血清基质交感分子1、视黄醇结合蛋白4水平对高血压肾病患者的诊断价值研究

目的探讨基质交感分子1(matrix sympathetic molecule 1,STIM1)、视黄醇结合蛋白4(retinol binding protein 4,RBP4)在高血压肾病患者血清中的表达水平,分析其诊断价值。方法选取2020年3月至2021年3月三二〇一医院收治的高血压肾病患者88例为高血压肾病组,单纯高血压患者88例为高血压组,另外选取同期体检健康者88名为健康组。采用酶联免疫法检测血清STIM1和RBP4水平;Pearson法分析血清STIM1和RBP4水平的相关性及其与血压、肾功能指标的相关性;Logistic回归分析高血压肾病的影响因素;受试者工作特征曲线分析血清STIM1、RBP4水平对高血压肾病的诊断价值。结果高血压肾病组尿素氮[(8.26±3.37)mmol/L比(5.46±2.31)mmol/L、(5.63±2.54)mmol/L]、尿酸[(375.53±71.41)μmol/L比(342.80±59.75)μmol/L、(352.68±65.24)μmol/L]、血肌酐[(105.34±34.19)μmol/L比(68.31±20.19)μmol/L、(71.63±22.55)μmol/L]显著高于健康组和高血压组(P<0.05),估算肾小球滤过率(estimated glomerular filtration rate,eGFR)显著低于健康组和高血压组(P<0.05);健康组、高血压组、高血压肾病组血清STIM1[(30.61±6.25)μg/L、(36.63±8.27)μg/L、(48.10±11.06)μg/L]、RBP4[(42.26±5.23)ng/mL、(51.98±8.70)ng/mL、(66.61±13.79)ng/mL]水平显著依次增高,两两比较差异有统计学意义(P<0.05);高血压肾病组血清中STIM1、RBP4的水平呈正相关;高血压肾病组血清STIM1、RBP4水平与尿素氮、尿酸、血肌酐呈正相关,与eGFR呈负相关(P均<0.05);Logistic多因素回归分析得知STIM1高表达、RBP4高表达、血肌酐、eGFR是影响高血压患者发生高血压肾病的独立危险因素(P<0.05);血清STIM1、RBP4诊断高血压患者发生高血压肾病的曲线下面积为0.798、0.744,二者联合诊断高血压肾病的曲线下面积为0.852,灵敏度为75.29%,特异度为88.21%,二者联合优于血清STIM1、RBP4各自单独诊断(Z联合vsSTIM1=2.219、Z联合vsRBP4=3.385,P均<0.05)。结论血清STIM1、RBP4水平在高血压肾病患者中呈现高表达,二者联合对于高血压肾病具有一定诊断价值。

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白、抗磷脂酶A2受体抗体表达及尿视黄醇结合蛋白水平与慢性肾脏病的关系

目的探讨与分析中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、抗磷脂酶A2受体抗体(PLA2R)表达及尿视黄醇结合蛋白(RBP)水平与慢性肾脏病的关系。方法选择2019年6月—2023年6月在扬州大学附属靖江人民医院诊治的120例慢性肾脏病患者作为研究对象,根据慢性肾脏病定义及经我国人群校正的EPI公式计算得出的估算肾小球滤过率水平将其分为观察组和对照组,将慢性肾脏病Ⅳ期到Ⅴ期的40例患者分为观察组,将Ⅰ期到Ⅲ期的80例患者分为对照组。检测所有患者的血清NGAL、PLA2R表达及RBP水平,检测肾功能常规指标并进行相关性分析。结果观察组的血清NGAL、PLA2R水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组的RBP水平显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),观察组的血清尿素氮、血肌酐水平均显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。在观察组中,Pearson分析显示血清尿素氮、血肌酐水平与NGAL、PLA2R、RBP水平均存在正向相关性,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素logistic回归分析显示血清NGAL、PLA2R表达与RBP水平都为导致慢性肾脏病临床分期的重要因素,差异有统计学意义(P<0.05)。结论慢性肾脏病患者多伴随有血清NGAL、PLA2R表达及RBP水平升高,其与患者的常规肾功能指标存在相关性,也可影响慢性肾脏病的进展。

