急性淋巴细胞白血病患儿大剂量静脉滴注门冬酰胺酶治疗后脑脊液门冬酰胺浓度

目的 测定急性淋巴细胞白血病 (ALL)患儿大剂量静注门冬酰胺酶 (ASP)治疗前、后脑脊液 (CSF)中门冬酰胺 (ASN)浓度 ,从临床及药代动力学方面 ,探讨ASP在中枢神经系统 (CNS)白血病治疗中的药理作用及最佳给药方式。方法 10例ALL患儿分别 4次接受德国小儿白血病协作组多中心协作治疗方案 (COALL 97)中的主要药物ASP(每隔 4～ 6周 1次静脉注射 4 0 0 0 0U/m2 )的联合化疗。在静脉注射L ASP前及给药后第1、3、4、5周采集CSF ,用安捷伦高效流相色谱仪检测CSF中ASN浓度 ,并观察临床疗效。结果 CSF中ASN浓度分别为 :给药前 1.894± 0 .5 8μmol/L ;给药后第 1周 0 .0 5 6± 0 .0 13μmol/L ;第 3周 0 .117± 0 .0 0 0 0 8μmol/L ;第 4周 0 .2 12± 0 .0 13μmol/L ;第 5周 0 .897± 0 .0 89μmol/L。ALL患儿应用L ASP后CSF中ASN浓度明显降低 (P <0 .0 5 ) ,同时测定CSF中谷氨酰胺浓度在给药前后均无显著变化。结论 1次注射 4 0 0 0 0U/m2 ASP后能使CSF中ASN浓度降低并持续至第 5周后回升。

儿童急性淋巴细胞白血病应用门冬酰胺酶治疗的临床研究

目的回顾性总结和分析应用左旋门冬酰胺酶(L-Asp)治疗儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)的经验、不良反应及其应对措施,以期对未来用药提供借鉴。方法 102例ALL患儿入组。分析超敏反应对疗效的影响,总结凝血功能异常及暂时性高血糖(TH)的应对措施,对L-Asp相关胰腺炎(AAP)病例作简要总结。结果(1)34例(33.3%)出现超敏反应,多数程度较轻且发生于诱导期以后的治疗过程中。(2)PT延长16例(20.3%),APTT延长17例(21.5%),FIB不同程度降低,50例(63.3%)低于1g/L,4例(5.I%)低于0.5g/L。(3)70例(68.6%)出现不同程度的血糖升高,11例(10.8%)诊断TH,其中4例(36.4%)有高血糖家族史。(4)4例(3.9%)发生AAP,1例再次应用L-Asp后未出现AAP。结论(1)超敏反应组和无超敏反应组的预计5年OS和EFS差异无显著性。(2)L-Asp治疗过程中出现的凝血功能改变原则上在无严重合并症时可不行预防性凝血因子的替代治疗。(3)高年龄组(≥6岁)及有糖尿病家族史者发生TH的可能性更大。(4)AAP发生后48 h内症状缓解、淀粉酶和脂肪酶低于正常值上限3倍以及影像学未提示假性囊肿或坏死者可尝试再次应用L-Asp化疗。

人白血病细胞株对L-门冬酰胺酶敏感性与门冬酰胺合成酶表达水平的相关性

本研究探讨人白血病细胞株门冬酰胺合成酶(asparagine synthetase,AsnS)的表达水平及与白血病细胞株对L-Asparaginase(L-Asp)敏感性的关系。用实时定量PCR技术(real-time quantitative PCR,RQ-PCR)检测Jurkat,HL-60,U937,NB4,THP-1,Namalwa,Karpas299和K562等8种细胞株基础的和经L-Asp处理后的AsnS表达水平,用CCK-8实验检测细胞对L-Asp处理的敏感性。结果表明,8种细胞株之间AsnS的基础表达水平存在很大程度的变异,经L-Asp处理后细胞株的AsnS表达显著上调(p<0.05),AsnS低水平表达细胞对L-Asp相对敏感,而AsnS高表达细胞对L-Asp相对耐药。在8种细胞株中,U937对L-Asp高度敏感,其AsnS表达水平最低,而K562细胞株对L-Asp天然耐药,AsnS表达水平最高。结论:AsnS在天门冬氨酸耗竭后的细胞生物学行为中起着重要的作用,AsnS的表达水平反映了细胞对L-Asp的敏感性,L-Asp在AsnS低表达白血病的治疗中有潜在的应用价值。

