转染人源Omentin-1、Vaspin妊娠期糖尿病脂肪细胞胰岛素受体底物和磷脂酰肌醇3激酶表达变化

目的观察转染人源网膜素1(Omentin-1)、内脏脂肪组织源性丝氨酸蛋白酶抑制剂(Vaspin)的妊娠期糖尿病(GDM)脂肪细胞胰岛素受体底物1/2(IRS-1/2)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)表达变化。方法复苏、传代及诱导分化GDM前脂肪细胞。构建Omentin-1、Vaspin过表达载体,以3个不同过表达梯度(1.0、2.5、5.0μg)转染传代脂肪细胞,以无转染组为对照。采用实时荧光定量PCR法检测各组脂肪细胞Omentin-1、Vaspin、IRS-1/2、PI3K mRNA;采用Western blotting法检测各组脂肪细胞Omentin-1、Vaspin、IRS-1/2、PI3K蛋白及酪氨酸磷酸化IRS-1/2;采用[3H]-2-脱氧-D-葡萄糖摄取测定法测算各组脂肪细胞葡萄糖的摄取率。结果随Omentin-1表达增加,转染人源Omentin-1脂肪细胞中IRS-1、PI3K(P85a)mRNA及蛋白表达增加,IRS-2 mRNA及蛋白表达未发生明显变化,IRS-1酪氨酸磷酸化程度明显升高,IRS-2酪氨酸磷酸化程度未发生明显变化,葡萄糖摄取率上升。随Vaspin表达增加,转染人源Vaspin脂肪细胞IRS-1、IRS-2、PI3K(P85a)mRNA及蛋白表达均未出现明显变化,IRS-1、IRS-2酪氨酸磷酸化程度均未出现明显变化,葡萄糖摄取率变化不明显。结论转染人源Omentin-1的GDM脂肪细胞IRS-1和PI3K(P85a)表达升高,葡萄糖摄取率升高;转染人源Vaspin的GDM脂肪细胞无此变化。

用于确定动物的线虫感染抗性的有效重组抗原Aspin在大肠杆菌中的表达

报道了重组蛋白Aspin——由寄生性Trichostronglus colubriformis产生的一种门冬氨酰蛋白酶抑制剂类似物在大肠杆菌中的表达。研究了表达具生物活性、可溶而非形成包涵体的Aspin并使产量最大化的培养条件。高生长速率和表达水平易形成包涵体。在分批发酵中降低生物反应器的温度、溶氧水平和营养物浓度，使表达处于低水平，均能有效增加可溶性Aspin的表达量。分批发酵中，以2g／L的L-阿拉伯糖诱导，培养温度从37℃降至25℃获得了Aspin220mg／L的高表达量。因为最终的酸性pH、低溶氧有利于产生可溶性的Aspin发酵过程，故可不控制pH和溶氧。

急性肾损伤相关生物标志物的研究进展

急性肾损伤(AKI)是一种临床常见且严重的病症。目前临床上常用血清肌酐(SCr)、血尿素氮和尿量等指标来评价肾功能的下降,但它们的改变仅在严重肾脏损伤后才有意义,且易受非肾因素影响。寻找特异性、敏感性的早期诊断标志物对于AKI的治疗、降低患者死亡率和改善预后至关重要。AKI早期诊断标志物,主要涉及中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(CysC)、Klotho、肾损伤分子1(KIM-1)、白细胞介素-18(IL-18)、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)、高半胱氨酸蛋白61(Cyr 61)、TIMP-2、IGFBP-7、尿Na^+/H^+交换器-3(NHE3)、miRNA、组织蛋白酶(Cats)和肾动脉阻力指数(RRI)等。由于目前还没有一种能够同时具备高灵敏性和高特异性的理想AKI标志物,所以组合标志物将是AKI生物标志物研究的方向。