FSH对体外培养间质细胞睾酮生物合成的影响

以酶解法结合差速离心分离仔猪睾丸间质细胞为实验材料,研究了FSH对间质细胞睾酮合成的影响。实验结果表明:(1)随着培养时间的延长,间质细胞的分泌功能逐渐开始下降;(2)FSH(20ng/ml)对于d2和d4的间质细胞hCG的结合率,细胞内cAMP浓度均无明显影响;(3)FSH(20ng/ml)对于d2期细胞胆固醇和羟胆固醇的转化也不没有明显的影响。这表明,无论间质细胞处于何种时期,FSH不能通过调节细胞膜上的受体数量调节睾酮的合成,也不能通过影响胆固醇的转运调节间质细胞的功能。

睾丸间质细胞睾酮生物合成的局部调节

睾丸间质(leydig)细胞睾酮生物合成的调节包括许多方面,其中人们研究最多的是劳分泌调节。巨噬细胞和支持(sertoli)细胞与Leydig细胞紧密相邻,是旁分泌调节中的主要角色。本文综述了这两种细胞的主要劳分泌调节因子,如IL-1、TNF、NO、IFN、TGF、IGF等在睾酮合成中的作用,并对其作用机理进行了探讨。

PDGF-BB在胆道闭锁患儿肝脏中的表达及其与上皮间质转化的相关性研究

目的探讨胆道闭锁(biliary atresia,BA)患儿肝脏中血小板源性生长因子-BB(platelet-derived growth factor,PDGF-BB)、锌指转录因子(Snail 1)和上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的表达情况以及三者之间的关系。方法回顾性分析2018年1月至2019年12月河北医科大学第二医院小儿外科收治的BA患儿25例(BA组)、胆总管囊肿患儿15例(CCC组)以及肝脏肿瘤患儿10例(NL组)的临床资料;收集患儿活检组织,分别应用免疫组织化学法、实时荧光定量PCR检测PDGF-BB、Snail 1、E钙黏素(E-cadherin)和N钙黏素(N-cadherin)的表达情况,并对上述指标进行相关性分析。结果BA组患儿肝脏中PDGF-BB、Snail 1和N-cadherin的mRNA和蛋白表达均显著高于CCC组和NL组,差异有统计学意义(P<0.05),E-cadherin的mRNA和蛋白表达均显著低于CCC组和NL组,差异有统计学意义(P<0.05)。其中PDGF-BB与Snail 1 mRNA和蛋白的表达呈正相关(r=0.772,P<0.05;r=0.780,P<0.05);PDGF-BB与N-cadherin mRNA和蛋白表达呈正相关性(r=0.835,P<0.05;r=0.702,P<0.05);PDGF-BB与E-cadherin mRNA和蛋白表达呈负相关(r=-0.756,P<0.05;r=-0.696,P<0.05);Snail 1与N-cadherin mRNA和蛋白表达呈正相关(r=0.723,P<0.05;r=0.702,P<0.05);Snail 1与E-cadherin mRNA和蛋白表达呈负相关(r=-0.720,P<0.05;r=-0.636,P<0.05)。肝纤维化程度与PDGF-BB的表达呈正相关(r=0.977,P<0.05);肝纤维化程度与E-cadherin蛋白表达呈负相关(r=-0.722,P<0.05);肝纤维化程度与N-cadherin蛋白表达呈正相关(r=0.711,P<0.05);肝纤维化程度与Snail 1表达呈正相关(r=-0.810,P<0.05)。结论PDGF-BB可能通过增强转录因子Snail 1的转录活性,促进BA患儿发生EMT,这为BA患儿的诊治提供了新的理论依据。