以门冬酰胺酶为基础化疗方案治疗ⅠE和ⅡE期ENKTL的疗效分析及其与门冬酰胺合成酶表达的关系

目的探讨以左旋门冬酰胺酶(L-ASP)为基础的化疗方案联合放疗治疗ⅠE和ⅡE期结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤(ENKTL)患者的疗效,及门冬酰胺合成酶(ASNS)的表达水平与L-ASP治疗ENKTL疗效之间的关系。方法回顾性分析2008年5月至2013年5月ⅠE期和ⅡE期ENKTL患者119例,按治疗方式分为单纯放疗(RT)组(n=27)、CHOP或CHOP样化疗方案联合放疗(RT+CHOP)组(n=33)和以L-ASP为基础的化疗方案联合放疗(RT+L-ASP)组(n=59)。放疗总剂量DT 50~60 Gy,L-ASP 6000 U/m^2静滴,d1~d7。比较RT组、RT+CHOP组和RT+L-ASP组ENKTL患者的疗效;采用RTPCR和免疫组化法分别检测ASNS m RNA和蛋白表达水平,并分析其与疗效之间的关系。结果 RT+L-ASP组的有效率(RR)为91.5%,显著优于RT组的74.1%和RT+CHOP组的69.7%(P=0.007,P=0.030)。RT+L-ASP组的中位总生存时间(OS)为49个月,高于RT组的28个月(P=0.017),但与RT+CHOP组(31个月)的差异无统计学意义(P=0.077);RT+L-ASP组的中位无进展生存时间(PFS)为47个月,高于RT组的25个月和RT+CHOP组的17个月,差异均有统计学意义(P=0.018,P<0.001)。Cox比例风险回归分析显示,Ann Arbor分期和β2微球蛋白是影响OS的独立预后因素;治疗方案和近期疗效是影响PFS的独立因素。3组最常见的不良反应为骨髓抑制和肝肾功能损伤,RT+L-ASP组有8例患者出现过敏反应。近期疗效好的患者的ASNS m RNA和蛋白表达水平明显低于疗效较差的患者。ASNS m RNA表达分别与OS和PFS呈负相关(r=-0.60,P=0.01;r=-0.65,P=0.004);ASNS蛋白表达与OS和PFS亦呈负相关(r=-0.77,P<0.001;r=-0.71,P<0.001)。结论对于ⅠE期和ⅡE期ENKTL患者,以L-ASP为基础的化疗方案联合放疗的疗效优于单纯放疗和CHOP或CHOP样化疗方案联合放疗。ASNS的表达,尤其是蛋白表达水平,可作为L-ASP治疗ⅠE期和ⅡE期ENKTL疗效的预测指标。

门冬酰胺酶超敏反应与临床应用管理

白血病是儿童时期最常见的恶性肿瘤,我国每年新增15岁以下白血病患儿2万余人,发病率约为4/10万（[1]）。儿童白血病约95%为急性白血病,其中急性淋巴细胞白血病（acute lymphoblastic leukemia,ALL）占2/3左右。半个世纪以来,儿童ALL的治疗效果得到显著改善,超过95%的患儿获得完全缓解,总体生存率（overall survival,OS）接近90%,长期无事件生存率（event-free survival,EFS）达到80%以上^（[2-5]）。左旋门冬酰胺酶（L-Asparaginase,

