基于NFKB/STAT3信号通路探究防风多糖对过敏性鼻炎大鼠行为学、AQP5及鼻粘膜组织的影响

目的基于NF-κB/STAT3信号通路探究防风多糖对过敏性鼻炎大鼠行为学、AQP5及鼻粘膜组织的影响。方法选取40只SPF级SD雄性大鼠,随机分为正常(N)组,模型(M)组,糠酸莫米松(F)组,防风多糖(W)组,每组10只,采用卵清蛋白致敏法建立过敏性鼻炎模型,N组不建立该模型,建模成功后,对F组给予1喷/侧的糠酸莫米松喷鼻治疗,对W组灌胃600㎎/㎏的防风多糖,N组、M组同期给与灌胃同体积生理盐水,观察大鼠一般情况并对其行为学进行评分,HE染色法检测鼻黏膜组织病理形态,免疫组化法检测鼻黏膜组织中AQP5表达,免疫印迹法检测鼻黏膜组织中NF-κB/STAT3信号通路相关蛋白表达。结果实验开始前各组大鼠均活动饮食正常且精神状态良好,未见流涕、喷嚏、挠鼻等症状,造模完成后,可见大鼠精神状态明显变差,进食及活动明显减少,且可见被毛凌乱无光泽,出现常见抓鼻动作,喷嚏频发,大量鼻分泌物流出鼻前孔,给药后,大鼠纳食摄水都逐渐恢复正常,精神状态良好,喷嚏、流涕、挠鼻等症状都较治疗前有明显缓解,均无脏器损伤,但各组大鼠体重无明显变化(P>0.05);与N组相比,M组行为学评分显著升高(P<0.05),与M组比较,F、W两组行为学评分显著降低(P<0.05),且W组比F组降低显著(P<0.05);N组大鼠鼻黏膜组织结构完整、平滑且排列整齐,腺体大小正常,未见明显上皮坏死脱落、炎性细胞浸润及明显血管扩张或充血现象,M组鼻黏膜上皮结构紊乱且不完整,可见鼻粘膜上皮细胞破坏变性,出现纤毛坏死甚至脱落现象,可见明显腺体增生、肿胀、出血及炎性细胞浸润,与M组相比,F组、W组病理状态明显改善,炎性细胞明显减少;与N组比较,M组鼻黏膜组织中AQP5蛋白表达显著降低(P<0.05),与M组比较,F组、W组鼻黏膜组织中AQP5蛋白表达显著升高(P<0.05),且W组比F组升高显著(P<0.05);与N组比较,M组鼻黏膜组织中NF-κB、P-NF-κB、STAT3、P-STAT3蛋白表达显著升高(P<0.05),与M组比较,F组、W组鼻黏膜组织中NF-κB、P-NF-κB、STAT3、P-STAT3蛋白表达显著降低(P<0.05),且W组比F组变化显著(P<0.05),而B组与W组相比无明显差异(P>0.05),O组比B组降低明显(P<0.05)。结论防风多糖可有效改善过敏性鼻炎大鼠行为学及鼻黏膜病理形态,并可显著促进AQP5表达,其机制可能与抑制NF-κB/STAT3信号通路有关。

