慢性阻塞性肺疾病合并肺间质纤维化患者VEGF、CRP、IL-6、PCT变化的研究

目的对慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并肺间质纤维化(PF)患者胸部CT表现及血管内皮生长因子(VEGF)、C反应蛋白(CRP)、白细胞介素6(IL-6)、降钙素原(PCT)变化进行探讨。方法选取2020年1月至2024年2月在河南中医药大学第一附属医院接受治疗的124例COPD合并PF患者作为试验组,同期收治的124例单纯COPD患者作为对照组。比较两组胸部CT表现、临床资料及VEGF、CRP、IL-6、PCT水平,采用多因素Logistic回归分析法分析COPD合并PF患者的危险因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清VEGF、CRP、IL-6、PCT水平联合检测对COPD合并PF患者的诊断价值。结果COPD合并PF患者的独立危险因素包括年龄大、COPD病程长、有吸烟史、COPD急性加重期、肺功能分级为3~4级、烟雾/粉尘工作环境、急性加重发作频率高以及血清VEGF、CRP、IL-6、PCT水平高(P<0.05);血清VEGF、CRP、IL-6、PCT水平及联合检测诊断COPD合并PF患者的曲线下面积(AUC)分别为0.650、0.689、0.667、0.702、0.913,敏感度分别为63.71%、64.52%、62.10%、71.77%、88.71%,特异度分别为62.90%、69.35%、71.77%、64.52%、81.45%,其中联合检测的AUC高于单一检测(P<0.05);与对照组比较,试验组网格状影、毛玻璃状影、点状及蜂窝状影的患者占比更高(P<0.05)。结论胸部CT检查在COPD合并PF患者的诊断中具有一定应用价值,COPD合并PF患者的独立危险因素包括COPD病程长、年龄大、COPD急性加重期、有吸烟史、烟雾/粉尘工作环境、肺功能分级为3~4级、急性加重发作频率高;血清VEGF、CRP、IL-6、PCT在COPD合并PF患者的诊断中具有较高应用价值,其中联合检测的诊断价值最高。

慢性阻塞性肺疾病合并肺间质纤维化的相关危险因素分析

目的探讨慢性阻塞性肺疾病合并肺间质纤维化的相关危险因素。方法选择莆田学院附属医院2021年1月—2023年2月收治的92例慢性阻塞性肺疾病患者作为研究对象。其中合并肺间质纤维化36例设为研究组,未合并肺间质纤维化56例设为对照组,总结分析慢性阻塞性肺疾病合并肺间质纤维化的相关危险因素。结果治疗后,对照组的肺功能评价指标第1秒用力呼气容积(forced expiratory volume in one second,FEV1)、用力肺活量(forced vital capacity,FVC)及FEV1/FVC分别为(2.98±0.65)L、(3.79±0.82)L、(71.32±3.52)%,高于研究组的(2.12±0.61)L、(3.13±0.74)L、(63.76±3.26)%,差异均有统计学意义(P<0.05)。单因素分析显示,2组患者的年龄、肺功能、反流性食管炎、吸烟史差异有统计学意义(P<0.05)。多因素logistic回归分析显示,年龄、肺功能、反流性食管炎、吸烟史是慢性阻塞性肺疾病合并肺间质纤维化的危险因素(OR=4.862、4.745、4.424、5.516,P<0.001)。结论年龄、肺功能、反流性食管炎、吸烟史是慢性阻塞性肺疾病合并肺间质纤维化的危险因素,应强化对高龄患者的管理,积极改善患者肺功能,做好反流性食管炎治疗,有效降低合并肺间质纤维化的风险,提高患者生命健康质量,且为临床慢性阻塞性肺疾病合并肺间质纤维化防治标准制定提供借鉴内容。

