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SiO_2刺激肺泡上皮细胞间隙连接功能下调的研究 被引量:4
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作者 毛国根 叶少菁 曾群力 《中华劳动卫生职业病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期122-124,共3页
目的 探索矽肺发病过程中 ,SiO2 对肺泡上皮细胞增殖和间隙连接通讯功能 (GJIC)的影响。方法 不同剂量的SiO2 刺激SD大鼠肺泡巨噬细胞 (PAM)培养上清液 ,作用于正常貂肺泡上皮细胞株CCL 6 4细胞。用四唑盐 (MTT)法测定CCL 6 4细胞增... 目的 探索矽肺发病过程中 ,SiO2 对肺泡上皮细胞增殖和间隙连接通讯功能 (GJIC)的影响。方法 不同剂量的SiO2 刺激SD大鼠肺泡巨噬细胞 (PAM)培养上清液 ,作用于正常貂肺泡上皮细胞株CCL 6 4细胞。用四唑盐 (MTT)法测定CCL 6 4细胞增殖 (以A570nm值表示 ) ;采用激光扫描共焦显微镜 (LSCM ,LeicaTCSSP)用荧光光漂白后再恢复 (FRAP)技术测定CCL 6 4细胞GJIC功能 [以荧光扩散率K(× 10 -3 /s) ]表示。结果 体积分数为 5 %的SiO2 刺激的PAM上清液能诱导CCL 6 4细胞增殖 (F =9.6 79,P <0 .0 1) ,并抑制CCL 6 4细胞间GJIC功能 (F =2 0 .5 87,P <0 .0 1)。在 5 0~ 5 0 0 μg/mlSiO2 范围内 ,随SiO2 浓度增加 ,两者均呈良好的剂量依赖性关系 (GJIC :r =- 0 .943,P <0 .0 5 ;增殖 :r=0 .891,P <0 .0 5 )。结论 SiO2 刺激PAM培养上清液可以抑制肺泡上皮细胞的GJIC功能 ,并诱导细胞增殖。推论肺泡上皮细胞GJIC功能下调在SiO2 介导的肺泡上皮组织损伤中有重要的作用。 展开更多
关键词 SIO2 间隙连接功能 肺泡上皮细胞 FRAP技术 矽肺
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茶多酚对高转移性人肺癌细胞间隙连接通讯功能的上调研究 被引量:7
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作者 陈清勇 钱利生 +2 位作者 王彦刈 周建英 郑筱祥 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期337-339,共3页
应用MTT法体外观察不同浓度茶多酚对PG细胞的杀伤作用 ,激光共聚焦显微镜和流式细胞仪检测用药后PG细胞内Ca2 +浓度、细胞间隙连接通讯(GJIC)、Cx4 3表达和细胞增殖周期分布的变化。结果显示 ,4个浓度的茶多酚对PG细胞均有杀伤作用 ,呈... 应用MTT法体外观察不同浓度茶多酚对PG细胞的杀伤作用 ,激光共聚焦显微镜和流式细胞仪检测用药后PG细胞内Ca2 +浓度、细胞间隙连接通讯(GJIC)、Cx4 3表达和细胞增殖周期分布的变化。结果显示 ,4个浓度的茶多酚对PG细胞均有杀伤作用 ,呈剂量依赖关系。细胞增殖受到明显抑制 ,使细胞阻滞于G0 /G1期 ,不能进入S期及G2 /M期 ,细胞增殖指数明显下降。与对照组相比 ,随着茶多酚浓度的增加 ,细胞内Ca2 + 浓度、GJIC和Cx4 3表达水平逐渐上升。提示茶多酚对PG细胞具有生长抑制作用 。 展开更多
关键词 茶多酚 高转移性人肺癌细胞 细胞间隙连接通讯功能 肺肿瘤
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肝癌细胞中connexin32、connexin43的表达及其与间隙连接通讯功能的相关性 被引量:5
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作者 马向东 马兴 +1 位作者 隋延仿 王文亮 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 2002年第2期189-192,共4页
