酵母样真菌最低抑菌浓度药敏试验的临床价值研究

目的 对酵母样真菌抗真菌药物最低抑菌浓度(minimal inhibit concentration,MIC)进行药敏试验,为临床合理用药提供相关依据。方法 采集铜仁市人民医院从2020年1月—2022年6月根据常规培养方式培养出344株酵母样真菌进行MIC药敏试验,对试验结果进行分析,统计标本来源类型、科室、不同种类酵母样真菌的分布情况,对主要酵母样真菌的药敏性进行分析。结果 培养出的344株酵母样真菌标本来源科室主要为重症医学科(23.55%)、神经外科(15.12%);标本类型主要为尿液标本(56.69%),其次为分泌物标本与切口分泌物标本(均12.21%);酵母样真菌种类主要为白色假丝酵母菌(39.83%),其次为光滑假丝酵母菌(22.97%)、克柔假丝酵母菌(14.83%)、热带假丝酵母菌(9.88%)。白色假丝酵母菌、光滑假丝酵母菌、热带假丝酵母菌对5-氟胞嘧啶、两性霉素B的敏感性较高,克柔假丝酵母菌对两性霉素B、伏立康唑的敏感性较高。结论 应当对重症医学科、神经外科的患者及中老年患者加强酵母样真菌感染的预防,尤其是对尿路感染的预防。不同种类的酵母样真菌对不同抗真菌药物敏感性有所不同,酵母样真菌MIC药敏试验对临床上合理使用抗真菌药物具有重要的指导价值。

耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌耐消毒剂基因及四种消毒剂最低抑菌浓度检测

目的 了解临床分离耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌(CRE)耐消毒剂基因qacE、qacE△1、qacE△1-SUL1携带情况,以及四种常用消毒剂最低抑菌浓度(MIC),为医院做好科学消毒提供参考依据。方法 收集某院2021年10月—2022年3月所有临床送检标本分离的CRE非重复菌93株,对菌株进行鉴定和药敏试验,采用聚合酶链反应(PCR)方法检测菌株耐消毒剂基因qacE、qacE△1和qacE△1-SUL1携带情况,采用琼脂稀释法检测戊二醛、碘伏、84消毒剂(含氯消毒剂)和乙醇对CRE的MIC值。结果 93株CRE以肺炎克雷伯菌(52株)和阴沟肠杆菌(25株)为主;CRE菌株耐药率较高,对大部分抗菌药物耐药率达100%;耐消毒剂基因qacE、qacE△1和qacE△1-SUL1携带率分别为72.0%(67株)、81.7%(76株)、89.2%(83株)。四种消毒剂对CRE的MIC值,戊二醛为500 mg/L,碘伏为625~2 500 mg/L,84消毒剂(有效氯浓度)为250~500 mg/L,乙醇为75%;碘伏中有4株CRE MIC值(2 500 mg/L)高于标准菌株,84消毒剂中有24株CRE MIC值(有效氯500 mg/L)高于标准菌株。结论 该院临床分离的CRE耐消毒剂基因携带率较高,部分CRE菌株对碘伏和84消毒剂有抗性,临床工作中需科学、规范地使用消毒剂,防止耐药菌医院内传播。

西藏自治区鼠疫自然疫源地鼠疫耶尔森菌最低抑菌浓度的测定及研究

目的根据美国临床和实验室标准协会(CLSI)药敏试验方法中的琼脂平板稀释法,对分离自西藏自治区鼠疫自然疫源地内的164株鼠疫耶尔森菌进行抗菌药物最低抑菌浓度的测定,监测西藏地区耐药鼠疫耶尔森菌株,掌握其抑菌范围,为鼠疫的临床治疗提供基础数据。方法利用琼脂平板稀释法分别测定氧氟沙星、环丙沙星、复方磺胺甲恶唑(甲氧苄啶-磺胺甲恶唑)、硫酸卡那霉素、链霉素、头孢曲松钠、氨苄青霉素钠、氯霉素、盐酸壮观霉素、头孢呋辛钠、盐酸四环素、莫西沙星共12种抗生素对164株鼠疫耶尔森菌的最低抑菌浓度(MIC)。若发现耐药菌株,则用K-B法进行验证。结果所测的164株鼠疫耶尔森菌中有1株对链霉素具有耐药性(MIC=4096μg/mL),链霉素K-B法检测抑菌环直径为0,这株菌对其余11种抗菌药物均敏感。其余163株菌对12种抗生素均敏感。结论发现1株鼠疫耶尔森菌对链霉素具有耐药性,这是我国首次发现鼠疫耶尔森菌对链霉素耐药。因链霉素是国内外治疗鼠疫的首选药物,耐药鼠疫耶尔森菌会引起链霉素治疗失败,从临床和公共卫生的角度来看,对鼠疫耶尔森菌分离株的抗菌敏感性监测应常规开展。