血清PAI-1、CXCL13、MMP-9对COPD患者并发肺间质纤维化的预测价值

目的探讨血清纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)、趋化因子13(CXCL13)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者并发肺间质纤维化(PIF)的预测价值。方法选取2021年1月至2023年8月新疆维吾尔自治区第三人民医院收治的96例COPD并发PIF患者作为PIF组,另选取96例单纯COPD患者作为非PIF组。比较两组血清PAI-1、CXCL13、MMP-9水平;采用多因素Logistic回归分析COPD患者发生PIF的影响因素,受试者工作特征(ROC)曲线分析血清PAI-1、CXCL13、MMP-9水平对COPD患者发生PIF的预测价值。结果PIF组COPD病程、呼吸困难患者比例、急性期患者比例、PAI-1、CXCL13、MMP-9水平显著高于非PIF组(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,PAI-1、CXCL13、MMP-9、COPD病程、呼吸困难、临床分期是COPD患者发生PIF的影响因素(P<0.05)。PAI-1、CXCL13、MMP-9联合预测COPD患者发生PIF的曲线下面积(AUC)为0.934,灵敏度为93.75%,特异度为77.08%,优于PAI-1、CXCL13、MMP-9各自单独预测(P<0.001)。结论COPD并发PIF患者血清PAI-1、CXCL13、MMP-9水平显著升高,三者联合检测对COPD患者PIF具有较高的预测效能。

肾衰饮对肾间质纤维化大鼠miRNA-21/PTEN/AKT/自噬途径的作用及影响

目的以miRNA-21/PTEN/AKT/自噬途径为切入点,探讨肾衰饮改善肾间质纤维化大鼠的作用及机制。方法将60只雄性SD大鼠适应性喂养3 d后,按体重随机分为两组,即假手术组10只,模型组50只,采用左侧输尿管结扎术建立肾间质纤维化大鼠模型。造模成功后,将大鼠再随机分为组:模型组,肾衰饮低剂量组,肾衰饮中剂量组,肾衰饮高剂量组及尿毒清组。分别按人与大鼠1∶1/2,1∶1,1∶2和1∶1灌胃各给药组大鼠,假手术组与模型组给予生理盐水0.15ml/10g灌胃,M组:9.56 g/kg/d。实验期间进行一般情况观察,灌胃治疗14d后结束实验,各组大鼠禁食、不禁水12h,第二日早8:00称重,进行取材。收集24小时尿,全自动生化分析仪一次性检测尿肌酐(UCr)、微球蛋白(β2-MG)及尿微量白蛋白(mAlb)含量,髂总动脉分支处穿刺采血测定血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)含量;HE染色和Masson染色观察肾脏组织病理学改变及胶原沉积情况;免疫组织化学法检测肾脏组织相关蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测肾脏组织miRNA21及相关mRNA的表达水平;免疫印迹法(Western Blot)检测肾脏组织相关蛋白表达水平。结果与假手术组大鼠比较,模型组大鼠精神倦怠,明显消瘦,排便、排尿异常。Scr、BUN、Ucr、β2-MG、mAlb显著升高(P<0.01)。模型组HE染色肾组织结构紊乱,肾小管官腔明显扩张,排列稀疏,肾小管间质明显增宽,间质内有炎性细胞浸润;Masson模型组肾间质区及系膜区增宽伴大量胶原纤维沉积;肾脏组织miR-21、p62、FN、CollagenⅢmRNA的表达显著增高(P<0.01或P<0.05),PTEN、Atg13、LC3、Beclin-1mRNA的表达显著降低(P<0.01或P<0.05);肾脏组织FN、CollagenⅢ、p62、AKT、p-AKT、m TOR、p-m TOR蛋白水平显著增高(P<0.01);PTEN、Atg13、LC3、Beclin-1蛋白水平显著降低(P<0.01或P<0.05)。经给药治疗后,各给药组大鼠上述指标均明显好转(P<0.01或P<0.05),其中以肾衰饮高剂量组最为显著,明显优于尿毒清组(P<0.01或P<0.05)。结论肾衰饮可能通过下调miR-21及其介导的PTEN/AKT/m TOR通路,从而促进自噬的发生而有效延缓肾间质纤维化的发生发展。

