副猪嗜血杆菌血清5型间接血凝试验和间接ELISA抗体检测方法的建立

为建立副猪嗜血杆菌（HPS）的血清学诊断方法，通过探索HPS荚膜多糖产生的最适体外培养条件，提取了HPS血清5型菌株的荚膜多糖（CPS），并以之为抗原分别建立了间接血凝试验（IHA）和间接ELISA两种抗体检测方法，对其特异性、敏感性和符合率进行了比较研究。结果表明，两种检测方法的特异性良好，但ELISA的敏感性是IHA的5～10倍，二者的阳性符合率、阴性符合率和总符合率分别为79．7％、55．2％和65．3％。用这两种方法检测了320份临床送检猪血清，IHA和ELISA的阳性率分别为40％和59％。结果证实，这两种方法适用于不同实验室条件下HPS的诊断和流行病学调查。

鼠疫反向间接血凝试验与鼠疫细菌培养结果的对比分析

目的对比鼠疫反向间接血凝试验(RIHA)与鼠疫细菌培养的检菌结果,选择灵敏、简便、快速的鼠疫诊断方法。方法用鼠疫菌感染小鼠、大耳白兔、豚鼠,动物死亡后取肝、脾脏;大耳白兔死亡后,在室温(18～22℃)下自然腐败,并于第0、15、60天取脾脏;取人感染鼠疫尸体的肺脏;将上述样品同时进行RIHA和细菌培养,计算鼠疫菌阳性率,比较两种方法的检菌效果。结果动物和人被鼠疫菌感染后,鼠疫RIHA的阳性率(100％)明显高于细菌培养(87％);对腐败材料鼠疫菌的检测,RIHA诊断效果明显优越于细菌培养,尤其在菌培养阴性的情况下,仍能检查出鼠疫菌抗原(抗体滴度为1:102 400)。结论RIHA在鼠疫诊断中,具有敏感、简便和快速的特点,有助于及时确定疫源的存在和疫情的判定,在实际工作中便于应用和推广,希望早日成为鼠疫实验室诊断标准。

血吸虫间接血凝试验质量控制效果评价

目的评价血吸虫病血清学检测室间质量,探讨影响实验室结果相关因素,提高检验人员的质控意识及免疫学实验室的水平和质量。方法全年组织室间质评2次,一次发放5个血清质控样,要求各实验室按规定的时间检测并汇报结果,一次现场抽取10%查病血样复查,计算符合率及Kappa值,采用鱼骨图法对血吸虫病血清流行病学调查质量控制进行评价。结果2002～2006年武汉市血吸虫病外质控血清样总符合率和Kappa值分别为82.8%、87.8%、92.6%、93.5%、91.4%和0.61、0.73、0.82、0.86、0.82;复查血清样品符合率和Kappa值分别为86.1%、91.2%、96.7%、95.5%、93.9%和0.70、0.73、0.93、0.90、0.88。结论武汉市室间质控结果有一定的可比性,血吸虫病查病质量显著提高,能反映出血吸虫病检测水平。

采用间接血凝试验(IHA)确定湖区血吸虫病中度流行区化疗对象的可靠性分析

目的分析ＩＨＡ法在湖区血吸虫病中度流行区确定化疗对象的可靠性。方法选择洞庭湖沿岸疫情基本一致的流行村６个，居民感染率均在１０％～１５％之间。每年对其一半人群采用ＩＨＡ法过筛，抗体滴度在１： １０及以上者作为化疗对象，同时用Ｋａｔｏ－Ｋａｔｚ粪检法考核化疗效果。结果ＩＨＡ法阳性者包括了９０．７％～９６．１％的Ｋａｔｏ－Ｋａｔｚ粪检阳性者在内。１９９７、１９９８年ＩＨＡ和粪检都为阳性的人群，１９９９年粪检阴转率为８０．５％和７７．７％。ＩＨＡ和粪检均为阴性的人群，粪检考核阴性率仍保持９６．４％到 ９８． ３％。单就１９９７年粪检阳性者而言，１９０９年粪检阴转率为 ７４． ４％。结论在湖区血吸虫病中度流行区，采用ＩＨＡ确定化疗对象，可将９０％以上的粪检阳性对象和粪检查不出的大量血吸虫病人包括在内，其阳性和阴性结果是可靠的。