目的 :研究肝细胞肝癌和正常肝细胞间隙连接蛋白connexin 32 (Cx32 )、connexin 4 3(Cx4 3)的表达 ,及其对间隙连接通讯功能 (GJIC)的影响。方法 :应用细胞培养及流式细胞分析技术 (FCM) ,研究肝癌细胞系HHCC、SMMC 772 1和正常肝细胞系... 目的 :研究肝细胞肝癌和正常肝细胞间隙连接蛋白connexin 32 (Cx32 )、connexin 4 3(Cx4 3)的表达 ,及其对间隙连接通讯功能 (GJIC)的影响。方法 :应用细胞培养及流式细胞分析技术 (FCM) ,研究肝癌细胞系HHCC、SMMC 772 1和正常肝细胞系QZG细胞中Cx32和Cx4 3的表达。结合LuciferYellow划痕标记荧光传输技术 (SLDT) ,检测上述细胞的间隙连接通讯功能。结果 :流式细胞仪分析证实 ,Cx32蛋白在肝癌细胞系HHCC、SMMC 772 1和正常肝细胞系QZG细胞中表达的阳性率分别为 1 9%、0 7%和 99.0 % ;Cx4 3蛋白在HHCC、SMMC 772 1和QZG细胞中表达的阳性率分别为 7 3%、2 6 5 %和 99 1%。SLDT检测发现肝癌细胞HHCC ,SMMC - 772 1的间隙连接通讯功能较正常肝细胞QZG明显减弱。结论 :Cx32、Cx4 3蛋白在正常肝细胞中具有较高水平的表达 ,在肝癌细胞中表达水平显著降低 ;肝癌细胞的间隙连接通讯功能较正常肝细胞亦明显减弱。Cx32、Cx4 3表达调控异常引起的间隙连接通讯障碍可能与肝癌的发生密切相关。 展开更多
关键词 肝癌 CONNEXIN32 CONNEXIN43 间隙连接通讯功能 相关性 连接蛋白类 流式细胞术
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缺氧复氧对内皮细胞间隙连接通讯功能的影响初探
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作者 马尔丽 曾智 +2 位作者 张杰 黄明惠 强欧 《华西医科大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第3期368-371,共4页
目的 观察缺氧复氧刺激对内皮细胞间隙连接通讯功能的影响 ,初步探讨缺氧复氧引起内皮细胞损伤的机制。方法 将人脐静脉内皮细胞株 ECV30 4分为两组 ,常氧对照组在常氧状态下培养 12~ 18小时 ;缺氧复氧组先在氧浓度低于 1%状态下培养... 目的 观察缺氧复氧刺激对内皮细胞间隙连接通讯功能的影响 ,初步探讨缺氧复氧引起内皮细胞损伤的机制。方法 将人脐静脉内皮细胞株 ECV30 4分为两组 ,常氧对照组在常氧状态下培养 12~ 18小时 ;缺氧复氧组先在氧浓度低于 1%状态下培养 12~ 14小时 ,再置于常氧状态复氧 0~ 6小时。应用荧光漂白回复技术对细胞间隙连接通讯功能进行分析 ,结果用荧光回复率表示。结果 常氧对照组内皮细胞荧光回复率为 34 .4%±16 .5 %;缺氧复氧组经缺氧处理以及复氧 4小时和复氧 6小时处理后 ,其内皮细胞荧光回复率分别为 42 .7%±2 2 .7%、37.8%± 13.2 %和 43.0 %± 16 .2 %,与常氧对照组相比差异无显著性 (P>0 .0 5 ) ;经复氧 2小时处理后 ,内皮细胞的荧光回复率为 2 5 .0± 7.4%,与常氧对照组和经缺氧、复氧 4小时、复氧 6小时处理组相比 ,差异十分显著(P<0 .0 1)。结论 在本实验条件下 ,单独缺氧 12~ 14小时不影响内皮细胞间隙连接通讯功能 ,而复氧 2小时则能显著抑制间隙连接通讯功能。由此提示 ,间隙连接通讯功能改变参与了内皮细胞缺氧复氧损伤的早期反应。 展开更多
关键词 缺氧复氧 内皮细胞 间隙连接通讯功能 影响
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共轭亚油酸对正常动物细胞和人体肿瘤细胞间通讯功能的影响 被引量:4
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作者 刘家仁 陈炳卿 +2 位作者 杨艳梅 王璇琳 刘瑞海 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期113-116,共4页
为探讨c9,t11-共轭亚油酸 (CLA)的抑癌作用可能机制 ,在促癌物 (TPA)存在下 ,对正常细胞(CHL)以及人体肿瘤细胞 (SGC 790 1细胞和MCF 7细胞 )的细胞间隙连接通讯功能 (GJIC)的影响 ,采用划痕标记染料示踪技术 (SLDT) ;c9,t11 CLA剂量为 ... 为探讨c9,t11-共轭亚油酸 (CLA)的抑癌作用可能机制 ,在促癌物 (TPA)存在下 ,对正常细胞(CHL)以及人体肿瘤细胞 (SGC 790 1细胞和MCF 7细胞 )的细胞间隙连接通讯功能 (GJIC)的影响 ,采用划痕标记染料示踪技术 (SLDT) ;c9,t11 CLA剂量为 2 5 (mol L ,5 0 (mol L ,10 0 (mol L和 2 0 0 (mol L ,阴性对照为乙醇。结果显示 ,c9,t11 CLA可明显地提高TPA对CHL细胞的GJIC的抑制效应 ,当c9,t11 CLA浓度为 2 0 0 (mol L作用 48h时 ,细胞间隙通讯功能基本上与阴性对照组相近 ;当用c9,t11 CLA作用SGC 790 1细胞和MCF 7细胞2 4h和 48h时 ,可见 (2 4h 10 0 μmol L的MCF 7细胞 ) 2 4h 2 0 0 μmol L和 48h 10 0、2 0 0 μmol L剂量组的肿瘤细胞有一定的细胞间隙通讯功能。提示c9,t11 CLA可提高SGC 790 1细胞和MCF 7细胞的GJIC的功能 。 展开更多