正常小鼠巨噬细胞及外周血淋巴细胞亚群对防风多糖干预的反应

目的:有研究证明,防风多糖具有明显的体内抗肿瘤作用。实验拟进一步探讨防风多糖对正常小鼠巨噬细胞及外周血淋巴细胞亚群的影响。方法:实验于2006-8/11在河北北方学院实验中心完成。防风多糖提取方法:取已粉碎、真空干燥的一定量防风用85%乙醇回流提取1h,挥干溶剂,加入适量三蒸水回流提取4h,趁热滤过,滤渣加入三蒸水继续回流2h,合并2次滤液,减压浓缩,4倍体积无水乙醇醇沉,静置过夜,沉淀分别用无水乙醇、丙酮、石油醚依次洗涤即得防风粗多糖。采用苯酚-硫酸法测多糖含量。昆明种健康小白鼠120只,雌雄不拘,体质量20～25g,由本院动物中心提供,实验过程中对动物处置符合动物伦理学标准。实验方法:将120只昆明种小白鼠按随机数字表法分为4组:空白对照组和防风多糖250,500,1000mg/kg剂量组,每组30只,每天给药1次,连续7d。每组10只末次给药后1h,取腹腔液制片瑞士染色,观察小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬情况。另10只剥取脾脏称重,计算脾指数,碘化丙啶综合染液染色,采用FACSAria流式细胞仪进行检测,ModFit软件进行细胞周期分析脾细胞增殖指数。剩余10只采用FACSAria流式细胞仪检测外周血淋巴细胞亚群的比例。结果:120只小鼠均进入结果分析。①与对照组比较,中、高剂量组防风多糖均可提高小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬百分率和吞噬指数(P<0.05～0.01)。②各剂量组均可明显提高小鼠脾细胞的增殖指数,与对照组比较,差异有显著性意义(P<0.01);各剂量组小鼠的脾指数虽高于对照组(P<0.05),但组间无统计学意义(P>0.05)。③随着防风多糖浓度的增加,CD3+CD4+与CD3+CD8+比值增高(P<0.05～0.01)。与对照组比较,实验组CD19+的比例增高(P<0.05～0.01),但变化无剂量依赖性。结论:防风多糖具有剂量依赖性的提高小鼠特异性免疫和细胞免疫功能,并促进小鼠脾淋巴细胞的增殖;对小鼠体液免疫功能的影响无剂量依赖性。

防风多糖对骨质疏松大鼠的作用及机制研究

目的探讨防风多糖对切除卵巢后骨质疏松大鼠模型的作用及机制。方法切除大鼠双侧卵巢的方法建立骨质疏松模型,给予防风多糖(100、200 mg/kg)治疗,检测大鼠骨密度及骨钙素、肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6水平。结果防风多糖组大鼠骨质密度高于模型组,血清中肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6水平低于模型组,并且高剂量作用更为显著。结论防风多糖能够提高切除卵巢后骨质疏松大鼠骨密度,其可能通过调节肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6水平而发挥作用。

超声提取防风多糖的抗氧化活性研究

采用不同电功率和频率的超声波辅助提取防风多糖,通过体外抗氧化实验,研究了多糖抗氧化活性与超声电功率及频率的变化规律。实验结果表明:超声频率为135kHz、电功率为290W时,提取的防风多糖得率最高,达到7.12%。超声频率在80kHz和135kHz,电功率范围在150W～220W时提取的防风多糖抗氧化活性较高。超声提取防风多糖能够提高提取效率,选择适当的电功率和频率能达到较好的抗氧化活性效果。

防风多糖对过敏性鼻炎大鼠免疫因子的影响

目的:通过免疫因子水平变化考察防风多糖对卵蛋白致大鼠过敏性鼻炎(AR)模型的治疗作用及其作用机制。方法:采用卵清蛋白(OVA)0.3 mg,Al(OH)_3 30 mg及生理盐水1 ml混合后腹腔注射,进行初次免疫,第15天开始给予4%OVA 200μg滴鼻加强免疫,每天1次,复制AR动物模型。SD大鼠50只随机分为正常组、模型组、阳性组(鼻炎康片组,400 mg·kg^(-1))、防风多糖高、中、低剂量组(600,300,150 mg·kg^(-1))等6组。灌胃给药14 d后,各组大鼠采用腹主动脉取血并分离血清,放免法检测血清免疫因子和炎症因子的含量变化。结果:阳性组和防风多糖剂量组均可不同程度抑制AR导致的喷嚏、搔鼻、流清涕等典型症状,并能减轻相关炎症反应症状。药物干预治疗后,阳性组和防风多糖各剂量组均可下调白介素-4(IL-4)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、血管细胞黏附分子(VCAM-1)、白介素-5(IL-5)等细胞免疫因子的表达,提升白介素-12(IL-12)、干扰素-γ(INF-γ)的表达水平,同时抑制炎症因子血清免疫球蛋白E(IgE)、组胺(HA)、白三烯C4(LTC4)、前列腺素D_2(PGD_2)的生成及释放,各剂量组与模型组相比差异均有统计学意义(P<0.05);防风多糖高、中、低三个剂量组量效关系不明显,高剂量组优于中、低剂量组。结论:防风多糖对AR有治疗作用,可下调AR大鼠血清中IL-4、IL-5水平,上调IFN-γ、IL-12水平,调节Th1/Th2淋巴细胞亚群平衡和机体免疫应答,减轻鼻黏膜充血炎症;其减轻OVA致AR过程中免疫因子的生成和释放可能是其治疗AR的重要机制。