猪瘟间接血凝试验的研究

猪瘟兔化弱毒珠的细胞培养物浓缩纯化后,致敏戊二醛鞣酸处理 的健康绵羊红细胞,制成冻干猪瘟间接血凝诊断液,用以检测血清中的抗猪 瘟抗体效价。经室内外376份免疫猪、45份非免疫猪血清检测结果表明符合 率高达98％。检测猪瘟抗体消长动态的结果证明,接种冻干猪瘟弱毒疫苗后第3～4天出现特异抗体,第15天抗体效价进入高峰期并维持到接种后的第3个月,然后缓慢地下降,于接种后的第11个月消失。该法操作简便,无需特殊仪器设备;特异性强不与其他传染病阳性血清发生交叉凝集;快速,2小时内可判定检测结果;重复性好,不同批次诊断液检测同一血清样品结果一致;保存期长,冻干的诊断液4℃贮存一年半有效。液体诊断液4℃贮存6个月效价不降,37℃存放14天对诊断液质量无影响。适合广大基层现地进行猪瘟弱毒冻干苗免疫猪群的抗体水平和仔猪母源抗体水平监测,以便制定合理的免疫程序,充分发挥疫苗的预防效果,确保养猪业的安生生产。

酶联免疫吸附试验和间接血凝试验检测猪弓形虫病的比较

酶联免疫吸附试验和间接血凝试验检测猪弓形虫病的比较Ｃｏｍｐａｒｓｉｏｎｏｆｅｎｚｙｍｅ－ｌｉｎｋｅｄｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔａｓａｙｗｉｔｈｉｎｄｉｒｅｃｔｈｅｍａｇｇｌｕｔｉｎａｔｉｏｎｔｅｓｔｉｎｄｉａｇｎｏｓｅｓｏｆｓｗｉｎｅｔｏｘｏｐｌａｓ...

间接血凝试验检测EDS-76病毒抗体的研究

本研究通过纯化EDS-76病毒,成功地建立了间接血凝试验用于检测EDS-76病毒抗体。结果表明,该方法具有很强的特异性,其敏感性比血凝抑制试验高8倍,而且操作简便、快速,适合于疫苗免疫后血清抗体的监测及流行病学的血清学诊断。

间接血凝试验检测鸡传染性法氏囊病抗体的研究

鸡传染性法氏囊病(IBD)是幼鸡的一种急性致死性传染病。以胸、腿部肌肉出血,法氏囊肿大、出血和坏死为其主要特征。1979年我国首次发生 IBD,为了有效地控制本病,我们在病毒分离培养成功的基础上,开展了简易。

应用反向间接血凝试验检测山羊痘病毒抗原

以兔抗山羊痘病毒IgG致敏绵羊红细胞,采用反向间接血凝试验(RPHA)检测山羊痘病毒抗原.该诊断试剂与山羊痘病毒抗原发生特异性的凝集反应;在PBS中不自凝;与其它动物病病毒抗原无交叉反应.对贵州省8个疫区现场采集山羊痘待检抗原检测结果表明,该方法阳性检出率为87.5%(7/8),与琼脂扩散试验(AGP)阳性检出率为50%(4/8)相比较,RPHA敏感性比AGP高;同时对山羊痘野生强毒H-GZ株F1～F5代细胞培养物进行检测,F1代就可检出RPHA效价,而AGP则不能检测.该诊断试剂可用于兽医临床上山羊痘的快速诊断及作为病毒分离培养的检测指标.

改良凝集试验(MAT)与间接血凝试验(IHAT)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测弓形虫抗体的比较分析

为了评价用于检测弓形虫抗体的改良凝集试验 (MAT)、用MAT、间接血凝试验 (IHAT)、酶联免疫吸附试验 (ELISA)对动物和人的血清进行检测 ,比较阳性检出率与符合率 ,并对检测的结果进行统计分析。结果显示 :MAT和IHAT、MAT与ELISA检测动物和人血清的阳性检出率都无显著差异 (P >0 0 5 )。MAT与IHAT检测动物血清的总符合率为 78 7% (5 9 75 ) ,检测人血清的总符合率为 81 6 % (71 87) ;MAT与ELISA检测动物血清的总符合率为 74 0 % (5 4 73) ,检测人血清的总符合率为 79 3 % (6 9 87)。应用配对资料卡方检验分析显示 :MAT与IHAT、MAT与ELISA检测的结果一致。因此 ,检测弓形虫抗体的MAT与IHAT和ELISA具有良好的符合性 ,这 3种方法都能用于弓形虫抗体的常规普筛和血清流行病学研究。

