去势大鼠睾丸间质细胞移植的实验研究

目的:探讨对去势大鼠动物模型行睾丸间质细胞(Leydig细胞)移植的可行性。方法:随机选择SD大鼠离体睾丸进行Leydig细胞的体外培养及同种异体去势鼠大腿内侧肌群Leydig细胞移植,并进行绒毛膜促性腺激素(hCG)激发试验,监测其血清睾酮分泌情况的变化。结果:体外培养的Leydig细胞对hCG的刺激敏感,能分泌大量睾酮,而一旦进入机体后虽然短期内仍然成活,但分泌功能明显受阻。结论:通过施行同种异体睾丸Leydig细胞移植以提高血清睾酮含量的前景值得商榷。

人脐带间充质干细胞经不同移植途径治疗肝硬化大鼠模型的效果比较

目的探讨人脐带间充质干细胞(hUC-MSC)制剂(冷冻细胞制剂和新鲜细胞制剂)通过两种给药途径(门静脉/尾静脉)移植对肝硬化模型大鼠的治疗效果。方法70只SPF级健康雄性SD大鼠随机分为正常组(n=13,予以普通自来水及普通鼠粮喂养)和肝硬化模型组(n=57,给予CCl4/橄榄油溶液混合液,皮下多点注射造模)。第8周观察两组大鼠的生长状况,取正常组及肝硬化模型组小鼠各3只行组织病理学检查,明确肝硬化形成。选取50只肝硬化模型组大鼠按随机数字表法分为模型组、门静脉(新鲜细胞制剂)组、门静脉(冷冻细胞制剂)组、尾静脉(新鲜细胞制剂)组、尾静脉(冷冻细胞制剂)组,每组10只。分别取新鲜或冷冻hUC-MSC制剂通过门静脉或尾静脉途径移植。给药4周后,比较各组大鼠肝功能指标、肝纤维化程度变化。计量资料两组间比较采用成组t检验;多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果造模第8周时,肝硬化模型组大鼠肝脏形成多个大小不等的假小叶,符合肝硬化诊断标准,ALT、AST、TBil、ALP水平相较于正常组均明显升高(P值均<0.001),肝硬化大鼠造模成功。第12周时5组大鼠ALT、AST、TBil、ALP水平比较差异均有统计学意义(F值分别为232.00、177.10、112.30、121.70,P值均<0.001)。进一步两两比较结果显示,模型组ALT、AST、TBil、ALP水平均显著高于正常组(P值均<0.01);门静脉(新鲜细胞制剂)组、门静脉(冷冻细胞制剂)组、尾静脉(新鲜细胞制剂)组、尾静脉(冷冻细胞制剂)组ALT、AST、TBil、ALP水平均显著低于模型组(P值均<0.01)。结论hUC-MSC移植4周可改善肝硬化模型大鼠肝功能和肝纤维化程度,细胞制剂的不同、给药途径的不同对治疗结果无明显影响。

阿托伐他汀联合骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠急性心肌梗死

目的观察阿托伐他汀对骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠急性心肌梗死的协同作用,并与单纯间充质干细胞移植作比较。方法①间充质干细胞的提取、培养、标记。②建立急性心肌梗死模型。将大鼠分成4组,对照组:在梗死部位分4个点注射L-DMEM培养液,50μl/点。阿托伐他汀组:梗死部位分4个点注射L-DMEM培养液,50μl/点,阿托伐他汀5 mg/(kg.d)溶入生理盐水2 m l,灌喂4周。间充质干细胞组:梗死部位分4点注射已标记的间充质干细胞,每点(50μl)2×106个。联合组:已标记的间充质干细胞注入梗死部位4个点,每点(50μl)2×106个,阿托伐他汀5mg/(kg.d),溶入生理盐水2 m l,灌喂4周。③术后4周,测定大鼠左室收缩压、舒张末压、压力变化最大上升与最大下降速率,检测细胞移植情况及新生血管密度。结果①大鼠血流动力学检测:与对照组、阿托伐他汀组相比,间充质干细胞移植组与联合组左室收缩压、压力变化最大上升与最大下降速率均明显升高,舒张末压明显降低,联合组改善程度更明显。②大鼠心脏组织学检测:间充质干细胞移植组、联合组大鼠梗死心肌内可见5-溴脱氧尿嘧啶标记阳性细胞。③血管密度:联合组大鼠梗死心肌内血管密度高于其它组。结论阿托伐他汀联合应用骨髓间充质干细胞治疗大鼠急性心肌梗死有协同作用,其机制可能为阿托伐他汀通过促进血管新生提高间充质干细胞移植的存活率。

