人脐带血间充质干细胞条件培养基在白血病患儿口腔黏膜炎中的疗效观察

目的探讨人脐带血间充质干细胞条件培养基在白血病患儿口腔黏膜炎中的临床疗效。方法 2015年1-12月收治的白血病患儿312例,共发生口腔黏膜炎124例,随机分为两组,每组62例。对照组采用生理盐水漱口后,在溃疡面涂抹外用重组人粒细胞巨噬细胞刺激因子凝胶(金扶宁rhGM-CSF);观察组采用生理盐水漱口后,在溃疡面涂抹人脐带血间充质干细胞培养基(hUCB-MSC-CM)。观察两组患儿口腔创面愈合时间及愈合率。结果观察组口腔创面愈合时间5~14d,愈合率91.9%;对照组口腔创面愈合时间5~14d,愈合率67.7%,观察组明显优于对照组(P<0.05)。结论人脐带血间充质干细胞培养基在白血病患儿口腔黏膜炎中疗效显著。

骨髓间充质干细胞条件培养基对缺氧大鼠神经元凋亡的影响

目的观察大鼠骨髓间充质干细胞(BMMSCs)条件培养基(B-CM))对缺氧大鼠大脑皮质神经元凋亡的影响。方法分离、培养、传代Wistar大鼠BMMSCs,细胞融合达90%时更换培养基,继续培养24h后收集培养上清液即B-CM;取培养8d的新生Wistar大鼠大脑皮质神经元,分正常对照组、缺氧组、B-CM组,分别于缺氧0、6h、复氧24h用四甲基偶氮唑盐微量反应比色(MTT)法检测各组细胞活性,用流式细胞仪和透射电镜技术检测神经元凋亡情况。结果神经元缺氧6h细胞活性较对照组明显降低,复氧24h后细胞凋亡率明显升高(P<0.01)。B-CM培养后细胞活性和缺氧前无差异,细胞凋亡明显较少(P<0.01)。结论B-CM对缺氧-复氧引起的神经元凋亡有明显的防护作用。

脂肪来源间充质干细胞条件培养基对小型猪腹腔镜肝损伤氧化应激反应的影响

旨在探究脂肪来源间充质干细胞条件培养基(adipose-derived mesenchymal stem cells-conditioned medium,ADSCs-CM)对小型猪肝损伤氧化应激反应的影响,作者选取24头健康小型猪,随机分为4组,每组6只,分别为模型组(IRI)、DMEM对照组(DMEM)、ADSCs-CM治疗组(CM)和ADSCs治疗组(ADSCs)。4组均通过腹腔镜技术建立小型猪肝缺血再灌注(ischemia reperfusion,IR)合并部分肝切除的肝损伤模型,IRI组移植生理盐水,DMEM组移植浓缩的基础培养基,CM组移植浓缩的脂肪来源间充质干细胞培养基,ADSCs组移植脂肪间充质干细胞。各组分别于术前、术后1、3、7 d采集血液与肝组织样本,使用肝功能检测试剂盒对血清中总胆红素(T-BIL)、乳酸脱氢酶(LDH)、总蛋白(TP)进行检测;使用氧化应激检测试剂盒对肝组织中丙二醛(MDA)、髓内过氧化物酶(MPO)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)进行检测。结果显示:术后1、3 d:模型组和对照组肝功能严重损伤,发生明显氧化应激反应,CM和ADSCs治疗组显著促进肝功能的恢复,且氧化应激相应指标较模型组和对照组表达明显下降。术后7 d,各组基本恢复到术前水平。结果显示:腹腔镜肝缺血再灌注合并肝部分切除损伤可致小型猪发生氧化应激反应,脂肪来源间充质干细胞及其条件培养基均可改善肝损伤后的氧化应激反应。

