长链非编码RNA LINC-PINT在恶性肿瘤中的研究进展

恶性肿瘤是世界范围内发病率和死亡率很高的疾病,严重威胁人类的生命健康,恶性肿瘤的早期筛查、诊断是目前急需解决的难题。长链非编码RNA(lncRNA)参与恶性肿瘤的发生与发展。lncRNA-p53诱导转录本(LINC-PINT)在多数癌组织中表达下调,并可通过参与信号通路、与蛋白质相互作用、与微RNA相互调控,影响癌细胞的增殖、迁移、凋亡、侵袭及耐药性。LINC-PINT在恶性肿瘤的早期诊断、靶向治疗和预后评估中显示出巨大潜力,因此深入研究LINC-PINT的作用机制可为恶性肿瘤的早期诊断和治疗提供新的思路。

P53诱导产生的长链非编码RNA参与P53下游靶基因的广泛抑制

P53是一个重要的肿瘤抑制基因，当细胞受到损伤时，聊会引起DNA修复、细胞周期阻滞或细胞凋亡等生物学效应，从而维持细胞基因的完整性，但P53抑制其下游基因的分子机制尚不清楚。论文作者通过长链非编码RNA（10ngnon—coding RNA，lincRNA）来阐述丹3是如何参与其下游基因的广泛抑制。

长链非编码RNATARID在妊娠期高血压疾病中的表达及其临床意义

目的探讨妊娠期高血压疾病(HDP)患者长链非编码RNA转录因子21反义RNA诱导去甲基化(LncRNA TARID)的表达及其临床意义。方法选取上海儿童医学中心三亚市妇女儿童医院诊治的178例HDP患者作为HDP组、50例健康孕妇作为对照组,检测血清LncRNA TARID及白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及超敏C-反应蛋白(hs-CRP)水平。HDP组患者分为妊娠期高血压(GH组)40例、慢性高血压合并妊娠(CHDP组)28例、子痫前期(PE组)81例、子痫前期合并慢性高血压(PSCH组)29例,根据HDP患者发生不良妊娠结局情况分为不良妊娠结局组(66例)和妊娠结局良好组(112例)。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析LncRNA TARID、IL-6、TNF-α及hs-CRP预测HDP患者不良妊娠结局的价值,分析HDP患者血清LncRNA TARID表达水平与IL-6、TNF-α及hs-CRP的相关性。结果HDP组血清LncRNA TARID表达水平显著低于对照组,而血清IL-6、TNF-α及hs-CRP水平均显著高于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.001)。PSCH组和PE组血清LncRNA TARID表达水平显著低于GH组和CHDP组,而PSCH组和PE组血清IL-6、TNF-α、hs-CRP水平均显著高于GH组和CHDP组,差异均具有统计学意义(P<0.001)。不良妊娠结局组血清LncRNA TARID表达水平显著低于妊娠结局良好组,而血清IL-6、TNF-α及hs-CRP水平均显著高于妊娠结局良好组,差异均具有统计学意义(P<0.001)。ROC曲线显示,LncRNA TARID及IL-6、TNF-α、hs-CRP四项联合预测HDP患者不良妊娠结局的曲线下面积(AUC)最大(0.930,95%CI:0.870~0.991),其灵敏度为95.3%,特异度为81.7%。Pearson相关性分析显示,HDP患者血清LncRNA TARID表达水平与IL-6、TNF-α及hs-CRP均呈负相关(P<0.001)。结论血清LncRNA TARID水平在HDP患者中呈低表达,其与IL-6、TNF-α及hs-CRP联合对预测HDP患者不良妊娠结局具有较好的价值。

长链非编码RNA-ROR功能的研究进展

在人类基因组中,存在大量的非编码RNA(non-coding RNAs,ncRNAs).近年来随着研究的发展,这些ncRNA已成为继microRNAs和siRNAs之后又一研究热点.长链ncRNA-ROR(large intergenic ncRNA-regulator of reprogramming,lincRNA-ROR),是最新发现对细胞重编程过程具有重要调控作用的长链非编码RNA.现有的研究表明,ROR在诱导多能性干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)形成、DNA损伤、氧化应激等过程中发挥重要的作用;此外,在肿瘤中,目前发现ROR与乳腺癌、肝癌的发生、转移等密切相关.ROR拥有丰富的生物学功能,但其具体的作用机制尚不明确.本文就ROR的研究背景、发现过程、功能及特点做一概述,对其在肿瘤上的作用及相关调控机制的进行探讨.

