Coomb’s试验在慢性乙型肝炎治疗中的应用

了解Coomb’S试验在乙型病毒性肝炎中的临床意义。收集了 132例住院病例 ,男性 87例 ,女性 4 5例 ,平均年龄为 4 3 2岁 ,急性肝炎 15例 ,慢性中度 92例 ,慢性重度 17例 ,慢性重症 8例。对上述病例分别在入院时、住院中期或后期进行了Coomb’S试验、抗核抗体 (ANA)系列和T淋巴细胞亚群 (CD4/CD8)检测。急性重型、慢性重度及慢性重症肝炎患者均可出现直接抗人球蛋白试验阳性 ,其中广谱、抗 -C3、抗IgG阳性分别为 19、19和 2例 ,而间接抗人球蛋白试验仅 1例阳性。ANA阳性和CD4/CD8下降均为 19例。且以上各指标滴度与病情严重程度呈正相关。

呼肠孤病毒3型S1基因的原核表达及间接ELISA检测方法的建立

采用RT-PCR方法从呼肠孤病毒3型(Reo-3)中扩增S1基因的主要抗原片段SR,并将其克隆到原核表达载体pQE-31中诱导表达,融合蛋白SR-δ1纯化后被用作包被抗原,建立了检测呼肠孤病毒3型抗体的间接ELISA。对表达蛋白进行SDS-PAGE和Western-blot分析的结果表明,表达蛋白SR-δ1的分子质量约为32ku,具有很好的抗原性。建立的ELISA与鼠痘病毒、仙台病毒、小鼠肝炎病毒、小鼠肺炎病毒均无交叉试验,具有良好的特异性、重复性和敏感性,与国家实验动物检测中心的ELISA检测试剂盒的符合率为98.7%,证实该方法可用于Reo-3抗体的检测。

传染性支气管炎病毒(IBV)S1基因的真核表达及免疫原性检测

为了探讨S1基因在DNA免疫防制传染性支气管炎(IB)中的免疫原性,将IBVZ株S1基因插入到真核表达载体pcDNA3.1/V5-His-TOPO中,构建了真核表达质粒pcDNAIBVZS。在脂质体作用下将pcDNAIBVZS转染CEF细胞,用间接免疫荧光试验检测,在CEF细胞中可见有大量S1蛋白表达。将重组质粒以100μg/只的剂量肌注免疫SPF雏鸡,经间接ELISA试验检测二免前后的血清,结果显示,pcDNAIBVZS基因可在SPF鸡体内诱导相应抗体的产生,具有特定的免疫原性。

儿童风疹并溶血性贫血7例

目的 探讨儿童风疹并溶血性贫血临床特点 ,提高对此病认识。方法 结合文献资料对 7例儿童风疹并溶血性贫血临床资料进行回顾性分析。结果 7例均为学龄儿童 ,在风疹症状出现后 2～ 4d并溶血性贫血 ;血风疹病毒抗体IgM均阳性。其中 4例直接Coomb′s试验和 (或 )红细胞抗体阳性 ;并呈重度贫血 ;诊断为自身免疫性溶血性贫血 (AIHA) ,给予激素、人血丙种球蛋白 (丙球 )、输血治疗后病情好转。 3例直接Coomb′s试验和红细胞抗体阴性并呈中度贫血 ,仅予抗病毒治疗后病情好转。随访 1年均无复发。结论 儿童风疹并溶血性贫血很少见 ,当并AIHA时 ,应加用激素、丙球治疗 ,必要时予输注洗涤“O”型红细胞。

TGEV S基因原核表达及表达蛋白间接ELISA方法的建立与初步应用

为了建立检测猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S蛋白抗体的间接酶联免疫吸附试验(ELISA),试验参照GenBank公布的TGEV TH-98株S基因序列,设计合成1对引物,RT-PCR扩增相应的核苷酸片段。将PCR扩增产物连接至原核表达载体pET-32a中,以大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞为表达菌株进行诱导表达。再以纯化重组蛋白作为诊断抗原,通过探索最佳抗原包被量和抗体血清稀释倍数等参数建立检测TGEV S蛋白抗体的间接ELISA方法。结果表明:试验成功克隆了TGEV S基因,扩增片段长度为4 003 bp;构建了重组表达质粒pET-S,并在大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中获得高效表达,表达蛋白分子质量约为148 ku;经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及Western-blot分析显示,重组蛋白具有良好的抗原性;以纯化的S重组蛋白作为包被抗原,建立了TGEV S蛋白抗体检测间接ELISA方法;该ELISA方法的抗原最佳包被浓度为18.85μg/mL,最适血清稀释比例为1∶40。