NLRP3炎症小体在大鼠单侧输尿管梗阻引起肾间质纤维化中的作用及其机制

目的:探讨核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体在大鼠单侧输尿管梗阻(UUO)模型肾间质纤维化中的作用,并阐明其可能的作用机制。方法:健康雄性Wistar大鼠30只随机分为假手术组(n=6)和UUO组(n=24),假手术组大鼠仅分离输尿管不结扎,UUO组分别于术后3、7和14 d处死大鼠,并按照处理时间分为UUO 3 d组(n=8)、UUO 7 d组(n=8)和UUO 14 d组(n=8)。HE染色和Masson染色观察各组大鼠肾组织病理形态表现,试剂盒检测各组大鼠肾组织中丙二醛(MDA)水平、超氧化物歧化酶(SOD)活性和羟脯氨酸(HYP)水平,免疫组织化学法检测各组大鼠肾组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白表达水平,Western blotting法检测各组大鼠肾组织中NLRP3蛋白表达水平。结果:HE染色,UUO组大鼠出现明显肾小管扩张,肾间质水肿和增宽,可见较多炎症细胞浸润,部分肾小管腔内可见脱落的上皮细胞。与假手术组比较,UUO 3 d组、UUO 7 d组和UUO 14 d组大鼠HE染色肾间质纤维化评分均明显升高(P<0.05);与UUO 3 d组和UUO 7 d组比较,UUO 14 d组大鼠HE染色肾间质纤维化评分明显升高(P<0.05)。Masson染色,UUO组大鼠肾间质炎症细胞浸润明显,可见明显纤维组织增生;随UUO作用时间增加,大鼠部分肾小管消失,肾间质明显增宽,胶原沉积逐渐增多,皮髓交界处胶原沉积程度更加明显。与假手术组比较,UUO 3 d组、UUO 7 d组和UUO 14 d组大鼠Masson染色肾间质纤维化评分均明显升高(P<0.05);与UUO 3 d组和UUO 7 d组比较,UUO 14 d组大鼠Masson染色肾间质纤维化评分明显升高(P<0.05)。与假手术组比较,UUO 3 d组、UUO 7 d组和UUO 14 d组大鼠梗阻侧肾组织中MDA水平均明显升高(P<0.05),SOD活性明显降低(P<0.05)。与假手术组比较,UUO 3 d组、UUO 7 d组和UUO 14 d组大鼠梗阻侧肾组织中HYP水平均明显升高(P<0.05);与UUO 3 d组比较,UUO 14 d组大鼠梗阻侧肾组织中HYP水平明显升高(P<0.05)。免疫组织化学法,与假手术组比较,UUO 3 d组、UUO 7 d组和UUO 14 d组大鼠肾组织中α-SMA蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与UUO 3 d组和UUO 7 d组比较,UUO 14 d组大鼠肾组织中α-SMA蛋白表达水平均明显升高(P<0.05);与假手术组比较,UUO 3 d组、UUO 7 d组和UUO 14 d组大鼠肾小管上皮细胞和肾小管间质组织中TGF-β1蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与UUO 3 d组比较,UUO 14 d组大鼠肾小管上皮细胞和肾小管间质组织中TGF-β1蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。Western blotting法,与假手术组比较,UUO 7 d组和UUO 14 d组大鼠肾组织中NLRP3蛋白表达水平均明显升高(P<0.05)。结论:NLRP3炎症小体在UUO大鼠肾纤维化过程中发挥重要作用,其作用机制与氧化应激增加和TGF-β1蛋白表达水平升高有关。

六味地黄汤调控TGF-β及Smad家族蛋白表达对肾间质纤维化的影响研究

目的探究六味地黄汤抑制肾间质纤维化(renal interstitial fibrosis,RIF)的干预作用及机制。方法将30只SPF级SD大鼠随机均分为假手术组、模型组、阳性药物组、中药高剂量组和中药低剂量组,每组6只。除假手术组外,其余各组采用左侧输尿管结扎术制备RIF模型。造模结束后,假手术组和模型组予以蒸馏水灌胃,阳性药物组予以醋酸泼尼松片0.2 mg/kg灌胃,中药低、高剂量组分别予以六味地黄汤0.5、1 mg/kg灌胃,疗程为21 d。治疗结束后,采用HE染色法评估肾间质损伤,Masson染色法检测肾间质胶原蛋白沉积和纤维化,RT-PCR测定肾间质转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、针对半身不遂同源物2的重组母体(recombinant mothers against decapentaplegic homolog 2,Smad2)、Smad3、Smad7的mRNA表达,Western blot测定肾间质TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7的蛋白表达。结果与假手术组相比,模型组的病理呈现系膜增生、间质增宽、胶原蛋白大面积沉积和明显纤维化,且TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7的mRNA和蛋白表达均增加(P<0.05)。与模型组相比,阳性药物组和中药低、高剂量组的病理表现均减轻,且TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7的mRNA和蛋白表达均降低(P<0.05)。与中药低剂量组相比,阳性药物组和中药高剂量组的TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7的mRNA和蛋白表达均降低(P<0.05)。结论六味地黄汤能够减轻RIF大鼠的肾间质纤维化程度,且高剂量效果更佳,其机制可能与调控TGF-β及Smad家族蛋白表达有关。