门冬酰胺酶相关儿童急性胰腺炎诊治研究

目的通过收集国内病例资料,分析和归纳儿童门冬酰胺酶(ASP)相关胰腺炎(AAP)的临床特征和诊治经验,不断提高儿童AAP的早期诊断率和疗效水平。方法归纳我院和近年来国内报道的临床资料完整的66例患儿诊治经过,参照国际AAP诊断标准,分析我国儿童AAP的流行病学、临床表现、辅助检查规律以及治疗方法和疗效。结果归纳66例儿童AAP资料可见:(1)最终疗效:病死率为36%(24/66例),其中24例死亡病例中19例(79%)死于休克。(2)流行病学:无高发年龄段和性别差异,大多数(79%)发生于首次接受ASP的诱导治疗期。(3)临床表现:腹痛、腹胀和呕吐分占91%、72%和69%:(4)血胰腺酶水平:血淀粉酶和血脂肪酶增高分别占89%和100%。(5)影像学检查:早期腹部B超和CT检查的阳性率分别为84%和82%。(6)综合治疗:奥曲肽为主要药物之一,但并未能降低病死率。(7)左旋门冬酰胺酶(L-ASP)和培门冬酶(PEG-ASP)两组中,坏死性胰腺炎分别占25%和50%,P>0.05;病死率分别为36%和1I%,P<0.05。结论多数AAP发生于诱导治疗期。腹痛并非必然症状,血脂肪酶的敏感度高于血淀粉酶,早期B超和CT影像学检查阳性率也有限,因此需要全面分析判断以助早期诊断。需要在奥曲肽治疗的同时,积极进行综合治疗以提高疗效水平。PEG-ASP在预防AAP及降低其严重程度方面较L-ASP未见明显优越性。

培门冬酰胺酶致血、尿淀粉酶升高1例分析及药学监护

目的:探讨门冬酰胺酶相关性胰腺炎的发病风险及干预手段,提高医务人员对门冬酰胺酶相关性胰腺炎的认识,探讨临床药师该如何加强对培门冬酰胺酶用药的药学监护。方法:对1例急性淋巴细胞白血病患儿使用培门冬酰胺酶化疗后出现腹痛伴血、尿淀粉酶升高进行分析,并复习相关文献。结果:患儿使用培门冬酰胺酶化疗后出现腹痛伴血、尿淀粉酶升高,但无影像学异常表现,依据不良事件通用术语标准为1~2级门冬酰胺酶相关性胰腺炎,予禁食等对症处理后,显著好转。通过复习相关文献,评估患儿情况,认为可行第二剂培门冬酰胺酶化疗,临床药师对患儿进行饮食指导,在严密监护下行第二剂门冬酰胺酶化疗,患儿未出现类似不良反应。结论:临床药师需加强对使用培门冬酰胺酶化疗患儿的药学监护,对患儿及家属行用药教育,如出现门冬酰胺酶相关性胰腺炎不良反应时应及时评估,协同医师共同完成患儿化疗。

急性淋巴细胞白血病患者静注门冬酰胺酶后脑脊液门冬酰胺水平

对14例儿童急性淋巴细胞白血病患者，在使用不同剂量主旋门冬酰胺酶前后检测了脑脊液中门冬酰胺的浓度，发现有71．4％的患者脑脊液中在应用左旋门冬酰胺酶后无门冬酰胺可测到．肿瘤细胞缺乏门冬酰胺而不能合成蛋白质；因此应用不同剂量的左旋门冬酰胺酶均可抑制颅内脑组织白血病细胞的生长繁殖，对于中枢神经系统白血病的药理作用是肯定的．

长春新碱逆转骨髓间充质干细胞对白血病儿童门冬酰胺酶耐药的研究

目的:评估骨髓间充质干细胞(MSCs)对急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿左旋门冬酰胺酶(L-asp)治疗的影响,并探讨长春新碱(VCR)能否逆转其影响及机制。方法:体外分离培养扩增ALL儿童MSCs原代细胞,建立MSCs-Jurkat共培养模型,应用MTT法检测Jurkat细胞L-asp的IC_(50)、流式细胞仪测定Jurkat细胞凋亡率及RT-PCR检测其ASNS mRNA表达。结果:(1)经L-asp处理后,单独培养及共培养组中Jurkat细胞凋亡率及ASNS mRNA表达水平均升高(P<0.05)。(2)共培养组中Jurkat细胞的凋亡率较Jurkat细胞单独培养低(P<0.01),ASNS mRNA表达水平降低(P<0.05);经L-asp处理后,共培养组中Jurkat细胞的凋亡率也比Jurkat单独培养低(P<0.01),但ASNS的mRNA表达水平无明显变化(P>0.05)。(3)VCR预处理MSCs后,共培养组中Jurkat细胞凋亡率升高(P<0.01),ASNS的mRNA表达水平无明显变化(P>0.05)。结论:MSCs与Jurkat细胞共培养可使Jurkat细胞凋率下降,抑制Jurkat细胞ASNS mRNA的表达。在MSCs支持下,L-asp对Jurkat细胞仍有作用,MSCs只可部分抑制L-asp细胞毒性。VCR可部分逆转MSCs的作用,使共培养模型中Jurkat细胞株凋亡增加,其机制可能是通过部分抑制MSCs ASNS mRNA表达。