骨髓间充质干细胞条件培养基对小鼠肺泡上皮细胞增殖的影响及机制

目的探讨骨髓间充质干细胞条件培养基(BMSCs-CM)对小鼠肺泡上皮细胞增殖的影响及机制。方法分离与培养小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),流式细胞仪检测细胞表面标记物示CD44阳性表达率为92.5%、CD34阴性表达率为97.3%,提示成功分离与培养BMSCs,且纯度较高。当第2代细胞融合70%~80%时,提取BMSCs-CM。将人肺泡上皮细胞A549随机分为对照组、无血清组、BMSCs组、BMSCs-CM组。对照组以含10%血清的DMEM/F12培养基培养,无血清组以无血清的DMEM/F12培养基培养,BMSCs组加入已接种小鼠BMSCs的Transwell用无血清的DMEM/F12培养基共培养,BMSCs-CM组以获取的小鼠BMSCs-CM培养。培养24 h时,采用CCK-8法检测各组细胞相对存活率。将体外常规培养的肺泡Ⅱ型细胞(ATⅡ)随机分为对照组、BMSCs-CM组,对照组以无血清的DMEM/F12培养基培养24 h,BMSCs-CM组以获取的小鼠BMSCs-CM培养24 h,采用RT-PCR法检测钠通道蛋白α(α-ENa C)相对表达量。结果无血清组细胞相对存活率为(80.70±0.70)%,BMSCs组为(85.83±1.98)%,BMSCs-CM组为(91.28±1.91)%,BMSCs组与BMSCs-CM组均高于无血清组(P<0.05或<0.01)。对照组α-ENa C相对表达量为1.00±0.00,BMSCs-CM组为3.16±1.50,两组比较P<0.05。结论 BMSCs-CM可促进肺泡上皮细胞增殖,其作用机制可能与促进肺泡Ⅱ型细胞α-ENa C表达有关。

炎症激活骨髓间充质干细胞条件培养基对辐射损伤IEC-6细胞的修复

背景:间充质干细胞条件培养基是干细胞移植理想的替代方案,课题组前期研究表明炎症预激活的间充质干细胞条件培养基能促进辐射损伤小肠组织学结构和功能的修复,改善急性辐射损伤大鼠生存状态,但其潜在的细胞机制未进一步探讨。目的:观察炎症预激活的间充质干细胞条件培养基对辐射损伤小肠上皮细胞增殖、凋亡的影响,探讨预激活间充质干细胞条件培养基修复小肠黏膜的细胞机制。方法:小肠隐窝IEC-6细胞分为对照组、辐射损伤组、辐射损伤+MSC-CM^(IEC-6(NOR))组和辐射损伤+MSC-CM^(IEC-6(IR))组,后3组以10 Gy X射线一次性照射IEC-6细胞建立体外急性小肠辐射损伤模型,对照组及辐射损伤组加入DMEM-F12培养基,辐射损伤+MSC-CM^(IEC-6(NOR))组加入正常状态间充质干细胞条件培养基,辐射损伤+MSC-CM^(IEC-6(IR))组加入炎症激活状态间充质干细胞条件培养基。照射后3 d收集细胞行免疫荧光PCNA染色观察增殖改变,行TUNEL凋亡染色及Western blot蛋白免疫印迹法观察凋亡改变。结果与结论:与辐射损伤组相比,辐射损伤+MSC-CM^(IEC-6(IR))组IEC-6细胞PCNA阳性细胞数明显增加(P<0.05),TUNEL阳性细胞数下降(P<0.05),凋亡相关因子Caspases-3蛋白表达明显下降(P<0.05),而辐射损伤+MSC-CM^(IEC-6(NOR))组的各项指标变化无统计学意义(P>0.05)。上述结果表明,与正常状态的间充质干细胞条件培养基相比,炎症激活的间充质干细胞条件培养基显著促进辐射损伤肠上皮细胞的增殖,并抑制其凋亡,促进辐射损伤小肠上皮修复。