树鼩间质视黄醇结合蛋白-3 T细胞抗原表位的预测及其致葡萄膜炎的活性

目的:预测树鼩间质视黄醇结合蛋白-3(retinol-binding protein 3,RBP3)的T细胞抗原表位,评价其致葡萄膜炎的活性及免疫原性。方法:通过DNAMAN软件比对树鼩RBP3蛋白与人光感受器间维生素A类结合蛋白(interphotoreceptor retinolbinding protein,IRBP)、狒狒IRBP、牛IRBP、大鼠IRBP和小鼠IRBP氨基酸序列的同源性,利用DNAStar软件预测分析树鼩RBP3蛋白T细胞抗原表位及其与鼠主要组织相容性复合体Ⅱ类分子(major histocompatibility complexⅡ,MHC-Ⅱ)相互作用的抗原位点,合成上述预测的RBP3182-192抗原多肽片段评价其致B10.RIII小鼠的葡萄膜炎活性和免疫原性。结果:根据DNAMAN比对分析,树鼩RBP3与人IRBP、狒狒IRBP、牛IRBP、大鼠IRBP和小鼠IRBP的氨基酸同源性分别为83.50%、82.81%、82.23%、82.94%、82.63%。T细胞抗原表位的预测结果显示,RBP3含有47个潜在辅助性T细胞抗原优势表位和34个鼠MHC-Ⅱ类分子结合的CD4+T细胞抗原表位。合成包含预测抗原位点的RBP3182-192抗原多肽能够诱导出B10.RⅢ小鼠的全葡萄膜炎疾病和刺激其T淋巴细胞增殖。结论:树鼩RBP3蛋白包含较多CD4+T细胞抗原表位,选择并合成所预测的RBP3182-192抗原多肽具有诱导T淋巴细胞增殖的免疫活性和致小鼠葡萄膜炎的活性,可为诱导实验性自身免疫性葡萄膜炎树鼩新型模型的抗原筛选及葡萄膜炎研究提供基本理论依据。

NLRP3炎症小体在大鼠单侧输尿管梗阻引起肾间质纤维化中的作用及其机制

目的:探讨核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体在大鼠单侧输尿管梗阻(UUO)模型肾间质纤维化中的作用,并阐明其可能的作用机制。方法:健康雄性Wistar大鼠30只随机分为假手术组(n=6)和UUO组(n=24),假手术组大鼠仅分离输尿管不结扎,UUO组分别于术后3、7和14 d处死大鼠,并按照处理时间分为UUO 3 d组(n=8)、UUO 7 d组(n=8)和UUO 14 d组(n=8)。HE染色和Masson染色观察各组大鼠肾组织病理形态表现,试剂盒检测各组大鼠肾组织中丙二醛(MDA)水平、超氧化物歧化酶(SOD)活性和羟脯氨酸(HYP)水平,免疫组织化学法检测各组大鼠肾组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白表达水平,Western blotting法检测各组大鼠肾组织中NLRP3蛋白表达水平。结果:HE染色,UUO组大鼠出现明显肾小管扩张,肾间质水肿和增宽,可见较多炎症细胞浸润,部分肾小管腔内可见脱落的上皮细胞。与假手术组比较,UUO 3 d组、UUO 7 d组和UUO 14 d组大鼠HE染色肾间质纤维化评分均明显升高(P<0.05);与UUO 3 d组和UUO 7 d组比较,UUO 14 d组大鼠HE染色肾间质纤维化评分明显升高(P<0.05)。Masson染色,UUO组大鼠肾间质炎症细胞浸润明显,可见明显纤维组织增生;随UUO作用时间增加,大鼠部分肾小管消失,肾间质明显增宽,胶原沉积逐渐增多,皮髓交界处胶原沉积程度更加明显。与假手术组比较,UUO 3 d组、UUO 7 d组和UUO 14 d组大鼠Masson染色肾间质纤维化评分均明显升高(P<0.05);与UUO 3 d组和UUO 7 d组比较,UUO 14 d组大鼠Masson染色肾间质纤维化评分明显升高(P<0.05)。与假手术组比较,UUO 3 d组、UUO 7 d组和UUO 14 d组大鼠梗阻侧肾组织中MDA水平均明显升高(P<0.05),SOD活性明显降低(P<0.05)。与假手术组比较,UUO 3 d组、UUO 7 d组和UUO 14 d组大鼠梗阻侧肾组织中HYP水平均明显升高(P<0.05);与UUO 3 d组比较,UUO 14 d组大鼠梗阻侧肾组织中HYP水平明显升高(P<0.05)。免疫组织化学法,与假手术组比较,UUO 3 d组、UUO 7 d组和UUO 14 d组大鼠肾组织中α-SMA蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与UUO 3 d组和UUO 7 d组比较,UUO 14 d组大鼠肾组织中α-SMA蛋白表达水平均明显升高(P<0.05);与假手术组比较,UUO 3 d组、UUO 7 d组和UUO 14 d组大鼠肾小管上皮细胞和肾小管间质组织中TGF-β1蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与UUO 3 d组比较,UUO 14 d组大鼠肾小管上皮细胞和肾小管间质组织中TGF-β1蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。Western blotting法,与假手术组比较,UUO 7 d组和UUO 14 d组大鼠肾组织中NLRP3蛋白表达水平均明显升高(P<0.05)。结论:NLRP3炎症小体在UUO大鼠肾纤维化过程中发挥重要作用,其作用机制与氧化应激增加和TGF-β1蛋白表达水平升高有关。