培门冬酶相关胰腺炎患儿门冬酰胺酶再暴露1例

目的探讨临床药师参与门冬酰胺酶相关胰腺炎的急性淋巴细胞白血病患儿治疗方案的制定及药学监护要点。方法临床药师通过查阅文献参与1例门冬酰胺酶相关胰腺炎患儿门冬酰胺酶再暴露的治疗方案制定,对患儿进行用药教育及药学监护,以确保化疗方案顺利完成。结果临床药师协助医师为患儿制定化疗方案,进行用药教育及药学监护,门冬酰胺酶相关胰腺炎患儿门冬酰胺酶再暴露时顺利完成化疗方案。结论门冬酰胺酶相关胰腺炎患儿当病情需要时可考虑再次使用门冬酰胺酶,再暴露时药师应协助医师做好用药教育及药学监护。

儿童门冬酰胺酶相关性胰腺炎21例临床分析

目的总结儿童门冬酰胺酶(Asp)相关性胰腺炎(AAP)的临床特征及预后。方法纳入2012年1月至2019年12月初诊并接受Asp联合化疗后出现急性胰腺炎的21例急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿,分析其临床特征、实验室检查、治疗情况和预后。结果研究期间初诊并接受Asp治疗的ALL患儿共711例,21例患儿发生AAP,发生率为3.0%。21例患儿中,男10例、女11例,中位年龄8岁(3~18岁);7例AAP发生于诱导化疗期,L-asp中位次数7次(1~10次);14例发生于巩固化疗期,PEG-asp治疗后16.5天(2~22天),中位次数4.5次(1~9次)。轻型AAP 14例,重型7例;腹痛、呕吐为最常见的症状。AAP诊断时,血清淀粉酶和脂肪酶中位数分别为471 U/L(范围25~1632 U/L)和287.1 U/L(范围4.6~2213.7 U/L)。13例患儿行腹部超声,6例(46.2%)阳性;20例行腹部CT,17例(85.0%)阳性。4例AAP患儿出现胰腺假性囊肿。所有患儿均在早期予禁食、抑酸、抑制胰酶分泌、营养支持等治疗,3例采用经鼻空肠管喂养,5例行手术干预。4例轻型AAP患儿再次使用L-asp化疗,其中1例再发AAP。末次随访时,除1例患儿放弃治疗外,无胰腺炎相关死亡病例,1例发生慢性胰腺炎,其余19例胰腺炎已愈。结论AAP是Asp治疗过程中的严重并发症,早期识别是关键,总体预后良好。

门冬酰胺酶对急性淋巴细胞白血病患儿凝血、抗凝功能影响

目的 探讨门冬酰胺酶 (L asp)对急性淋巴细胞白血病 (ALL)患儿凝血、抗凝功能影响。方法 对96例ALL患儿测定L asp治疗前后凝血酶原时间 (PT)、活化部分凝血活酶时间 (APTT)、抗凝血酶Ⅲ (AT Ⅲ )及蛋白C(PC)。PT及APTT应用血凝分析仪测定 ,血浆AT Ⅲ及PC活性测定采用发色底物法。结果 L asp治疗后PT延长 18例 ,缩短 2 2例 ;APTT延长 2 1例 ,缩短 17例 ;AT Ⅲ活性降低 5 1例 ,PC活性低 2 0例 ,差异有显著性 (P <0 .0 1)。结论 L asp对ALL患儿凝血及抗凝功能的影响是双向的 。

