间期细胞遗传学及其在实体瘤分子诊断和发病机理研究中的应用

间期细胞遗传学即以标记的核酸探针用原位杂交的方法在完整细胞核中观察染色体的畸变。荧光原位杂交（ＦＩＳＨ）不仅在基因组物理制图上立下汗马功劳，随着比较基因组技术的进展，人类基因组全部基因的分离克隆，基因表达谱的发展，将在实体瘤的染色体畸变诊断以及分子机制研究方面发挥更大的用途。间期细胞遗传学也将成为连接分子遗传学和细胞病理学的桥梁学科。

肺癌胸水间期细胞遗传学异常变化的研究

目的 探讨肺癌胸水肿瘤细胞的间期细胞遗传学改变 ,并将其结果与传统细胞学结果进行比较。方法 用 7号、11号、17号、X染色体着丝粒特异的 DNA探针 ,对 2 6例肺癌胸水标本进行双色荧光原位杂交 (fluorescence in situ hybridization,FISH)。结果 在 19例肺癌阳性胸水标本中 ,7号、X、17号、11号染色体出现超二倍体的病例分别为 16例 (84.2 % )、14例 (73.7% )、12例 (6 3.2 % )、8例 (42 .1% )。 2例可疑癌胸水标本 7号、X染色体也均表现为超二倍体。在 5例肺癌阴性胸水中 ,有 2例 FISH结果 X染色体出现超二倍体改变。其它 3例阴性胸水以二倍体细胞为主。结论 染色体超二倍体改变是肺癌胸水肿瘤细胞的重要特征 ,FISH技术可以检测胸水标本中的超二倍体肿瘤细胞 ,而且染色体超二倍体改变对临床没有发现的恶性肿瘤及诊断为可疑癌的病例有一定的提示作用。

早熟凝缩染色体(PCC)与荧光原位杂交(FISH)技术的结合

为便于对间期细胞染色体结构异常的识别,作者开展了对早熟凝缩染色体技术(PCC)与荧光原位杂交技术(FISH)二者相互结合起来的研究。作为模型,人外周血细胞在与诱导细胞——分裂期中国仓鼠孵巢细胞(CHO)融合后,形成了早熟凝缩的染色体。当使用人类全基因组DNA为探针做原位杂交时,仅见由人外周血细胞形成的PCC上被染上阳性荧光信号,CHO细胞染色体阴性。在使用人Y染色体特异性DNA探针作原位杂交时,结果不仅在男性外周上细胞核上,而且在一条由胞核演变的早熟凝缩染色体上,获得了特异性阳性荧光杂交信号。这一方法拓展了间期细胞遗传学的研究深度。

荧光原位杂交技术在产前诊断及遗传咨询中的应用

荧光原位杂交（FISH）是近年发展起来的一种分子生物学、细胞遗传学及免疫学技术相结合的全新技术，其在基础生物学领域和临床研究中得到广泛应用。FISH作为一种非放射原性杂交法，它利用特殊的荧光素标记DNA探针，与DNA进行杂交，经免疫荧光显色，可检测细胞内DNA或RNA的存在与否，这既可显示染色体中期分裂相，又能显示未培养的间期核。因此，FISH通常被用于性别鉴定、染色体非整倍体诊断、染色体结构异常诊断、基因定位、间期细胞遗传学及肿瘤遗传学研究。