成釉细胞纤维肉瘤间叶细胞的电镜和免疫组化研究

为探讨成釉细胞纤维肉瘤（ Ａ Ｆ Ｓ）间叶细胞的本质及特征， 作者采用免疫组化和电镜技术，对３例 Ａ Ｆ Ｓ间叶细胞进行了研究，并与６例成釉细胞纤维瘤进行比较。结果显示： Ａ Ｆ Ｓ的间叶细胞主要由成纤维细胞构成，此外尚有少许未分化间叶细胞和组织细胞， 偶见肌纤维母细胞。成纤维细胞仅表现 Ｖｉｍ ｅｎｔｉｎ 阳性。肌纤维母细胞呈 Ｖｉｍ ｅｎｔｉｎ， Ｈ Ｈ Ｆ３５及 α Ｓ Ｍ Ａ 阳性。组织细胞 Ｐ Ｇ Ｍ１ 和ｋｐ１标记均阳性， 可能是炎症或免疫反应的产物。与成釉细胞纤维瘤比较， Ａ Ｆ Ｓ间叶细胞具备较高的 Ｐ Ｃ Ｎ Ａ 阳性标记率， 提示 Ａ Ｆ Ｓ的增生活性较高。

KLF4调控上皮细胞-间叶细胞转化抑制脑膜瘤

目的研究KLF4在脑膜瘤中的作用及其对上皮细胞-间叶细胞转化(EMT)的调控作用。方法通过临床手术和诊断获得分级脑膜瘤脑蛛网膜组织样本,采用Western blotting和定量real-time PCR对组织样本进行KLF4蛋白半定量表达和mRNA定量表达检测。构建KLF4异位表达载体并获取病毒液对原代脑膜瘤细胞和恶性脑膜瘤细胞系IOMM-Lee进行感染,通过细胞趋化和侵袭实验检测KLF4超表达对脑膜瘤细胞的影响。同时通过检测KLF超表达细胞中EMT相关转录因子(E-cadherin,α-catenin,Vimentin,VEGFA)的表达探讨其对在该生物学过程中的作用机制。利用荧光素酶报告基因系统测定KLF4超表达对VEGFA启动子活性的影响,并进行染色质免疫沉淀实验检测KLF4与VEGFA的相互作用。结果在脑膜瘤患者中,KLF4的蛋白表达低于健康对照组(P<0.001),且脑膜瘤患病组Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ级组间呈梯度下降(P<0.05)。体外试验中,KLF4超表达细胞组的趋化细胞和侵袭细胞数明显低于对照组(P<0.01)。KLF4超表达抑制原代脑膜瘤细胞和IOMM-Lee的趋化和侵袭作用。KLF4超表达对EMT的影响实验发现实验组细胞中上皮细胞标记因子E-cadherin和α-catenin表达明显高于对照组(P<0.05),而间叶细胞标记因子Vimentin和VEGFA的表达显著低于对照组(P<0.05)。蛋白表达结果与mRNA表达结果相一致。荧光素酶报告基因和染色质荧光免疫实验显示,超表达的KLF4与VEGFA相互作用并抑制VEGFA启动子活性。结论 KLF4蛋白与脑膜瘤患者临床分期有明显的负相关性,且其可以通过调控脑膜瘤细胞上皮细胞-间叶细胞转化而发挥抑制作用。

肾混合性上皮间叶肿瘤:具有上皮和间叶细胞分化能力的单一细胞起源证据(英)

混合性上皮-间叶肿瘤是罕见的双向分化的肾肿瘤,有囊性和实性区,其中实性区由形态不同的基质组成,包括卵巢样基质和异质性明显的上皮成分。该肿瘤的组织发生和克隆性起源不甚明了。本研究共观察了21例肾混合性上皮间质肿瘤,均为进行了根治性或部分肾切除的女性患者。对经福尔马林固定。