关键词 C9 tll-共轭亚油酸 细胞间隙连接通讯功能 肿瘤细胞 CHL细胞
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Study on roles of gap junctional intercellular communication in low dose parat hyroid hormones-induced bone anabolism in vitro
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作者 马兴 胡蕴玉 +6 位作者 李起鸿 王全平 吕荣 王军 徐新智 李晓娟 王德堂 《中国临床康复》 CSCD 2003年第4期660-661,T003,共3页
AIM:To investigate mediating and regulatory effects of osteoblastic gap juncti onal intercellular communication(GJIC) on low-dose parathyroid hormones(PTH)-s timulated bone formation activities in vitro.METHODS:Rat ca... AIM:To investigate mediating and regulatory effects of osteoblastic gap juncti onal intercellular communication(GJIC) on low-dose parathyroid hormones(PTH)-s timulated bone formation activities in vitro.METHODS:Rat calvarial osteoblasts ( ROBs) in cultures were divided into three groups according to the different mode of exposure.Group A: vehicle (sodium acetate, SA)-treated group; Group B:1×10-8 mol/L hPTH(1-34) intermittent exposure group;Group C:1×10-8 mol/L hPTH(1-34) +1×10-7mol/L TPA exposure group.48 h incubation cycles in three groups were repeated for eight times.GJIC and mineralized bone nodules formation in thr ee groups were detected using Lucifer Yellow (LY) scrape loading dye transfer (S LDT) and mineralized nodule staining together with nodule index,respectively. RE SULTS:At various measuring time points of SA×6 h in group A,PTH×6 h in group B ,PTH×6 h+1 h in group B and PTH×6 h+TPA×1 h in group C,LY(+) cell numbers were 6.8±2.5,19.5±6.5,14.0±3.6 and 5.7±2.4,respectively.Diffusion and transf er of LY fluorescent probe was much more noticeably discerned in group B than in group A and C(P< 0.01).Mineralized bone nodule indices were 45.2±12.5, 88.0±1 5.3 and 38.5±17.9 in group A,B and C respectively.Bone formation activity was m uch better revealed in group B than in group A and C (P< 0.01),whereas no statis tically significant difference of bone formation