亲和素-生物素间接偶联的压电DNA传感器研究

采用 33′ 二巯基硫代丙酸的金电极自组装技术 ,用乙基 3 (3 二甲氨基 )碳二亚胺盐酸盐 (EDC)和N 羟基磺基琥珀酰亚胺 (NHS)偶联剂将亲和素固定于金电极上 ,联于生物素标记的探针 ,制备成压电DNA传感器的检测电极 ,和杂交液中的待检葡萄球菌肠毒素B的ssDNA进行杂交 ,通过频率信号检测DNA杂交的量 ,达到检测的目的 .采用不同长度的基因片段进行了研究 ,制作的传感器一致性、特异性都较好 ;杂交后的电极 ,电极再生后 。

间接偶联法合成Aβ_(1-15)多重抗原肽疫苗及其免疫学活性

目的探索合成Aβ1-15重抗原肽疫苗的方法,并对其免疫学活性进行鉴定。方法采用间接偶联法合成8分支Aβ1-15重抗原肽（MAP）,通过高效反相液相色谱（RP-HPLC）、SDS-PAGE以及氨基酸成分分析对其进行初步鉴定。以合成的MAP Aβ1-15C57BL/6小鼠,用ELESA法检测血清特异性抗Aβ抗体。结果间接偶联法合成的MAP Aβ1-15RP-HPLC层析后,呈现为一宽大主峰。SDS-PAGE检测显示,共有8条蛋白带,条带梯度比较均匀,分别为1～8分支的MAP Aβ1-15基酸组份及含量基本与Aβ1-15肽的序列一致。以合成的MAP Aβ1-15免疫C57BL/6小鼠后,可产生高滴度的特异性抗Aβ抗体。结论间接偶联法可成功地合成MAP Aβ1-15,且具有很好的免疫学活性,但合成的MAP产物难以纯化。

2,2’-二苯基二硫的间接电解氧化合成

以KI-NaI为间接电解质,丙酮为溶剂,用间接电解氧化的方法对硫酚进行偶联,高产率地得到了偶联产物2,2’-二苯基二硫(Ph2S2).

表面等离子共振法测量乙肝病毒功能受体NTCP与配体相互作用

钠离子/牛磺胆酸共转运多肽(NTCP,SLC10A1)是乙型肝炎病毒(HBV)感染肝细胞的功能性受体,也是抗慢性乙肝感染药物的潜在靶标。目前评价NTCP与其配体相互作用的方法仍然有限。本文使用Sf9细胞表达并纯化了重组NTCP蛋白,通过抗体间接偶联的方法将其固定在表面等离子共振实验芯片上。通过动力学分析,拟合得出HBV PreS1多肽对NTCP结合的平衡解离常数K_(D)为4.93μmol/L;NTCP经典底物牛磺胆酸钠对NTCP的平衡解离常数K为25.3μmol/L。相对于化合物抑制NTCP底物转运的活性,通过SPR方法测得的平衡解离常数可比较化合物与NTCP直接相互作用力的强弱,并用于研发基于NTCP-PreS1相互作用的抗HBV药物。