间接血凝试验NP30筛检血吸虫病效果

目的评价间接血凝试验(IHA)、NP30在血吸虫病大规模现场调查中的筛检作用。方法选择疫区村1338人,采用双盲法,同时采用尼龙绢集卵孵化法和IHA、NP30血清学检查,计算其血检阳性率、粪检阳性率、人群感染率;尼龙绢集卵孵化法分别与IHA、NP30、IHA+NP30配对,计算IHA、NP30、IHA+NP30血检过筛的粪检漏检率。结果1338人的粪检阳性率为9.72%。IHA、NP30、IHA+NP30血检阳性率分别为23.09%、21.90%、37.67%,人群感染率分别为6.35%、7.17%、9.34%,漏检率分别为34.62%、26.15%、3.85%。IHA+NP30双项检查,血检阳性率高于任一单项血检组(P均<0.01),其人群感染率与粪检阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。结论采用IHA+NP30双项筛检病人,漏检率低,更能准确反映实际病情。

应用间接血凝试验(IHA)诊断猪蛔虫病

以猪蛔虫抗原致敏绵羊红细胞制备检测猪蛔虫特异性抗体的间接血凝诊断试剂,与猪蛔虫抗体发生特异性凝集反应。结果表明,用间接血凝诊断试剂对3 000份猪血清进行现场检测,阳性率为30.00%;而琼脂扩散试验(AGP)的阳性率为13.00%,表明,间接血凝试验(IHA)比GAP敏感,间接血凝诊断试剂可用于猪蛔虫病的快速诊断。

单克隆抗体反向间接血凝试验检测日本血吸虫循环抗原

反向间接血凝试验(RIHA)是一种简单、实用的实验诊断技术,其显著特点是操作简便、快速,无需特殊仪器和试剂,现场应用的适应性高,其检测效果与标记方法相比无显著差异.目前,以单克隆抗体检测日本血吸虫循环抗原的反向间接血凝试验国内文献报道不多,为此,我们拟用该法对日本血吸虫循环抗原进行了检测.

间接血凝试验检测猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体

以猪繁殖与呼吸综合征 (PRRS)病毒致敏猪红细胞作诊断液 ,用间接血凝试验 (IHA)检测猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体。检测了可疑猪场 80份血清样本 ,PRRS阳性 32份 ,阳性率 40 % ,与ELISA试验比较符合率 98%。用此方法检测PRRS疫苗免疫猪血清 ,发现其抗体水平在初免后 15天升高 ,二免后 15天达最高峰 ,二免后

间接血凝试验检测鸭肝炎病毒抗体的研究

粗提DHV经Sephadex G200柱层折纯化后作为致敏用抗原,戊二醛法固定绵羊红细胞、BDB法致敏抗原红血球,建立了检测DHV抗体的间接血凝试验,其最佳致敏条件为:50%醛化红血球0.1ml、BDB2ml、DHV抗原0.5mg、37℃15min。本试验还对不同鸭血清的IHA抗体及免疫雏鸭的抗体水平等进行了检测,经与中和试验比较,阳性结果符合率为84.6％。

应用间接血凝试验(IHA)诊断肺螨病的实验观察

本文采用醛化绵羊红细胞以1:800粉尘螨抗原制成致敏血球进行间接血凝试验(IHA)。37例患者阳性滴度的几何均值为84.82,最大滴度1:256,阳性率86.49％,与对照组比较有显著差异。结果认为间接血凝试验可用于肺螨病的辅助诊断,方法敏感方便,具有一定的应用价值。

定量产肠毒素性大肠杆菌黏附素抗原反向间接血凝试验的建立

利用黏附素单因子血清IgG致敏绵羊红细胞,建立了定量产肠毒素性大肠杆菌黏附素抗原的反向间接血凝试验。该试验所用K88、K99、987P和F41单因子血清IgG致敏红细胞的最佳浓度依次为30μg/ml、56μg/ml、28μg/ml和100μg/ml。经交叉试验、抑制试验和敏感性试验证实,该试验具有很高的特异性和敏感性,可用于生物制品中黏附素含量的定量。