尿视黄醇结合蛋白与肾小管间质受损的相关性研究

目的:揭示尿视黄醇结合蛋白(RBP)含量与肾小管间质受损的关系及其临床意义。方法:选择1 353例健康人群及186例经肾活检确诊的各种肾脏病患者为研究对象,均进行肌酐清除率(Ccr)、肌酐(Cr)、RBP、尿β2-微球蛋白(β2-MG)、尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)、尿比重(SG)、尿渗透压等项目的测定,并进行比较;同时将所有肾小管功能检测项目与肾小管间质受损评分进行Spearman等级相关分析,计算RBP含量与肾间质受损及受损程度的相关性和敏感性与特异性。结果:肾小管间质受损与尿RBP,β2-MG,NAG呈正相关(分别r=0.863,P<0.001;r=0.777,P<0.001;r=0.374,P=0.002);与渗透压,SG呈负相关(分别r=-0.519,P<0.001;r=-0.624,P<0.001);尿RBP含量对肾间质受损的特异性和敏感性为91.03%和72.06%。结论:尿RBP是反映近端肾小管功能的特异性标志物,可能对诊断、鉴别诊断各种肾脏疾病小管间质病理受损及受损程度具有重要临床意义。

尿视黄醇结合蛋白测定轻型急性胰腺炎肾小管间质损害及其转归

目的 了解轻型急性胰腺炎 (MAP)肾小管间质损害及其转归。方法 用特异性酶联免疫法 (ELISA)测定 5 0例MAP患者尿视黄醇结合蛋白 (RBP)的含量变化与 5 0例健康对照组作对照 ,并随访 31例恢复后患者尿RBP变化。结果 MAP组RBP值与对照组相比有显著差异 (P <0 0 1) ,随访恢复组 31例RBP值与MAP组比较显著降低 (P <0 0 1) ,但与正常对照组比较无显著差异 (P >0 0 5 )。结论 MAP患者可存在近曲肾小管间质功能损害 ,随MAP病情自限 。

视黄醇结合蛋白联合中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白对早期糖尿病肾病的诊断价值

目的探讨中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)联合视黄醇结合蛋白(RBP)对早期糖尿病肾病的诊断价值。方法选取2020年8月至2021年12月在上海市宝山区仁和医院就诊的糖尿病患者203例,根据尿微量白蛋白/尿肌酐比(UACR)分为正常白蛋白尿组(127例)和微量白蛋白尿组(76例)。并选同期健康体检者100名作为健康对照组。检测各组患者的血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)和尿酸以及血清NGAL、RBP表达水平,并绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析其在糖尿病肾病早期诊断中的临床价值。结果微量白蛋白尿组的BUN、Scr、尿酸、NGAL和RBP水平明显高于正常白蛋白尿组和健康对照组(均P<0.05);且微量白蛋白尿组的血清NGAL、RBP水平均与BUN、Scr、尿酸均呈显著正相关(均P<0.05)。绘制ROC曲线可知,NGAL、RBP及联合检测的ROC曲线下面积(AUC值)95%CI分别为0.750(0.683,0.817)、0.703(0.628,0.778)和0.809(0.747,0.870),联合检测的诊断效能明显高于NGAL、RBP单独检测(均P<0.05)。当NGAL、RBP的最佳截断值分别为77.45μg/L,44.75 mg/L时,灵敏度分别为80.3%和73.7%,准确度分别为62.2%和63.8%,诊断准确度最佳,分别为69.0%和67.5%。而联合检测的灵敏度、特异度和准确度分别为88.2%、71.7%和77.8%,明显高于NGAL、RBP单独检测(均P<0.05)。结论NGAL、RBP可作为糖尿病肾病早期诊断的生物标志物,且联合检测的早期诊断效能更高。

