共聚焦荧光镜检术揭示大蒜鳞片细胞间期核中的F肌动蛋白网络(英文)

采用免疫荧光和荧光分子探针技术与共聚焦激光扫描显微镜观察相结合 ,对大蒜 (AlliumsativumL .)鳞片细胞间期核中是否存在F肌动蛋白进行了研究。结果表明 ,以兔抗肌动蛋白抗体为一抗、FITC_羊抗兔IgG抗体为二抗进行免疫荧光标记实验 ,在荧光镜下观察到蒜瓣薄壁组织的细胞核及表皮细胞核均发出明亮的黄绿色荧光。经共聚焦激光扫描显微镜进一步检查 ,整个细胞核呈黄绿色荧光 ,说明其中含有肌动蛋白。经TRITC_鬼笔环肽(TRITC_phalloidin)标记后 ,细胞核散发出明亮的红色荧光 ,经共聚焦激光扫描显微镜做光切片及三维重组图像 ,发现核中有一个三维网络结构。细胞松弛素D (cytochalasinD)预处理后 ,核中三维网络结构不复存在 ,但核仍显示红色荧光 ;若经非标记phalloidin预处理 ,则核中几乎看不到红色荧光和任何网络残迹。对照实验结果进一步表明 ,F肌动蛋白存在于大蒜细胞核中并以F肌动蛋白纤束形成三维网络结构。

PRINS技术标记绒毛细胞间期核21号染色体的研究

目的 探索妊娠早期诊断唐氏综合征的新方法。方法 应用 2 1号染色体特异的α -卫星DNA序列引物对 7份早孕绒毛间期细胞标本进行了引物原位标记反应。结果 7份标本中 ,平均 93 %的细胞核显示 2个标记信号。荧光信号清晰明亮 ,整个反应在 4～ 5h内完成。结论 引物原位标记技术可于妊娠早期快速检测绒毛间期细胞 2 1号染色体数目异常 。

遗传病间期核FISH产前诊断的临床研究进展

间期核荧光原位杂交(FISH)具有快速、安全、灵敏度高、特异性强等优点,被认为是继聚合酶链反应之后又一重要的产前诊断手段。应用生物素标记的染色体特异性探针对未经培养的绒毛细胞或羊水细胞进行FISH,能够快速诊断常见的三体型及性染色体数目畸变,对孕早期快速筛查诊断异常妊娠有重要意义。

人类精子间期核荧光原位杂交

目的：研究人类精子染色体畸变。方法：Ｅ和３号染色体涂染探针对人类精子间期核进行荧光原位杂交，共检测了１０名正常健康男性，２名涉及３号染色体平衡易位携带者ｔ（３：７）、ｔ（３：９）的精子。结果：正常男性精子间期核中３号染色数目和（或）结构畸变率〈２％，涉及３号染色体平衡易位携带者的畸变率〉１０％。结论：荧光原位杂交技术可秀于检测精子间期核染色体的畸变．

几类细胞中期染色体与间期核AgNOR活性的对比观察

对鼻咽癌细胞株HNE3，以及HeLa、Raji、人PBL等细胞的中期染色体AgNOR表达及其间期核AgNOR活性进行了检测分析。染色体AgNOR活性表达依次为8．2±2．8，11．0±2．7，14．6±4．3，17．8±2．2；间期核AgNORs依次为35.2±3．3，32.3±3.1，24.4±3.0，2.8±1.7。结果表明，染色体与间期核的AgNOR活性呈负相关（r＝－0．933）。

从石蜡包埋组织中提取的间期核FISH分析

从石蜡包埋组织中提取的间期核ＦＩＳＨ分析从石蜡包埋的组织中提取细胞核的方法是１９８３年第一次由Ｈｅｄｌｅｙ等人提出的。这一方案在许多方面已得到修改。然而，其中３个重要步骤一直没有得到改进：①脱蜡和再水合过程中组织的沉降；②应用胃蛋白酶（和胃蛋白酶抑制...

精子间期核荧光原位杂交及其应用

精子间期核荧光原位杂交是近年来检测非整倍体精子的新方法，具有荧光信号直观易分辨、短时间内能分析大量精子和实验结果准确可信等优点，在一定程度上取代了繁琐费时的人精子—仓鼠卵融合技术。本文介绍了精子间期核荧光原位杂交的基本实验方法，在遗传学各研究领域的应用。

几种动物间期核染色质的电镜研究

用电镜对不同种动物细胞间期核染色质进行了研究 ,结果表明染色质在间期核内有不同结构层次 ,其中主要是直径为 2 0～ 30nm纤维 ,也有较多 10nm纤维 .不同种动物间期核染色质的存在形式和排布有一定差异 .赤链蛇肝细胞间期核没有聚集的异染色质区 ,整个核内均匀分布着直径为 2 0nm的纤维 .乌鸡红细胞间期核染色质直径为 2 0～ 30nm的纤维呈“念珠”状颗粒结构 ,并以此结构锚定在核纤层上 .