亚胺培南西司他丁钠所致溶血1例

亚胺培南/西司他丁是1种广谱β-内酰胺碳青霉烯类抗菌药,抗菌谱广,抗菌活性强,是目前治疗重症感染的有效抗菌药物之一。其耐受性良好,不良反应的发生率在0.1 %~3.9 %不等,常见的有局部用药反应、皮疹、胃肠道反应等,大多轻微而短暂,除此之外,还有一些不常见的不良反应,如神经系统症状、血液系统损害及过敏性休克等。

重组人血小板生成素联合小剂量利妥昔单抗治疗Evans综合征一例

患者男,42岁.2014年7月中下旬因＂发热伴乏力＂至外院就诊.查血常规示WBC 8.53×109/L,Hb 51 g/L,PLT25×10^9/L,血生化示TBil 59.2 μmol/L,DBil 15.8 μmol/L,间接胆红素（IBil）38.6 μmol/L,乳酸脱氢酶（LDH）1 169 U/L;直接抗人球蛋白试验（Coombs试验）阳性,间接Coombs试验阴性;骨髓象：增生明显活跃,红系占79.2％,红系比例明显增高;全片可见巨核细胞115个,分类50个,其中颗粒型43个,产板型4个,裸核3个,血小板少见.考虑为Evans综合征,上呼吸道感染,予以地塞米松、口服达那唑治疗,效果差.

1例蓝氏贾第鞭毛虫感染的诊断

患者,男,40岁,上海市居民。2018年7月因“急性腹泻”就诊于同济大学附属杨浦医院急诊内科。患者自述水样便腹泻1 d。患者发病前1个月有巴拿马旅行史,无饮生水和食生肉史。血常规检查结果C反应蛋白升高(16.17 mg/L),其余指标正常,提示感染。患者粪样涂片镜检查见蓝氏贾第鞭毛虫包囊和滋养体。间接免疫荧光试验检测结果显示,蓝氏贾第鞭毛虫滋养体被患者血清(1∶50)识别,虫体表面有较强的荧光染色。提取患者粪样DNA,PCR扩增出147 bp的蓝氏贾第鞭毛虫特异性18S核糖体基因片段,该片段序列与蓝氏贾第鞭毛虫集聚体A(GenBank登录号:KY706490)的序列一致性为100%,在邻接法构建的系统进化树上与蓝氏贾第鞭毛虫集聚体A聚在同一分支上。结合患者临床表现和相关检查结果,诊断患者为蓝氏贾第鞭毛虫感染。临床给予患者甲硝唑(每日20 mg/kg,分3次口服,连服7 d)治疗。2周后复查血常规和粪便常规,均恢复正常,患者病情好转。

3种筛选红细胞在疑难配血筛检致敏不规则抗体中的应用比较

目的探讨3种筛选红细胞(配组红细胞、混合O型红细胞和抗体筛选红细胞)对致敏红细胞不规则抗体的筛检效果。方法对36例临床交叉配血申请进行聚凝胺法、生理盐水法与微柱凝胶法交叉配血试验,不合者拟做微柱凝集法Coomb’s试验筛查原因,受、供血者直接Coomb’s试验阳性的排除补体致敏后进行致敏红细胞放散试验,并以3种筛选红细胞筛检放散液中可能存在的不规则抗体。结果1例主侧、次侧均不合者,受血者直接Coomb’s试验(生理盐水介质法)筛检阳性、间接Coomb’s试验筛检阳性,供血者直接、间接Coomb’s试验筛检阴性;受血者致敏红细胞放散试验,3种筛选红细胞筛检放散液不规则抗体均为阳性。结论对交叉配血试验不合者进行原因筛查时,抗体筛选红细胞可用于游离/致敏不规则抗体的筛检。

微柱凝胶法在儿童临床输血中的应用

目的探讨微柱凝胶法在儿童临床输血中的应用。方法应用微柱凝胶卡进行血型鉴定及抗体筛查3 638例,交叉配血914例,Coomb’s试验25例。结果血型鉴定中Rh(O)阴性8例,正反定型不一致者361例;不规则抗体筛查阳性12例;交叉配血主侧不合者1例,次侧不合者2例;Coomb’s试验阳性9例。结论微柱凝胶法是一种儿童临床输血前检测的好方法。