生物支架材料及间充质干细胞在骨组织工程中的研究与应用

背景:骨缺损的临床治疗面临诸多难题,为解决这一难题,骨组织工程支架材料的研究得到了广泛关注。目的:综述骨组织工程中生物支架材料和间充质干细胞的临床应用价值及发展前景。方法:以"骨组织工程,生物支架材料,间充质干细胞;Bone tissue engineering,Biological scaffold,Mesenchymal stem cells"为关键词,应用计算机检索Pub Med数据库和中国知网数据库中2000年1月至2016年12月关于骨组织工程研究的文章,纳入与有关生物支架材料及间充质干细胞相关的文章,排除重复研究与Meta分析类文章。结果与结论:生物支架材料目前主要有人工合成支架材料(聚乙烯醇、聚乳酸、聚羟基乙酸、聚乳酸羟基乙酸等)和天然支架材料(胶原、壳聚糖、明胶、丝素蛋白等)两种,每种材料均有优缺点。间充质干细胞具有很强的自我复制及多向分化能力,被认为是相对较理想的种子细胞。根据生物支架材料组成成分的特点与间充质干细胞的增殖及多向分化能力,设计更为理想的生物支架材料并构建具有更好修复功能的生物支架材料-间充质干细胞复合体对骨组织缺损的修复至关重要。构建间充质干细胞-3D支架材料还处于实验阶段,但随着纳米材料、国际再生医学、仿生科学的发展,生物支架材料及间充质干细胞在骨组织工程中的应用会得到解决。

间质胶原酶活性中心肽段的制备与表征

利用Fmoc固相合成法合成了一种基质金属蛋白酶—间质胶原酶(MMP-1)活性中心的肽片段,通过RP-HPLC对粗肽进行纯化得到了高纯度的多肽,经电喷雾质谱、1HNMR进行了表征.实验结果表明,Fmoc法合成粗肽的产率为76.0%,纯度为86.5%,经RP-HPLC纯化后纯度达到99.1%.

重组共表达质粒pIRES-hVEGF_(121)cDNA/hBMP-4在大鼠骨髓间充质干细胞中的共表达

目的观察重组共表达质粒pIRES-hVEGF121cDNA/hBMP-4转染大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)后的共表达情况,为骨缺损的联合基因治疗奠定基础。方法使用全骨髓培养法分离、培养大鼠MSCs;重组共表达质粒pIRES-hVEGF121cDNA/hBMP-4经酶切鉴定后,在脂质体介导下将其转入大鼠MSCs,提取总RNA和总蛋白,进行RT-PCR和Western blot检测。结果重组共表达质粒pIRES-hVEGF121cDNA/hBMP-4成功转染至大鼠MSCs中,并获得有效表达。结论hVEGF121和hBMP-4在大鼠MSCs中获有效表达,为骨缺损的联合基因治疗奠定了基础。

放射线照射的肺成纤维细胞对人脐带间充质干细胞中经典Wnt/β-catenin通路的影响

目的：体外研究放射线照射后的人肺成纤维细胞（ HLFs ）对人脐带间充质干细胞（HUMSCs）中经典Wnt／β-catenin信号通路的影响。方法：实验细胞分为共培养组和单纯 HUMSCs 组，共培养组为5 Gy X 射线照射后的 HLFs 通过Transwell系统与HUMSCs共培养。细胞培养3d后，蛋白质印迹法检测HUMSCs中GSK-3β、p-GSK-3β、FRAT1和胞核内β-catenin蛋白表达，酶联免疫吸附试验检测细胞培养上清液中WISP-1蛋白表达。结果：共培养组HUMSCs 中p-GSK-3β／GSK-3β相对比值（0.15±0.05）和FRAT1表达水平（0.48±0.07）较单纯HUMSCs组（0.55±0.05和1.16±0.13）明显下降，共培养组 HUMSCs 胞核内β-catenin （0.50±0.07）也较单纯HUMSCs组（2.39±0.15）明显下降；共培养组HUMSCs培养上清液中 WISP-1蛋白表达[（602.23±161.47） ng／mL ]较单纯 HUMSCs 组[（977.77±110.56）ng／mL]明显下降，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。结论：放射线照射后的HLFs对HUMSCs中经典Wnt／β-catenin通路具有抑制作用。