外阴梭形细胞间叶组织源性恶性肿瘤1例

1病例资料。患者,女性,42岁,未婚,有性生活史,因“发现外阴肿物4年,反复疼痛发作1年余”入院。患者于2022年6月30日于当地医院就诊,彩超提示“皮下软组织内见一大小约77 mm×50 mm实性包块”,2023年4月19日因发现肿块增大致排尿排便困难收入院。

高糖诱导足细胞发生上皮-间叶细胞转分化

目的通过观察高糖是否引起小鼠足细胞发生上皮-间叶细胞转分化现象，探讨糖尿病肾小球损伤的可能机制。方法以小鼠永生化足细胞株为研究对象，予不同浓度葡萄糖（12．5、25、50mmol／L）处理该细胞36h，并设低糖（5．6mmol／L）和甘露醇（50mmol／L）处理组为对照组。采用蛋白免疫印迹和间接免疫荧光染色方法检测α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、迁连蛋白（FN）、CD2相关蛋白（CD2AP）和Wihns’肿瘤1基因（WT-1）蛋白的表达。结果低糖（5．6mmol／L）和甘露醇（50mmol／L）处理条件下小鼠足细胞表达WT-1、CD2AP，基本不表达α-SMA和FN；而予不同浓度葡萄糖处理36h后，足细胞中α-SMA和FN表达水平呈剂量依赖性上调（P〈0．05）。间接免疫荧光染色结果也显示，与低糖组相比，高糖组中α-SMA阳性的足细胞比例显著增加（P〈0．05）。同时，蛋白免疫印迹结果还表明高糖可呈剂量依赖性方式下调WT-1和CD2AP的表达（P〈0．05）。结论在高糖条件下，足细胞发生向间叶细胞表刑的转分化可能是引起足细胞功能失调，进而引起糖尿病肾小球损伤发生的作用机制之一。

氟伐他汀抑制高糖诱导足细胞发生上皮-间叶细胞转分化

目的探讨他汀类药物保护高糖诱导的糖尿病肾小球损伤的可能机制。方法给予25 mmol/L葡萄糖刺激的同时给予不同浓度的氟伐他汀处理分化后的足细胞36 h。采用蛋白免疫印迹法检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤维粘连蛋白(FN)、CD2相关蛋白(CD2AP)和Wilms肿瘤1基因(WT-1)蛋白的表达;间接免疫荧光法检测αSMA。结果低糖(5.6 mmol/L)条件下小鼠足细胞表达高水平的WT-1、CD2AP,基本不表达αSMA和FN;予25 mmol/L葡萄糖作用36 h后,足细胞中αSMA和FN表达水平升高,同时WT-1和CD2AP表达水平降低。在高糖条件下给予不同浓度的氟伐他汀处理,结果表明氟伐他汀可部分逆转高糖的上述作用,且存在一定的剂量依赖性。结论氟伐他汀可在一定程度上抑制高糖诱导的足细胞发生向间叶细胞表型的转分化。

自体骨髓间叶干细胞诱导分化移植重建窦房结起搏功能的实验研究

目的 :探索应用骨髓干细胞治疗病态窦房结综合征的生物介入方法。 方法 :选取犬 6只 ,随机分为实验组和对照组 ,每组 3只。抽取犬自体骨髓 ,分离培养扩增骨髓间叶干细胞 ,并在体外应用 5 氮胞苷进行诱导分化。应用射频技术损伤犬窦房结 ,建立动物病态窦房结综合征模型。将溴脱氧尿嘧啶核苷 (BrdU)标记的且诱导分化的骨髓间叶干细胞自体移植到窦房结区 ,应用心电图、组织病理、免疫组化等技术观察干细胞移植治疗效果。 结果 :在动物病态窦房结综合征模型 ,自体移植骨髓干细胞后 ,心电图示窦房结功能明显改善 ;病理与免疫组化示移植的骨髓干细胞在窦房结区分化为拟窦房结细胞与血管内皮细胞 ,并与宿主细胞建立缝隙连接。 结论 :自体移植诱导分化的骨髓间叶干细胞可改善窦房结自律起搏功能。

