确定一类带环离子通道门控的转移速率

证明了Markov链中某状态集的生存时间和死亡时间的分布均是混合指数分布,并给出了此分布与转移速率之间的若干约束关系.利用它们证明了:对于文中的带环离子通道门控,四种情形的转移速率都能由其中两个开状态的生存时间和死亡时间分布唯一决定,并给出了相应的算法.而Wagner等指出只有一种情形是可以确定的.

大电导钾离子通道(BK)结构与功能的研究进展

大电导钙离子激活钾通道(BK)是细胞膜上唯一接受细胞内Ca2+和膜电位双重调控的离子通道.最新发表的关于BK通道电镜结构及其胞质功能域的晶体结构的文章,第一次展示了BK通道各亚基的组装,并证实通道各功能域在通道门控机制中存在紧密的相互作用.近年来,针对BK通道的功能调节及其门控动力学模拟的研究取得较多进展,有助于更好地理解BK通道发挥生理功能的门控机制,并揭示BK通道相关疾病的病理生理学基础.

HCN通道功能变化在SAH后早期脑损伤中的作用研究

目的观察大鼠模型蛛网膜下腔出血(SAH)后早期脑内超极化激活-环核昔酸门控的阳离子(HCN)通道的表达变化。评估HCN通道功能变化在SAH后早期脑损伤发生中的作用。方法动物模型的建立及分组;大鼠神经功能评价;检测神经元凋亡情况及脑脊液(CSF)中谷氨酸(Glu)含量。结果给予HCN通道阻断剂(ZD7288)后进一步加重神经功能损害及神经元凋亡,CSF中Glu含量进一步增加;而给予非特异HCN通道激动剂(NO/Sp)后并未改善神经功能损害,未能显著缓解神经元凋亡情况及降低Glu含量。结论阻断HCN通道后,神经元损伤及神经功能损害进一步加重;给予NO/Sp干预后,神经元及神经功能损害情况并未显著改善。

体外培养猪骨髓间充质干细胞hHCN2基因的转染及表达

背景:通过超极化活化的阳离子电流调制心脏自律性成为该领域研究的焦点。目的:将起搏基因质粒CMV-hHCN2-3xha-IRES-EGFP转染到猪骨髓间充质干细胞,检测其在骨髓间充质干细胞中核酸和蛋白水平是否表达。方法:采用单纯直接贴壁法或密度梯度离心结合直接贴壁法分离、纯化、增殖获得骨髓间充质干细胞,脂质体2000转染质粒CMV-hHCN2-3xha-IRES-EGFP至骨髓间充质干细胞。结果与结论:单纯直接贴壁法收集到的细胞增殖速度慢,而密度梯度离心结合直接贴壁法细胞增殖速度较快,原代细胞培养第3代后转染48h荧光显微镜下可见骨髓间充质干细胞发出荧光,对照组无荧光。细胞转染率达15%-20%。RT-PCR检测及Westernblot印迹检测证明了hHCN2基因在骨髓间充质干细胞有表达。密度梯度离心结合直接贴壁法较单纯直接贴壁法培养骨髓间充质干细胞的培养效率更高。转染目的基因hHCN2的骨髓间充质干细胞蛋白有表达。

腺病毒介导的hHCN4表达载体的构建及其转染人胚肾细胞

目的构建人超极化激活环核甘酸门控通道基因4(hHCN4)的重组腺病毒载体pAV-hHCN4-IRES/eGFP,并对其进行鉴定、包装。方法利用Gateway技术构建pAV-hHCN4-IRES/eGFP,酶切鉴定并进行阳性克隆测序。将构建好的质粒转染人胚肾细胞HEK293,检测病毒液滴度。结果测序符合Genbank中的hHCN4的编码序列。转染HEK293细胞见绿色荧光蛋白表达,病毒滴度为1.26×108 pfu/ml。结论成功构建了重组腺病毒载体pAV-hHCN4-IRES/eGFP。