尿视黄醇结合蛋白检测轻型急性胰腺炎肾小管间质损害

目的 了解轻型急性胰腺炎 (MAP)肾小管间质损害情况。方法 用特异性酶联免疫法 (ELISA)测定 31例MAP患者尿视黄醇结合蛋白 (RBP)的含量变化并与 5 0例健康者作对照。结果 MAP组RBP和RBP/Cr值分别为 ( 0 .6 6 5±0 .6 4)mg·l-1和 ( 176 .89± 198.91) μg·mmol-1,与对照组 ( 0 .0 87± 0 .0 5 8)mg·l-1和 ( 13.43± 12 .70 ) μg·mmol-1相比 ,有显著性差异 (P <0 .0 1)。结论 MAP患者可能存在近曲小管功能损害 ;尿RBP测定可敏感地反映MAP患者近曲小管功能损害情况。

SNHG3调控miR-186-5p/ZEB1促进肝癌细胞增殖、迁移、侵袭和上皮-间质转化的机制研究

目的探究SNHG3调控miR-186-5p/E盒结合锌指蛋白1(ZEB1)促进肝癌细胞增殖、迁移、侵袭和上皮-间质转化(EMT)的机制。方法在HepG2细胞中转染siRNA干扰片段敲除SNHG3、转染pcDNA3.1(+)/SNHG3使SNHG3过表达,通过实时荧光定量聚合酶链式反应(FQ-PCR)检测是否转染成功。克隆形成实验检测HepG2细胞增殖,细胞划痕实验检测HepG2细胞迁移率,Transwell小室实验检测HepG2细胞侵袭数量,双荧光素酶活性检测验证SNHG3与miR-186-5p、miR-186-5p与ZEB1的靶向关系,FQ-PCR和Western blot法检测SNHG3、ZEB1、E-cadherin、N-cadherin、MMP-2、vimentin、MMP-9、Snail的表达水平。结果肝癌组织中SNHG3表达量高于正常组织,SNHG3表达量低/中的肝癌患者的生存预后优于SNHG3表达量高的肝癌患者,差异有统计学意义(P<0.05)。克隆形成实验结果显示,与pcDNA3.1(+)组相比,pcDNA3.1(+)/SNHG3组HepG2细胞增殖数量显著增加(P<0.05)。细胞划痕实验结果显示,pcDNA3.1(+)/SNHG3组HepG2细胞迁移率显著高于pcDNA3.1(+)组(P<0.05)。Transwell小室实验结果显示,pcDNA3.1(+)/SNHG3组HepG2细胞侵袭数量显著高于pcDNA3.1(+)组(P<0.05)。双荧光素酶活性检测结果显示,miR-186-5p mimic和pGL6-SNHG3-WT共转染后,荧光素酶活性低于其他组,miR-186-5p mimic和pGL6-ZEB1-WT共转染后,荧光素酶活性低于其他组,差异有统计学意义(P<0.05)。FQ-PCR和Western blot检测结果显示,当SNHG3过表达时,E-cadherin mRNA和蛋白相对表达量显著下调,N-cadherin、MMP-2、vimentin、MMP-9和Snail mRNA和蛋白相对表达量以及ZEB1蛋白相对表达量显著上调;当SNHG3敲除后,E-cadherin mRNA和蛋白相对表达量显著上调,N-cadherin、MMP-2、vimentin、MMP-9和Snail mRNA和蛋白相对表达量以及ZEB1蛋白相对表达量显著下调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论SNHG3调控miR-186-5p/ZEB1可促进肝癌细胞增殖、迁移、侵袭和EMT,表明SNHG3是肝癌潜在的治疗靶点。

尿视黄醇结合蛋白、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白与痛风患者肾功能的关联性研究

目的探讨尿视黄醇结合蛋白(RBP)、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)与痛风患者肾功能的关系,并进一步分析了二者对痛风患者合并早期肾损伤的诊断价值。方法选取2018年6月到2020年6月期间在我院接受治疗的痛风患者136例,根据肾损伤情况将136例患者分为痛风组和痛风+肾损伤组,痛风+肾损伤组再根据肾小球滤过率(GFR)将其分为轻度组、中重度组。另选取同期在我院体检的健康志愿者30例作为对照组。检测所有研究对象的尿RBP、NGAL以及血清肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)的水平。结果痛风+肾损伤组的SCr、BUN、RBP、NGAL水平高于对照组和痛风组,差异有统计学意义(P<0.05)。中重度组的SCr、BUN、RBP、NGAL水平高于轻度组,差异有统计学意义(P<0.05)。痛风患者的尿RBP、NGAL与SCr、BUN均呈正相关,且尿RBP与NGAL亦呈正相关(P<0.05)。采用ROC分析显示,尿RBP的曲线下面积为0.795(95%CI:0.705~0.884),尿NGAL的曲线下面积为0.830(95%CI:0.751~0.910)。二者联合诊断时采用并联诊断,可有效提升灵敏度和约登指数。结论尿RBP、NGAL的表达水平与痛风患者肾功能损伤程度密切相关,二者联合检测对痛风患者合并早期肾损伤有较高的诊断价值。