犬骨髓间叶干细胞体外定向诱导分化心肌细胞的实验研究

目的 :旨在建立骨髓间叶干细胞 (MSCs)体外定向诱导分化心肌细胞的方法 ,为心肌疾患的移值修复治疗提供成体干细胞来源。方法 :利用Percoll密度梯度法及MSCs黏附贴壁生长特性进行分离培养与扩增骨髓MSCs ,并予以鉴定证实。应用5 氮胞苷对培养早期的骨髓MSCs进行定向诱导分化心肌细胞。通过细胞形态学、细胞免疫组化、透射电镜等技术观察分化细胞的肌管 ,心肌细胞特异性蛋白与细胞特异性超微结构以鉴定诱导分化的效果。结果 :利用Percoll密度梯度法与细胞黏附贴壁生长特性 ,可分离培养与扩增足量骨髓MSCs。应用化学诱导剂 5 氮胞苷 10～ 2 0 μmol/L孵育早期培养的骨髓MSCs 4～ 5周 ,可见细胞形成肌管 ;肌细胞特异性蛋白α 肌动蛋白 ,肌球蛋白以及心肌细胞特异性分子标志肌钙蛋白I免疫组化染色阳性 ;透射电镜可见肌丝与房性颗粒。结论 :骨髓MSCs可在体外 5 氮胞苷的诱导下定向转化为具有典型结构的心肌细胞。

间叶干细胞及其肿瘤转化与上皮分化

成体间叶干细胞（mesenchgmal stem cells,MSCs）存在于所有器官和组织中。MSCs活体移植于特定器官损伤的小鼠,或经适宜条件体外培养,可向特定上皮细胞分化。MSCs经长期培养,由于基因组不稳定性。

自体骨髓间叶干细胞诱导分化移植治疗房室阻滞的初步观察

利用诱导分化的骨髓间叶干细胞自体移植治疗房室阻滞，探讨生物介入方法治疗缓慢型心律失常的新途径。11只实验犬随机分为实验组(n=6)和对照组(n=5)。应用射频技术消融His束，制备永久Ⅲ度房室阻滞动物模型；每只犬抽取10ml犬骨髓液，应用密度梯度离心法及贴壁培养法分离、培养和扩增骨髓间叶干细胞，5=氮胞苷对骨髓间叶干细胞进行诱导分化；房室阻滞4周后，开胸心脏直视下将BrdU标记的分化干细胞(1ml，1．5×10^7细胞)多点注射至该犬消融的His束部位，而对照组仅将1ml DMEM培养液替代干细胞悬液多点注射至相同部位。术后1—12周，应用心电图观察两组活体动物房室功能恢复情况，应用组织病理、免疫组化等技术对移植干细胞的存活、增殖、分化与缝隙连接功能进行评价。结果：在动物房室阻滞模型中，实验组犬在自体骨髓干细胞移植后12周，2／6只犬的房室传导功能得以改善；病理与免疫组化示诱导分化的骨髓干细胞在His束区存活、增殖和分化为心肌细胞、血管内皮细胞，并与宿主细胞建立缝隙连接；而对照组5只犬未见上述变化。结论：自体移植诱导分化的骨髓间叶干细胞有可能改善His束传导功能。