间期核荧光原位杂交技术用于产前诊断的研究进展

荧光原位杂交是由细胞遗传学、分子生物学及免疫学技术相结合而形成的一种新技术,具有快速、安全、灵敏度高、特异性强等优点,不但能显示于染色体中期分裂相中,还能显示于间期核细胞,是分子细胞遗传学研究的重要工具。本文对近年来间期核 FISH 应用于常见染色体数目畸变快速产前诊断的研究进展作一综述。

辐射对abl和bcr基因在IM-9细胞间期核中三维动态分布的影响

目的 通过观察辐射对bcr和abl基因在间期核内三维分布的影响 ,了解bcr和abl基因发生融合的物质基础 ,探讨慢性髓细胞白血病发病的生物体视学机制。方法 用荧光原位杂交结合激光共聚焦扫描显微镜的方法 ,研究受γ射线照射的IM 9细胞中bcr和abl基因在各细胞周期核内三维空间的分布情况 ,并与正常的IM 9细胞作了比较。结果 abl和bcr基因在间期核内呈非随机分布 ,abl靠近核膜 ,而bcr靠近核心 ,在G0 期两基因最接近 ;同源基因之间的相对距离在增殖期明显大于静止期。照射后abl和bcr基因到核心的相对距离减少 ,两基因间的相对距离亦缩短 ,在S期最接近。结论 辐射会改变bcr和abl基因在间期核内的三维空间分布 ,促使二者互相接近。

间期核荧光原位杂交在稽留流产病因诊断中的应用

目的探讨间期核荧光原位杂交技术(interphase fluorescence in situ hybridization,FISH)在稽留流产病因诊断中的应用价值以及稽留流产中染色体异常的发生率。方法 2010～2011年我院妇产科收治的稽留流产病例95例及人工流产病例40例,取流产绒毛组织分别行间期核FISH检测13、16、18、21、22、X、Y染色体数目异常,同时进行细胞培养,制备中期染色体进行G显带核型分析。结果间期核FISH在95例流产绒毛组织中共检出40例(42.1%)染色体数目异常,与G显带核型分析结果相一致。40例中三体31例(32.6%),X单体5例(5.3%),多倍体4例(4.2%)。常染色体非整倍体的发生率(35.8%)大于性染色体非整倍体(6.3%),检出率最高的是16三体,占48.4%(15/31),单体型异常仅检出X单体,未检出常染色体单体。稽留流产组染色体数目异常发生率高于对照组(P<0.05),年龄大于或等于35岁者稽留流产染色体数目异常的发生率高于年龄小于35岁者(P<0.05)。结论绒毛染色体数目异常是导致稽留流产的重要病因,在诊断稽留流产染色体异常方面,间期核FISH技术是一种快速简便、灵敏特异的方法,具有重要的临床应用价值。

间期核FISH技术快速诊断染色体畸变在选择性减胎中的应用

目的探讨间期核荧光原位杂交技术(FISH)快速检测双胎之一染色体畸变在孕中期选择性减胎中的应用价值。方法对5例双胎之一为染色体畸变且缺乏超声标志病例分别抽取羊水采用目标染色体探针行间期核FISH检测,根据检测结果判断被减胎儿进行选择性减胎,随访观察胎儿生长发育及分娩情况。结果间期核FISH均在短时内明确异常胎儿,辅助完成孕中期选择性减胎。5例孕妇术后未出现并发症,胎儿出生后一般情况好。结论间期核FISH在选择性减胎术前应用,未增加手术操作风险同时避免了减错胎的风险,对于超声难以辨认异常胎儿时的选择性减胎,是一种可行的补救措施。

两种少量小鼠外周血间期核FISH技术的比较

目的:探讨低渗法与红细胞裂解法应用于小鼠少量外周血间期核荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)检测的优缺点,以便于根据实验条件选取最合适的方法。方法:小鼠剪尾巴法获取外周血,采用低渗法或红细胞裂解法破坏红细胞,涂片前先用免疫组化笔在玻片上划好预计涂片区域,重悬沉淀后稍等片刻再吸中间部分用于涂片,涂完后在相差显微镜下观察密度,行常规FISH,比较两种方法处理后的FISH结果。结果:低渗法和红细胞裂解法处理后的片子背景都较干净,密度适中,信号较强。结论:在外周血间期核荧光原位杂交技术中,低渗法和红细胞裂解法都可以获得较满意的FISH结果。低渗法的特点在于试剂便宜且易于获取,但耗时稍长;而红细胞裂解法的特点在于可节省实验时间,但需专用试剂。

斑马鱼的核型、Ag-NORs及C-带型研究

斑马鱼的核型、Ａｇ－ＮＯＲｓ及Ｃ－带型研究易梅生余其兴周荣家郭一清（武汉大学生命科学学院，武汉４３００７２）ＴｈｅＫａｒｙｏｔｙｐｅａｎｄＡｇ－ＮＯＲｓ，Ｃ－ｂａｎｄｉｎｇＰａｔｅｒｎｓｏｆｔｈｅＺｅｂｒａｆｉｓｈ（Ｂｒａｃｈｙｄａｎｉｏｒｅｒｉｏ）...