舒尼替尼通过调控转化生长因子β介导的上皮—间质转化抑制卵巢癌细胞转移

目的：研究舒尼替尼通过调控转化生长因子β（TGF—β）介导的上皮-间质转化抑制卵巢癌细胞转移的作用和机制。方法：运用划痕实验和transwell实验考察舒尼替尼对卵巢癌细胞SKOV3运动能力的影响；采用蛋白质印迹法、实时定量PCR技术和免疫荧光技术分析舒尼替尼对TGF-β诱导的钙黏蛋白（E—cadherin）表达的影响；并通过蛋白质印迹法和报告基因检测技术分析舒尼替尼对Snail蛋白水平和Smad转录活性的影响。结果：舒尼替尼可抑制SKOV3细胞的迁移运动，且呈现一定的量效关系。TGF—β刺激SKOV3细胞后，细胞内E-cadherin蛋白表达减少，而舒尼替尼可部分回调TGF—β减少的E—cadherin。TGF—β可诱导Snail蛋白上调，而该效应可被舒尼替尼阻断；TGF-β可增强Smad复合物的转录活性，而舒尼替尼则可削弱TGF—β对该转录活性的诱导作用。结论：舒尼替尼通过干预Smad复合物的转录活性阻断Snail对E—cadherin的负性调控，从而抑制卵巢癌SKOV3细胞发生上皮-间质转化，并干预其运动迁移能力。

半胱亚磺酸脱羧酶和牛磺酸转运体mRNA在成年小鼠睾丸间质细胞的表达

为检测成年小鼠睾丸间质细胞是否存在牛磺酸生物合成关键酶半胱亚磺酸脱羧酶（CSD）和牛磺酸转运体（TauT）mRNA的表达，通过Percoll分离液分离纯化成年小鼠睾丸间质细胞，运用RT—PCR方法测定睾丸间质细胞中CSD和TauTmRNA表达情况。结果显示，成年小鼠睾丸间质细胞存在CSD和TauTmRNA表达。说明成年小鼠睾丸间质细胞能通过CSD途径合成牛磺酸以及睾丸间质细胞可能存在牛磺酸的转运活动。

TGF-β调控的miRNA在肾间质纤维化中研究

微核糖核酸（microRNA）是短的非编码的内源性RNA,结合到其靶mRNAs,并组装到相应的RNA诱导的沉默复合物（RISC）中。miRNA的生物合成包括多个步骤。首先,miRNA在细胞核通过RNA聚合酶Ⅱ或RNA聚合酶Ⅲ转录为具有发夹径环结构的初级miRNA（PRI-MIR）。

基质金属蛋白酶及其抑制物与乳腺癌关系的研究进展

1基质金属蛋白酶及其抑制剂的生物学特性 MMPs产生于正常组织细胞（结缔组织细胞、内皮细胞、巨噬细胞、淋巴细胞、胸腺细胞等）和肿瘤细胞中,以前酶形式分泌,具有高度的同源性,迄今为止共发现有23种之多[1]。根据其结构及作用底物的特异性分为5类：①胶原酶：包括间质胶原酶（MMP-1）,中性粒细胞胶原酶（MMP-8）和3型胶原酶（MMP-13）,分别降解Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型胶原。

细胞信号传递与细胞外基质降解简介

细胞信号传递与细胞外基质降解简介金博，王立秋，李玉彬海军总医院传染科细胞外间质与细胞间的信号传递有密切的关系，所有细胞外间质都可与细胞膜上的结合素受体结合，有些蛋白多糖还可有类似受体的作用，参与细胞间的信号传递，对于细胞分化状态及细胞极性的维持有重要...