三维球体间充质干细胞移植对大鼠缺血再灌注损伤脑组织TNF-α及凋亡相关蛋白表达的影响

目的观察三维(3-D)球体间充质干细胞(MSCs)移植对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)及凋亡相关蛋白表达的影响,探讨3-D球体MSCs的神经保护作用及可能机制。方法实验大鼠随机分为假手术组、溶剂对照组、3-D球体MSCs治疗组(n=36),假手术组常规分离大脑中动脉(MCA)但不结扎,MSCs治疗组采用线栓法建立大脑中动脉缺血(MCAO)模型后给予MSCs移植,溶剂对照组模型建立成功后给予等体积溶剂对照。各组大鼠分别于移植治疗后1、3、7d进行神经功能评分;采用ELISA和RT-PCR方法检测大鼠脑组织中的TNF-α表达;采用免疫组化SABC法染色,观察损伤侧大鼠脑组织Caspase-3和Caspase-8蛋白的表达。结果与假手术组、溶剂对照组相比,MSCs治疗组大鼠神经运动功能评分降低(P<0.05);与假手术组相比,溶剂对照组大鼠脑组织TNF-α、Caspase-3和Caspase-8表达增加(P<0.01);与溶剂对照组相比,MSCs治疗组脑组织TNF-α、Caspase-3、Caspase-8表达下降(P<0.05,P<0.01)。结论 3-D球体MSCs移植可能通过下调脑组织中炎性因子TNF-α含量及减少凋亡相关蛋白的表达,改善大鼠脑缺血再灌注损伤后神经运动功能。

华通胶源间充质干细胞经冠状动脉移植治疗慢性缺血性心肌病的实验研究

目的探讨华通胶源间充质干细胞(WJMSCs)经冠状动脉移植治疗猪慢性缺血性心肌病(CIMP)的安全性和有效性。方法巴马小型猪29头,其中25头行左冠状动脉前降支球囊闭塞制作心肌梗死后CIMP模型,以超声心动图检查左室射血分数(LVEF)≤45%为CIMP成功标准,其余4头为假手术(Sham)组。造模成功17头,3头未成功,5头死亡,研究初始6头CIMP模型猪(3头成功造模+3头造模未成功)先行WJMSCs经冠状动脉移植剂量选择安全性实验,依次以6×106、1×107、2×107剂量经冠状动脉移植,每剂量组小型猪2头,造模成功与未成功者各1头,以TIMI 3级为安全剂量。余14头CIMP模型猪被随机分为WJMSCs移植组和对照组(n=7),分别经冠状动脉移植WJMSCs(2×107),或注入生理盐水。在WJMSCs移植8周后,对两组模型猪进行超声心动图、病理组织学、免疫荧光学检测。结果 CIMP小型猪在WJMSCs移植8周后,LVEF较移植前增高11.6%(P<0.01),左室收缩末容积减少4.1ml(P<0.05),而对照组心室功能进一步恶化(LVEF从42.8%下降为35.9%,P<0.01),左室进一步扩张(左室舒张末容积从42.8±1.2ml进展为46.7±1.3ml,P<0.05)。病理组织学检查显示WJMSCs移植组梗死区心室壁厚度明显增厚,梗死边缘区血管密度明显增加。免疫荧光检测可见带有Myc标志的WJMSCs在梗死心肌内存活,且与心肌肌钙蛋白T、α-actin和Connexin-43共表达。结论经冠状动脉移植WJMSCs治疗猪慢性CIMP是安全、有效的。

通心络联合外周血间充质干细胞移植对糖尿病足大鼠血管新生磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B信号通路的影响研究