门冬酰胺酶治疗成人和儿童急性淋巴细胞白血病时不良反应比较及处理

目的:研究以门冬酰胺酶(ASP)为主的联合化疗方案治疗儿童和成人急性淋巴细胞白血病(ALL)/淋巴母细胞淋巴瘤(LBL)时的不良反应及处理。方法:25例儿童和45例成人ALL/LBL共接受118疗程含ASP的联合化疗方案治疗。监测治疗前后的凝血指标、肝功能、血脂和血糖。临床或血液检查怀疑胰腺炎时行超声或CT检查。怀疑血栓形成时进行相应血管超声检查。结果:ASP相关的临床不良反应包括过敏反应、静脉血栓和急性胰腺炎,发生率分别为1.7%、1.7%和2.5%。这些并发症均导致治疗中断或原计划的治疗方案推迟2周-3周。另有因脑出血致死亡一例。实验室检查肝功能异常、低纤维蛋白原血症、高甘油三酯血症和高血糖的发生率分别为38.99%、41.5%、5.6%和6.1%。比较儿童和成人各种不良反应的发生率和严重程度均无明显差别。结论:ASP治疗过程中可产生多种不良反应,少数可致死,需密切监测,早期采取措施进行干预。

门冬酰胺酶治疗儿童淋巴系统恶性肿瘤的严重并发症

目的 观察门冬酰胺酶 (L ASP)在儿童急性淋巴细胞白血病 (ALL)及Ⅲ、Ⅳ期非霍奇金淋巴瘤(NHL)应用中严重并发症 ,探讨L ASP化疗顺利完成的有效对策。方法 针对L ASP的各种主要并发症制定相应的检测手段及监测指标 ,在应用L ASP期间对患儿进行监测 ,对出现并发症采取相应的检测。统计各并发症的发生率、发生时间。结果 用L ASP化疗的ALL和NHL患儿总计 30 1例次 ,其中L ASP相关严重并发症2 0例次 ( 6 .6 % ) ,高血糖 7例次 ( 2 .32 % ) ;低血糖 1例次 ( 0 .33% ) ;胰腺炎 6例次 ( 1.99% ) ;脑栓塞 2例次( 0 .6 6 % ) ;弥散性血管内凝血 (DIC) 6例次 ( 1.99% ) ;脏器出血 4例次 ( 1.32 % ) ;休克 7例次 ( 2 .3% ) ;死亡 10例 ( 3.3% )。结论 L ASP的细胞毒作用可造成人体各系统的损害 ,严重者甚至危及生命。严密、合理的监测手段及早期干预可明显降低L ASP并发症。

门冬酰胺酶致儿童急性淋巴细胞白血病脑血栓形成2例

例1女，11岁9个月，体重66kg，因反复皮肤出血点2个月入院，经骨髓细胞学检查确诊为急性淋巴细胞白血病（12）-B细胞性，临床分型中危，无中枢神经系统浸润。

门冬酰胺合成酶启动子区单核苷酸多态性与基因表达量的相关性研究

细胞内门冬酰胺合成酶(asparagines synthetase,AS)的表达水平与白血病细胞对左旋门冬酰胺酶(L-asp)耐药有关。本研究旨在通过筛查发现AS启动子区的单核苷酸多态性(SNP)位点,研究它们对AS基因表达量的影响及寻找对L-asp治疗反应具有影响的个体遗传因素。对82份白血病标本和45份非白血病标本直接测序,筛查AS启动子区的SNP;用实时定量PCR法测定相应标本中的ASmRNA水平。通过对被筛SNP位点不同基因型个体的AS表达水平的统计分析,判断被筛SNP是否对基因表达产生影响。结果发现:被测AS启动子片段内共发现3个SNP位点。分别是-239C/T,-92G/A和-62A/T。其中-92A等位基因在白血病患儿中的发生频率高于非白血病(P<0.05)。AS表达在该SNP的各种基因型个体间存在差异,基因表达水平由高到底依次为GA杂合子型>AA纯合子型>GG纯合子型(P<0.01)。结论:-92A等位基因变异可能与白血病的某些特征相关,并且这个等位基因变异的存在与AS基因的高表达相关。

