应用间接荧光抗体试验调查黄淮流域不同媒介地区当前疟疾流行水平的研究

目的通过对黄淮流域居民进行间接荧光抗体试验(IFAT)调查,评价黄淮流域不同媒介地区疟疾流行水平。方法2006和2007年选择沿黄淮流域单一中华按蚊为媒介的安徽省宿州、怀远和砀山县、河南省永城县,嗜人按蚊与中华按蚊复合媒介地区的河南省桐柏县和湖北省广水县,每县分别选择2个自然村,采用重复横向调查方法,连续两年于疟疾流行季节末期对调查点居民(≥1.5岁)采制滤纸干血滴,用IFAT检测人群疟疾抗体水平,计算人群疟疾抗体阳性率与阳性几何平均滴度倒数(GMRT);分别以20岁以下年龄组的抗体阳性率通过可逆催化模型估算这些地区的疟疾感染概率,并与当年疟疾发病率进行比较。结果2006和2007年安徽、河南和湖北等3省6县12个自然村的平均抗体阳性率分别为6.1%(153/2489)和12.0%(295/2458),其中单一中华按蚊媒介地区2007年的平均抗体阳性率12.0%(194/1624)]明显高于2006年的4.1%(69/1670)(χ2=69.9,P<0.01);而嗜人按蚊和中华按蚊复合媒介地区平均抗体阳性率分别为10.3%(84/819)和12.1%(101/834),两年的差异无统计学意义(χ2=0.17,P>0.05)。2007年12个自然村平均阳性GMRT为26.2,略高于2006年的22.7。可逆催化模型估算结果显示,单一中华按蚊媒介地区和复合媒介地区年感染概率均明显高于当地疫情报告的疟疾发病比率,前者平均分别为后者的117.3倍和17.2倍。在抗体阳性者中,有87.8%为疟疾无症状者,表明黄淮流域地区存在一定比例的无症状潜在传染源。结论黄淮流域地区疟疾实际发病远较报告疫情为高,单一中华按蚊为媒介地区疟疾发病呈回升趋势,嗜人按蚊与中华按蚊复合媒介地区疟疾传播相对稳定。

检测抗人疱疹病毒6型IgG的间接免疫荧光试验的建立及其应用

目的 :建立检测血清中人疱疹病毒 6型 (HHV 6 )IgG的间接免疫荧光试验 (IFA)。方法 :用HHV 6国内分离株感染人脐带血单个核细胞制备抗原片 ,建立检测HHV 6IgG的IFA方法 ,并用于育龄期妇女血清流行病学调查。结果 :建立的IFA具有特异性。对 116份育龄期妇女血清标本检测表明 ,HHV 6IgG的阳性率为 72 .4 % ,几何平均滴度 (GMT)为 1∶6 1;在孕妇和正常未孕妇女之间 ,以及不同孕期的孕妇之间 ,HHV 6IgG的阳性率和GMT均无差异 (P >0 .0 5 )。结论 :建立了具有特异性的IFA法 ,可用于对育龄妇女HHV

间接免疫荧光试验在西尼罗病毒抗体检测中的初步应用

目的了解人群血清西尼罗病毒(WNV)抗体存在的本底,探讨WNV与乙型脑炎病毒(JEV)的免疫交叉反应。方法以新兵入伍健康体检时收集的男性血清347份为检测标本,应用建立的间接免疫荧光试验(IFA)对WNV与JEV的IgG抗体进行检测。结果血清WNV和JEV的抗体阳性率分别为3.2%(11/347)和5.7%(14/244);在同时检测了两种病毒抗体的244份标本中,有3份两者均为阳性,分别占WNV和JEV抗体阳性数的60%(3/5)和21%(3/14)。结论人群对WNV缺乏免疫力,JEV抗体对WNV的交叉免疫作用有一定的局限性。