不同来源间充质干细胞条件培养基对内源性衰老细胞作用的比较

背景:随着经济的发展,人们对美的追求越来越高,抗衰老研究成为当今的研究热点。干细胞是具有自我更新能力和多向分化能力的细胞,间充质干细胞是其中的一种。研究表明间充质干细胞能通过旁分泌作用修复损伤衰老的细胞,但对于不同来源间充质干细胞条件培养基的抗皮肤衰老作用研究甚少。目的:比较人脂肪、羊水、胎盘、脐带来源间充质干细胞条件培养基对自然衰老皮肤成纤维细胞的抗衰老作用。方法:制备人脂肪、羊水、胎盘、脐带4种不同来源的间充质干细胞条件培养基,添加到自然衰老皮肤成纤维细胞中,采用CCK-8法检测细胞活力、β-半乳糖苷酶染色试剂盒检测细胞衰老率、DCFH-DA探针检测活性氧含量以及q PCR检测p16、p53、COL1、KLOTHO基因表达量。结果与结论:①4种间充质干细胞条件培养基均能提高皮肤成纤维细胞的活力,其中脂肪间充质干细胞条件培养基的效果最好,β-半乳糖苷酶染色率最低;②4种间充质干细胞条件培养基均能降低活性氧含量,脂肪和羊水来源间充质干细胞条件培养基组的活性氧含量最低;③p16和p53在胎盘和脐带间充质干细胞条件培养基组的表达均高于对照组,在羊水来源间充质干细胞条件培养基组的表达较低,脂肪间充质干细胞条件培养基组p16表达显著低于对照组,但p53的表达较高;④COL1基因表达除羊水间充质干细胞条件培养基组外,其他3组均显著高于对照组,KLOTHO基因表达除胎盘间充质干细胞条件培养基组外,其他3组均显著高于对照组,且脂肪间充质干细胞条件培养基组的表达最高;⑤结果显示,4种不同来源间充质干细胞条件培养基能在一定程度上延缓细胞衰老,但作用效果存在差异,其作用机制还有待进一步研究。

间充质干细胞培养上清抑制星状细胞活化治疗肝纤维化的研究

目的:研究骨髓来源间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)条件培养基(mesenchymal stem cell-conditioned medium,MSC-CM)对肝纤维化是否有治疗作用及其作用机制。方法 :6周龄SD大鼠随机分为3组(n=8):模型组,治疗组,正常对照组。建立四氯化碳(CCL4)诱导大鼠肝纤维化模型,腹腔注射CCL4,1.5 m L/kg,每周2次,持续8周。MSC培养至3~5代用于MSC-CM的制备,获取的MSC-CM并超滤浓缩约25倍,过滤除菌。在实验第5周起,治疗组经尾静脉注射2 mg/kg MSC-CM,每天1次至第8周末,同时模型组和正常组注射相同剂量的L-DMEM。至实验终点,按照原位灌注和密度梯度离心法提取肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC),并留取肝组织行病理学检查。通过Masson染色和免疫组织化学染色法来检测胶原纤维沉积的程度和α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达程度;qRT-PCR和Western blot检测HSCs中α-SMA、转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)、Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)、基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinases-2,MMP-2)、组织金属蛋白酶抑制剂-2(tissue inhibitor of metalloproteinases-2,TIMP-2)mRNA和蛋白的表达水平。结果:MSC-CM治疗组肝脏炎症程度较模型组减轻,胶原纤维和α-SMA表达量均较模型组明显降低(P<0.05),但未达到正常组水平(P<0.05)。治疗组HSC中TGF-β1、α-SMA、CollagenⅠmRNA和蛋白表达水平较模型组明显下降(P<0.05),MMP-2 mRNA表达水平较模型组升高(P<0.05)。结论:静脉注射MSC-CM对CCL4诱导的肝纤维化有一定治疗作用,这一过程可能与MSC-CM能降低TGF-β1的表达、抑制HSC活化及促进胶原蛋白降解有关。

鼠骨髓间充质干细胞对神经元凋亡的影响

目的探讨体外培养鼠骨髓间充质干细胞对谷氨酸诱导大脑皮质神经元凋亡的影响。方法分离、培养、传代Wistar大鼠骨髓间充质干细胞,细胞融合达90%时更换培养基,继续培养24h,收集细胞培养液即为骨髓间充质干细胞条件培养基;培养新生Wistar大鼠大脑皮质神经元,第8d随机分为对照组、谷氨酸损伤组和骨髓间充质干细胞条件培养基处理组。采用台盼蓝染色计算神经元存活率,同时用流式细胞仪和透射电镜技术检测各组神经元凋亡情况。结果谷氨酸(0.8mmol/L)可诱导细胞凋亡,骨髓间充质干细胞条件培养基处理组较谷氨酸损伤组细胞成活率明显升高(P<0.001);流式细胞仪检测见骨髓间充质干细胞条件培养基处理组细胞凋亡率明显降低(P<0.001);而电镜检测发现对照组无明显的凋亡细胞,谷氨酸组有典型凋亡神经元,骨髓间充质干细胞条件培养基处理组凋亡细胞数明显减少。结论骨髓间充质干细胞条件培养基对谷氨酸神经元毒性具有拮抗作用。

