间羟苯甲酸4－羟化酶纯化及部分性质研究

经超声破碎、硫酸铵分级沉淀、凝胶过滤、磷酸钙胶层析和离子交换层析等步骤，从Ｃｏｍａｍｏｎａｓｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｉ菌株中获得了ＳＤＳ－ＰＡＧＥ单一条带，相对分子质量为６２×１０３的间羟苯甲酸４－羟化酶比活提高２１倍，产率为３０％此酶为ＦＡＤ加单氧酶，催化间羟苯甲酸转变为３。

间羟苯甲酸4-羟化酶的化学计量学研究

用扫描分光光度计对酶所催化的反应进行化学计量学研究。在反应开始后的不同时间，在２００～４００ｎｍ波长范围内扫描，观察到不同的吸收波谱，直到吸收波谱不再改变为止，由此得到间羟苯甲酸４羟化酶催化间羟苯甲酸转变成３，４二羟苯甲酸随时间变化的吸收波谱。用摩尔消光系数计算每种成分的浓度，在２次独立的实验中，底物与产物的摩尔比值分别为１：０．９９８和１：１．０８５，提示来源于Ｃｏ．ｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｉＫＨ１２２３Ｓ菌株的ＭＯＢ４ＨＯａｓｅ与文献报道的来源于Ａｓｐｅｒｇｉｌｕｓｎｉｇｅｒ菌株的ＭＯＢ４ＨＯａｓｅ所催化的反应是相同的。