长链非编码RNA转化生长因子-β诱导HOXA转录物调控KHDRBS3介导的肿瘤干细胞机制研究

目的研究长链非编码RNA(LncRNA)转化生长因子(TGF)-β诱导HOXA转录物(HIT)在胰腺癌组织中的表达及其与细胞转移间的关系及机制。方法培养人肾上皮细胞系293T并进行HIT干扰载体的慢病毒细胞包装,构建Capan-1干扰HIT细胞模型,分为对照组、干扰1#组及干扰2#组,以Transwell侵袭及迁移实验检测各组细胞侵袭及迁移数量的变化,以蛋白质印迹(Western Blot)法检测各组细胞KHDRBS3及CD44的蛋白表达变化。结果对照组、干扰#1组及干扰#2组中HIT mRNA表达水平分别为1.00±0.07,0.36±0.02及0.30±0.03,KHDRBS3 mRNA表达水平分别为1.00±0.11,1.22±0.13及0.93±0.09,CD44 mRNA表达水平分别为1.00±0.09,0.61±0.06及0.46±0.04,KHDRBS3蛋白相对表达水平分别为0.81±0.06,0.12±0.01及0.18±0.02,CD44蛋白相对表达水平分别为0.57±0.06,0.19±0.02及0.23±0.03,每视野侵袭细胞数分别为(66.0±7.4),(32.5±5.1)和(26.1±5.8)个,每视野迁移细胞数分别为(71.6±8.0),(21.5±3.7)及(24.9±4.2)个,干扰#1组及干扰#2组侵袭及迁移细胞数显著低于对照组(P<0.01);干扰1#组及干扰2#组KHDRBS3蛋白及CD44 mRNA和蛋白表达明显低于对照组(P<0.01)。结论LncRNA HIT在胰腺癌组织中高表达,且可通过激活KHDRBS3/CD44通路,促进胰腺癌细胞的侵袭转移能力。

长链非编码RNA转录因子21反义RNA诱导去甲基化在肺腺癌中的表达及功能

目的观察长链非编码RNA转录因子21反义RNA诱导去甲基化（TARID）在肺腺癌组织中的表达及对A549细胞功能的影响。方法采用实时定量聚合酶链反应（Real-timePCR）法检测90对肺腺癌患者癌组织和癌旁组织中TARID的表达。构建过表达质粒，应用细胞计数试剂盒（CCK-8）实验检测TARID对细胞增殖的影响，流式细胞仪检测细胞凋亡，细胞划痕和Matrigel小室观察迁移和侵袭能力变化。结果与癌旁组织比较，TARID在肿瘤组织中显著低表达，并与淋巴结转移相关。过表达TARID后，A549细胞72、96h吸光度值较阴性对照组显著降低（P〈0．05）；细胞凋亡增加（P〈0．05）；细胞迁移能力明显减弱[（42．1±3．9）mm比（201．4±9．6）mm，P〈0．05]；细胞穿膜数[（73±6）个]较阴性对照组[（207±8）个]显著减少（P〈0．05）。结论TARID的表达与肺腺癌相关，上调其表达能抑制A549细胞增殖和侵袭迁移。