犬骨髓间叶干细胞的多向分化潜力

目的观察犬骨髓间叶干细胞的体外多向分化潜力,为损伤组织的干细胞移植修复提供理论基础。方法利用梯度-贴壁筛选法分离、培养与扩增骨髓间叶干细胞。利用化学诱导剂5-氮胞苷(20滋mol/L),血管内皮细胞生长因子(VEGF10ng/ml),成骨细胞诱导剂(地塞米松10nMol/L,抗坏血酸0.05mMol,茁甘油磷酸钠10mMol/L)以及成脂肪细胞诱导剂(1-甲基3-异丁基黄嘌呤0.5mmol/L,地塞米松1滋mol/L,胰岛素10mg/L,消炎痛100mmol/L),分别定向诱导骨髓间叶干细胞分化为心肌细胞、血管内皮细胞、成骨细胞与脂肪细胞。再应用细胞形态观察、免疫细胞化学染色及电镜对分化细胞进行鉴定。结果利用梯度-贴壁筛选法可以分离培养与扩增骨髓间叶干细胞。5-氮胞苷可诱导干细胞呈现肌管、肌丝、心房颗粒,且肌细胞特异性蛋白琢-actinin,Myosin,琢-Actin,TroponinI免疫染色阳性;VEGF可诱导骨髓间叶干细胞出现管网状、血管样及鹅卵石样结构,vWF免疫染色阳性;成骨细胞诱导剂可诱导分化细胞碱性磷酸酶阳性;成脂肪细胞诱导剂使分化细胞内出现脂肪滴,油红O染色示脂滴为橙红色。结论成年犬骨髓间叶干细胞在体外具备多向分化潜力。在化学或生物诱导剂的作用下,犬骨髓间叶干细胞能够定向分化为心肌细胞、血管内皮细胞、成骨细胞、脂肪细胞等多种间叶组织?

腹腔良性间叶瘤CT诊断

腹腔良性间叶瘤少见,常误诊为畸胎瘤.本文报告5例经手术病理证实的腹腔良性间叶瘤并讨论CT诊断.临床和CT资料本组5例又性间叶瘤,其中腹腔4例,腹膜后1例,见附表.讨论间叶细胞瘤是各种不同间胚叶组织结构的混合瘤,按肿瘤内间胚组织及成熟度不同,可分为良性及恶性问叶瘤两类,良性问叶瘤由分化好又成熟的多种间胚叶成分构成,常见有脂肪、纤维、血管、平滑肌、骨及软骨等组织,肿瘤内各种成份含量不一.所占范围大小差异亦较大,肿瘤可发生在身体多部位和多器官,发生在腹腔少见.有些作者认为良性间叶瘤是一种错构瘤.

SOCS-3对OSM诱导的肾小管上皮细胞转分化的影响

目的观察细胞因子信号传导抑制蛋白-3(suppressors of cytokine signaling,SOCS-3)对抑瘤素M(oncostatin M,OSM)诱导的人肾小管上皮细胞转分化的影响。方法体外培养人肾近曲小管上皮细胞株(HKC),用Lipofectamine 2000分别转染pCR3.1/SOCS-3表达质粒和pCR3.1空质粒载体,G418筛选阳性克隆,应用OSM(10 ng/ml)进行刺激。培养48 h后收集细胞及上清液,采用Western blot检测SOCS-3、CK18、α-SMA和磷酸化信号传导及转录激活因子3(phospho-Signal transducers and activators of transcription 3,p-STAT3)的表达;采用酶联免疫吸附实验测定细胞上清液中Ⅰ型胶原(collagenⅠ,ColⅠ)和纤维连接蛋白(fibronectin,FN)的分泌;采用RT-PCR检测SOCS-3 mRNA的表达。结果与对照组相比,OSM刺激组肾小管上皮细胞α-SMA和p-STAT3蛋白表达增加,细胞培养上清液ColⅠ和FN的分泌增加,而CK18蛋白表达减少。SOCS-3过表达能抑制OSM刺激引起的α-SMA和p-STAT3蛋白表达,减少ColⅠ和FN的分泌,同时能够部分恢复OSM刺激引起的CK18蛋白表达。结论 SOCS-3过表达能抑制OSM诱导的肾小管上皮细胞转分化,此过程可能与p-STAT3的磷酸化受抑有关。

胃肠间质瘤的临床特点

胃肠间质瘤（gastrointestinal stromal tumours,GISTs）是消化道最常见的、独立的一类间叶性肿瘤。它被认为是起源于星型胶质细胞干细胞。最近10年,GISTs已经从组织发生不明确的胃肠道间叶细胞肿瘤变成了定义明确的，具有独特的临床、形态学、超微结构、组织发生和分子特性并因此可以实现靶向治疗的一类肿瘤。