目的探讨通心络联合外周血间充质干细胞移植对糖尿病足大鼠血管新生磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路的影响。方法于2014年3月,选取无特定病原体(SPF级)雄性SD大鼠70只,10只为对照组;60只制作糖尿病足大鼠模型,然后随机分为模型组、西洛他唑组、通心络组、外周血间充质干细胞移植组、西洛他唑+外周血间充质干细胞移植组、通心络+外周血间充质干细胞移植组各10只。完成相应实验操作28 d后,检测并比较各组大鼠的外周血间充质干细胞及缺血下肢肌组织中的内皮糖蛋白(CD)105、细胞周期蛋白(cyclin D_1)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、磷酸化糖原合成酶激酶-3β(p-GSK-3β)表达水平。结果通心络+外周血间充质干细胞移植组大鼠的干细胞数、积分光密度高于外周血间充质干细胞移植组、西洛他唑+外周血间充质干细胞移植组,差异有统计学意义(P<0.05);西洛他唑+外周血间充质干细胞移植组大鼠的干细胞数、积分光密度高于外周血间充质干细胞移植组,差异有统计学意义(P<0.05)。6个造模组大鼠缺血下肢肌组织中CD_(105)、cyclin D_1、p-Akt表达水平低于对照组,p-GSK-3β表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);5个用药组大鼠缺血下肢肌组织中CD_(105)、cyclin D_1、p-Akt表达水平高于模型组,p-GSK-3β表达水平低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05);通心络+外周血间充质干细胞移植组大鼠缺血下肢肌组织中CD_(105)、cyclin D_1、p-Akt表达水平高于西洛他唑组、通心络组、外周血间充质干细胞移植组,p-GSK-3β表达水平低于西洛他唑组、通心络组、外周血间充质干细胞移植组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论通心络联合外周血间充质干细胞移植可以通过调节PI3K/Akt信号通路,促进内皮细胞增殖、分化,从而促进糖尿病足大鼠的新生血管形成。

不同输注途径移植骨髓间充质干细胞对阿霉素肾病大鼠疗效初探

目的探索骨髓间充质干细胞(BMSCs)经不同输注方式移植入阿霉素慢性肾病大鼠体内对肾损伤的影响。方法SD大鼠左侧肾切除后以2.5 mg/kg剂量给大鼠尾静脉注射阿霉素,1次/周,连续2次,慢性肾病模型成功后,将成模大鼠36只随机均分为3组:阿霉素慢性肾病对照(ADR)组、干细胞经肾动脉移植(M-A)组、干细胞经外周静脉移植(M-V)组,另选12只正常大鼠设正常对照(N)组。BMSCs经体外培养后,以2×106个/mL经肾动脉注射到M-A组大鼠体内,2×106个/mL经尾静脉注射到M-V组大鼠体内,2周后再次同样方法注射等量BMSCs。检测移植当周、移植后1周、2周大鼠血尿素氮、血肌酐、24 h尿蛋白、24 h尿微量蛋白,末次注射干细胞后第1周于激光聚焦显微镜下观察大鼠肾脏病理和干细胞在肾脏内分布情况。结果M-A组、M-V组和ADR组在各观察时点血尿素氮、血肌酐、24 h尿蛋白总量、24 h尿微量蛋白均明显高于N组(P<0.01)。移植后1、2周M-A组的24 h尿微量蛋白低于ADR组(P<0.01),且M-A组的血肌酐较ADR组和M-V组均降低(P<0.01)。移植后1周,M-A组24 h尿蛋白、24 h尿微量蛋白明显低于M-V组(P<0.01);但2周时尿蛋白和微量蛋白与M-V组的差异无统计学意义。结论BMSCs移植可以改善阿霉素慢性肾病的肾损伤情况,在BMSCs移植后一段时间,BMSCs经肾动脉移植的效果优于经外周静脉移植。

骨髓间充质干细胞移植治疗脑缺血大鼠的实验研究

目的评价骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对大鼠脑缺血后肌力、平衡力及空间学习能力的改善作用。方法栓塞大鼠大脑中动脉,制作40只脑缺血2 h再灌注动物模型,再灌注24 h后对移植组(20只)移植异体BMSCs。采用抓绳实验、平衡木行走实验及水迷宫实验,在缺血再灌注后1周、2周、4周和12周时对大鼠肌力、平衡力及空间学习能力进行检测,观察BMSCs移植后脑缺血大鼠神经功能恢复情况。结果脑缺血可导致大鼠肌力、平衡力及空间学习能力下降。缺血后随再灌注时间延长,移植组与对照组大鼠肌力、平衡力及空间学习能力均有一定程度的恢复,而移植组较对照组有明显改善。结论BMSCs移植可较显著地促进脑缺血大鼠肌力、平衡力及空间学习能力的改善。

