LC3-II/LC3-I和Beclin 1的表达,miR-142 mimic处理后自噬蛋白水平降低。使用DDP处理Hep-2/R细胞后,BLACAT1-siRNA显著抑制Hep-2/R细胞活力和MRP1蛋白的表达,而miR-142 inhibitor逆转这一结果。结论 LncRNA BLACAT1通过miR-142/ATG7信号通路促进LSCC细胞的自噬和化疗耐药性。

长链非编码RNA膀胱癌相关转录因子1通过调控miR-5590-3p/SMAD5信号轴抑制喉鳞状细胞癌的增殖和侵袭

目的 探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)膀胱癌相关转录因子1(bladder cancer-associated transcript 1,BLACAT1)在喉鳞状细胞癌(简称喉鳞癌)中的表达及其对喉鳞癌细胞增殖、侵袭的影响及分子机制。方法 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测45例喉鳞癌组织和对应的癌旁组织中BLACAT1和miR-5590-3p的表达,分析BLACAT1表达与临床病理学参数的关系。将BLACAT1 siRNA、对照siRNA及阴性对照和miR-5590-3p模拟物转染喉鳞癌Hep-2细胞,采用qRT-PCR检测BLACAT1、miR-5590-3p和母亲DPP同源物5(果蝇)[mothers against DPP homolog 5(Drosophila),SMAD5]的表达,CCK-8和Transwell小室检测Hep-2细胞增殖和侵袭的变化,双荧光素酶报告基因检测miR-5590-3p与BLACAT1和SMAD5之间的相互作用。结果 喉鳞癌组织中BLACAT1的表达水平(8.483±0.995)显著高于癌旁组织(1.099±0.019),差异有统计学意义(t=5.765,P<0.001)。在有淋巴结转移的喉鳞癌组织中BLACAT1的表达水平(12.50±1.772)显著高于无淋巴结转移组织(6.268±1.997),差异有统计学意义(t=3.319,P=0.0018)。BLACAT1的表达与淋巴结转移和组织学分级密切相关(P<0.01)。抑制BLACAT1的表达能够显著抑制Hep-2细胞的增殖和侵袭能力。miR-5590-3p在喉鳞癌组织中的表达水平显著低于癌旁组织,且miR-5590-3p表达的上调能够显著抑制Hep-2细胞的增殖和侵袭能力。此外,BLACAT1和SMAD5是miR-5590-3p的直接作用靶点,下调BLACAT1表达能促进Hep-2细胞中miR-5590-3p的表达和抑制SMAD5的表达,而miR-5590-3p模拟物能抑制Hep-2细胞中SMAD5的表达。结论 BLACAT1/miR-5590-3p/SMAD5调控轴可能在喉鳞癌细胞的增殖和侵袭中发挥重要作用,因而可能成为喉鳞癌患者潜在的治疗靶点。

血清LncRNA MALAT1和microRNA-124水平检测对非小细胞肺癌患者预后的评估价值

目的:探究长链非编码RNA-转移相关肺腺癌转录本1(LncRNA MALAT1)和微小RNA-124(microRNA-124)对非小细胞肺癌(NSCLC)患者预后的预测效能。方法:选取2020年06月至2022年06月我院收治的124例NSCLC患者作为研究对象,入院后,收集患者的病历资料,检测入院时外周血LncRNA MALAT1、microRNA-124的相对表达量。电话随访12个月记录患者的死亡率,分为生存组和死亡组,分析NSCLC患者预后的影响因素,评估血清LncRNA MALAT1、microRNA-124对NSCLC患者预后的预测效能。结果:死亡组患者的IV期占比及LncRNA MALAT1相对表达量高于生存组,microRNA-124相对表达量低于生存组。Logistic遂步分析显示,病理分期IV期(OR=12.342,95%CI:4.295~36.765)、LncRNA MALAT1(OR=5.371,95%CI:1.836~15.714)及microRNA-124(OR=0.257,95%CI:0.089~0.752)是NSCLC患者死亡的影响因素(P<0.05)。LncRNA MALAT1与microRNA-124呈负相关(P<0.05)。受试者工作特性曲线(ROC)分析显示,LncRNA MALAT1及microRNA-124单一及联合预测NSCLC患者预后的灵敏度分别为0.741(95%CI:0.601~0.846)、0.759(95%CI:0.621~0.861)、0.815(95%CI:0.682~0.903),特异度分别为0.825(95%CI:0.705~0.906)、0.762(95%CI:0.635~0.856)、0.841(95%CI:0.723~0.917),曲线下面积(AUC)分别为0.781、0.760、0.839。联合预测效能更高(P<0.05)。结论:LncRNA MALAT1及microRNA-124可用于预测NSCLC患者的预后,且预测效能良好。