防风多糖的提取分离与含量测定方法研究

目的建立防风多糖提取、分离、纯化及其含量测定方法。方法以水提醇沉法制取防风粗多糖,以三氟三氯乙烷法除蛋白,用D280阴离子交换树脂柱层析脱色,采用紫外分光光度法测定防风总多糖含量。结果紫外光谱全波长扫描结果显示,防风多糖与葡萄糖标准品加入显色剂后最大波长均为486 nm,且在260和280 nm处没有吸收峰。防风多糖平均回收率为98.54%,RSD为1.09%。防风中多糖含量为2.98%。结论采用本实验提取方法可有效提取分离出纯化的防风多糖,利用紫外分光光度法测定防风结果准确,可作为防风总多糖含量测定的方法。

防风多糖诱导人白血病K562细胞凋亡的研究

目的:探讨防风多糖对体外培养人白血病K562细胞有无调亡诱导作用。方法:MTT法检测防风多糖对K562细胞的增殖抑制作用;荧光显微镜观察细胞的形态学变化;琼脂糖凝胶电泳分析细胞凋亡的DNA断裂;流式细胞术采用Annexin-V/PI双染实验检测细胞凋亡。结果:MTT法检测显示防风多糖对K562细胞具有显著生长抑制作用;荧光显微镜下观察发现防风多糖作用的K562细胞中出现核固缩、凋亡小体;琼脂糖凝胶电泳呈现DNA梯形条带即(DNA ladder);流式细胞仪分析结果显示细胞凋亡百分率随防风多糖浓度增加而增加。结论:防风多糖对体外培养人白血病K562细胞具有增殖抑制及凋亡作用。

防风多糖ASPSO溶液粘度及构象研究

主要利用乌氏粘度计研究温度、pH、变性剂(脲)和金属离子(Na+、K+、Ca2+、Mg2+)对防风多糖ASPS0粘度的影响;采用圆二色谱、扫描电镜和刚果红实验等手段观察ASPS0在溶液中的形貌;研究了ASPS0在酸与碱中的粒度变化。研究表明不同浓度的金属离子的加入,对ASPS0溶液的粘度影响程度不同,其中K+、Ca2+及Mg2+对ASPS0溶液的粘度影响较大,而Na+对其影响程度很小;防风多糖ASPS0呈现无规卷曲状;不同pH条件粒度分布不同,pH为12时聚集体的有效直径最大,其次为pH为2以及pH为6.5。

防风多糖治疗骨质疏松大鼠的效果及对血清IL-6、TNF-α、TGFβ1、NO、NOS水平的影响

目的：探讨防风多糖治疗骨质疏松大鼠的实验效果及作用机制。方法：选取60只SPF级雌性SD大鼠,采用随机数字表分为假手术组（等量生理盐水）、模型组（等量生理盐水）、阳性对照组[乙烯雌酚0.05 mg/（kg·d）]、防风多糖低剂量组[250 mg/kg浓度防风多糖供试液,20 m L/（kg·d）、防风多糖高剂量组500 mg/kg浓度防风多糖供试液,20 m L/（kg·d）]各12只。结果：干预70 d后,模型组股骨干重较假手术组显著降低（P〈0.05）,阳性对照组、低剂量组、高剂量组的股骨干重大于模型组（P〈0.05）,高剂量组的股骨干重大于低剂量组（P〈0.05）;阳性对照组、低剂量组、高剂量组的血清IL-6、TNF-α水平低于模型组（P〈0.05）,TGF-β1、NO、NOS高于模型组（P〈0.05）;高剂量组的血清IL-6、TNF-α水平低于低剂量组（P〈0.05）,TGF-β1、NO、NOS高于低剂量组（P〈0.05）;阳性对照组、低剂量组、高剂量组的血清Ca^（2＋）、Mg^（2＋）、ALP水平低于模型组（P〈0.05）,P^（2-）高于模型组（P〈0.05）;高剂量组的血清Ca^（2＋）、Mg^（2＋）、ALP低于低剂量组（P〈0.05）,P^（2-）高于低剂量组（P〈0.05）。结论：防风多糖治疗骨质疏松大鼠能有效降低血清中钙、镁离子及ALP浓度,调节细胞因子,缓解去势大鼠的骨高分解状态,达到治疗效果。