血清视黄醇结合蛋白4对胰岛素抵抗大鼠骨骼肌组织磷脂酰肌醇3激酶的影响

目的研究视黄醇结合蛋白4(RBP4)对胰岛素抵抗大鼠骨骼肌组织磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)的影响。方法雄性Wistar大鼠以高脂高糖饲料喂养诱发胰岛素抵抗模型,造模成功后随机分成正常对照(NC)、胰岛素抵抗(IR)和吡格列酮治疗(IR+PIO)三组。喂养8周后处死动物,取血清测血糖(FPG)、胰岛素(FINS)、甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL),计算胰岛素敏感指数(ISI),ELISA法检测血清RBP4水平,免疫组化方法检测骨骼肌组织中磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)表达水平。结果 (1)IR组大鼠RBP4、FINS、LDL、腹部脂肪含量与体重比值高于NC组和IR+PIO组(P<0.01),IR组ISI、HDL低于其他两组(P<0.01),IR+PIO组FBG、TC、TG低于IR组(P<0.01);(2)IR组骨骼肌组织PI3K的表达低于NC组和IR+PIO组(P<0.01);(3)血清RBP4与骨骼肌组织PI3K(r=-0.577,P<0.01)、HDL(r=-0.550,P<0.01)、ISI(r=-0.457,P<0.01)呈负相关,与FINS(r=0.604,P<0.01)、腹部脂肪含量与体重比值(r=0.472,P<0.05)、LDL(r=0.337,P<0.05)呈正相关。结论胰岛素抵抗大鼠血清RBP4升高,吡格列酮可降低其水平。RBP4与大鼠骨骼肌组织PI3K水平负相关,提示其降低胰岛素的敏感性可能与阻碍胰岛素信号转导有关。

视黄醇结合蛋白4调节肝脏脂质合成及其分子机制

目的探索视黄醇结合蛋白4（RBP4）在肝脏脂质异常合成中的作用及其分子机制。方法以HepG2细胞系、c57BL／6J小鼠及PGC-1β基因敲除小鼠为研究模型展开体外、体内研究。结果细胞水平的实验显示，不论是视黄醇结合的RBP4，还是无视黄醇的RBP4均可显著诱导HepG2细胞内甘油三酯的合成，说明此效应与视黄醇本身无关。RBP4干预能够促进SREBP-1前体由内质网向高尔基体的转位，经蛋白水解活化，成为具有转录活性的成熟SREBP-1形式，从而上调脂质合成相关基因的表达，例如：脂肪酸合酶（FAS）、乙酰辅酶A羧化酶1（ACC-1）以及甘油二脂O-酰基转移酶2（DAGT2）。RBP4干预能够显著提高转录辅因子PGC—113在信使RNA和蛋白水平的表达，并且PGC．113活性的提高对于RBP4所诱导的SREBP-l转录活性的增强是必不可缺的。RBP4通过磷酸化环磷酸腺苷反应元件结合蛋白（CREB）Serl33位点激活CREB，从而诱导靶基因PGC-1β转录活性的增强。在体内实验中，注射了RBP4的C57BL／6J正常小鼠肝脏SREBP-1c的表达升高，进而导致肝脏脂质合成的增加及血中TAG水平的升高，但这一现象在PGC-1β基因敲除的小鼠中并不存在。结论RBP4通过PGC-1p依赖的方式上调SREBP-1的表达、促进肝脏脂质合成，揭示了RBP4水平的调控在改善肝脏异常脂质合成与蓄积方面的巨大潜力。

血清β_2微球蛋白、视黄醇结合蛋白、胱抑素C、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白及基质金属蛋白酶2多指标联合检测在糖尿病肾病患者中的价值