兔骨髓间充质干细胞促进乳鼠损伤神经元修复的研究

【目的】探讨骨髓间充质干细胞对损伤神经元的作用。【方法】培养骨髓间充质干细胞融合达90%时更换培养基培养24 h,收集细胞培养液即为BMMSC条件培养基,用谷氨酸建立离体大鼠皮质神经元损伤模型,用MSC条件培养基进行对谷氨酸损伤神经元的修复,倒置显微镜观察细胞生长及形态的变化,用四唑盐比色法(MTT)和乳酸脱氢酶(LDH)法分别检测各组神经元的活性和细胞损伤后修复的程度。【结果】谷氨酸(0.8 mmol/L)对神经元有明显的损伤作用(P<0.05),骨髓间充质干细胞条件培养基能提高正常及损伤神经元细胞活性,MTT值明显升高(P<0.05),LDH渗漏量明显下降(P<0.05)。【结论】骨髓间充质干细胞条件培养基能促进损伤神经元的修复。

细胞传代对小型猪脂肪间充质干细胞及分泌因子的影响

为了探索细胞传代对小型猪脂肪间充质干细胞(adipose-derived mesenchymal stem cells,ADSCs)的影响,试验采用形态学观察法、CCK8法、Transwell迁移法、ELISA法对P3~P9代ADSCs的形态变化、增殖能力、迁移能力进行研究,并检测了传达次数对脂肪间充质干细胞的条件培养基(adipose-derived mesenchymal stem cells conditioned medium,ADSCs-CM)中血管内皮生长因子(VEGF)、血管生成素-1(ANG-1)、血管生成素-2(ANG-2)、碱性成纤维细胞生长因子(b-FGF)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)含量的影响。结果表明:随着传代次数的增加,ADSCs形态发生变化,细胞折射率变低,边界逐渐不清晰;不同传代次数的ADSCs生长曲线相似,近似S型,但P3、P5代细胞增殖能力显著高于P9代(P<0.05);且P5代细胞迁移能力与P3、P9代细胞存在极显著差异(P<0.01);P5代细胞分泌VEGF、ANG-1、ANG-2、b-FGF、IL-6能力最强,P6代细胞分泌IL-1β最多。说明细胞传代次数的增加会影响ADSCs的增殖、迁移及分泌能力。

BMSC-CM通过抑制Notch1信号通路减轻H_2O_2诱导的神经干细胞凋亡

目的探讨骨髓间充质干细胞条件培养基(BMSCCM)对氧化应激损伤的神经干细胞(NSCs)的保护作用,以及Notch1信号通路在其中所发挥的作用。方法通过使用过氧化氢(H_2O_2)来模拟氧化应激环境,采用流式细胞仪检测NSCs的凋亡率。Western blot法检测Notch1蛋白、Hes1蛋白、含半胱氨酸的天冬氨酸水解酶3蛋白(Caspase-3)、Caspase-9、Bcl-2相关蛋白(Bax)蛋白和B细胞淋巴瘤蛋白2(Bcl-2)的表达量。结果结果表明,BMSC-CM可以降低H_2O_2引起的氧化应激环境的损害。BMSC-CM可以抑制Notch1信号通路,提高神经干细胞的存活率。结论 BMSCCM可以通过抑制Notch1信号通路来中和氧化应激损伤对NSCs细胞凋亡的影响。