肠道菌群干预肾间质纤维的机制及中药防治研究进展

肾间质纤维化(renal interstitial fibrosis,RIF)为慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)发展成终末期肾脏病的共同病理特征,其发生机制与炎症损伤、氧化应激和细胞自噬等因素密切相关。研究证实肠道菌群与RIF的发生相关,其机制涉及肠道菌群相关的尿毒症毒素、代谢物质等方面。中药在改善RIF进而保护肾功能等方面具有较好的临床效果。大量研究表明中药可以通过调节肠道菌群进而改善RIF。文章就肠道菌群参与RIF的相关机制以及中药调节肠道菌群防治RIF的相应措施做一总结,为后续肠道菌群作为影响RIF提供些许思路和方向。

徐艳玲教授诊疗肺间质纤维化经验探析

肺间质纤维化是多种肺系疾病的终末期改变,病情多呈慢性、渐进性进展,其发病机制尚不够明晰,患病率和病死率日益增高。中医药在应对这一疾病过程中,发挥着独特的优势,不仅能够有效缓解患者的临床症状,还能在一定程度上延缓疾病的进展速度,进而提升患者的生活质量。徐艳玲教授,辽宁省名中医,从事呼吸系统疾病的诊治40余载,有着丰富的临床诊疗经验。徐艳玲教授结合古代文献记载,推崇以“肺痹”“肺痿”认识肺间质纤维化。肺肾气阴两虚是肺间质纤维化发病的基础,正虚不运日久,津失输布,成饮酿痰,阻滞气机,肺失宣降,形成痰浊瘀血等有形实邪阻滞肺络,痰浊瘀血之标实为肺痹发病之机。肺间质纤维化本于肺肾气阴两虚,日久津亏液竭,虚火灼肺,肺络失养,肺叶焦枯而萎弱失用;或本虚日久,酿生之痰浊瘀血,化热酿毒,灼伤肺络,终成肺叶枯萎不荣之象,谓疾病之本虚为肺痿发病之机。其病机肺肾两虚是本,痰浊瘀血阻肺为标,外邪侵袭是疾病恶化要因,提出益气养阴以治其本、化瘀消痰以治其标、参以扶正祛邪的治疗大法。

吡非尼酮联合甲泼尼龙治疗特发性肺间质纤维化的效果及安全性分析

目的探讨吡非尼酮联合甲泼尼龙治疗特发性肺间质纤维化(IPF)的效果及安全性。方法前瞻性纳入2020年1月至2022年12月郑州大学第一附属医院收治的110例IPF患者,采用随机数字表法分为对照组和观察组,各55例,对照组应用甲泼尼龙治疗,观察组应用吡非尼酮联合甲泼尼龙治疗,两组均治疗3个月。比较治疗前、治疗3个月时,两组炎症因子指标[白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]、肺纤维化指标[Ⅲ型胶原(Ⅲ-C)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、透明质酸(HA)]、肺通气功能指标[呼气流量峰值(PEF)、第1秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV_(1)%pred)及第1秒用力呼气容积占用力肺活量的比值(FEV_(1)/FVC)],治疗期间记录患者不良反应发生情况。结果治疗3个月时,两组血清IL-6、TNF-α水平均降低,且观察组低于对照组(P<0.05);两组血清Ⅲ-C、Ⅳ-C、HA水平均降低,且观察组低于对照组(P<0.05);两组PEF、FEV_(1)%pred、FEV_(1)/FVC均提高,且观察组高于对照组(P<0.05)。两组患者不良反应发生率比较无统计学意义(P>0.05)。结论吡非尼酮联合甲泼尼龙可有效减轻IPF患者炎症反应,抑制纤维化进程,改善患者肺通气功能,且安全性良好。