目的探讨糖尿病肾病(DN)患者应用血清β_2微球蛋白(β_2-MG)、视黄醇结合蛋白(RBP)、胱抑素C(Cys C)、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)多指标联合检测的价值。方法选择260例T2DM患者,根据尿微量白蛋白/肌酐比值(UACR)将其分为DN组(UACR 30~<300μg/mg)112例与单纯T2DM组(UACR<30μg/mg)148例。选择同期进行体验的130例健康对象作为对照组。比较3组研究对象血清β_2-MG、RBP、Cys C、NGAL及MMP-2水平,DN组血清β_2-MG、RBP、Cys C、NGAL、MMP-2与联合检测的阳性率。分析UACR与β_2-MG、RBP、Cys C、NGAL、MMP-2的相关性。结果 3组研究对象血清β_2-MG、RBP、Cys C、NGAL及MMP-2水平对比差异有统计学意义,即DN组血清β_2-MG、RBP、Cys C、NGAL>单纯T2DM组>对照组(P<0.05),MMP-2<单纯T2DM组<对照组(P<0.05)。DN组联合检测阳性率88.39%,均显著高于单纯β_2-MG、RBP、Cys C、NGAL、MMP-2阳性率62.50%、60.71%、59.82%、60.71%、63.39%(P<0.05)。UACR与β_2-MG、RBP、Cys C、NGAL呈正相关性(P<0.01);UACR与MMP-2呈负相关性(P<0.01)。结论血清β_2-MG、RBP、Cys C、NGAL及MMP-2多指标联合检测可作为DN的有效诊断与监控指标。

自制尿液视黄醇结合蛋白质控品及其性能评价

目的探讨胶乳增强免疫比浊法检测尿液视黄醇结合蛋白(RBP)室内质控品的制作及其性能评价。方法分别收集肾病患者和体检健康人群的尿液标本,3 500r/min离心5min去除沉淀物,分别调节尿液RBP水平,体检健康人群的尿液为低值,肾病患者尿液为高值;然后防腐、分装、-20℃保存。使用尿液RBP商品试剂盒,应用胶乳增强免疫比浊法检测尿液RBP,分别进行批内和批间精密度检测,然后连续5个月对高值和低值的自制质控品每天各检测1次。数据处理使用SPSS13.0统计软件。最后对自制的尿RBP质控品进行性能评价。结果两个水平的尿液RBP质控品的批内不精密度均小于5.0%,批间不精密度均小于6.0%;-20℃保存稳定期至少5个月,5个月间不精密度比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论自制高低两个水平尿液RBP质控品能够满足室内质控品使用要求,对完善室内质控有重要临床价值。

非妊娠糖尿病孕妇血清视黄醇结合蛋白4、胰岛素样生长因子-1、胰岛素样生长因子-2、胰岛素样生长因子结合蛋白-3水平与巨大儿出生的关系分析

目的探究非妊娠糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)孕妇血清视黄醇结合蛋白4(retinol-binding protein 4,RBP4)、胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)、胰岛素样生长因子-2(insulin-like growth factor-2,IGF-2)、胰岛素样生长因子结合蛋白-3(insulin-like growth factor binding protein-3,IGFBP-3)水平与巨大儿出生的关系。方法回顾性分析2017年6月至2019年5月于中国人民解放军总医院第六医学中心产科分娩的105例非GDM孕妇资料;根据新生儿出生体重将入选孕妇分为正常组(52例,新生儿出生体重<4 kg)和巨大儿组(53例,新生儿出生体重≥4 kg)。记录两组孕妇孕期体重增加值;采用酶联免疫吸附测定分别检测妊娠不同时期孕妇血清RBP4、IGF-1、IGF-2、IGFBP-3水平,通过Pearson相关性分析和线性回归分析探讨上述指标与非GDM孕妇娩出巨大儿之间的关系。结果巨大儿组孕妇孕期体重增加值明显大于正常组(P<0.05)。妊娠16~18周,两组孕妇血清RBP4水平比较差异无统计学意义(P>0.05);妊娠26~28周和38~41周,巨大儿组孕妇血清RBP4水平均显著高于同期正常组(均P<0.05)。妊娠16~18周、26~28周和38~41周,两组孕妇血清IGF-1、IGF-2水平比较差异均无统计学意义(均P>0.05),巨大儿组孕妇血清IGFBP-3水平均显著高于同期正常组(均P<0.05)。Pearson相关性分析显示:非GDM孕妇妊娠26~28周和38~41周的血清RBP4水平与新生儿出生体重均呈正相关(均P<0.001);妊娠38~41周的血清IGFBP-3水平与新生儿出生体重呈正相关(P<0.05)。线性回归分析显示:妊娠26~28周和38~41周血清RBP4水平、妊娠38~41周血清IGFBP-3水平为非GDM孕妇娩出巨大儿的影响因素(均P<0.05)。结论妊娠26~28周和38~41周血清RBP4水平、妊娠38~41周血清IGFBP-3水平均是非GDM孕妇娩出巨大儿的影响因素,可将其作为评价胎儿生长发育的指标。