结核分枝杆菌gyrA基因突变与氟喹诺酮类药物体外最低抑菌浓度的关系

目的探讨结核分枝杆菌gyrA基因突变与氟喹诺酮类药物体外最低抑菌浓度(MIC)的关系。方法收集640例痰结核分枝杆菌阳性临床分离株,用探针熔解曲线法筛选gyrA基因耐药决定区突变株,对其gyrA基因耐药决定区进行测序,并检测氧氟沙星、左氧氟沙星、莫西沙星及加替沙星对不同突变位点菌株的MIC,分析其差异。结果探针熔解曲线法筛选出gyrA突变株共45株(7.03%),其中90位点突变15株(33.33%)、94位点突变26株(57.78%)、91位点突变4株(8.89%)。90位点突变菌株中,氧氟沙星高水平耐药2株,左氧氟沙星无耐药,莫西沙星低水平耐药3株、高水平耐药2株,加替沙星高水平耐药3株;91位点突变菌株中,氧氟沙星、左氧氟沙星无耐药,莫西沙星高水平耐药2株,加替沙星高水平耐药1株;94位点突变菌株中,氧氟沙星低水平耐药4株、高水平耐药7株,左氧氟沙星低水平耐药7株,莫西沙星低水平耐药2株、高水平耐药13株,加替沙星低水平耐药3株、高水平耐药14株。除左氧氟沙星外,90位点突变菌株对其他3种药物易出现高水平耐药;91位点突变菌株对莫西沙星易出现高水平耐药;94位点突变菌株对莫西沙星、加替沙星多为高水平耐药,其中天冬氨酸(Asp)→天冬酰胺(Asn)和Asp→甘氨酸(Gly)突变类型的菌株更易出现。结论结核分枝杆菌gyrA基因突变类型与氟喹诺酮类药物MIC相关,可为临床用药提供重要参考。

β-内酰胺类及氟喹诺酮类抗生素对铜绿假单胞菌的防耐药突变浓度研究

目的分析β-内酰胺类抗生素美罗培南(MEM)、头孢他啶(CAZ)及氟喹诺酮类抗生素环丙沙星(CIP)和左氧氟沙星(LEV)单用对铜绿假单胞菌菌株防耐药突变浓度(MPC)的影响,考察其潜在耐药性。方法采用微量肉汤稀释法测定抗菌药物对铜绿假单胞菌标准菌株CMCC(B)10104和5株临床分离铜绿假单胞菌菌株的最低抑菌浓度(MIC),并用琼脂平板法测定其相应的最小杀菌浓度(MBC)值。采用琼脂平板稀释法测定MEM、CAZ、CIP、LEV单用对标准菌株CMCC(B)10104和5株临床分离铜绿假单胞菌菌株的MPC,并计算相应的选择指数(SI),以评估4种抗菌药物单药治疗对铜绿假单胞菌的潜在耐药性。结果根据实验数据得出铜绿假单胞菌临床分离株对氟喹诺酮类抗菌药物的耐药率高达80%,但其两者防耐药突变能力是相对较强的;对MEM和CAZ的耐药率分别为20%和0,防耐药突变能力是相对较弱的,4种抗生素的MPC50各为12.69μg/ml、11.31μg/ml、3.29μg/ml、8.19μg/ml;MPC_(90)各为71.58μg/ml、45.87μg/ml、30.15μg/ml、157.04μg/ml;SI范围各为3.18~25.64μg/ml、3.20~25.42μg/ml、1.59~3.20μg/ml、1.60μg/ml。结论4种抗生素长期的单药治疗对铜绿假单胞菌的潜在耐药率较高,不宜单独使用,提示临床应加强监测该4种抗生素对铜绿假单胞菌的敏感性及疗效。