CC类趋化因子受体2、Th1/Th2细胞在IgA肾病大鼠肾间质纤维化中的表达及意义

目的检测IgA肾病大鼠肾间质纤维化中CC类趋化因子受体2(C-C motif chemokine receptor 2,CCR2)的表达和辅助性T细胞1/2(helper T cell 1/2,Th1/Th2)的含量,并观察其在肾脏纤维化中的作用。方法40只SD雄性大鼠,随机分为模型组和对照组,每组20只。采用脂多糖+改良牛血清白蛋白+四氯化碳法构建免疫球蛋白A(IgA)肾病模型。观察大鼠肾组织病理改变和IgA沉淀,计算胶原纤维占肾组织百分比,采用Katafuchi评分标准评估肾小管间质损伤程度。蛋白质印迹测定肾组织CCR2水平。双抗体夹心酶联免疫吸附法测定血清白细胞介素-4(IL-4)和干扰素-γ(IFN-γ)水平。流式细胞术检测Th1/Th2细胞比例。结果模型组大鼠肾组织胶原纤维面积百分比和Katafuchi评分显著高于对照组(P<0.05);模型组大鼠肾组织CCR2、血清IL-4水平、Th2细胞含量及IL-4/IFN-γ比值显著高于对照组,血清IFN-γ水平、Th1细胞含量显著低于对照组(P<0.05);CCR2和IL-4水平及IL-4/IFN-γ比值与胶原纤维面积百分比、Katafuchi评分呈正相关(P<0.05);IFN-γ水平与胶原纤维面积百分比、Katafuchi评分呈负相关(P<0.05)。结论CCR2和Th1/Th2失衡参与IgA肾病大鼠肾间质纤维化发生和发展,拮抗CCR2和调节Th1/Th2平衡有可能减轻IgA肾病大鼠肾脏纤维化改变。

补肺健脾颗粒对肺间质纤维病变大鼠肺组织病理学及羟脯氨酸水平的影响

目的:探讨补肺健脾颗粒对博来霉素注射液诱导的肺间质纤维病变大鼠肺组织病理学及羟脯氨酸(HYP)水平的影响。方法:将40只健康雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、醋酸泼尼松龙组、补肺健脾颗粒组,每组10只。除空白组外,其余3组均采用盐酸博来霉素从气管内注入法进行大鼠肺间质纤维化造模。造模后,空白组和模型组每日灌胃10.0 mL/kg 0.9%氯化钠溶液,醋酸泼尼松龙组灌胃剂量为3 mg/(kg·d),补肺健脾颗粒组灌胃剂量为15.8 g/(kg·d)。分别观察给药第14、28日各组大鼠肺系数和HYP水平,以及给药结束后各组大鼠肺组织病理学改变。结果:给药第14日,模型组肺系数明显高于空白组(P<0.05),补肺健脾颗粒组与醋酸泼尼松龙组肺系数比较差异无统计学意义(P>0.05),但两组均明显低于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05)。给药第28日,模型组肺系数明显高于其余各组(P<0.05),补肺健脾颗粒组与醋酸泼尼松龙组肺系数比较,差异无统计学意义(P>0.05)。给药第14、28日,与空白组比较,模型组肺组织HYP水平明显较高(P<0.05);与模型组比较,补肺健脾颗粒组与醋酸泼尼松龙组肺组织HYP水平明显较低(P<0.05)。给药第28日,与醋酸泼尼松龙组比较,补肺健脾颗粒组肺组织HYP水平较低(P<0.05)。肺组织病理学结果可见,给药第28日,空白组大鼠肺泡区见少许浅蓝色胶原纤维分布,模型组、醋酸泼尼松龙组及补肺健脾颗粒组浅蓝色胶原纤维分布较空白组多。结论:补肺健脾颗粒可抑制肺间质纤维病变大鼠模型病情进展,同时逆转部分肺间质纤维化,降低肺组织HYP水平。

保真汤治疗气阴两虚型肺间质纤维化的临床效果

目的分析气阴两虚型肺间质纤维化患者采用保真汤治疗的效果.方法选取2018年9月—2020年12月潍坊市中医院收治的80例气阴两虚型肺间质纤维化患者为研究对象,以随机抽签法将其分为对照组及观察组,每组40例.对照组采用常规西药治疗,观察组采用保真汤治疗.比较两组的治疗效果.结果观察组的治疗总有效率为95.00%,高于对照组的77.50%,差异有统计学意义(P﹤0.05).治疗后,观察组的用力肺活量(FVC)、第1秒用力呼气容积(FEV_(1))及FEV_(1)/FVC水平均高于对照组,组间差异有统计学意义(P﹤0.05);观察组的各项中医证候积分均低于对照组,组间差异有统计学意义(P﹤0.05);观察组的生活质量综合评定问卷中各项评分均高于对照组,组间差异有统计学意义(P﹤0.05).结论气阴两虚型肺间质纤维化患者采用保真汤治疗的效果显著,可改善其肺功能,减轻症状,提高生活质量,值得临床推广使用.