缺氧预处理激活HIF-1α/MALAT1/VEGFA通路促进骨髓间充质干细胞生存和血管再生

背景:既往研究发现缺氧预处理能够提高骨髓间充质干细胞生存和改善其移植治疗效率,且此效应主要由缺氧诱导因子1α(hypoxia induced factor-1α,HIF-1α)介导,但下游机制未明。目的:体外观察缺氧预处理对骨髓间充质干细胞生存和血管再生能力的影响,探讨HIF-1α/MALAT1/VEGFA通路在其中的调控作用。方法:将体外培养的骨髓间充质干细胞分为缺氧实验组(体积分数为1%O2)和常氧对照组(体积分数为20%O2),培养24 h后检测细胞增殖、凋亡以及血管形成情况以及HIF-1α、MALAT1和VEGFA的表达;在此基础上,分别采用相应的siRNA抑制HIF-1α以及MALAT1的表达,以HIF-1αsiRNA scramble和MALAT1 siRNA scramble作为阴性对照,再进行缺氧预处理,检测并比较各组通路因子的表达变化。结果与结论:①与常氧对照组相比,缺氧实验组细胞生存力明显增强,凋亡比例显著减少,血管管腔样结构明显增多(P<0.01),HIF-1α、MALAT1和VEGFA的表达均明显增高(P<0.01);②在抑制HIF-1α的基础上进行缺氧预处理,MALAT1和VEGFA表达均明显下降(P<0.01);而抑制MALAT1后,VEGFA的表达亦显著降低(P<0.01);③结果表明,缺氧预处理能够通过激活HIF-1α/MALAT1/VEGFA通路促进骨髓间充质干细胞生存和血管再生。

二甲双胍通过lncRNA-MALAT1对人血管平滑肌细胞活力、迁移及凋亡的影响

目的:探讨二甲双胍通过长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录本1(lncRNA-MALAT1)对人血管平滑肌细胞(VSMC)活力、迁移及凋亡的影响。方法:RT-qPCR检测38例无冠心病的对照人群与35例冠心病患者血液中lncRNA-MALAT1的表达。用二甲双胍给药后检测lncRNA-MALAT1的表达;用二甲双胍给药或MALAT1小干扰RNA(si-MALAT1)转染VSMC后,用CCK-8法检测细胞活力,细胞划痕法测定细胞迁移情况,流式细胞术检测细胞凋亡水平, RT-qPCR检测lncRNA-MALAT1表达及抑癌因子p53 mRNA表达水平, Western blot检测p53蛋白表达水平。结果:与对照人群相比,冠心病患者血液中lncRNA-MALAT1表达显著升高(P<0.05)。二甲双胍给药后,lncRNA-MALAT1表达呈时间依赖性降低;与阴性对照组比较,二甲双胍给药组VSMC活力和迁移能力均显著下降,而凋亡率显著升高,p53 mRNA及蛋白表达水平亦显著升高(P<0.05)。与si-NC组比较,si-MALAT1组VSMC活力和迁移能力下降(P<0.05),凋亡率升高不显著,p53 mRNA水平及蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论:二甲双胍可能通过lncRNA-MALAT1抑制VSMC的活力和迁移能力,促进细胞凋亡,其机制可能部分与激活p53表达有关。

急性冠脉综合征患者外周血单个核细胞中lncRNA表达

目的探究急性冠脉综合征(ACS)患者外周血单个核细胞中长链非编码(lnc)RNA〔a缺氧诱导因子(HIF)、心肌梗死相关转录体(MIAT)〕的表达水平及其对ACS的临床诊断价值。方法91例ACS患者为ACS组,其中急性心肌梗死(AMI)42例,不稳定型心绞痛(UA)49例。选取同期非缺血性胸痛患者49例为对照组。采用实时荧光定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测各样本aHIF和MIAT表达水平,并检测肌钙蛋白(cTn)I、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶MB同工酶(CK-MB)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)等指标。结果ACS组外周血单个核细胞aHIF和MIAT表达水平均显著高于对照组(P<0.05),其中AMI亚组外周血单个核细胞aHIF表达水平显著高于UA亚组、MIAT表达水平显著低于UA亚组(P<0.05)。相关性分析显示,CK与aHIF呈低程度正相关(r=0.317,P<0.05)。aHIF对ACS和AMI诊断敏感度分别为60.2%、59.0%,特异度分别为82.0%、98.0%。aHIF对诊断ACS和AMI的受试者工作特征(ROC)曲线下面积均>0.5。结论ACS患者外周血单个核细胞中aHIF表达水平升高,有望作为ACS诊断的潜在标志物及治疗靶点。