防风多糖对巨噬细胞分泌细胞因子的影响

目的:观察防风多糖对体外培养的巨噬细胞分泌细胞因子的影响,探索防风多糖活化巨噬细胞的部分机制。方法:常规提取防风多糖组分,体外与小鼠腹腔巨噬细胞共同培养,ELISA法检培养液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素8(IL-8)等细胞因子(CK)的影响。结果:防风多糖组分在一定浓度下能明显促进小鼠腹腔Mφ释放IL-1和IL-8,其效应具有浓度差异性(P<0.05或P<0.01)。结论:防风多糖能明显增加体外培养的巨噬细胞释放IL-1和IL-8,提示中药防风调节免疫功能的药理作用可能与其多糖组分刺激巨噬细胞释放细胞因子有关。

防风多糖JBO—6对荷瘤小鼠免疫功能的影响及抗肿瘤作用的实…

本文研究了防风多糖ＪＢＯ－６对荷瘤小鼠免疫功能的改善作用及体内外抗肿瘤作用。结果证明防风多糖对Ｓ１８０荷瘤小鼠的脾指数有明显的增重作用；对荷瘤小鼠的胸腺细胞，脾Ｔ细胞及Ｂ细胞增殖均有明显改善作用；对荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬作用及细胞毒作用及ＮＫ细胞有改善作用；体外防风多糖对Ｓ１８０细胞生长无抑制作用，但体内对Ｓ１８０移植瘤有明显的抑瘤作用，量效关系明显，１００ｍｇ／ｋｇ的抑瘤率高达６９．１％。

防风多糖温敏凝胶的制备及评价

目的制备防风多糖温敏凝胶并对其进行质量评价。方法采用单因素试验筛选凝胶基质,Box Behnken法优化处方,并对防风多糖温敏凝胶的理化性质、溶蚀动力学与释药行为等方面进行质量评价。结果经实验优化得到防风多糖温敏凝胶的最佳处方为:19.4%泊洛沙姆407,1.4%泊洛沙姆188,0.1%聚乙烯吡咯烷酮类聚合物PVP-K30,4%防风多糖,胶凝温度30.4℃。质量评价结果表明其性质稳定、胶凝温度合适,体外释放和凝胶溶蚀之间存在良好线性关系。结论所制备的防风多糖温敏凝胶工艺稳定,外观均匀,质量可控且有较好缓释效果。

防风多糖XC-2的组成及摩尔比测定

采用薄层层析和气相层析法 ,测定出防风多糖XC - 2的单糖组成为鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖、半乳糖醛酸 ,摩尔比为 1.0 5∶7.0 1∶0 .16∶0 .79∶10 .0 0∶4.6

防风多糖增强巨噬细胞抗肿瘤作用的实验研究

观察了防风多糖体内对Ｓ１８０移植瘤生长的影响，以及对Ｓ１８０瘤细胞免疫小鼠腹腔巨噬细胞（Ｍφ）吞噬活性的影响；同时，将Ｓ１８０瘤免疫小鼠腹腔Ｍφ再与Ｓ１８０瘤细胞混合后接种给小鼠，观察防风多糖对该Ｍφ直接抗肿瘤活性的影响。进一步用硅胶体内阻断Ｍφ功能，观察对防风多糖体内抗肿瘤效果的影响。结果表明，防风多糖体内应用能明显抑制Ｓ１８０实体瘤的生长（抑瘤率为５２９２％），提高Ｓ１８０瘤免疫小鼠腹腔Ｍφ的吞噬活性（Ｐ＜０．０１），并能提高Ｓ１８０瘤免疫小鼠腹腔Ｍφ与Ｓ１８０瘤细胞混合接种时的抗肿瘤活性（Ｐ＜０．０１）；但是，用硅胶阻断Ｍφ机能后，防风多糖的抗肿瘤作用大大下降，抑瘤率由５２９２％降到１１８２％。

防风多糖和IL-2体外对小鼠NK、LAK细胞活性的影响及体内抗移植瘤生长的实验研究

观察了防风多糖、IL－2体外对NK及LAK细胞杀瘤活性的影响及体内对S180移植瘤生长的抑制作用。结果显示：防风多糖在一定浓度范围内能提高NK、LAK的杀瘤活性，且防风多糖与IL－2联合应用时效果更佳；防风多糖与IL－2体内应用均能抑制S180移植瘤的生长，且防风多糖与IL－2联合应用时，抑瘤率显著提高。

防风多糖JBO－6体内对小鼠兔疫功能的影响及抗肿瘤作用

防风多糖ＪＢＯ－６体内对小鼠兔疫功能的影响及抗肿瘤作用周勇，马学清，严宣佐，张丽，牛建昭，赵离原，陆蕴如，葛东宇（北京中医药大学北京１０００２９）关键词：防风多糖；免疫增强；抗肿瘤中药多糖作为免疫增强剂其主要优点是无毒副作用，效果确切。本研究从中药防...

