小鼠阳和汤血清对细胞的诱导分化作用

目的:观察小鼠阳和汤血清对细胞的诱导分化作用。方法:SRB法和乳酸脱氢酶释放法检测B16细胞活性;油红染色法检测3T3-L1前脂肪细胞的分化;NBT还原能力和细胞吞噬功能法检测HL-60细胞的分化;血红蛋白含量法检测K562细胞的分化;黑色素含量法检测B16细胞的分化。结果:小鼠阳和汤血清能明显呈剂量依赖性抑制B16细胞生长,但不表现细胞毒作用;阳和汤血清能促进3T3-L1前脂肪细胞在分化液刺激下的油红染色,提高HL-60细胞的NBT还原能力和对辣根过氧化物酶的吞噬功能,增加K562细胞的血红蛋白含量,降低B16细胞的黑色素含量。结论:小鼠阳和汤血清对3T3-L1前脂肪细胞、肿瘤细胞均有诱导分化和成熟作用,这可能是其抗肿瘤作用的主要机制。

阳和汤血清增强阿霉素对MCF-7肿瘤细胞抑制作用机制的研究

目的:研究小鼠阳和汤血清增强阿霉素对MCF-7肿瘤细胞抑制作用的机制。方法:用1.08 g.mL-1阳和汤按小鼠体重20 mL.kg-1连续ig 7 d,末次给药1 h采血,分离得含阳和汤1 g.mL-1的血清(YHDS)。用SMY培养细胞24 h,5-溴脱氧尿核苷(BrdU)掺入法检测细胞增殖,软琼脂克隆形成法检测细胞分化,Western blotting检测Bax/Bcl-2表达,原位末端标记检测细胞凋亡,流式细胞术检测细胞线粒体膜电位。结果:小鼠阳和汤血清能促进阿霉素引起的MCF-7细胞生长抑制(抑制率为61.25%±1.66%,P<0.05),上调MCF-7细胞Bax/Bcl-2表达比率,增加细胞凋亡。小鼠阳和汤血清对MCF-7细胞有诱导分化作用(与对照组比较克隆数减少了68.4%,P<0.05)。结论:阳和汤血清有增强阿霉素对MCF-7肿瘤细胞抑制作用,其机制与易化肿瘤细胞凋亡和诱导肿瘤细胞分化有关。

阳和汤小鼠血清促进淋巴细胞增殖和阿霉素诱导的HL-60细胞凋亡

目的:观察阳和汤小鼠血清对淋巴细胞增殖和阿霉素致肿瘤细胞死亡的影响。方法:MTT法检测细胞增殖,Western blotting检测bax/bcl-2表达,Histone/DNA ELISA检测细胞凋亡,ELISA与分光光度法分别检测细胞色素C释放和caspase-3激活,流式细胞检测线粒体膜电位。结果:阳和汤小鼠血清能增强小鼠淋巴细胞增殖和对阿霉素的抵抗,但促进阿霉素引起的HL-60细胞生长抑制、DNA断裂、细胞色素C释放和caspase-3激活,上调其bax/bcl-2表达比率,增加细胞凋亡。结论:阳和汤有增强阿霉素抗肿瘤作用,激活肿瘤细胞凋亡通路可能是其化疗增敏的主要机制。

阳和汤含药血清对膝骨性关节炎兔膝软骨MMP-1、MMP-3和TIMP-1表达的影响

目的:阳和汤含药血清对膝骨性关节炎兔膝软骨MMP-1、MMP-3和TIMP-1表达的影响。方法:按照阳和汤药配方水煎阳和汤汤剂,将10只新西兰大白兔5只/组随机分为两组,含药血清制备组兔50ml/只,早晚各灌胃1次,连续3d;空白组灌胃等剂量蒸馏水。末次灌胃3h后,腹主动脉取血,分离血清~20℃备用。将30只白兔10只/组随机分为假手术组、模型组和阳和汤含药血清治疗组(治疗组),采用改良Hulth法制备关节炎模型,构建模型当日,治疗组兔子右膝关节腔注射1.5ml含药血清,每日1次;假手术组和模型组注射等剂量的普通血清,连续注射7d。兔处死后取右膝软骨组织通过HE染色进行病理分析和TUNEL染色进行凋亡分析,商业试剂盒检测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和乳酸脱氢酶(LDH)水平;westernblot分析软骨组织中Bcl-2、Bad、cleaved-caspase-3、MMP-1、MMP-3和TIMP-1蛋白表达。结果:HE病理分析结果显示,与模型组相比,治疗组兔膝关节软骨损伤明显改善,Tunel显示凋亡细胞比例明显降低(P<0.05),同时软骨组织中MDA和血清中LDH的水平明显降低,SOD含量显著上升(P<0.05);Westernblot结果显示,与模型组相比,治疗组兔软骨组织中MMP-1的表达量明显降低,MMP-3和TIMP-1蛋白表达显著提高(P<0.05)。结论:阳和汤含药血清能够通过降低MMP-1的表达,上调MPP-3和TIMP-1的表达改善兔膝骨性关节炎软骨损伤。

基于miR-204-5p_NF-κB轴探讨阳和汤含药血清抑制前列腺癌PC-3细胞生长与转移的机制研究

目的:探讨阳和汤含药血清对PC-3细胞生长与转移的影响及机制。方法:通过CCK8检测阳PC-3细胞增殖,采用Transwell检测PC-3细胞迁移与侵袭,利用PCR和Western blot检测PC-3细胞中miR-204-5p、NF-κB通路分子的表达,在裸鼠中验证阳和汤含药血清对PC-3细胞生长的影响。结果:阳和汤含药血清呈时间和浓度依赖性抑制细胞增殖、侵袭与迁移,同时上调细胞中miR-204-5p表达并抑制NF-κB下游分子表达,此外,阳和汤含药血清抑制体内瘤体的生长,差异较对照组有统计学意义(P<0.05)。结论:阳和汤含药血清可抑制PC-3细胞的生长与转移,该作用可能与miR-204-5p_NF-κB通路有关。