activities were found in group A compared with group C(P=0.465).CONCLUSION:Mediations and regulations of the co ordinating signals in osteoblastic network via GJIC essentially contribute to PT H-stimulated bone anabolism.However,disruption of GJIC not only hinders osteobl astic intercellular coordination but also frustrates PTH-induced bone formation activities in vitro.Therefore,GJIC may evidently play important roles in regula tions on low-dose PTH-induced bone formation. 展开更多
关键词 间隙连接通讯功能 小剂量 甲状旁腺激素 成骨效应 调控
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腺病毒介导Cx43基因修饰对急性白血病骨髓基质细胞GJIC功能的影响
7
作者 司英健 张曦 +6 位作者 刘耀 陈幸华 高力 高蕾 彭贤贵 光丽霞 王庆余 《中国实用内科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第S1期75-76,共2页
目的观察急性白血病骨髓基质细胞(ALBMSCs)经腺病毒介导的间隙连接蛋白43(Cx43)基因修饰后 Cx43基因表达的变化以及对细胞间隙连接通讯(GJIC)功能的影响。方法用重组腺病毒 Ad-Cx43-GFP 转染 ALBM-SCs,荧光显微镜观察报告基因GFP的表达... 目的观察急性白血病骨髓基质细胞(ALBMSCs)经腺病毒介导的间隙连接蛋白43(Cx43)基因修饰后 Cx43基因表达的变化以及对细胞间隙连接通讯(GJIC)功能的影响。方法用重组腺病毒 Ad-Cx43-GFP 转染 ALBM-SCs,荧光显微镜观察报告基因GFP的表达并计算转染效率,RT-PCR 法、Western Blot 法和免疫细胞化学法检测ABMSCs 转染前后 Cx43基因及蛋白表达情况。 展开更多
关键词 骨髓基质细胞 急性白血病 重组腺病毒 基因修饰 细胞间隙连接通讯功能 免疫细胞化学法 间隙连接蛋白 基因表达 转染效率 蛋白表达
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Survivin microRNA对人肝癌细胞间通讯功能影响的实验观察
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作者 方基勇 刘影 毕富勇 《医学分子生物学杂志》 CAS CSCD 2011年第2期138-142,共5页
目的 观察survivin的microRNA对HepG2细胞间通讯功能主要环节的影响作用.方法 人工设计合成特异性靶向survivin的microRNA的序列.肝癌细胞株HepG2接种于细胞培养板内并分为5组.作用后收集各组细胞.流式细胞术检测各组细胞增殖率和凋亡指... 目的 观察survivin的microRNA对HepG2细胞间通讯功能主要环节的影响作用.方法 人工设计合成特异性靶向survivin的microRNA的序列.肝癌细胞株HepG2接种于细胞培养板内并分为5组.作用后收集各组细胞.流式细胞术检测各组细胞增殖率和凋亡指数.划痕染料示踪技术检测转染前后HepG2的细胞间隙连接通讯功能变化,放射性免疫法定量测定细胞内cAMP含量的变化,钙离子指示剂Fura-2双波长荧光检测技术检测转染前后胞内Ca2+水平的变化.结果 流式细胞术检测各浓度miRNA转染组细胞凋亡指数明显高于对照组(P<0.05),高浓度转染组最明显(P<0.05);各浓度microRNA转染组细胞增殖指数明显低于对照组(P<0.05),高浓度转染组最明显(P<0.05);Survivin microRNA转染组HepG2细胞间隙连接通讯功能较两个对照组有不同程度的恢复和增强;不同浓度Survivin microRNA转染组细胞内cAMP浓度明显高于对照组;Survivin microRNA转染组HepG2细胞内[Ca2+]与两个对照组相比有升高趋势.结论 Survivin microRNA能显著抑制HepG2细胞的增殖,促进GJIC功能恢复和增强,并能直接影响细胞内的第二信使传递系统. 展开更多
关键词 SURVIVIN 微小RNA 间隙连接细胞间通讯功能 第二信使
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