骨髓间充质干细胞条件培养基对退变髓核细胞生物学活性及细胞外基质表达的调节作用

目的观察经骨髓间充质干细胞条件培养基培养的退变髓核细胞的生物学活性及细胞外基质表达的变化。方法(1)从成年SD大鼠股骨和胫骨中提取骨髓间充质干细胞,传代培养后,收集骨髓间充质干细胞条件培养基;(2)取成年大鼠,破坏其椎间盘纤维环,2周后获得椎间盘退变大鼠模型,提取大鼠脊柱髓核细胞;(3)以骨髓间充质干细胞条件培养基培养髓核细胞24 h。结果与正常髓核细胞比较,退变髓核细胞的活性[(59.43±12.33)%,t=11.647,P<0.01]明显降低,细胞中Ⅱ型胶原(0.50±0.12,t=14.677,P<0.01、0.49±0.17,t=7.153,P<0.01)、蛋白聚糖(0.72±0.23,t=15.436,P<0.01、0.26±0.32,t=8.816,P<0.01)蛋白及mRNA表达水平明显减少,基质金属蛋白酶-3(1.48±0.31,t=15.436,P<0.01、2.00±0.24,t=29.640,P<0.01)蛋白及mRNA表达水平明显增多。而骨髓间充质干细胞条件培养基可显著恢复退变髓核细胞的活性(79.62±10.11,t=4.786,P<0.01),并促进细胞中Ⅱ型胶原(1.23±0.16,t=10.933,P<0.01;0.74±0.16,t=3.506,P<0.01)、蛋白聚糖蛋白(1.49±0.28,t=9.359,P<0.01;0.99±0.37,t=6.846,P<0.01)及mRNA表达,降低基质金属蛋白酶-3(0.49±0.39,t=9.359,P<0.01;0.89±0.12,t=21.934,P<0.01)蛋白及mRNA表达,但骨髓间充质干细胞条件培养基对正常髓核细胞的活性(94.87±8.36,t=0.524,P>0.05)以及细胞中Ⅱ型胶原(1.52±0.18,t=0.299,P>0.05;1.21±0.31,t=1.543,P>0.05)、蛋白聚糖(1.81±0.32,t=0.486,P>0.05;0.99±0.16,t=0.094,P>0.05)和基质金属蛋白酶-3(0.24±0.14,t=0.486,P>0.05;0.55±0.11,t=0.593,P>0.05)蛋白及mRNA表达水平没有明显影响。结论骨髓间充质干细胞条件培养基对退变髓核细胞的增殖以及细胞外基质蛋白表达有促进作用。

BMSC-CM通过抑制Notch1信号通路促进神经干细胞的有效分化

目的探讨骨髓间充质干细胞条件培养液(BMSC-CM)对神经干细胞(NSCs)分化的影响及Notch1信号通路在其中的作用。方法在不同分化条件下培养NSCs,通过Notch1信号微活剂Jagged分析是否存在Notch1信号通路的作用。实验分为四组:对照组(NSCs)、Jagged组(NSCs+1μg/ml Jagged)、BMSC-CM组(NSCs+BMSC-CM)、BMSC-CM+Jagged组(NSCs+BMSC-CM+1μg/ml Jagged)。用免疫荧光染色法鉴定各组NSCs的分化情况,Western blot法检测MAP-2、GFAP及通路相关蛋白Notchl、NICD、Hes1、Hes5的表达量。结果免疫荧光分析显示:与对照组相比,BMSC-CM组神经元特异性微管相关蛋白-2(MAP-2)阳性细胞数明显增多,星形胶质细胞特异性胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性细胞数明显减少,在Jagged组中这种现象完全相反。关于Noteh1、NICD.Hes1、Hes5蛋白的表达量,Jagged组明显高于对照组,BMSC-CM组明显低于对照组,BMSC-CM+Jagged组明显低于Jagged组,BMSC-CM+Jagged组明显高于BMSC-CM组。结论BMSC-CM通过抑制Notch1通路促进神经千细胞在体外的有效分化,增加MAP-2阳性细胞比例,减少:GFAP阳性细胞比例。