测鸭出血症病毒间接免疫荧光试验的建立

为寻求一种检测鸭出血症病毒 (duck hemorrhagic disease virus,DHDV)快速、敏感、实用的方法 ,建立了间接免疫荧光试验 ,并测定了一抗 (兔抗鸭出血症病毒阳性血清 )、二抗 (FITC标记的羊抗兔 Ig G)的最佳使用浓度及最佳感作时间分别为 1∶ 2 0、6 0 m in和 1∶ 10 0、6 0 min。以建立的间接免疫荧光试验检测了 DHDV于番鸭胚成纤维细胞中的复制动态 ,结果表明 ,接毒后 36～ 6 0 h为 DHDV大量复制期 ;6 0～ 12 0 h为 DHDV从核膜以出芽方式进入胞浆中成熟的阶段 ;12 0～ 14 4 h为大量 DHDV自胞浆中释放至胞外阶段。该方法快速、特异 ,可用于该病的实验室诊断。

四川省疟疾间接荧光抗体试验检测结果分析

目的 了解疟疾流行情况 ,考核防治效果。方法 采用间接荧光抗体试验 ( IFAT) ,以学龄儿童为检查对象 ,对监测点进行纵向监测 ,对流行区进行横向监测 ,对基本消灭疟疾地区进行抽样调查 ;通过学龄儿童疟疾抗体水平分析疟疾态势。结果 1 996～ 2 0 0 2年 5个监测点纵向监测结果 ,抗体阳性率依次为 0 .61 %、0 .77%、2 .3 8%、2 .0 0 %、0 .0 0 %、0 .44%、0 .2 5 % ;6个流行县横向监测结果 ,抗体阳性率在 0 .5 0 %～ 1 1 .3 1 %之间 ;对 8个基本消灭疟疾县共抽样调查 2 683人 ,结果均为阴性。结论 通过不同疟区的间接荧光抗体水平检测 ,掌握了全省疟疾态势 ,评价了防治措施 。

应用螨体抗原片间接荧光抗体试验和印迹酶联免疫吸附试验诊断肺螨病的研究

目的:探讨螨体抗原片间接荧光抗体试验(MapIFAT)和印迹酶联免疫吸附试验(DotELISA)对肺螨病的诊断价值。方法:应用MapIFAT和DotELISA分别对肺螨病组(32例)、正常对照组(32名)、疥疮组(31例)、蠕形螨组(30例)进行检测并作对比分析。结果:MapIFAT血清抗粉螨抗体的阳性率和DotELISA检测抗粉螨特异性IgG的阳性率:肺螨组分别为91%(29/32)和91%(29/32);正常对照组分别为3%(1/32)和0;疥疮组分别为0和16%(5/31);蠕形螨病组分别为0和0。结论:MapIFAT与DotELISA用于肺螨病的诊断均有较高的特异性、敏感性,且两者结果具有一致性,两种方法联合应用可提高诊断肺螨病的准确性。

间接免疫荧光试验在HIV抗体检测中的应用

[目的 ]评价间接免疫荧光试验 (IFA)作为一种确认实验在 HIV抗体检测中的应用。 [方法 ]用 T嗜性的HIV毒株感染 MT4细胞制备抗原片 ,并与不同稀释度的免疫血清相结合 ,再滴加荧光素标记的羊抗人 Ig G,在荧光显微镜下检测特异性免疫荧光。 [结果 ]用 IFA检测 43份血清样本 (其中包括 17份 WB阳性血清 ,14份阴性血清和 12份EL ISA阳性或 WB出现可疑条带但按标准不能判为阳性的可疑血清 ) ,除 HIV- 2血清呈阴性反应外 ,其余检测结果与WB相符。 IFA对 HIV- 1抗体检测的敏感性和特异性均达到 10 0 %。 HIV- 1阳性血清抗体最高滴度达到 1∶ 10 2 40。 [结论 ]IFA可用于 HIV- 1抗体检测的确认 ,它可作为 Western Blot的一种补充或替代实验。

RESA-间接荧光抗体试验检测恶性疟RESA抗体的研究

由体外培养的恶性疟原虫获得的含环状体为主的感染红细胞制成单层感染红细胞,经戊二醛固定后空气干燥,作为RESA,抗原片,以RESA-IFA检测恶性疟患老血样中的RESA抗体。受检的58份恶性疟血样中,12份呈RESA抗体阳性反应,阳性率为20.7％,其中8份用IFA检测时抗体滴度均>1∶4096。对20份间日疟血样进行了同样试验,结果均为阴性。对RESA及其抗体在疟疾保护性免疫中的作用进行了简要讨论。