益气活血清泄法抗肾间质纤维化证治体系的构建与思考

慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)是一组严重威胁人类健康和生命并消耗巨大社会卫生资源的常见慢性进展性疾病,具有发病率高、知晓率低、治疗率低、后期多系统并发症多、预后差的特点。肾间质纤维化(renal interstitial fibrosis,RIF)是CKD进展至终末期肾病(end stage renal disease,ESRD)的主要病理基础和共同通路,其特征是肾间质中细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的过度积累,导致肾功能逐渐恶化。

芪术肺纤汤治疗特发性肺间质纤维化的临床疗效观察

目的探索芪术肺纤汤治疗特发性肺间质纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)患者的临床疗效。方法纳入40例2019年10月1日至2021年12月31日于中国中医科学院广安门医院就诊及住院的IPF患者,随机分为试验组和对照组各20例,对照组患者口服乙酰半胱氨酸胶囊加百令胶囊,试验组患者在此基础上加用芪术肺纤汤,治疗3个月后观察2组患者肺功能、6分钟步行距离(six-minute walk distance,6MWD)、静息状态血氧饱和度(oxygen saturation,SpO_(2))、圣乔治呼吸问卷(the Saint George's respiratory questionnaire,SGRQ)评分、血清涎液化糖链抗原6(krebs von den lungen-6,KL-6)水平、高分辨CT(high-resolution ct,HRCT)半定量评分变化。结果治疗后试验组患者一氧化碳弥散量占预计值的百分比(carbon monoxide diffusing capacity/predict value,DLCO%)明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);治疗后试验组SGRQ总分、症状评分、疾病影响评分、血清KL-6和HRCT半定量评分均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);肺功能分级和HRCT半定量评分呈正相关性(r=0.849,P<0.01)。结论芪术肺纤汤能够延缓IPF患者的肺纤维化进展,值得临床推广应用。

基于Wnt/β-catenin信号通路探索芪蛭通络方对糖尿病肾病大鼠肾间质纤维化的作用机制

目的:基于Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路探讨芪蛭通络方对糖尿病肾病(DKD)大鼠肾间质纤维化的作用机制。方法:SD大鼠予高糖高脂饲料及腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制作DKD模型,取50只造模成功的大鼠随机分为模型组、厄贝沙坦组(每日14 mg/kg)和芪蛭通络方低、中、高剂量组(每日1.215 g/kg、2.430 g/kg、4.860 g/kg),每组10只。同时取10只SD大鼠予普通饲料和腹腔注射柠檬酸缓冲液,作为正常组。造模成功后,各给药组每日予相应药物灌胃,正常组和模型组每日灌胃等体积蒸馏水,各组均连续灌胃8周。收集处死前1 d各组大鼠24 h尿液,检测24 h尿蛋白定量(24 h-UTP);处死前尾静脉取血,测血糖(GLU);末次给药后5 h,各组大鼠予异氟烷吸入麻醉,腹主动脉取血,分离血清测血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN);取双肾,采用苏木素-伊红(HE)染色法、马松(Masson)染色法观察各组大鼠肾脏组织病理变化;分别采用免疫组化(IHC)法、蛋白免疫印迹(Westernblot)法检测各组大鼠肾组织Wnt1、β-catenin、糖原合成激酶-3β(GSK-3β)、结缔组织生长因子(CTGF)蛋白表达。结果:模型组大鼠GLU、Scr、BUN、24 h-UTP水平均明显高于正常组(P<0.01),各给药组大鼠上述指标均明显低于模型组(P<0.01),芪蛭通络方高剂量组上述指标均明显低于厄贝沙坦组(P<0.01),芪蛭通络方对上述指标的改善作用表现出一定的剂量依赖性。病理图片显示,模型组大鼠肾小球结构遭到破坏,炎性改变明显,肾小管扩张,肾间质纤维化明显,肾组织蓝色胶原分泌增多且伴病理损伤;各给药组大鼠肾组织病理改变均有不同程度的改善,以芪蛭通络方高剂量组改善最为显著。免疫组化法及蛋白免疫印迹法结果显示,模型组大鼠Wnt1、β-catenin、CTGF、GSK-3β蛋白表达均明显高于正常组(P<0.01);各给药组大鼠上述蛋白表达均明显低于模型组(P<0.05,P<0.01)。免疫组化法结果显示,芪蛭通络方高剂量组上述蛋白表达均明显低于厄贝沙坦组(P<0.05,P<0.01);蛋白免疫印迹法结果显示,芪蛭通络方高剂量组Wnt1、GSK-3β蛋白表达明显低于厄贝沙坦组(P<0.05,P<0.01),β-catenin、CTGF蛋白表达与厄贝沙坦组比较差异无统计学意义(P>0.05)。芪蛭通络方对上述蛋白的表达表现出一定的剂量依赖性。结论:芪蛭通络方可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路激活,在一定程度上延缓肾间质纤维化,从而起到保护肾功能的作用。