从外周血间期细胞中检测染色体非整倍体

将荧光原位杂交（Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｉｎｓｉｔｕｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ，ＦＩＳＨ）技术应用于未培养的外周血间期检测染色体非整倍体，以省去复杂的细胞培养过程。选用Ｄ２１Ｚ１／Ｄ１３Ｚ１ＤｘＺ１探针与８例正常人及３例唐氏综合征和３例特纳综合征外周血间期白细胞进行荧光原位杂交来检测染色体非整倍体。结果表明：通过统计间期核中的杂交信号，能准确检出唐氏综合征及特纳综合征，与常规细胞学结果相符，该法省去了复杂的细胞培养过程和周期，不仅使常规的细胞学得以简化，而且为产前诊断染色体非整倍体及肿瘤病因学的研究提供了捷径。

微核出现率与肝硬化预后的初步探讨

微核是染色体畸变在有丝分裂间期核时所呈现的一种损伤类型,能迅速而准确地反映出畸变率,与染色体分析密切相关。许多研究认为微核测定可反映人体受致癌物作用的早期生物学效应,在癌症患者外周血淋巴细胞中均普遍而又较高地出现微核,提示机体正处于不正常状态、以及微核有可能作为机体患癌的生物学标志之一。本文对肝炎后肝硬化患者外周血淋巴细胞微核出现率的变化与预后的关系作一初步探讨。对象和方法一、对象:7例肝炎后肝硬化患者均为我所收治并经临床确诊。

基于细胞学和DNA序列的苎麻与其野生近缘类群系统关系研究

为了了解苎麻与野生近缘种的系统学关系,更有效利用野生苎麻资源,通过细胞学观察和分子标记证据,对中国苎麻与其24个野生近缘类群进行了系统学分析。细胞学结果表明,苎麻间期核形态属于田中分类体系的前染色体型,而其野生近缘种分别属于前染色体型和分散型;苎麻和23个野生近缘物种(其中15个类群的染色体数目为首次报道)中,19个为二倍体(2n=28),而大叶苎麻组3个类群为三倍体(2n=42),1个为四倍体(2n=56),1个为五倍体(2n=70)。ITS序列和trnL-F序列分析表明,苎麻属可分成A(含A1和A2亚分支)、B(含B1和B2亚分支)和C3个基本分支。根据分析结果本文提出苎麻属的两条演化路线:(1)前染色体型进化路线A1→A2,即腋球苎麻组→苎麻组;(2)分散型进化路线B→C,即腋球苎麻组→帚序苎麻组→序叶苎麻组→大叶苎麻组。

FISH技术的临床应用研究

荧光原位杂交 (FISH)是染色体显带技术的补充和发展 .以人类精子、早期胚胎等间期核及中期染色体为材料 ,用FISH技术检测染色体的数目异常和微小的结构异常 .结果快速准确 ,显示它较之传统的细胞遗传学技术诊断具有明显的优越性 ,在临床应用中有广泛的前景 .

染色体领域的研究及其进展

间期核中的染色体并不是散乱分布的,而是每条染色体占据了一块特定的核区域,即染色体领域(chromosometerritory,CTs),染色体领域在间期核中的排列与定位是经过严格组织的,并具有一定的动力学特征,染色体领域的这些严格的定位和空间组织与基因的表达调控密切相关。文章综述了这几个方面的研究进展。

双色荧光原位杂交用于慢性粒细胞白血病干扰素治疗效果的监测

为了探讨双色荧光原位杂交 (D FISH)方法对CML病人干扰素治疗后疗效监测的意义 ,本研究采用D FISH方法对慢性粒细胞白血病 (CML)病人应用干扰素治疗前后骨髓间期核细胞进行bcr abl融合基因的检测 ,并与RT PCR方法检测bcr ablmRNA及传统细胞遗传学方法检测Ph染色体的结果进行比较。结果显示 ,2 2例CML病人D FISHbcr abl融合基因在干扰素治疗前均为阳性 ,其平均检出率在干扰素治疗前后分别为 96 4 %和 5 8.6 % ,其中 2例治疗前Ph染色体阴性病人 ,D FISHbcr abl融合基因在干扰素治疗前后平均检出率分别为 94 .0 %和 70 .1%。D FISH方法检测的 2 2例病人中 ,4例为部分反应 ,4例为微小反应 ,其余 14例为无反应。与传统的细胞遗传学方法相比较具有良好的相关性。结论 :D FISH方法直接检测CML病人间期核细胞的bcr abl融合基因 ,克服了传统的细胞遗传学只能进行分裂中期核细胞分析及RT PCR方法不能定量检测的不足 ,为CML干扰素治疗后克隆缓解程度的评定提供了更方便。