人脐带间充质干细胞条件培养基联合白藜芦醇对人滋养层细胞的作用

目的:探讨人脐带间充质干细胞条件培养基联合白藜芦醇对人绒毛膜外滋养层细胞凋亡的影响。方法:通过CCK8细胞活力检测试剂盒测定白藜芦醇及其与人脐带间充质干细胞条件培养基共同处理人绒毛膜外滋养层细胞HTR8后对细胞增殖及活性的影响;细胞迁移试验检测白藜芦醇和人脐带间充质干细胞条件培养基对细胞迁移能力的影响;显微镜观察细胞形态,并用流式细胞仪检测细胞凋亡率的变化;Western blot检测白藜芦醇和人脐带间充质干细胞条件培养基对细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2以及迁移相关蛋白MMP-9表达的影响。结果:白藜芦醇能够抑制HTR8细胞增殖,抑制细胞迁移及MMP-9蛋白的表达,改变Bax和Bcl-2蛋白表达诱导细胞凋亡的作用。而人脐带间充质干细胞条件培养基能够逆转白藜芦醇对细胞的抑制作用。结论:人脐带间充质干细胞条件培养基能够通过调控Bax、Bcl-2、MMP-9的蛋白表达逆转白藜芦醇对人绒毛膜外滋养层细胞的抑制作用。人脐带间充质干细胞条件培养基可作为潜在的治疗人绒毛膜外滋养层细胞功能障碍的临床手段,孕妇需要小心使用白藜芦醇。

间充质干细胞条件培养基对多西紫杉醇诱导多倍体肺癌细胞衰老表型的研究

目的探讨间充质干细胞条件培养基对多西紫杉醇(Doc)诱导的多倍体肺癌细胞衰老表型的影响。方法人非小细胞肺癌1 299细胞株细胞分为3组, 常规组、Doc(24 h)组和Doc(24 h)+3 d组。常规组为二甲基亚砜处理细胞24 h;Doc(24 h)组为100 nmol/L的Doc处理细胞24 h;Doc(24 h)+3 d组为100 nmol/L的Doc处理细胞24 h, 更换新鲜的含10%胎牛血清的DMEM/F12培养基, 继续培养3 d。Doc(24 h)+3 d组细胞分为2组, Doc组和Doc+CM组。Doc组为含10%胎牛血清的DMEM/F12培养基中培养4 d;Doc+CM组为含10%胎牛血清的DMEM/F12培养基和hUC-MSC-CM(1∶1)的混合培养基中培养4 d。Hoechst 33342染色观察细胞核形态, 流式细胞术分析细胞DNA含量、线粒体膜电位及DNA损伤应答信号分子磷酸化组蛋白H2A.X(γ-H2A.X)的表达, 衰老β-半乳糖苷酶染色试剂盒检测β-半乳糖苷酶活性, 实时定量聚合酶链式反应(RTQ-PCR)检测衰老相关的炎性细胞因子白细胞介素6(IL-6)与白细胞介素8(IL-8)的信使核糖核酸(mRNA)表达水平。结果 Doc(24 h)组和Doc(24 h)+3 d组细胞核体积增大、DNA含量增加, 常规组、Doc(24 h)组和Doc(24 h)+3 d组多倍体细胞百分比分别为(12.27±3.29)%、(27.13±6.02)%和(43.60±4.26)%, Doc(24 h)组和Doc(24 h)+3 d组细胞百分比明显高于常规组, 差异有统计学意义(F=33.91, P=0.001)。常规组、Doc(24 h)组与Doc(24 h)+3 d组细胞密度分别为(8.18±0.54)×10^(4)/cm^(2)、(3.78±0.54)×10^(4)/cm^(2)及(0.75±0.08)×10^(4)/cm^(2), Doc(24 h)组与Doc(24 h)+3 d组细胞密度显著低于常规组, 差异有统计学意义(F=212.55, P=0.001)。常规组细胞β-半乳糖苷酶无活性, 细胞染色阴性, Doc(24 h)组与Doc(24 h)+3 d组中观察到有呈蓝色的阳性染色细胞, β-半乳糖苷酶活性增强。流式细胞术分析线粒体膜电位, 常规组、Doc组与Doc+CM组的JC-1单体百分比分别为(1.7±1.2)%、(48.2±12.9)%及(46.6±12.0)%, Doc组与Doc+CM组低电势细胞百分比明显高于常规组, 差异有统计学意义(F=20.15, P=0.002), Doc组细胞与Doc+CM组细胞线粒体膜电位比较, 差异无统计学意义(F=20.15, P=0.854)。常规组、Doc组与Doc+CM组中γ-H2A.X表达阳性的细胞百分比分别为(54.9±3.2)%、(58.9±4.0)%及(60.6±5.4)%, 差异无统计学意义(F=1.40, P=0.317)。Doc组与Doc+CM组γ-H2A.X荧光信号强度明显高于常规组, 荧光信号右移, Doc组与Doc+CM组γ-H2A.X荧光信号强度没有差异, 荧光信号没有偏移。Doc组IL-6与IL-8的mRNA表达水平是常规组的(7.22±0.34)倍及(157.64±7.49)倍, 差异有统计学意义(t=1.00, P=0.001)。Doc+CM组IL-6与IL-8的mRNA表达水平是Doc组的(48±6)%及(43±3)%, 差异有统计学意义(t=1.00, P=0.001)。结论 Doc诱导人非小细胞肺癌1 299细胞株细胞产生多倍体肿瘤细胞, 即多倍体肺癌细胞, 多倍体肺癌细胞表现多种衰老表型特征, hUC-MSC-CM不改变Doc诱导的多倍体肺癌细胞衰老表型, 但显著降低了炎性因子IL-6和IL-8的mRNA表达水平。