基于络病理论探讨补阳还五汤治疗肺间质纤维化

肺间质纤维化的中医病机是肺虚络瘀,符合络病理论肺络受损致病,经典名方补阳还五汤益气活血通络,暗合络病理论诊治机理,文章基于络病理论详细探讨补阳还五汤治疗肺间质纤维化的理论依据。

心肌间质纤维化相关生物标志物的研究进展

全球目前约有1.25亿冠状动脉疾病(coronary artery disease, CAD)患者,心肌梗死(myocardial infarction,MI)导致的缺血性心肌病(ischemic cardiomyopathy,ICM)和心力衰竭(heart failure, HF)是死亡、反复住院的主要原因^([1])。尽管造成心力衰竭的根本原因通常是多因素且相互重叠的,缺血性心肌病仍是心力衰竭的最大单一因素^([1])。

尿酸盐在慢性肾病并发肾间质纤维化中的作用及机制

目的探讨尿酸盐在慢性肾病并发肾间质纤维化过程中的作用及机制。方法利用0.2%腺嘌呤的饲料喂养小鼠9周,构建慢性肾病小鼠模型。造模结束后,小鼠眼眶后静脉丛采血,检测肾功能和血尿酸含量;HE染色和PAS染色分析肾脏组织病理变化;Masson染色观察肾脏纤维化程度;尿酸盐染色观察肾组织中尿酸盐沉积;Western blot和免疫组化检测目标分子的表达变化。利用不同浓度尿酸刺激原代培养小鼠肾小管上皮细胞(mRTECs)及人肾小管上皮细胞系(HKC);划痕实验观察尿酸对细胞迁移的影响。结果动物水平上,生化分析检测结果显示,模型组小鼠血清尿素氮(P=0.0064)、肌酐(P=0.0080)、血尿酸(P=0.0007)水平较对照组明显增加;HE和PAS染色结果显示,模型组小鼠出现严重肾小管损伤及炎症细胞浸润;Masson染色结果显示,模型组胶原沉积明显增加;尿酸盐染色结果显示,与对照组比较,模型组小鼠肾组织出现大量尿酸盐结晶;Western blot和免疫组化结果显示,模型组小鼠波形蛋白、平滑肌肌动蛋白和转化生长因子β1(TGF-β1)水平较对照组升高,E钙黏蛋白水平较对照组降低。细胞水平上,划痕结果显示,尿酸刺激促进肾小管上皮细胞迁移;Western blot检测结果与免疫组化一致。结论尿酸可通过促进肾小管上皮细胞分泌TGF-β1,进而促进上皮-间质细胞转分化,加速肾间质纤维化的发生。

