莱克多巴胺ELISA间接非竞争检测方法的建立

本快速测定方法使用甲醇提取液超声波提取动物源性制品中莱克多巴胺，采用样品与抗体预混的间接非竞争法测定样品中的莱克多巴胺。没有采用常规的间接竞争法，而是预先混合抗体和待测物质，使得检出限底，达到0.0044ng/mL，其含量在0.0044～11ng/mL浓度范围内呈良好线性关系，相关系数R2=0.9799,回收率在65%～89%之间，具有较好的稳定性、重现性和回收率，能满足实验室的检测要求。

可视化蛋白芯片法同时检测牛乳中残留的磺胺类和喹诺酮类药物

目的：利用可视化蛋白芯片分析技术对牛乳中磺胺类和喹诺酮类抗生素多残留的同时检测。方法：采用间接竞争法反应原理,将磺胺类和喹诺酮类药物的人工抗原以微阵列形式固定于微孔板底部,制备成微孔板生物芯片阵列,并依次与磺胺类和喹诺酮类单克隆抗体、纳米银标记羊抗鼠IgG反应,最后用纳米银增强法显色,并采用可视化芯片扫描仪对微孔板显色结果进行快速扫描成像,图像采用芯片分析软件处理。结果：本法磺胺嘧啶和恩诺沙星线性范围为分别为0.3~7.2 ng/m L和0.4~18 ng/m L。空白牛乳中加标磺胺嘧啶（0.5、2.0、5.0 ng/m L）和恩诺沙星（0.5、3.0、15.0 ng/m L）,结果牛乳中2种药物的加标回收率分别为83%~110%,且相对标准偏差均在10%以内。结论：本法能够用于牛乳样本中磺胺类和喹诺酮类药物的残留的快速初筛。

2种不同检测模式下的林可霉素胶体金试纸条的比较研究

本试验旨在研究检测牛奶中林可霉素(lincomycin,LIN)胶体金免疫层析试纸条。根据直接竞争抑制和间接竞争抑制2种模式,通过对金标包被原(抗体)量、pH、包被抗体(抗原)浓度、牛奶前处理等试验的优化,制备出2种满足实际检测需要的胶体金试纸条;二者的检测限分别为30和10ppb。在实际检测中,间接法在灵敏度、稳定性和检测时间等方面都优于直接法。

间接竞争ELISA检测核桃制品中核桃蛋白含量

通过核桃蛋白组分分析,确定核桃丰度蛋白。以其作为抗原免疫小鼠,制备可特异性识别核桃蛋白的单克隆抗体,建立间接竞争ELISA检测方法。筛选出一株能稳定分泌抗核桃蛋白的杂交瘤细胞株HT-1,对间接竞争ELISA方法的反应条件进行优化后,建立了检测核桃蛋白的间接竞争ELISA方法,核桃蛋白的检测线性范围在4.664.2μg/mL,IC50为17.2μg/mL,最低检测限为0.67μg/mL。抗体特异性较好,与其他的植物蛋白没有交叉反应。该方法适用于检测核桃制品中的核桃蛋白含量。

ELISA法快速检测食品中重金属含量的研究进展

重金属超标会对人体健康产生极大危害,世界各国日渐重视食品中重金属的限量标准,同时对重金属分析检测方法的研究也越来越多。传统的重金属检测方法比较成熟,灵敏度高,但操作繁琐、费用高昂、依赖大型仪器设备以及需要专业技术人员操作等。酶联免疫(enzyme-linked immune sorbent assay,ELISA)法是一种特异性强、灵敏度高的检测方法,并能用于现场快速检测,故得以迅速发展。ELISA法检测重金属主要包括四大关键步骤:样品前处理、人工抗原的合成、特异性抗体的制备、ELISA方法的选择。该文主要综述了ELISA法在检测重金属方面的最新研究成果,并对该检测技术的研究方向进行了展望。

微孔板生物芯片测定蜂蜜中四环素残留方法的研究及应用

目的：采用微孔板生物芯片可视化分析技术建立一种内标法蛋白免疫分析新方法,实现单孔内测定蜂蜜中四环素的残留定量。方法：研究中根据间接竞争法反应原理,将四环素人工抗原和纳米银标记的羊抗兔Ig G以微阵列形式固定于微孔板底部,制备成微孔板生物芯片阵列,并依次与四环素单克隆抗体、纳米银标记羊抗鼠Ig G反应,最后用纳米增强法显色,并采用可视化芯片扫描仪对微孔板显色结果进行快速扫描成像,图像采用相关软件处理。结果：该法的检测限可达0.8 ng·m L-1,线性范围为0.8∽19.2 ng·m L-1,R2=0.971,回收率达80%∽120%,RSD〈10%。结论：本法简便快速,易操作,高通量,能满足日常大规模样品的初筛。