猪圆环病毒3型衣壳蛋白抗体间接酶联免疫吸附测定方法的建立与应用

【目的】建立一种检测猪圆环病毒3型抗体的血清学方法。【方法】以猪圆环病毒3型衣壳蛋白为包被抗原,通过筛选和优化反应条件建立一种检测猪圆环病毒3型衣壳蛋白抗体的间接酶联免疫吸附测定方法,并进行特异性试验与重复性试验以及初步临床应用。【结果】确定检测猪圆环病毒3型衣壳蛋白抗体的间接酶联免疫吸附测定方法的各项最佳反应条件;仅有猪圆环病毒3型阳性血清的检测结果为阳性,显示出良好的特异性;批内变异系数和批间变异系数都小于5%,显示出良好的可重复性。在来源于北京地区与河北地区的318份猪的血清中检出猪圆环病毒3型衣壳蛋白抗体阳性率为32.70%,表明这两个地区存在较多的猪圆环病毒3型感染。【结论】建立了一种具有良好特异性和可重复性的检测猪圆环病毒3型衣壳蛋白抗体的间接酶联免疫吸附测定方法,可用于猪圆环病毒3型抗体的检测。

间接测定人工湖渗漏量方法初探

介绍一种在观测人工湖水位降深时，同时在等气象条件下；观测不渗漏容器水位降深量(蒸发量)，从而间接确定人工湖渗漏量之方法。

最大吸氧量直接、间接测定法的效果比较

为比较直接测定法与间接测定法测定最大吸氧量的效果差异,于2006-11选择湖南师范大学体育学院男性大学生30名(足球专选15名,田径专选15名),应用心肺功能测试系统进行最大吸氧量直接测定,应用多别恩台阶实验方法间接测定最大吸氧量。检测结果显示间接测定法得到的最大吸氧量值高于直接测定[(3.70±0.56),(3.30±2.61)L/min,P<0.01]。说明了运用多别恩台阶实验方法间接测定最大吸氧量的准确性不高,其作为体质监测指标的有效性、可比性值得思考。

采用狂犬病毒G基因原核表达的间接ELISA方法

为获得狂犬病毒G基因并在大肠杆菌中进行表达,进而初步建立用于评价狂犬疫苗免疫效果的方法,根据狂犬病病毒RV(rabies virus)ERA株G基因序列设计引物,从病毒中提取出RNA,经逆转录并扩增得到RVG基因;将该基因片段定向克隆到原核表达载体pET28a(+)中,构建重组质粒PET-RVG并转化到大肠杆菌BL21(DE3)gold中,经IPTG诱导表达并确定表达的最佳条件;Ni亲和层析柱纯化获得重组G蛋白,并以G蛋白为抗原建立检测狂犬病毒抗体的间接ELISA方法.检测结果表明,经灰度分析纯化后纯度可达96%.

桃花粉生活力的测定

以中油4号、早红宝石、早露蟠桃、艳光、鄂桃1号等5个桃品种花粉为试材,用过氧化物酶测定法间接测定花粉生活力。结果表明:供试品种花粉的生活力高低顺序为:艳光>早红宝石>鄂桃1号>中油4号>早露蟠桃,其花粉生活力分别为92.99%、91.09%、90.45%、86.98%和73.58%,早露蟠桃与其它4个品种差异极显著。用蔗糖琼脂培养基在不同温度下进行花粉发芽率试验,结果表明:鄂桃1号在5～15℃的低温条件下花粉发芽率普遍较低;中油4号在5℃的低温下花粉发芽率也比较低(13.46%);相对而言,艳光花粉的平均生活力较高(56.78%),适于大多数地区引种栽培;早红宝石和早露蟠桃在5～15℃条件下花粉生活力一般。

种子活力测定将列入农作物种子检验规程

近日，从全国种子质量控制和检验技术培训会上传出消息，即将修订完成的农作物种子检验规程，将种子活力测定新增为检测项目。种子活力测定是依据种子生理和物理特性的表现为基础，利用直接或间接测定方法，决定在广泛的环境条件下高发芽率种子批的出苗状况和贮藏性能表现。

种子活力测定将列入农作物种子检验规程

近日，从全国种子质量控制和检验技术培训会上传出消息，即将修订完成的农作物种子检验规程，将种子活力测定新增为检测项目。种子活力测定是依据种子生理和物理特性的表现为基础，利用直接或间接测定方法，决定在广泛的环境条件下高发芽率种子批的出苗状况和储藏性能表现。

北京市昌平地区园林植物烟草花叶病毒的检测

【目的】植物病毒侵染园林植物,影响其观赏价值和绿化效果。为了明确北京市昌平地区园林植物常见病毒病的发生情况,对园林植物中的烟草花叶病毒进行检测。【方法】采集大叶黄杨(Buxus sp.)、早熟禾(Poa sp.)、棣棠花(Kerria sp.)、鸢尾(Iris sp.)、月季(Rosa sp.)、桃树(Amygdalus sp.)、海棠(Malus sp.)和女贞(Ligustrum sp.)共8种园林植物样品的叶片,用间接酶联免疫吸附测定方法和RT-PCR方法检测烟草花叶病毒。【结果】桃树(Amygdalus sp.)和海棠(Malus sp.)的样品含有烟草花叶病毒,大叶黄杨(Buxus sp.)、早熟禾(Poa sp.)、棣棠花(Kerria sp.)、鸢尾(Iris sp.)、月季(Rosa sp.)和女贞(Ligustrum sp.)的样品未检测到烟草花叶病毒。将检测结果为阳性样品的RT-PCR产物进行序列测定与分析,获得的烟草花叶病毒分离物与烟草花叶病毒-S亲缘关系较近,归属于组2。【结论】该研究结果可以为北京园林植物烟草花叶病毒的相关研究提供参考。