线粒体质量控制调控上皮-间质转化在肾间质纤维化中作用机制的研究进展

肾间质纤维化是各种慢性肾脏病进展至终末期肾病的共同病理过程,上皮-间质转化是肾间质纤维化的关键环节。线粒体是调控机体内环境稳态平衡的重要细胞器,其可通过细胞呼吸产生三磷酸腺苷,在肾间质纤维化过程中发挥重要作用。线粒体质量控制通过线粒体自噬、线粒体动力学及线粒体生物合成调控肾间质纤维化。本文就线粒体质量控制调控上皮-间质转化在肾间质纤维化中作用机制的研究进展作一综述。

Ets-1、MMP-1及TIMP-1在膀胱移行细胞癌中的表达

目的研究Ets-1、基质金属蛋白酶1(MMP-1)及基质金属蛋白酶1抑制物(TIMP-1)在膀胱移行细胞癌(BTCC)中的表达及意义。方法用免疫组化方法检测40例BTCC组织和12例正常膀胱黏膜组织中Ets-1、MMP-1及TIMP-1的表达;分析Ets-1与BTCC临床病理特征间的关系;研究BTCC中MMP-1、TIMP-1表达与Ets-1表达的相关性。结果①Ets-1在BTCC中高度表达,阳性率为82.5%(P<0.01),且随BTCC临床分期和病理分级的升高而增加,肿瘤复发组高于无复发组,肿瘤转移组高于无转移组(P<0.05)。②MMP-1阳性表达率膀胱癌组(85.0%)明显高于对照组(58.3%)(p<0.05);TIMP-1阳性表达率对照组(83.3%)明显高于膀胱癌组(47.5%)(P<0.05)。③MMP-1与Ets-1表达呈正相关(Rs为0.824,P<0.01),而TIMP-1与Ets-1表达呈负相关(Rs为-0.821,P<0.01)。结论①Ets-1在BTCC中高度表达,并随BTCC分期分级升高而增加;Ets-1与BTCC转移及复发密切相关。②BTCC中Ets-1上调MMP-1表达,而下调TIMP-1表达,从而参与BTCC侵袭与转移。

MMP-9和TIMP-1在骨肉瘤中的表达和临床意义

目的研究骨肉瘤组织中基质金属蛋白酶及其抑制剂(MMP-9、TIMP-1)的表达情况、探讨它们与骨肉瘤侵袭的关系和临床意义,为临床上寻找判断骨肉瘤侵袭性的可靠指标。方法对36例骨肉瘤和15例正常骨组织行免疫组化染色。观察并分析1MMP-9及TIMP-1在骨肉瘤与正常骨组织中的表达;2MMP-9及TIMP-1与骨肉瘤组织学类型及临床分期的关系;3MMP-9及TIMP-1在骨肉瘤中的表达及其相关性。结果MMP-9和TIMP-1在骨肉瘤中的表达率为86.11%和75.00%,二者表达呈正相关(P<0.05);MMP-9和TIMP-1在骨肉瘤中的表达明显高于正常骨组织(P<0.05);MMP-9及TIMP-1与骨肉瘤组织学类型及临床分期无显著相关(P>0.05);骨肉瘤组织中MMP-9阳性表达者肿瘤浸润软组织的比率明显高于阴性表达者(P<0.05)。结论1MMP-9在正常骨组织中呈低表达,而在骨肉瘤中的表达明显上调;2MMP-9可作为骨肿瘤恶性表型的标志,可作为骨肉瘤诊断的辅助指标;3MMP-9是骨肉瘤细胞增殖、侵袭的标志;4MMP-9和TIMP-1在骨肉瘤中二者表达呈正相关。

