间接SPA菌体吸附法快速检测单纯疱疹病毒

本文联合运用玻片细胞培养板分离病毒和间接 SPA 菌体吸附法检测感染细胞表面 HSV抗原,鉴定分离的病毒。本法快速、简便,可于细胞病变出现前检出感染细胞表面 HSV 抗原,获很病原诊断。其敏感性与间接免疫荧光法一致。

ANAE染色和抗Thy1-SPA菌体花环双标记法的建立及其用于检测小鼠T淋巴细胞的研究

目的建立 ANAE染色联合抗 Thy1SPA菌体花环双标记法 ,并试图利用此法证明抗θ抗体对 ANAE阳性淋巴细胞的特异作用。方法利用双标记法对正常小鼠胸腺及脾细胞进行检测 ,观察抗 Thy1SPA抗体对 ANAE阳性细胞结合的专一性。结果双标记法中 ,抗 Thy1SPA菌体花环阳性同 ANAE阳性一样 ,能很好反映 6 15小鼠胸腺或脾脏 T细胞数 (P>0 .0 5 ) ;胸腺和脾脏细胞 Thy1+ - ANAE+ 率 ,即双标记阳性率略低于总的 ANAE+ 或总抗θ菌体花环 + 数 ,但 3者之间有明显的相关性。结论成功建立了 ANAE-抗 Thy1SPA菌体花环法 ,并首次用此法证明抗θ血清对

双抗体夹心酶联免疫吸附试验检测布氏菌抗原的实验研究

目的 建立检测布氏菌抗原特异、敏感和快速的试验方法。方法 在制备高滴度布氏菌抗体辣根过氧化物酶结合物及其冻干制品基础上 ,建立检测布氏菌抗原的双抗体夹心酶联免疫吸附试验 (DAbS -ELISA) ,包括常规DAbS -ELISA及快速DAbS -ELISA。用建立的两种DAbS -ELISA法对布氏菌菌体抗原及可溶性抗原进行有关其特异性及敏感性对比观察 ;同时对模拟的这些抗原污染的饮用水标本进行对比观察。结果 常规DAbS -ELISA检测布氏菌 5 44A、16M、13 3OS及 10 4M的菌体抗原以及布氏菌 16M可溶性抗原的敏感性分别为 0 .2 2万菌 /ml、12 0万菌 /ml、190万菌 /ml、2万菌 /ml和 0 .0 12 μg/ml ;用快速DAbS -ELISA法的敏感性分别为 2 2万菌 /ml、12 0万菌 /ml、190 0万菌 /ml、2 0万菌 /ml和 1.2 μg/ml;同时用这两种DAbS -ELISA检测上述抗原污染的饮用水标本其敏感性分别为 0 .2 2万菌 /ml、190 0万菌 /ml、2 0万菌 /ml和 0 .0 12 μg/ml ;以及 2 2万菌 /ml、12 0万菌 /ml、190 0万菌 /ml、2 0 0万菌 /ml和 1.2 μg/ml。而且这两种DAbS -ELISA法检测不含布氏菌抗原的所有对照均为阴性反应。结论 双抗体夹心酶联免疫吸附试验是检测布氏菌抗原的特异、敏感、快速和适用的试验方法。

小鼠泰泽菌抗体IFA检测方法的建立及其与ELISA方法的初步比较

目的 建立小鼠血清中泰泽菌抗体的IFA检测方法。方法 采用IFA方法以泰泽菌抗原片检测人工感染和人工免疫的ICR小鼠血清中抗泰泽菌抗体 ,并与日本的泰泽菌抗体ELISA检测试剂盒检测结果进行初步比较。结果 用阳性对照血清 ,抗原片出现特异性蓝绿色荧光 ,清晰显示出泰泽菌形态 ,而阴性血清只出现橘红色的本底。在 12份人工感染泰泽菌的小鼠早期血清标本中 ,IFA方法检出 4份阳性 ,8份阴性 ,阳性检出率 33 3% ;而ELISA方法检测 12份样本均为阴性。另外 ,在 6 6份人工免疫泰泽菌的小鼠晚期血清样本中 ,IFA方法检出 4 4份阳性 ,2 2份阴性 ,阳性检出率 6 6 7% ;而ELISA方法检出 5 0份阳性 ,16份阴性 ,阳性检出率 75 7% ,结论 建立的小鼠泰泽菌抗体IFA检测方法能够用于小鼠血清中泰泽菌抗体的检测 ,特别是早期感染的检测。

医药废水中大肠杆菌抗体制备及检测方法

该文研究制备了大肠杆菌全菌体抗体,经纯化后抗体蛋白含量为2.50 mg/mL,测得全菌体抗体的效价大于25 600,并使用自制的抗体,建立了测定医药废水中大肠杆菌的间接酶联免疫吸附（ELISA）方法。间接ELISA方法的最佳测定条件为：抗原最佳包被浓度为200倍,一抗和酶标二抗的稀释浓度分别为稀释12 800倍和2 000倍,以0.5%牛血清白蛋白（BSA）作为封闭液,封闭时间为2 h。在最佳测定条件下,大肠杆菌在1×10^3-1×10^9 cfu/mL表现出良好的线性关系。采用所建立的间接ELISA方法检测了实际医药废水中的大肠杆菌,检测限为10^3 cfu/mL。

检测牛乳样品生物素酶联免疫吸附法特异性高于间接酶联免疫吸附法

印度DRKalorey等人用高纯度李斯特溶血素O作为抗原，通过与细菌学检查作比较，评估检测牛乳样品中单增李斯特菌抗体的间接酶联免疫吸附法（1ndirect ELISA）和生物素酶联免疫吸附法（A—BELISA）。