枫杨萘醌对常见菌的抗菌谱、最低抑菌浓度和最低杀菌浓度研究

目的研究枫杨抗菌单体5-羟基-2-乙氧基-1,4-萘醌体外抗菌谱和活性强度。方法用琼脂平板法测定抗菌谱;以左氧氟沙星和阿奇霉素作为对照,用试管二倍稀释法测定最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)。结果该物质对常规菌株具有较为广泛的抗菌谱,对金黄色葡萄球菌(MIC为12.5μg.ml-1,MBC为50.0μg.ml-1)、大肠杆菌(MIC为6.25μg.ml-1,MBC为25.0μg.ml-1)、姜瘟菌(MIC为3.125μg.ml-1,MBC为6.25μg.ml-1)、蜡状芽孢杆菌(MIC为6.25μg.ml-1,MBC为25.0μg.ml-1)、白色念球菌(MIC为3.125μg.ml-1;MBC为12.5μg.ml-1)、沙门氏菌(MIC为25μg.ml-1;MBC为100.0μg.ml-1)有显著的拮抗作用。结论该物质抗菌谱较广,抗菌活性强度近似于左氧氟沙星,而远强于阿奇霉素。

鸡毒支原体的分离鉴定和最低抑菌浓度测定

从山东、河北、北京和天津等不同地区分离、鉴定了 4株鸡毒支原体 ,通过体外最低抑菌浓度测定发现泰妙菌素、泰乐菌素、百里霉素、罗红霉素、林可霉素 /壮观霉素合剂、氧氟杀星、乳酸红霉素和盐酸林可霉素对该 4个菌株的最低抑菌浓度 (MIC)平均值分别是 0 .0 0 62 μg/ml、0 .0 1 71 μg/ml、0 .0 682 μg/ml、8.5 2 48μg/ml、8.5 2 48μg/ml、0 .1 0 2 4μg/ml、0 .45 5 0 μg/ml和 1 5 .4944μg/ml,同时发现不同菌株之间的最低抑菌浓度有明显的差异。该试验结果表明鸡毒支原体容易对抗菌药物产生抗药性 ,目前临床预防或治疗鸡毒支原体感染可选用泰妙菌素、泰乐菌素、百里霉素和氧氟杀星等药物 ,而常规使用的红霉素和罗红霉素效果不佳。

40种秦岭“七药”最低抑菌浓度的测试

目的 :研究秦岭“七药”的抗菌作用。方法 :将 40种民间秦岭药制成 10 0 %的生药原液 ,以不同的稀释度与 11种标准菌种共同培养 ,观察其抑菌作用 ,以传统抗菌中药黄连作为对照组。结果 :有 37种“七药”对一种菌具有抗菌作用 ,占实验“七药”总数的 92 .5 % ;有 2 9种“七药”对两种革兰氏阳性与两种革兰氏阴性菌有效 ,占实验“七药”的 72 .2 5 % ;有 18种“七药”对 7种致病菌有抗菌作用 ,占实验“七药”总数的 45 %。结论 :供试的多数秦岭“七药”具有一定的抑菌作用 ,少数“七药”的抑菌作用与黄连相当甚至更强。