左旋门冬酰胺酶与盐霉素联合作用对急性T淋巴细胞白血病Jurkat细胞株增殖凋亡的影响

目的:研究左旋门冬酰胺酶(L-asparaginase,L-ASP)与盐霉素(salinomycin,Sal)联合作用对急性T淋巴细胞白血病Jurkat细胞株增殖和凋亡的影响及其机制。方法:CCK-8试剂盒检测细胞增殖情况;Western blotting方法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、caspase-3、caspase-8、caspase-9及细胞色素C表达的变化;流式细胞术分析各实验组细胞凋亡率之间的差别。结果:不同浓度的L-ASP和Sal单独处理Jurkat细胞株后均显示出明显的增殖抑制作用,L-ASP的IC50为8.12 IU/L,Sal的IC50为0.75μmol/L。而两药联合使用的增殖抑制作用更显著(P<0.05);合用指数计算公式结果显示两药为协同作用。Western blotting显示联合用药组与L-Asp、Sal单独处理组相比,Bcl-2蛋白表达明显减少,caspase-3、caspase-8、caspase-9和胞浆细胞色素C水平明显增高;干预48 h后行流式细胞术检测结果显示L-ASP(2.5 IU/L)单独处理组和Sal(0.5μmol/L)单独处理组细胞凋亡率分别为(7.11±0.23)%和(25.43±0.47)%,与对照组(6.67±0.13)%比较差别有统计学意义(P<0.05),联合用药组细胞凋亡率(39.12±1.97)%分别与L-ASP、Sal单独处理组比较,差别有统计学意义(P<0.05)。结论:左旋门冬氨酸酶与盐霉素联合作用于Jurkat细胞具有协同抑制增殖和诱导凋亡的作用。

左旋门冬酰胺酶治疗小儿白血病时的毒性反应:附4例报告

左旋门冬酰胺酶(L-ASP)治疗急性淋巴细胞白血病(ALL)有明显疗效,且能提高长期存活率,但我院在使用L-ASP过程中有4例出现轻重不一的毒性反应,现报道如下。

门冬酰胺酶联合CHOP方案治疗结外NK/T细胞淋巴瘤的临床效果研究

目的:探讨门冬酰胺酶(L-Asparaginasum,ASP)联合CHOP方案治疗结外NK/T细胞淋巴瘤的临床效果。方法:选取2007年8月至2009年5月我院收治的结外NK/T细胞淋巴瘤患者68例,分为CHOP方案治疗组(CHOP组)34例和门冬酰胺酶联合CHOP方案治疗组(ASP+CHOP组)34例,比较两组患者的临床效果。结果:CHOP组CR+PR 16例,治疗总有效率47.06%;ASP+CHOP组CR+PR 24例,治疗总有效率70.58%;后者治疗总有效率高于前者,且差异具有统计学意义(X2=3.886,P<0.05)。CHOP组患者平均PFS时间为24.7个月,ASP+CHOP组患者平均PFS时间为47.5个月,后者长于前者,且差异具有统计学意义(P<0.05)。在两组患者最为常见的不良反应为血细胞减少、转氨酶升高、白蛋白降低和发热,Ⅰ-Ⅱ级和Ⅲ-Ⅳ级血细胞减少性贫血发生率在ASP+CHOP组均比CHOP组高(P<0.05),ASP+CHOP组患者Ⅰ-Ⅱ度发热及白蛋白降低发生率均较CHOP组高(P<0.05)。ASP+CHOP组患者凝血功能异常治疗较CHOP组组高(P<0.05),6例发生过敏反应,1例侵袭性NK/T细胞淋巴瘤患者发生血淀粉酶升高、1例发生急性胰腺炎经治疗后好转,但因疾病进展快速致一般情况差,未能耐受后续化疗而早期死亡。3例患者发生不完全性肠梗阻,经保守治疗后好转。ASP+CHOP组2例发生Ⅱ度血肌酐升高,CHOP组中1例经对症治疗后好转。结论:门冬酰胺酶联合CHOP方案治疗结外NK/T细胞淋巴瘤的临床效果满意,建议在临床治疗中推广应用。