脑源性神经营养因子修饰人羊膜间充质干细胞移植改善老年痴呆大鼠的学习记忆能力

背景:研究发现多种干细胞治疗老年痴呆大鼠效果显著,但关于脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)修饰人羊膜间充质干细胞移植治疗老年痴呆的研究报道较少。目的:探讨BDNF修饰人羊膜间充质干细胞移植对老年痴呆大鼠学习记忆能力的影响。方法:将48只SD大鼠根据随机数字法分为对照组、模型组、干细胞移植组和BDNF修饰干细胞移植组,每组12只。后3组建立老年痴呆大鼠模型,干细胞移植组和BDNF修饰干细胞移植组大鼠基底前脑注射人羊膜间充质干细胞和BDNF修饰人羊膜间充质干细胞。移植后2周,大鼠在三等份辐射式迷宫箱中检测学习记忆能力,免疫组化染色结合图像分析测定p75 NGFR阳性神经元数目。结果与结论:(1)模型组、干细胞移植组、BDNF修饰干细胞移植组斜角带和内侧隔核p75 NGFR阳性神经元数均低于对照组(P<0.05),干细胞移植组、BDNF修饰干细胞移植组斜角带和内侧隔核p75 NGFR阳性神经元数均高于模型组(P<0.05),BDNF修饰干细胞移植组斜角带和内侧隔核p75 NGFR阳性神经元数高于干细胞移植组(P<0.05);(2)模型组、干细胞移植组、BDNF修饰干细胞移植组大鼠的学习记忆能力均低于对照组(P<0.05),干细胞移植组、BDNF修饰干细胞移植组大鼠的学习记忆能力均高于模型组(P<0.05),BDNF修饰干细胞移植组大鼠的学习记忆能力高于干细胞移植组(P<0.05);(3)BDNF修饰干细胞移植组大鼠的学习次数与p75 NGFR阳性神经元数呈负相关(P<0.05),记忆能力与p75 NGFR阳性神经元数呈正相关(P<0.05);(4)结果表明,人羊膜间充质干细胞移植可提高老年痴呆大鼠的学习记忆能力,BDNF修饰人羊膜间充质干细胞可进一步提高人羊膜间充质干细胞的治疗效果。

间充质干细胞移植治疗缺血性卒中的临床研究进展

近二十年来,缺血性卒中的诊断和治疗方法取得了长足的进展,然而,在全球范围内,卒中仍然是致残的最主要因素.尽管卒中急性期的溶栓治疗能够改善预后,提高生存率,但是由于卒中发生后,溶栓时间窗的限制,仅使一小部分患者能够获益[1].卒中发生后最主要是对患者神经功能的影响,这些损害在卒中发生的急性期最明显,随后的4~6周部分功能有所改善,但是患者依然残留一些功能缺损,从而导致了慢性残疾[2].

骨髓间充质干细胞移植联合高压氧治疗兔脊髓冲击伤

目的利用兔骨髓间充质干细胞联合高压氧治疗兔脊髓冲击伤,评价其治疗效果是否优于其两种治疗方法单独应用的效果。方法建立T9-T10段大白兔脊髓冲击伤模型,通过Reuter、改良Tarlov评分和体感诱发电位选择脊髓损伤程度相同的48只大白兔,随机分为4组,每组12只。12 h后对各组分别作空白对照、高压氧治疗、骨髓间充质干细胞移植、两者联合治疗方面的干预。6周后行运动感觉功能评分、免疫荧光示踪、甲苯胺蓝染色、免疫组化染色(Bax、Bcl-2检测凋亡)等检测,比较各组指标的差异。结果高压氧治疗组和骨髓间充质干细胞移植组的运动学评分及病理学指标均优于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05),两者联合治疗组的相关指标较其他治疗组效果明显,差异有统计学意义(P<0.05)。结论单独应用干细胞移植和高压氧治疗均能对脊髓冲击伤产生一定的修复作用,两种治疗措施联合能发挥协同作用,增强治疗效果。