噻唑蓝比色法测定药物最低抑菌浓度初步研究

目的 用噻唑蓝 (MTT)比色法测定药敏试验最低抑菌浓度 (MIC)。方法 利用数理统计方法确定了药物浓度和吸光度的关系式为 :1gC =a +bA(C :药物浓度 ,A :吸光度 ,a ,b :常数 )。当A趋近于零时 ,药物浓度C就是该药物的MIC ,即 :1gMIC =(A1/A2 1gC2 -1gC1) /(A1/A2 -1)。通过该药物两种浓度C1、C2 及其相应的吸光度值A1、A2 就可以求出该药物的MIC ,这样求得的MIC并非直接实验得出 ,而是由两个确定的药物浓度及相对应的吸光度值计算得出的。结果 该方法已应用于临床标本 40株大肠埃希氏菌 ,35株金黄色葡萄球菌 ,33株铜绿假单孢菌。该方法和稀释法比较 ,回归方程分别为 :Y本法 =1.0 3X +2 .79(N =40 ) ,Y本法 =1.0 3X +3.0 5 (N =35 ) ,Y本法=1.14X +0 .6 7(N =33) ,相关系数分别为 :0 .996、0 .990和 0 .990。结论 该方法简便、快速、准确、重复性好。

左氧氟沙星、环丙沙星单用和联合其他抗菌药物对铜绿假单胞菌防突变浓度的研究

目的了解左氧氟沙星、环丙沙星单用及其与头孢他啶、美罗培南、阿米卡星联合使用，对铜绿假单胞菌防突变浓度（MPC）的变化。方法采用琼脂稀释法测定上述抗菌药物单用及联合使用对8株左氧氟沙星、环丙沙星敏感铜绿假单胞菌的MPC，并计算耐药频率。结果左氧氟沙星、环丙沙星单用对上述8株铜绿假单胞菌MPC／MIC分别为8～32、8～16；两药分别与头孢他啶、美罗培南和阿米卡星联合使用，MPC／MIC则降为2～8、2～4、1～2、1～2、4～8和1～8，联合用药较单独用药MPC／MIC下降2～16倍，且其耐药频率也大幅下降。结论联合用药能使耐药突变选择窗变窄，使MPC／MIC降低，减少耐药菌产生。

氟喹诺酮类药物对临床分离肺炎链球菌的防突变浓度

目的检测氟喹诺酮类药物对肺炎链球菌临床分离株的防突变浓度(MPC),并探讨其与药动学参数的关系,为临床合理用药提供依据。方法采用琼脂二倍稀释法检测4种抗菌药物对25株肺炎链球菌临床分离株的MIC值,计算MIC50和MIC90值;采用新鲜制备的1010CFU/mL菌液测定MPC值,计算MPC50、MPC90和MPC/MIC比值,并探讨MPC值与药动学参数的关系。结果2种氟喹诺酮类药物中,莫西沙星的MPC值较低,MPC范围在0.5～2mg/L,MPC50和MPC90值分别为1mg/L和2mg/L,以400mg每日1次的药动学参数计算莫西沙星的Cmax/MPC90、AUC/MPC90分别为2.2和19.7;左氧氟沙星的MPC范围在2～4mg/L,MPC50和MPC90值分别为2mg/L和4mg/L,在左氧氟沙星3个剂量组中500mg组Cmax/MPC90、AUC/MPC90明显高于200mg与300mg组,分别为1.9和9.6。结论莫西沙星400mg每日1次、左氧氟沙星500mg每日1次的给药方案有望防止肺炎链球菌突变的发生。

临床分离大肠埃希菌耐消毒剂基因携带情况及5种消毒剂最低抑菌浓度

目的了解临床标本分离的大肠埃希菌(E.coli)对常用消毒剂耐药性及其消毒剂耐药基因携带状况。方法采用聚合酶链反应(PCR)对82株E.coli耐消毒剂基因sugE(c)、sugE(p)、qacEΔ1和qacE进行检测,琼脂稀释法进行最低抑菌浓度(MIC)测定。结果临床分离的82株E.coli中,sugE(c)、sugE(p)、qacEΔ1、qacE、sugE(c)+qacEΔ1、qacE+qacEΔ1+sugE(c)阳性率分别为84.15%(69株)、1.22%(1株)、76.83%(63株)、73.17%(60株)、68.29%(56株)、59.76%(49株)。产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)与非产ESBLs菌株,头孢吡肟敏感株与耐药株4种耐消毒剂基因携带情况比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。苯扎氯铵、西吡氯铵、溴化铵及三氯生4种消毒剂对82株E.coli的MIC值均>标准菌株;氯己定对32株E.coli的MIC值>标准菌株,对另外50株E.coli的MIC值≤标准菌株。苯扎氯铵、西吡氯铵、溴化铵及三氯生对产ESBLs和非产ESBLs组、头孢吡肟敏感和耐药组的MIC值结果比较,差异均无统计学意义(均P>0.05);而氯己定MIC值比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论临床送检标本分离的E.coli耐消毒剂基因qacE、qacEΔ1和sugE(c)检出率高,苯扎氯铵等消毒剂对E.coli的MIC普遍较标准菌株明显升高。