防风多糖的理化特性、形貌特征及结构分析

目的从防风Saposhnikovia divaricata中提取多糖并对其进行理化性质及结构特征的分析。方法采用DEAE-52纤维素和Sephadex G-200凝胶柱色谱分离纯化,获得防风多糖主要成分SPS0和SPS1,通过紫外光谱(UV)、热稳定性实验、红外光谱(IR)、刚果红实验、环境扫描电镜(ESEM)、原子力显微镜(AFM)对防风多糖进行理化性质、形貌特征及结构特征分析。结果 SPS0和SPS1糖醛酸的质量分数分别为12.07%、0.95%;IR光谱显示SPS0含有-COOH的特定吸收峰;刚果红实验表明SPS0具有三股螺旋结构,SPS1没有三股螺旋结构;ESEM、AFM观察显示SPS0形貌工整,为链状多分枝结构,SPS1多糖形貌不规则,有少量分枝结构。结论 SPS0是一种具多分枝结构的酸性多糖;SPS1是一种含β-D-吡喃环的均一多糖,热稳定性较高。

硫酸酯化防风多糖的制备及其抗氧化作用研究

目的对防风多糖(SPS)进行硫酸酯化修饰,并研究其抗氧化活性。方法用三氧化硫-吡啶法对防风多糖进行硫酸酯化修饰得到硫酸酯化防风多糖(S-SPS),利用紫外、红外分析手段对S-SPS进行鉴定,通过气相色谱方法研究其单糖组成,并在体外化学模拟条件下,研究SPS和S-SPS的总还原能力以及对超氧阴离子(O2÷)、羟基自由基(.OH)的清除作用。结果SPS和S-SPS均由鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成,S-SPS的抗氧化活性明显好于SPS。结论硫酸酯化可以改善防风多糖的水溶性,提高其抗氧化活性,是防风多糖分子修饰的一种好方法。

防风多糖对升麻素在Caco-2细胞模型中吸收、转化的影响

目的研究防风多糖对升麻素在小肠中吸收和转化的影响。方法以Caco-2单层细胞模型模拟小肠黏膜吸收机制,通过测定Caco-2单层细胞模型顶侧端与底侧端升麻素含量的变化,分析防风多糖对升麻素小肠吸收的影响。采用高效液相色谱法检测在防风多糖作用下,升麻素和Caco-2细胞孵育2、4 h后各色原酮含量,阐明在肠道环境中防风多糖对升麻素转化的影响。结果不同浓度的多糖对药物通过Caco-2单层细胞膜的量均无明显影响,各时间点升麻素的差别均无统计学意义。防风多糖、升麻素和Caco-2细胞共孵后,在培养体系和Caco-2细胞内,加入的多糖量对细胞内升麻素含量无明显影响(P>0.05),随着多糖量的增加,升麻苷含量有升高趋势(P<0.05),5-O-甲基维斯阿米醇苷含量明显升高(P<0.01),且与多糖的加入量成正比,反应4 h后,培养体系中无多糖组的3种色原酮总量为10.3 nmol/L,多糖组的3种色原酮总量为75.6 nmol/L,说明多糖是升麻素转化的原因。结论防风多糖对升麻素的吸收无明显影响,但多糖能够促进升麻素向结构稳定的升麻苷转化,有效抑制色原酮类成分降解。

毛细管电泳法测定防风多糖中单糖的含量

在pH=12.80,电压为25kV,检测波长为254nm,以吲哚乙酸-磷酸钠体系为背景电解质的条件下,采用毛细管电泳对防风多糖中单糖进行了分离测定,各单糖的校准曲线线性关系良好,均大于0.994,测得防风多糖中半乳糖∶阿拉伯糖∶鼠李糖∶半乳糖醛酸=1∶2.3∶0.15∶4.8。