骨髓间充质干细胞移植联合髓芯减压植骨修复股骨头坏死（英文）

背景:单独使用髓芯减压治疗股骨头坏死,易造成股骨头凹陷和内部显微结构的崩溃,因而需要自体骨等材料进行填充支撑,而骨髓干细胞移植能使股骨头塌陷的发生率降低。目的:观察髓芯减压植骨联合骨髓间充质干细胞移植治疗股骨头坏死的临床效果。方法:选择2012年12月至2013年5月在沈阳医学院附属中心医院骨外四科住院的33例采用股骨头髓芯减压植骨联合骨髓间充质干细胞注入髓腔内治疗股骨头坏死患者。结果与结论:股骨头髓芯减压植骨联合骨髓间充质干细胞注入髓腔内治疗股骨头坏死后患者Harris髋关节功能评分增加,疼痛消失,能从事各种劳动;X射线片或CT检查显示股骨头正常30髋,占79%;疼痛明显减轻,行走基本正常或者轻微跛行15髋,占40%;行走间距延长35髋,占92%;髋关节功能障碍明显好转24髋,占63%。提示髓芯减压植骨联合骨髓间充质干细胞移植对改善股骨头缺血性坏死局部血供,促进坏死骨质吸收和骨质修复起到积极的作用。

骨髓间充质干细胞移植对心肌梗死大鼠心肌钾离子通道蛋白和细胞因子的影响

背景:研究表明,骨髓间充质干细胞移植可以有效改善心肌梗死后的心功能,移植后的骨髓间充质干细胞可能对心肌电生理有一定影响,但目前相关的研究甚少。目的:观察骨髓间充质干细胞移植对心肌梗死大鼠心肌钾离子电压门控通道蛋白和心肌梗死相关细胞因子的影响,为进一步探索骨髓间充质干细胞治疗心肌梗死引起心律失常的相关机制提供研究基础。方法:将40只SPF级Wistar雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、细胞培养液组和骨髓间充质干细胞组。通过冠状动脉左前降支结扎建立心肌梗死模型,并于建模成功15-20 min后在梗死区周围采用四点法注射100μL骨髓间充质干细胞悬液(含1×10~6个骨髓间充质干细胞)和100μL细胞培养液。细胞移植4周后获取心脏标本,采用苏木精-伊红染色观察梗死心肌组织病理形态并计算梗死面积,采用Westernn blot检测钾离子电压门控通道蛋白Kv1.2和Kv1.5和心肌细胞特异性蛋白cTnT的表达,利用免疫组化方法检测梗死区心肌细胞凋亡因子Caspase-3、自噬因子Bcl-2和一氧化氮及超氧化物歧化酶的表达。结果与结论:(1)与模型组相比,骨髓间充质干细胞组心肌梗死面积减小(P<0.05),cTnT、Kv1.5和超氧化物歧化酶表达水平均提高(P<0.05),Caspase-3、Bcl-2和Kv1.2表达水平均降低(P<0.05);(2)与细胞培养液组比较,骨髓间充质干细胞组心肌梗死面积减小(P<0.05),cTnT、Kv1.5和超氧化物歧化酶表达水平均提高(P<0.05),Caspase-3、Bcl-2和Kv1.2表达水平均降低(P<0.05);(3)结果提示,骨髓间充质干细胞移植提高了心肌抗氧化能力,减少了细胞凋亡和自噬,促进钾离子通道蛋白Kv1.5的表达。