血清视黄醇结合蛋白、胱抑素C、基质金属蛋白酶9与急性脑梗死患者颈动脉粥样硬化的相关性

目的:分析血清视黄醇结合蛋白(RBP)、胱抑素C(Cys-C)、基质金属蛋白酶(MMP)-9联合检测与急性脑梗死(ACI)患者颈动脉粥样硬化的关系。方法:采用回顾性方法,收集112例ACI患者作为ACI组,同期选取100例健康体检者作为对照组,分别对两组进行RBP、Cys-C、MMP-9水平检测。ACI组根据超声检查颈动脉内的中膜厚度分为正常组31例、轻度狭窄组22例、中度狭窄组29例、重度狭窄组30例,根据斑块的形成分为无斑块组28例、稳定斑块组45例、不稳定斑块组39例。结果:ACI组RBP、Cys-C、MMP-9、颈动脉内-中层厚度(IMT)值显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);随着颈动脉狭窄程度的增加,RBP、Cys-C、MMP-9水平在轻度狭窄组、中度狭窄组、重度狭窄组中逐渐升高,差异有统计学意义(P<0.05);ACI组稳定斑块组和不稳定斑块组RBP、Cys-C、MMP-9水平明显高于无斑块组,不稳定斑块组高于斑块稳定组,差异有统计学意义(P<0.05);Pearson相关性分析显示ACI患者颈动脉IMT值与血清RBP、Cys-C、MMP-9水平呈明显正相关。结论:血清RBP、Cys-C、MMP-9水平在ACI患者中明显升高,并且与颈动脉粥样硬化的程度、斑块性质密切相关。

微小RNA-494-3p靶向配子生成素结合蛋白2促进结直肠癌细胞侵袭、迁移及上皮间质转化的实验研究

目的研究微小RNA-494-3p(miR-494-3p)影响结直肠癌细胞迁移、侵袭及上皮间质转化(EMT)的分子机制。方法于2019年1—12月体外培养购自美国ATCC的结直肠上皮细胞NCM460和结直肠癌细胞系T84、LS1034和HCT116,实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测细胞中miR-494-3p和配子生成素结合蛋白2(GGNBP2)mRNA的表达量,蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞中GGNBP2蛋白表达。将LS1034细胞分为对照(NC)组、miR-494-3p抑制剂(anti-miR-494-3p)组、抑制剂阴性对照(anti-miR-con)组、GGNBP2过表达载体(pcDNA-GGNBP2)组、空载体(pcDNA-con)组、anti-miR-494-3p+GGNBP2小干扰RNA(si-GGNBP2)组和anti-miR-494-3p+小干扰RNA阴性对照(si-con)组,甲基噻唑基四唑(MTT)法测定LS1034细胞存活率,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭,Western blot检测相关蛋白细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)的表达。双荧光素酶报告系统验证miR-494-3p和GGNBP2的调控关系。结果与NCM460细胞相比,结直肠癌细胞T84、LS1034和HCT116中miR-494-3p表达量均显著升高[(1.91±0.11)、(2.23±0.14)、(2.08±0.12)比(1.00±0.04),P<0.001],GGNBP2 m RNA表达量均显著下降[(0.51±0.08)、(0.38±0.06)、(0.45±0.07)比(1.00±0.11),P<0.001],GGNBP2蛋白表达量均显著下降(P<0.001)。与anti-miR-con组相比,anti-miR-494-3p组LS1034细胞存活率、迁移数和侵袭数均显著下降[(41.29±3.89)%比(84.36±7.28)%,(132.56±7.56)个比(246.3±10.64)个,(55.64±5.64)个比(145.62±9.56)个,均P<0.001],细胞中Cyclin D1、MMP-2、Vimentin蛋白表达量均显著下降,均P<0.001,E-cadherin蛋白表达升高、蛋白表达降低(P<0.001)。与pcDNA-con组相比,pcDNA-GGNBP2组LS1034细胞存活率、迁移数和侵袭数均显著下降,P<0.05,细胞中Cyclin D1、MMP-2、Vimentin蛋白表达均下降,均P<0.001,E-cadherin蛋白表达升高,蛋白表达降低,P<0.001。miR-494-3p靶向负调控GGNBP2的表达。与anti-miR-494-3p+si-con组相比,anti-miR-494-3p+si-GGNBP2组LS1034细胞存活率、迁移数和侵袭数均显著上升,细胞中Cyclin D1、MMP-2和Vimentin蛋白表达均升高,E-cadherin蛋白表达下降,均P<0.001。结论miR-494-3p通过靶向抑制GGNBP2促进结直肠癌LS1034细胞迁移、侵袭及EMT。