基于网络药理学探讨白芍总苷治疗类风湿关节炎肺间质纤维化的机制研究

[目的]通过网络药理学结合动物试验探究白芍总苷(TGP)主要药物成分与类风湿关节炎(RA)肺间质纤维化之间的作用靶点,揭示白芍总苷治疗RA肺间质纤维化的分子机制。[方法]通过检索多个数据库,根据2个ADEM参数口服生物利用度(oral bioavailability, OB)>30%、类药性(drug likeness, DL)>0.18,筛选出白芍总苷中的主要活性成分及作用的基因靶点;检索DrugBank、GeneCards、OMIM、TTD、DisGenet等数据库筛选RA和肺间质纤维化的基因靶点,通过UniProt数据库进行靶点蛋白的基因名转换,收集白芍总苷治疗RA和肺间质纤维化的作用靶点。获取化合物和疾病靶点取交集,制作韦恩图;将靶点交集导入到STRING数据库绘制PPI网络图,利用DAVID数据库进行GO功能和KEGG信号通路富集分析,深入分析其治疗类风湿关节炎合并肺间质纤维化的机制。将Wistar大鼠分为空白组、模型组、白芍总苷组和托法替布组,通过测定肺脏指数反映肺脏组织的水肿炎症反应,HE染色观察各组肺组织和踝关节滑膜租住的炎症反应,Masson染色观察肺脏组织的胶原沉积状况。[结果]检索TCMSP数据库,筛选得到85种白芍总苷的药物成分,根据OB>30%、类药性>0.18,共筛选9种主要成分;从DrugBank、DisGenet、OMIM、TTD和GeneCards等数据库筛选RA疾病靶点1 625个,肺间质纤维化的疾病靶点1 930个。通过GO功能和KEGG信号通路富集分析共获得分子功能65条目,细胞组分37条目,生物过程350条目和141个富集通路。通过中药-靶点-通路网络图,将Degree排名前十的肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素-6(IL6)、AKT丝氨酸/苏氨酸激酶1(AKT1)、血管内皮生长因子A(VEGFA)、基质金属蛋白酶9 (MMP9)、转录因子Jun(JUN)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARG)、胱天蛋白酶3(CASP3)、前列腺素内过氧化物合酶2(PTGS2)、细胞间黏附分子-1(ICAM1)作为白芍总苷治疗RA肺间质纤维化的关键作用靶点。动物试验结果显示,与模型组相比,治疗组的关节炎评分和肺脏指数降低;HE染色发现,白芍总苷组的关节和肺脏组织炎性细胞的浸润减少;Masson染色发现,白芍总苷可减少条索状的纤维化灶,表明白芍总苷不但可治疗RA,还能延缓肺间质纤维化的胶原沉积和减少炎症反应。[结论]白芍总苷通过多种成分作用于炎症反应、免疫调节和细胞分化增殖等方面的多靶点和多通路,通过靶点和通路间的协同相互作用来延缓RA肺间质纤维化疾病的发展进程。

LncRNA FEZF1-AS1调控特发性肺间质纤维化的机制研究

目的 探讨FEZ家族锌指1-反义RNA 1(LncRNA FEZF1-AS1)对肺间质纤维化细胞增殖、迁移、侵袭能力及上皮-间充质相互作用(EMT)的影响及其作用机制。方法 将转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))作用于A549细胞,诱导肺间质纤维化细胞模型,将其分为空白对照组(A549细胞组)和模型组。Western blotting检测细胞E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)及波形蛋白(Vimentin)表达,观察模型复制是否成功;实时荧光定量聚合酶链反应(q RT-PCR)检测细胞LncRNA FEZF1-AS1和miR-200c-3p基因表达。根据实验目的和转染质粒不同,将A549细胞分为空白对照组(Blank组)、TGF-β_(1)+Si LncRNA FEZF1-AS1 NC组、TGF-β_(1)+Si LncRNA FEZF1-AS1组。CCK-8法检测细胞增殖能力;细胞划痕实验检测细胞迁移能力;Transwell检测细胞侵袭能力。Western blotting检测细胞E-cadherin、N-cadherin及Vimentin蛋白表达;qRT-PCR检测细胞LncRNA FEZF1-AS1和miR-200c-3p基因表达。结果 模型组E-cadherin蛋白相对表达量较空白对照组降低(P <0.05),N-cadherin及Vimentin蛋白相对表达量较空白对照组升高(P <0.05);模型组LncRNA FEZF1-AS1基因相对表达量较空白对照组升高(P <0.05),miR-200c-3p基因相对表达量较空白对照组降低(P <0.05)。与Blank组比较,TGF-β_(1)+Si LncRNA FEZF1-AS1 NC组细胞增殖、迁移、侵袭能力升高(P <0.05);与TGF-β_(1)+Si LncRNA FEZF1-AS1 NC组比较,TGF-β_(1)+Si LncRNA FEZF1-AS1组细胞增殖、迁移、侵袭能力降低(P<0.05)。与TGF-β_(1)+SiLncRNAFEZF1-AS1NC组比较,TGF-β_(1)+Si LncRNA FEZF1-AS1组LncRNA FEZF1-AS1基因相对表达量及N-cadherin、Vimentin蛋白相对表达量降低(P <0.05),E-cadherin蛋白相对表达量升高(P <0.05);与TGF-β_(1)+Si LncRNA FEZF1-AS1 NC组比较,TGF-β_(1)+SiLncRNAFEZF1-AS1组和Blank组miR-200c-3p基因相对表达量升高(P<0.05)。结论LncRNA FEZF1-AS1通过抑制miR-200c-3p促进肺间质纤维化细胞增殖、迁移、侵袭及EMT过程。