骨髓和脐血间质干细胞联合移植治疗杜氏型进行性肌营养不良症269例疗效研究

目的观察骨髓间质干细胞(BMSCs)和脐血间质干细胞(CMSCs)联合移植治疗杜氏型进行性肌营养不良症(DMD)的临床疗效。方法2007年6月—2009年3月对269例DMD患者行自体BMSCs和CMSCs联合移植方案进行治疗,患者均使用重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF),5～10μg/kg,2次/d,皮下注射动员骨髓干细胞4d,于第5天行骨髓采集术,局部麻醉下从髂后上棘抽取骨髓100～180ml。将采集的骨髓液经Ficoll密度梯度离心后,分离单个核细胞2.0×109,用Uitra cul Ture培养液调节细胞数量为1×105/ml～1×106/ml,接种于75mm2培养瓶中,24h换液,7～10d后收集全部细胞,总数为4.0×108/ml～1.5×109/ml。将BMSCs移植到患者四肢近端肌肉内。采集脐血80～160ml,Ficoll密度梯度离心,分离单个核细胞并诱导分化为CMSCs。将CMSC(1.0～4.8)×107细胞悬液,经静脉缓慢输注,每5～7d1次,共3次。移植后6个月对患者的肌力、步行10m和推轮椅10m所需时间、肌酸激酶水平、肌电图等进行观察。结果269例患者移植后6个月时随访,218例患者(81.0%)肌力有不同程度的增加。干细胞移植后235例患者复查心肌酶谱,其中188例(80%)患者步行10m及推轮椅10m所需时间明显缩短,与移植前比较差异有统计学意义(P<0.05),干细胞移植后患者肌酸激酶水平较移植前明显下降(P<0.01)。51例患者复查肌电图,32例(62.7%)患者波幅不同程度增高,运动单位增多,多相波减少。47例患者复查大腿肌肉磁共振成像,肌肉影像较移植前变化不明显。结论BMSCs和CMSCs移植治疗DMD,对肌肉组织有一定的修复作用,使DMD患者的运动功能得到改善,肌力有所提高,肌酸激酶较移植前下降。移植后复查肌电图波幅不同程度增高,运动单位增多,多相波减少。MSCs移植无不良反应,患者依从性好,是治疗DMD的新手段。

骨髓间充质干细胞移植对老年性痴呆大鼠中枢胆碱能系统的保护作用研究

目的探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植治疗对老年性痴呆(AD)大鼠中枢胆碱能系统的保护作用及机制。方法雄性Wistar大鼠45只,采用随机数字法分为双侧穹隆海马伞(FF)切断模型组(模型组,复制AD模型),假手术对照组(SOC组,除不切断双侧FF以外,其他操作同模型组),骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植治疗组(BMSCs组,在模型制作成功2周后,每只大鼠接受1×106个BMSCs治疗)。采用免疫组化法检测海马胆碱能神经纤维胆碱乙酰转移酶(ChAT)的表达,RT-PCR检测基底前脑神经生长因子(NGF)mRNA表达。结果模型组在FF切断术后6周,其海马ChAT阳性神经纤维的积分光密度值(1249.71±143.25)明显低于SOC组(2059.58±166.69,P<0.05),BMSCs组(1807.02±133.85)与模型组相比,ChAT阳性纤维数量增多(P<0.05)。模型组基底前脑神经元NGFmRNA表达水平(0.45±0.08)与SOC组(1.14±0.12)比较明显降低(P<0.05),BMSCs组(0.78±0.09)较模型组有所升高(P<0.05)。结论BMSCs移植治疗对AD模型大鼠中枢胆碱能系统有保护作用,其机制可能与BMSCs移植上调基底前脑神经元NGF的表达有关。

人脐带间充质干细胞移植治疗糖尿病足的临床研究

目的:观察人脐带间充质干细胞移植治疗糖尿病足的临床疗效。方法:2型糖尿病并发糖尿病足患者5例。术前采用胰岛素控制血糖,完善检查后给予人脐带间质干细胞悬液病变下肢局部多点注射。结果:治疗后所有患者肢体疼痛缓解,冷感、间歇性跛行均有不同程度的改善,5例溃疡明显好转。结论:人脐带间充质干细胞移植治疗糖尿病足是一种简单、安全、有效的方法,能提高患者生活质量。

济生肾气汤联合骨髓间充质干细胞移植对肝硬化大鼠T淋巴细胞亚群及红细胞免疫功能的影响研究

目的探讨济生肾气汤联合骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对肝硬化大鼠T淋巴细胞亚群及红细胞免疫功能的影响。方法 2014年10-12月,采用随机数字表法将造模成功的30只肝硬化大鼠分为对照组和实验组,每组各15只。对照组采用单纯BMSCs移植治疗,实验组采用济生肾气汤联合BMSCs移植治疗。治疗前及治疗后1、2、3、4周检测两组大鼠T淋巴细胞亚群和红细胞免疫功能指标。结果 CD_4^+、CD_8^+、CD_4^+/CD_8^+比较,治疗方法与时间存在交互作用(P<0.05);组间比较,差异有统计学意义(P<0.05);时间间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。其中,治疗前和治疗后1、2周对照组大鼠CD_4^+、CD_8^+、CD_4^+/CD_8^+与实验组比较,差异均无统计学意义(P>0.05);治疗后3、4周对照组大鼠CD_4^+、CD_8^+、CD_4^+/CD_8^+与实验组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);对照组和实验组大鼠治疗后2、3、4周CD_4^+、CD_8^+、CD_4^+/CD_8^+与治疗前比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。红细胞C3b受体花环率(RBC·C3bRR)、红细胞免疫复合物花环率(RBC·ICR)比较,治疗方法与时间存在交互作用(P<0.05);组间比较,差异有统计学意义(P<0.05);时间间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。其中,治疗前和治疗后1、2周对照组大鼠RBC·C3bRR、RBC·ICR与实验组比较,差异均无统计学意义(P>0.05);治疗后3、4周对照组大鼠RBC·C3bRR、RBC·ICR与实验组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);对照组和实验组大鼠治疗后3、4周RBC·C3bRR、RBC·ICR与治疗前比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论与单纯BMSCs移植相比,济生肾气汤联合BMSCs移植可明显改善肝硬化大鼠的T淋巴细胞亚群和红细胞免疫功能的相关指标。