以羊肚菌菌丝为抗原的不同免疫程序对Balb/c鼠抗体水平的影响

以羊肚菌菌丝为抗原,免疫Balb/c鼠。用建立的酶联免疫吸附试验(ELISA)间接法检测不同免疫剂量、不同免疫途径、不同免疫次数等免疫程序影响因素所对应的免疫Balb/c鼠的血清抗体水平,得出产生抗体水平较高的快捷的免疫程序。结论:70μg∕只剂量的不含佐剂的羊肚菌菌丝抗原,经由腹腔间隔4d连续3次注射的免疫程序,可以在首免的25d后产生较高水平的抗体。

棉花大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)血清学检测——抗原处理的比较

分别以棉花黄萎病菌V20的菌丝研磨物、菌丝蛋白、超氧化物歧化酶酶带Ⅰ、超氧化物歧化酶酶带Ⅱ为抗原免疫家兔,制备了抗血清As1、As2、As3、As4。琼脂双扩散法(ADD)和间接ELISA方法测定其特异性,发现这4种抗血清既可与同种的抗原发生阳性反应,也可与不同种的抗原发生交叉反应。用异种抗原黑白轮枝菌和尖孢镰刀菌吸附这4种抗血清,排除其非特异性成分后,抗血清专化性明显提高,消除了交叉反应。特异性测定表明:经吸附后的4种抗血清可以准确地将大丽轮枝菌鉴定到种的水平,但仍不能区分其生理型和致病类型。另外,当分别使用菌丝研磨物或菌丝蛋白为特异性测定抗原时,ADD检测的结果虽然一致,但前者阳性反应沉淀线粗糙,轮廓不清晰,后者的沉淀线较细,且清晰、明显。因此适宜选择菌丝蛋白为抗原进行抗血清的特异性测定试验。

鸭疫里默氏杆菌抗体检测的全菌体抗原间接ELISA方法的建立

本研究建立了检测鸭疫里默氏杆菌(Rimerrlla anatipestifer,RA)抗体的全菌体抗原间接ELISA方法,最佳血清稀释倍数为1:100。以RA1的甲醛灭活全菌体为包被抗原,棋盘滴定法试验确定其最适抗原包被浓度为5×108CFU/mL。与全菌体裂解抗原和重组P25蛋白为包被抗原的间接ELISA方法相比较,三者均可检测不同血清型RA标准阳性血清,结果符合性良好。用该方法检测雏鸭接种鸭疫里默氏杆菌蜂胶灭活疫苗后血清抗体水平的变化,发现免疫后10天抗体水平开始上升,二免后10天抗体水平达到峰值。

重组溶葡萄球菌酶中宿主菌残余蛋白含量的测定

制备球形芽孢杆菌菌体蛋白作为免疫抗原,免疫家兔制备抗血清,建立了一种测定重组溶葡萄球菌酶中残余宿主菌菌体蛋白含量的双抗体夹心酶联免疫吸附测定法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)。结果表明,建立的双抗体夹心ELISA法快速、简便、灵敏,检测范围宽,能检测出制品中的微量菌体蛋白;对3批重组溶葡萄球菌酶原液的检测合格,制品中残余宿主菌蛋白含量小于万分之二。此方法可以用于重组溶葡萄球菌酶中残余宿主菌菌体蛋白含量的测定。

应用ELISA法检测门冬酰胺酶中残余大肠杆菌菌体蛋白含量的研究

采用Cygnus公司"大肠杆菌菌体残留蛋白检测试剂盒"检测门冬酰胺酶中残余宿主菌菌体蛋白含量,建立门冬酰胺酶中宿主菌菌体蛋白残留检测方法并进行了相关方法验证。验证结果表明:宿主菌菌体蛋白浓度在0～100 ng/mL范围内呈良好的线性关系,线性相关系数大于0.99,不同实验人员测得的精密度RSD均小于5%,平均回收率为94.34%。通过对8批门冬酰胺酶样品的检测,测得门冬酰胺酶中的残余宿主菌体蛋白含量均小于550×10-6。该方法具有快速,操作安全简便等优点,灵敏度高,重现性好,可用于门冬酰胺酶的宿主菌体蛋白的残留检测。

姬松茸的海绵固定化培养研究

本文采用海绵吸附法来固定化培养姬松茸。培养条件为 15 块海绵、3%接种量。固定化培养的胞外多糖产量比游离细胞培养增加 9.1%、菌体生物量增加 13.6%。固定化细胞可连续使用 3 个周期,在工业生产上具有可行性。

布鲁菌检验在布病患者中的效果及意义

分析布鲁菌检测在布病患者中的效果及作用。方法:本次实验的开始时间为2019年12月,结束时间为2020年12月,研究对象为我院收治的患有布鲁菌病的患者50例,对上述患者均进行检测的方式分别为间接酶联免疫吸附试验法,以及红虎平板凝集试验法,试管凝集试验法。结果:采用红虎平板凝集试验法的检出率略高,检出率为84.00%,其次为试管凝集试验法,检出率为80.00%,最后为间接酶联免疫吸附试验法,检出率为70.00%,但是三种检测方式的数据不存在统计学意义。结论:布鲁菌检测在布病患者中的应用价值较高,在检测方式方面,红虎平板凝集试验法检出率较高,在实际工作中,采用联合检测能有效提高疾病的检出率,予以患者有效的治疗方案。