DOG1、CD117及CD34在胃肠道间质瘤中的表达及病理诊断的意义

目的探讨DOG1、CD117及CD34在胃肠道间质瘤中的表达及病理诊断的意义。方法应用免疫组化EnVision二步法，检测DOG1、CD117及CD34在60例胃肠道间质瘤（GIST）和14例其他类型间叶源性肿瘤组织中的表达。结果GIST组织中DOG1蛋白表达明显高于非GIST间叶源性肿瘤（P=0．000）。发生于胃的GSIT组织中DOG1蛋白表达明显高于肠道GIST（P=0．011）。60例GIST组织中，DOG1、CD117和CD34蛋白阳性表达率分别为95％、95％和83．3％，DOG1蛋白表达高于CD34（P=0．040），而DOG1与CD117差异无统计学意义（P=1．000）。CD117、CD34阳性表达GIST组织中DOG1表达率分别为94．7％、94．1％，CD117、CD34阴性表达GIST病例均全部表达DOG1（3／3，9／9），其中有3例CD117及CD34两者阴性，但DOG1阳性。结论DOG1是一个诊断GIST具有较高敏感性和特异性的GIST标记物，在GIST临床病理诊断工作中，联合检测DOG1、CD117及CD34蛋白表达情况，有助于进～步提高诊断GIST的准确性。

胃肠道间质瘤92例临床病理观察

目的：探讨胃肠道间质瘤（gastroin testinal stromal tumors，GIST）临床病理特征。方法：收集116例手术切除的胃肠道间叶性肿瘤标本，通过常规HE制片，单抗CD117等免疫组化标记确诊GIST92例，分析和观察患者的，临床和病理资料，并复习文献。结果：GIST高峰年龄55～75岁，占胃肠道间叶性肿瘤的79．31％，约15．22％伴发消化道癌。好发部位是胃（54．35％）和小肠（18．48％），其次是肠系膜、结直肠及食管。瘤体大小为0．2～22cm，单发或多发性结节（9．78％）。显微镜下，瘤细胞梭形和上皮样呈束状交叉或弥漫性排列为主，细胞异形性在同一瘤体内的不同区域可存在明显差异，可伴有骨软骨化生（4．35％）。免疫组化，瘤细胞表达CD117（96．74％）或CD34（89．23％），灶性表达DES、SMA、S-100及NSE。结论：GIST是具独特的临床表现和组织学上高度异质性、免疫表型上表达c—kit蛋白（CD117）的胃肠道最常见的间叶源性肿瘤；掌握其临床病理特点有助于治疗方案的拟定。

小鼠SFRP-2基因的克隆及重组腺病毒制备

目的构建小鼠secretedfrizzled-related protein-2(SFRP-2)全基因的重组腺病毒表达系统。方法采用基因工程技术,将SFRP-2基因片段克隆入穿梭质粒pAdTrack-CMV,然后在细菌内与pAdEasy-1进行同源重组,经脂质体转染293细胞包装并扩增腺病毒颗粒。体外原代培养小鼠子宫内膜基质细胞,转染制备的腺病毒颗粒,并用Western blot法检测SFRP-2蛋白的表达。结果构建的小鼠SFRP-2重组腺病毒载体的效价达到5.6×1012pfu/mL,转染原代培养的小鼠子宫内膜基质细胞48h后,有SFRP-2蛋白的明显表达。结论成功构建含小鼠SFRP-2全基因的重组腺病毒载体。

白细胞介素-1及其受体拮抗剂与肝纤维化

白细胞介素-1(Interleukin-1,IL-1)和白细胞介素-1受体拮抗剂(Interleukin-1 Receptor Antagonist,IL-ra)是一对体内重要的细胞因子,主要由单核细胞产生,具有广泛的、相互拮抗的生物学活性。它们不仅对机体防御反应有重要调节作用,而且与多种疾病的病理变化有关。近年来,有一些关于IL-1和IL-ra与肝纤维化形成的关系的研究报道。本文就此研究进展作一综述。

促蛋白合成雄性类固醇的滥用

促蛋白合成雄性类固醇(anabolcandrogenic teroids)是一类天然及人工合成的化学结构同胆固醇相似的化合物。睾丸酮是其中的典型代表。在体内。它主要由睾丸间质细胞(95％)和肾上腺皮质合成。此外女性卵巢也合成少量的睾丸酮。睾丸酮衍生物或类似物都具有致男性化作用．并有促蛋白合成作用。因此这类化合物被统称为促蛋白合成雄性类固醇。临床上主要用于治疗成人雄性特征低下，