食醋对15种病原菌最低抑菌浓度测定

采用微量稀释法 ,检测食醋对 1 5种常见病原菌的最低抑菌浓度。结果表明 :浓度为 1∶ 2 0食醋 (p H=4.42 )对金黄色葡萄球菌、白色念珠菌有抑制作用 ;浓度为 1∶ 40食醋 (p H=4.81 )对大肠杆菌、蜡样芽胞杆菌、粪肠球菌、阴沟肠杆菌有抑制作用 ;浓度为 1∶ 80食醋 (p H=5 .38)对伤寒沙门氏菌等 8种细菌有抑制作用。食醋对 1 5种病原菌的最低抑菌浓度为 1∶ 2 0～ 1∶ 80 ,即 p H值为 4.42～ 5 .38。

微量稀释法测定皮肤癣菌最低抑菌浓度(MIC)的实验研究

目的，建立用微量稀释法测定皮肤癣菌最低抑菌浓度（ＭＩＣ）的方法学，为该类实验的标准化打下基础。方法：用９６孔酶标板做药敏试验载体，１０级倍比稀释药液，测定３０株皮肤癣菌临床分离株对三唑类新药伊曲康唑和氟康唑的敏感性。结果：３０株皮肤癣菌对伊曲康唑和氟康唑的ＭＩＣ范围分别为≤０．０６～４μｇ／ｍｌ和１～３２μｇ／ｍｌ，均值分别为０．３２μｇ／ｍｌ和７．７６μｇ／ｍｌ．结论：用微量稀释法测定皮肤癣菌ＭＩＣ初步显示了用药量少、重复性好、结果较可靠等优点。

万古霉素对医院获得性肺炎中甲氧西林耐药金葡菌的最低抑菌浓度及其与预后的关系

目的研究耐甲氧西林金葡菌(MRSA)医院获得性肺炎(HAP)中万古霉素对MRSA的最低抑菌浓度(MIC)分布、MIC值与预后的关系以及高MIC值MRSA菌株感染的危险因素。方法选择应用万古霉素治疗的MRSA HAP,采用E试验法测定MRSA菌株的MIC值,分析比较不同MIC值菌株感染患者的临床资料。结果本研究共纳入患者82例,43例(52.4%)MRSA菌株具有较高的MIC值;在基础疾病状态无明显统计学差异情况下,低MIC值和高MIC值患者万古霉素应用7 d后病原菌未清除率分别为15.4%和37.2%(P=0.026);万古霉素应用3 d后临床治疗无效率分别为25.6%和44.2%(P=0.079);28 d内肺炎复发率分别为5.7%和20.5%(P=0.129);万古霉素治疗前90 d内MRSA感染史与高MIC值MRSA感染发生明显相关(P=0.033)。结论高MIC值MRSA HAP患者万古霉素应用3 d后临床治疗无效率、7 d后病原菌未清除率及28 d内肺炎复发率高于低MIC值患者,万古霉素治疗前90 d内有MRSA感染史是HAP中高MIC值MRSA菌株感染的独立危险因素。