糖尿病肾损伤患者血清中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白、胱抑素C、视黄醇结合蛋白表达的临床意义

目的探讨糖尿病肾损伤患者血清中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、胱抑素C(Cys-C)、视黄醇结合蛋白(RBP)水平的变化及其临床意义,为临床诊断糖尿病肾损伤提供参考。方法回顾性分析2019年12月至2022年3月眉山市人民医院收治的98例糖尿病患者的临床资料,根据患者是否合并肾损伤分成无肾损伤组(50例)与肾损伤组[48例,其中早期糖尿病肾病(EDN)25例,临床糖尿病肾病(CDN)23例],同时回顾性分析同期进行体检的45例健康者的临床资料作为健康组。比较无肾损伤组、肾损伤组、健康组研究对象血清NGAL、Cys-C、RBP水平,EDN组与CDN组患者血清NGAL、Cys-C、RBP水平;绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清NGAL、Cys-C、RBP对糖尿病肾损伤的诊断价值。结果肾损伤组患者血清NGAL、Cys-C、RBP水平均高于无肾损伤组和健康组,且无肾损伤组高于健康组;CDN组患者血清NGAL、Cys-C、RBP水平均高于EDN组(均P<0.05);ROC曲线显示,血清NGAL、Cys-C、RBP诊断糖尿病肾损伤的曲线下面积(AUC)分别为0.797、0.776、0.741,其中NGAL的诊断价值最高(P<0.05)。结论血清NGAL、Cys-C、RBP可用于糖尿病肾损伤的临床诊断中,且患者肾损伤越严重,三者水平越高,其中以NGAL对糖尿病肾损伤的诊断价值最高。

儿童肾病综合征患者血清视黄醇结合蛋白4水平与氧化低密度脂蛋白的关系研究

目的探讨儿童肾病综合征(NS)患者血清视黄醇结合蛋白4(RBP4)水平的变化及其与氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)的关系。方法分别检测118例NS患儿和45名健康体检儿童(正常对照组)血清RBP4水平,同时测定其血清ox-LDL、白蛋白(Alb)、血脂[包括总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)及非高密度脂蛋白胆固醇(non HDL-C)]及肾功能指标[尿素(Urea)、肌酐(Cr)],并做统计学分析。结果 NS组血清RBP4水平为(55.88±27.36)mg/L,明显高于正常对照组[(30.61±8.68)mg/L](P<0.01),且血清RBP4与ox-LDL、TC、TG、LDL-C、non HDL-C及Urea呈明显正相关[相关系数(r)分别为0.30、0.35、0.25、0.29、0.32、0.26,P均<0.01];进一步多元回归分析显示,NS组TC(β=0.62,P<0.01)、Urea(β=0.26,P<0.01)和ox-LDL(β=0.20,P<0.05)水平共同影响了48.4%的RBP4的变化,且RBP4也是NS患儿ox-LDL水平的决定因素之一。结论 NS患儿血清RBP4水平明显升高。升高的RBP4与ox-LDL的增加有一定的关联,可能促进了NS的发生、发展。

视黄醇结合蛋白4和心血管疾病危险因素

脂肪组织不仅是一个储备能量、提供能量的器官，更是重要的内分泌器官。2005年美国哈佛大学医学中心鉴定出一种新的参与胰岛素抵抗的脂肪细胞因子——视黄醇结合蛋白4（RetinolBindingprotein，RBP4）。随后多项研究表明其可诱导胰岛素抵抗，并且发现血浆RBP4水平在2型糖尿病、肥胖、代谢综合征以及心血管疾病中均有升高。同时国内外一些研究报道了它与脂质代谢、动脉粥样硬化、糖代谢、胰岛素抵抗、高血压、心力衰竭等心血管疾病相关危险因素的相关性。本文综述RBP4的结构、功能、测定及其在心血管疾病中的研究进展。