骨髓间质干细胞移植梗死心肌后细胞因子分泌及对血管新生的影响

目的 研究骨髓间质干细胞 (MSCs)移植梗死心肌后细胞因子的分泌及其对血管新生的作用。 方法 贵州香猪 2 4只 ,按照计算器随机数法随机分为对照组、实验组。抽取骨髓液 3ml,按照 Wakitani的方法培养出骨髓间质干细胞 ,经 5 -氮胞苷 (5 - aza)诱导后 ,5 -溴脱氧尿苷 (Brd U)标记备用。开胸结扎左冠状动脉前降支 ,自体骨髓间质干细胞分别经局部注射和结扎的左冠状动脉前降支远端灌注移植入自体急性心肌梗死区域 ,对照组以 DMEM作对照。术后 3周、6周取标本 ,免疫组织化学法、计算机图象分析检测组织血管内皮生长因子 (VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子 (b FGF)和 因子表达。 结果 实验组梗死区 3周、6周 b FGF、VEGF灰度值明显高于对照组 (P<0 .0 1) ,微血管计数明显增多 (P<0 .0 1)。 结论 自体骨髓间质干细胞移植梗死心肌后能分泌 VEGF、b FGF,诱导血管新生。

骨髓间充质干细胞移植治疗糖尿病神经源性膀胱的研究与进展

背景:干细胞移植治疗近年来吸引了相当多的关注,为治疗糖尿病神经源性膀胱提供了新思路。目的:综述骨髓间充质干细胞移植治疗糖尿病神经源性膀胱的研究与应用进展。方法:由第一作者以"bone marrow mesenchymal stem cells,diabetic neurogenic bladder,differentiation,transplantation;骨髓间充质干细胞,糖尿病神经源性膀胱,分化,移植"为检索词,检索2000至2016年Sciencedirect、Pub Med、Embase、万方及知网数据库应用骨髓间充质干细胞对糖尿病神经源性膀胱治疗及机制相关文献。结果与结论:在糖尿病神经源性膀胱出现膀胱功能障碍时移植骨髓间充质干细胞,通过增殖和分化为平滑肌细胞修复膀胱及尿道功能,同时可合成多种生长因子,对膀胱内局部微环境产生营养性旁分泌作用,包括抗炎、促进增殖和存活等,有效治疗糖尿病神经源性膀胱。一方面,骨髓间充质干细胞凭借向损伤部位趋化的能力,通过血液循环迁移到受损部位参与修复;另一方面,骨髓间充质干细胞合成多种生长因子,以及具有可抑制炎性应答的细胞因子。但目前临床研究尚少,其有效性及安全性有待进一步验证。

体外扩增脐血与骨髓间充质干细胞共移植对NOD/SCID鼠造血重建的研究

目的探讨体外扩增脐血与骨髓间充质干细胞(MSC)移植对NOD/SCID鼠早期造血重建的影响。方法在无血清无基质培养基(SCF、FL、TPO、IL-3)中体外扩增7d,MSC培养传至第3代,移植物注射给亚致死量照射NOD/SCICD鼠,FCM分析移植后2周小鼠骨髓人CD45+细胞表达率。结果体外扩增脐血、MSC与未扩增脐血共移植后,小鼠骨髓CD45+细胞比率提高3·55倍,差异有显著性(P<0·05),部分小鼠血小板恢复照射前水平。结论此3种移植物共移植可能促进NOD/SCICD小鼠早期造血重建和血小板恢复。