两种氟喹诺酮类药物对肺炎克雷伯菌防耐药突变浓度及耐药突变体耐药性的研究

目的测定两种氟喹诺酮类药物(FQNs)对肺炎克雷伯菌(KP)的防耐药突变浓度(MPC),比较其防耐药突变能力,了解突变耐药菌对FQNs的耐药性。方法肉汤法富集1010CFU/ml的菌液接种于不同浓度环丙沙星及加替沙星琼脂平皿上,采用琼脂二倍稀释法测定环丙沙星、加替沙星对临床分离肺炎克雷伯菌ATCC700603及其耐药突变体的最低抑菌浓度(MIC)、防耐药突变浓度(MPC)。对不同药物浓度筛选出的耐药突变株进行编码拓扑异构酶VIC亚单位基因parC和回旋酶A亚单位基因gyrA喹诺酮耐药决定区的PCR扩增和测序,并测定外排泵抑制剂羟基氰氯苯腙(Carbonyl Cyanide m-chlorophenylhydrazone,CCCP)对环丙沙星和加替沙星MIC的影响。结果环丙沙星、加替沙星对ATCC700603的MPC分别为4、1.6mg/L,细菌耐药选择指数分别为16、4。两种药物的耐药突变体均出现了gyrA的第83位(TCC→ATC/TTG)均出现了突变,引起了相应氨基酸的改变(Ser-83→Ile/Leu)。其中有一株同时也出现了第87位点(GAC→AAC)的改变,氨基酸也由Asp→Asn。除第二步突变体parC第80位点突变(AGC→ATC),引起氨基酸由Ser→Ile的改变外,其余几株均没有发生parC的突变。MIC测定结果显示,单用两种FQNs及合用CCCP的结果一样。结论加替沙星限制KP耐药突变株选择的能力强于环丙沙星,KP的耐药突变株对FQNs耐药的主要原因是gyrA和parC基因突变。

氧氟沙星和环丙沙星对快速生长分支杆菌最低抑菌浓度测定

以Ｂａｃｔｅｃ４６０ＴＢ检测议测定了氧氟沙星（ＯＦＬＸ）和环丙沙星（ＣＰＦＸ）对１１株快速生长（速生）分支杆菌、３株标准菌株的最低抑菌浓度（ＭＩＣ＿９９），结果两药对龟型分支杆菌龟亚种ＭＩＣ＿９９最高，分别为１．０和１．０～２．０μｇ／ｍｌ，对龟型分支杆菌脓肿亚种及偶发分支杆菌ＭＩＣ＿９９相近，分别为０．２５和０．５～１．０μｇ／ｍｌ，对１株转黄和１株待定型速生分支杆菌ＭＩＣ＿９９分别为≤０．１２５，０．５和≤０．１２５，１．０μｇ／ｍｌ。结果表明，体外两药对速生分支杆菌有强抑菌作用，值得进行临床验证。

替加环素对肺炎克雷伯菌的防耐药突变浓度研究

目的考察替加环素对肺炎克雷伯菌的潜在耐药性。方法测定替加环素对于药敏背景不同的肺炎克雷伯菌防突变浓度(MPC)和最低抑菌浓度(MIC)。比较MIC与MPC之间的相关性,考察是否能用MIC推测MPC值。结合MPC和防耐药突变窗(MSW)与替加环素药动学参数评估替加环素单药治疗对于肺炎克雷伯菌的潜在耐药性。结果碳青霉烯类耐药、喹诺酮类耐药组肺炎克雷伯菌对替加环素的MPC较碳青霉烯类敏感、喹诺酮类敏感组高出8倍。替加环素对于肺炎克雷伯菌的MPC范围在4~512 mg/L,MPC90为64 mg/L,远高于替加环素血药浓度。结论替加环素长期单药治疗对于肺炎克雷伯菌的潜在耐药率较高,不宜单独使用,提示临床应加强监测替加环素菌株敏感性及替加环素疗效。

双黄连粉针与几种抗生素伍用的体外最低抑菌浓度研究

目的:探讨双黄连粉针与抗生素联合使用的临床意义。方法:用试管稀释法测定几种抗生素单用及与双黄连伍用对细菌的体外最低抑茵浓度(MIC)。结果:双黄连粉针与青霉素、头孢唑啉及红霉素配伍后对金黄色葡萄球菌的体外抑菌效果明显增强(P<0.05);头孢噻肟和头孢唑啉与双黄连配伍后对肺炎克雷伯菌的体外抑菌效果有不同程度的增强(P<0.05)。结论:对于不同的细菌感染,选用对其敏感的抗生素与双黄连配伍使用具有积极的临床意义。