内源性骨髓间充质干细胞与骨折微环境中的相关趋化因子

背景: 研究表明,骨髓间充质干细胞定向迁移依赖于损伤局部表达趋化因子与细胞表面相应受体的相互作用。然而,哪些趋化因子在介导骨髓间充质干细胞向骨折部位定向迁移过程中起关键作用,目前尚不清楚。目的: 对内源性骨髓间充质干细胞进行示踪,观察其在骨修复中的作用;检测并筛选出骨折微环境中表达量高且与骨髓间充质干细胞趋化规律相关的因子。方法: 建立C57BL/6小鼠荧光/普通骨髓嵌合体,利用嵌合体动物模型制造胫骨骨折模型,在不同时相点检测骨折部位组织绿色荧光蛋白阳性细胞占所有细胞的比例、来源于骨髓间充质干细胞的成骨细胞占全部成骨细胞的比例,判断来源于骨髓的骨髓间充质干细胞在骨折修复中的作用;利用免疫组化等方法检测骨折部位不同时相点趋化因子的蛋白表达水平。结果与结论: 骨折局部绿色荧光蛋白阳性细胞占所有细胞比例在术后1,5,14d分别为(3.011±0.911)%,(9.031±0.145)%,(12.064±0.145)%;来源于骨髓间充质干细胞的成骨细胞占全部成骨细胞的50%以上;骨折后各时相点微环境中基质细胞衍生因子1、集落刺激因子、肝细胞生长因子、单核细胞趋化蛋白1、间质金属蛋白酶9有不同程度的表达,粒细胞集落刺激因子无明显表达。基质细胞衍生因子1的表达量相对最高。经相关分析认为:基质细胞衍生因子1在骨折微环境中的表达与骨髓间充质干细胞趋化规律具有相关关系。结果表明骨髓内的骨髓间充质干细胞参与骨折修复并在其中起到了重要作用;基质细胞衍生因子1促进骨髓间充质干细胞的定向趋化并参与骨组织的修复。

自发性早产患者胎盘组织中fFN、MMP-9、COX-2的表达及意义

目的:胎儿纤维连接蛋白(fFN)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、环氧化酶2(COX-2)在自发性早产患者胎盘组织中的表达及意义。方法:选择2012年12月至2013年6月在西京医院妇产科住院分娩的90例孕妇,其中自发性早产30例,足月顺产30例,择期剖宫产30例。采取免疫组化法、RT-PCR法检测胎盘组织中fFN、MMP-9、COX-2的表达。结果:(1)fFN、MMP-9、COX-2的阳性表达主要定位于滋养细胞胞浆。fFN、MMP-9、COX-2在自发性早产组的阳性表达率分别为96.7%、90%和93.3%,显著高于足月顺产组(86.7%、70%和83.3%)和择期剖宫产组(56.7%、46.7%和50%)(P<0.01);足月顺产组显著高于择期剖宫产组(P<0.01)。(2)fFN mRNA、MMP-9 mRNA、COX-2 mRNA在早产组中的表达水平显著高于足月顺产组、择期剖宫产组(P<0.01);足月顺产组显著高于择期剖宫产组(P<0.01)。结论:fFN、COX-2、MMP-9在自发性早产中呈高表达,推测其可能参与了自发性早产的发病过程。

氯沙坦对不稳定型心绞痛患者血清细胞因子和心肌缺血的影响

目的:探讨氯沙坦对不稳定型心绞痛患者血清细胞因子和心肌缺血的影响。方法:用酶联免疫吸附法测定50例常规治疗组和50例氯沙坦组冠心病患者治疗前后血清肿瘤坏死因子-α(tumornecrosisfactor-α,TNF-α)、间质金属蛋白酶9(matrixmetalloproteinases-9,MMP-9)和白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)的水平,同时观察两组患者治疗前后心肌缺血发作的变化。结果:氯沙坦组病人治疗6个月后血清TNF-α、MMP-9和IL-6水平均较治疗前明显降低(均为P<0.05),而常规治疗组病人治疗前后TNF-α、MMP-9和IL-6水平差异无显著性(均为P>0.05)。氯沙坦组病人治疗后血清TNF-α、MMP-9和IL-6水平低于常规治疗组(均为P<0.05)。两组患者心绞痛临床症状均明显改善(P<0.05),心绞痛持续时间缩短(P<0.05),ST段压低减轻(P<0.05),但氯沙坦组疗效更加明显(P<0.05)。结论:氯沙坦可以降低不稳定型心绞痛患者血清TNF-α、MMP-9和IL-6水平,抑制动脉粥样病变的炎症反应,稳定动脉粥样硬化斑块,改善心肌缺血症状,是治疗不稳定型心绞痛的理想药物。

磷脂酶C抑制剂U73122对COPD大鼠肺组织内MMP-9,MMP-12表达影响的实验研究

目的:探讨磷脂酶C抑制剂U73122对COPD大鼠肺组织内MMP-9,MMP-12表达的影响。方法:通过烟熏及气管内注入脂多糖(LPS)建立COPD大鼠模型,从第1d起通过尾静脉注射磷脂酶C(PLC)抑制剂U73122(以U73343为阴性对照),持续28天。第28d,观察各组大鼠肺组织病理变化,western blot法检测肺组织中MMP-9、MMP-12表达水平。结果:模型组和干预组大鼠MMP-9、MMP-12蛋白表达高于对照组(P<0.05),干预组低于模型组(P<0.05)。干预组肺组织形态学改变较模型组改善(P<0.05)。结论:U73122通过抑制磷脂酶C(PLC)信号途径减少了COPD中MMP9、MMP12的表达,减轻肺组织结构破坏。

Effect of the same mechanical loading on osteogenesis and osteoclastogenesis in vitro

Purpose： To investigate the influence of the same mechanical loading on osteogenesis and osteoclastogenesis in vitro. Methods： Primary osteoblasts, bone marrow-derived mesenchymal stem cells （BMSCs, cultured in osteoinductive medium） and RAW264.7 cells cultured in osteoclast inductive medium were all subjected to a 1000μstrain （μs） at 1 Hz cyclic mechanical stretch for 30 min （twice a day）. Results： After mechanical stimulation, the alkaline phosphatase （ALP） activity, osteocalcin protein level of the osteoblasts and BMSCs were all enhanced, and the mRNA levels of ALP and collagen type I increased. Additionally, extracellular-deposited calcium of both osteoblasts and BMSCs increased. At the same time, the activity of secreted tartrate-resistant acid phosphatase, the number of tartrate-resistant acid phosphatase-positive multinucleated cells, matrix metalloproteinase-9 protein levels of RAW264.7 cells and the extracellular calcium solvency all decreased. Conclusion： The results demonstrated that 1000 μs cyclic mechanical loading enhanced osteoblasts activity, promoted osteoblastic differentiation of BMSCs and restrained osteoclastogenesis of RAW264.7 cells in vitro.