云南省十个县(市)疟疾间接荧光抗体试验结果分析

采用IFAT对永德、云县、双江、梁河、保山、广南、临沧、腾冲、盐津和勐海十个疟疾发病率各异县10076份滤纸血滴进行了检测,结果表明各地的抗体阳性率、抗体滴度变化情况与当地疟疾疫情,发病率情况相一致。

华支睾吸虫病间接荧光抗体试验(IFAT)纸片法的应用研究

采用滤纸干血代替血清作间接荧光抗体试验(IFAT)诊断华支睾吸虫病,血清与滤纸干血两者测定效果无显著性差异。滤纸干血在现场应用作流行病学调查,观察1612例,与粪检比较检出率无显著性差异。阳性符合率88.2％,阴性符台率92.9％。感染度与阳性符合率、反应强度有一定关系。

间接免疫荧光试验检测抗核抗体的前带效应分析

目的探讨间接免疫荧光试验(IIFA)检测抗核抗体(ANA)中的前带效应对ANA荧光滴度的影响。方法将880例血清样本以1∶100稀释进行手工检测,筛选ANA荧光滴度≥1∶1 000的样本分别以1∶100、1∶1 000、1∶10 000稀释检测,统计有前带效应(1∶1 000稀释比1∶100稀释荧光亮)的样本数;将前带效应的样本采用欧蒙Sprinter XL全自动荧光加样仪和EUROPattern全自动荧光分析仪检测ANA(1∶100稀释),与手工法检测ANA(1∶100稀释)进行比较,检测前带效应样本的特异性自身抗体,分析其荧光模型、荧光滴度及阳性特异性自身抗体的分布特点。结果有明显前带效应的样本数为34例,占总样本数的3.86%,占高滴度(≥1∶1 000)ANA样本数的29.57%。通过手工法检测或通过Sprinter XL全自动荧光加样仪检测均发现前带效应,其荧光模型及荧光滴度相似,值得注意的是,EUROPattern只能选取图片中间区域判读。在有前带效应的血清样本中,以荧光滴度≥1∶10 000最常见(74.42%)。在荧光模型方面,以斑点型最为多见(46.51%)。在特异性自身抗体的分布方面,以抗核糖核蛋白(RNP)抗体最多见(62.79%),其次为抗双链DNA抗体(51.16%)和抗SSA抗体(51.16%)。结论 IIFA检测高滴度ANA样本在低稀释度时容易产生前带效应,从而导致错误的ANA荧光滴度判断,临床检验实验室应引起重视。

间接荧光抗体试验和免疫酶染色试验诊断血吸虫病的研究

本文进一步研究了日本血吸虫感染鼠肝组织内虫卵冰冻切片作为血吸虫病诊断抗原的实用价值。用该抗原作间接荧光抗体试验和免疫酶染色试验,采用单盲法检测140例日本血吸虫病人特异性抗体,阳性率分别为96.4％及97.1％;检测100份健康人血清,假阳性率分别为3.0％及2.0％;检测21例丝虫病人及11例华枝睾吸虫病人,交叉反应率为0～9.5％。间接荧光抗体试验和免疫酶染色试验的敏感性均显著地高于环卵沉淀试验.结果表明该抗原是一种较为理想的血吸虫病血清学诊断抗原。

间接荧光抗体试验诊断犬吉氏巴贝斯虫病

利用冷藏抗原玻片 ,用间接荧光抗体试验检测感染吉氏巴贝斯虫犬血清 ,具有特异性强、敏感性高、快速、准确、操作简单等特点。对疫区 82份犬血清的检查 ,阳性率为 37 8% ;对非疫区 50份犬血清的检查 ,假阳性率为 2 %。与血液涂片染色检查比较 ,该法检出率高 ,结果可靠 。