人脐血间充质干细胞培养液上清在血液肿瘤化疗相关口腔黏膜炎患者中的疗效观察

目的:探讨人脐血间充质干细胞培养液上清在血液恶性肿瘤化疗相关口腔黏膜炎患者中的治疗作用。方法:随机将血液恶性肿瘤化疗患者发生口腔黏膜炎常规治疗无效患者分为两组,实验组和对照组各20例。实验组使用间充质干细胞培养基上清漱口及涂抹溃疡,对照组使用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子漱口及涂抹溃疡,比较两组患者口腔黏膜炎愈合时间、治疗有效率及疼痛评分。结果:实验组口腔黏膜炎愈合时间短于对照组(P<0.05);实验组治疗中期有效率高于对照组(P<0.05);疼痛评分低于对照组(P<0.05)。两组均无明显的肝肾功能毒性。结论:人脐血间充质干细胞培养液上清在血液肿瘤化疗相关的口腔黏膜炎患者中,有较好的治疗作用且无明显毒副作用。

人脐带间充质干细胞旁分泌物质的作用及对肝功能衰竭的影响

脐带间充质干细胞（umbilical cord mesenchymal stem cell, UC-MSC）是从人脐带华尔通胶（Wharton jelly）中分离出的细胞，它可以表达间充质干细胞的表面标志，其生物学特性与骨髓间充质干细胞相似，可以诱导分化为多种细胞。最近国内外学者对UC—MSC的移植及诱导分化治疗进行了大量研究，如在心肌梗死、肾脏及血液系统疾病中的研究。但对UC—MSC旁分泌物质的研究却不多见。此文就UC—MSC的分泌、分化及免疫调节作用、旁分泌物质的作用及对肝功能衰竭的影响和应用前景作一综述。

上皮细胞钠通道在博来霉素诱导小鼠肺纤维化中的作用机制

目的探讨上皮细胞钠通道(ENaC)在博来霉素诱导小鼠肺纤维化中的作用及相关机制,以及骨髓间充质干细胞条件培养基(BMSCs-CM)对ENaC的作用。方法将20只C57小鼠随机分为对照组和实验组。Masson染色观察小鼠肺纤维化程度;实时荧光定量-PCR(RT-PCR)和Western blot方法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、α/β/γ-ENaC mRNA的表达水平。将体外常规培养的肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)随机分为DMEM/F12组(CON组)、转化生长因子β1(TGF-β1)处理组(TGF组)、TGF-β1+BMSCs-CM组(T+CM组),培养24 h,采用Western blot方法检测α/γ-ENaC蛋白的变化。结果与对照组比较,实验组小鼠体重明显下降(P<0.05),死亡率为36.36%。实验组小鼠肺组织Masson染色观察到明显的肺细胞损伤和组织纤维化。RT-PCR和Western blot结果显示实验组小鼠TGF-β1、α-SMA mRNA和蛋白表达水平明显上升(P<0.05),α/β/γ-ENaC 3个亚基mRNA和蛋白的表达水平明显下降(P<0.05)。与CON组比较,TGF组小鼠的AECⅡ中α/γ-ENaC蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与TGF组比较,T+CM组小鼠的AECⅡ中α/γ-ENaC蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论BMSCs-CM对肺纤维化的保护作用可能与促进AECⅡ中ENaC的表达有关。