间接酶标抗体染色法检测石蜡切片中鸡肾型传染性支气管炎病毒的研究

以抗鸡肾型传染性支气管炎病毒（ＮＩＢＶ）Ｔ株的鼠源超免疫血清为一级抗体，辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）标记的羊抗鼠ＩｇＧ为二级抗体，建立了检测石蜡切片中ＮＩＢＶ抗原的间接酶标抗体染色技术。经过特异性试验和阻断性试验，表明该方法具有高度的敏感性和特异性。应用该法对人工感染ＮＩＢＶＣ９００１株的鸡气管和肾石蜡切片中的病毒抗原进行了检测，结果：气管从感染后０．５～１１ｄ，肾从感染后１～２０ｄ，均检测到病毒抗原，阳性染色主要集中于气管粘膜上皮细胞和肾小管上皮细胞浆内。

应用单克隆抗体的免疫组织化学法研究雏鸭体内鸭瘟病毒的分布

本实验应用了免疫组织化学的单克隆抗体间接酶标染色法,对人工感染鸭瘟病毒雏鸭的组织切片进行染色观察,旨在研究病毒在鸭体内分布,对其进行定位。研究结果显示,鸭的心脏、肝脏、脾、胸腺、肠、法氏囊、胰、肺、肾等组织的细胞浆内均出现了染色的特异阳性反应物。结果表明,鸭瘟病毒广泛分布于感染雏鸭的各种组织器官,并造成一定的组织病理变化。

免疫器官中肾型鸡传染性支气管炎病毒的定位和动态分布

以鼠抗鸡肾型传染性支气管炎病毒 (肾型IBV)的高免血清为一抗 ,辣根过氧化物酶 (HRP)标记的羊抗鼠IgG为二抗 ,建立了检测石蜡切片肾型IBV抗原的间接酶标抗体染色技术。应用该技术对人工感染肾型IBVC90 0 1株鸡免疫器官中的病毒进行了检测 ,结果胸腺和法氏囊是病毒主要侵害的免疫器官 ,脾脏、盲肠扁桃体仅呈一过性感染 ,哈氏腺未检测到。法氏囊从感染后 2～ 12天 ,胸腺从感染后 3～ 8天均检测到病毒抗原 。

实验性鸡大肠杆菌病的免疫组化检测

用致病性大肠杆菌 O1 8分离株和 /或低致病性禽流感病毒 (Mildly pathogenic avian influenza virus,MPAIV)接种 1 0～ 1 2日龄 SPF鸡 ,细菌接种后 1～ 96h对试验鸡的气管、肺、气囊、胸腺、法氏囊、脾脏、肝脏和肾脏的石蜡切片进行间接酶标抗体染色 ,发现大肠杆菌接种组、混合接种组的气管、肺在接种后 1 h可检测到细菌抗原 ,混合接种组检测到的细菌更多 ,存在时间更长。结果表明 :气管、肺和气囊是鸡大肠杆菌定居的场所 ;MPAIV可延长细菌在气管、肺和气囊中定居的时间 。

动物致伤人群接种狂犬病疫苗后血清学与流行病学效果的初步分析

目的观察就诊的动物致伤者,分别全程足量接种两种剂型狂犬病疫苗后,其血清中抗体阳转率和疫苗保护率.方法 2000-2001年就诊者全程接种浓缩苗,2002-2003年的全程接种精制纯化(vero细胞)苗.严重致伤者,于0、3天接种加倍量疫苗,并于0天的同时,对其伤口周围用抗狂犬病血清(40IU/kg)进行浸润注射 .联合使用抗血清者,完成全程5次注射后第15、75天各加强1针疫苗.接种结束后15-20天,以间接混合酶标法检测血清中抗狂犬病病毒抗体.期内经疫情报告系统,收集当年观察人群狂犬病病例,计算两接种组人群的发病率,并分别与当年未接种疫苗的动物致伤人群比较,以估算疫苗保护率.结果 4年中该人群抗体总阳性率为95.60%.接种精制纯化苗组的阳性率为96.37%,高于浓缩苗组的94.83%.狂犬病疫苗保护率,精制苗1年和2年的均为100.00%;浓缩苗1年的为95.46%,2年、3年和4年的为90.91%.结论动物致伤人群规范处理局部伤口后,及时全程接种狂犬病疫苗,其抗体阳性率较高.国产精制纯化苗接种人群的抗体阳性率和1～2年的疫苗保护率高于浓缩苗.从我国狂犬病防治工作实际出发,提示国产精制纯化苗需尽快降低成本,以巩固和提高其接种率.

盘羊刚果嗜皮菌的分离与鉴定

从疑似刚果嗜皮菌感染的盘羊皮肤病料中分离刚果嗜皮菌,并进行鉴定。将皮肤病料于28℃风干、粉碎,加无菌水浸泡15 d,静置,取上清加6%酵母膏液,60℃条件下30 min,混匀后连续10倍倍比稀释涂板,37℃培养48 h后挑取可疑菌落进行细菌形态学、培养特性、间接免疫酶标染色法鉴定,并根据GenBank上发表的刚果嗜皮菌16S rRNA序列设计特异性引物对分离株进行PCR扩增,得到与预期相符的606 bp基因片段,结果证实该盘羊分离株为刚果嗜皮菌。