平均阳性染色面积百分比法分析免疫组化结果初探

借助于计算机图像分析系统,使用平均阳性染色面积百分比(APSAP)法分析免疫组化切片结果,并与人工技术方法相比较,从而验证图像分析APSAP法与人工计数方法在免疫组化染色结果判定方面的符合程度。实验结果表明,采用APSAP法分析免疫组化切片结果与人工计数分析方法的符合程度较高。我们简要介绍以平均阳性染色面积所占测量面积的百分比来衡量免疫组化切片结果的方法。此外,我们还对APSAP法的理论基础、特点等问题进行了深入的讨论。

二甲基亚硝胺所致大鼠肝硬化形成与逆转过程中Thy1.1与OV6阳性染色细胞比较

目的:在二甲基亚硝胺(dimechylnitrosanline,DMN)致大鼠肝硬化形成与消减过程中,比较Thy1.1与OV6标记肝脏卵圆细胞(hepaticovalcells,HOC)的不同变化,从而选择最佳的HOC标记物.方法:应用DMN腹腔注射(4wk12次)制备大鼠肝硬化模型,进行胶原组织染色动态观察肝纤维化程度,免疫组化检测Thy1.1和OV6的不同阳性染色细胞表达,光镜下进行Thy1.1标记的HOC计数,westernblot进行该标记细胞的蛋白定量测定.结果:DMN造模4wk大鼠已形成典型的肝硬化;终止造模后2wk、即6wk时肝组织病变较4wk时有所减轻出现不完全纤维间隔.8wk时炎症明显减轻并以不完全纤维间隔为主.OV6在各时间点除了卵圆细胞表达外,也于正常胆管上皮细胞表达.正常大鼠肝组织未见到Thy1.1阳性染色的细胞,3d时可见卵圆细胞微量表达,2wk时呈散在分布,4wk时明显增多,见于纤维间隔周围,终止造模后2wk、即第6wk时阳性染色显著强于4wk,大量出现于汇管区,8wk时较6wk有所减少,表达量基本与4wk时相等.Thy1.1标记的HOCWesternblot结果与细胞计数一致.结论:在DMN大鼠肝硬化形成与消减过程中,Thy1.1标记肝脏卵圆细胞优于OV6,具有特异性和敏感性.

伊马替尼与达沙替尼在儿童费城染色体阳性急性淋巴细胞白血病中的有效性和安全性观察

目的观察伊马替尼(IMA)和达沙替尼(DAS)治疗儿童费城染色体阳性急性淋巴细胞白血病(Ph+ALL)的有效性和安全性。方法回顾性收集2016年1月—2021年2月南方医科大学珠江医院及中山大学孙逸仙纪念医院小儿血液科共22例Ph+ALL的临床资料,根据使用TKI的不同分为IMA组和DAS组,按照不同TKI的不同剂量分为3组(IMA 300mg/m^(2)组、DAS 60mg/m^(2)组、DAS 80mg/m^(2)组)。结果IMA组和DAS组患儿的激素7 d反应不佳率、D15 CR率、D33 CR率无差异,患儿药物不良反应也无统计学差异。1例患儿口服DAS后出现出血性结肠炎和手足综合征。结论IMA和DAS治疗Ph+ALL有效性和安全性无明显差异,DAS导致出血性结肠炎的机制仍有待研究。

成人Ph染色体阳性急性淋巴细胞白血病免疫表型特征分析

本研究旨在了解成人Ph染色体阳性(Ph+)的急性淋巴细胞白血病(ALL)免疫表型特征,并初步探讨其在预测疾病预后和指导临床治疗中的价值。应用多参数流式细胞仪(MFC)技术对35例Ph+ALL和59例Ph-ALL患者的标本(骨髓或外周血)进行细胞免疫表型检测,并分析其异常表达。结果显示:所有Ph+ALL均为B淋系表达;Ph+B-ALL患者CD34和CD13表达较Ph-B-ALL显著增高(p<0.05),而CD38表达较Ph-B-ALL明显减低(p<0.05);两组患者伴髓系表达比例分别为85.7%和61.0%,Ph+B-ALL组显著增高(p<0.05),表达的髓系抗原主要为CD13和/或CD33。结论:Ph+ALL存在较为特征性的免疫表型,在成人B-ALL中CD34、CD13和CD38的免疫表型分析有助于提示存在Ph染色体的可能,对于存在上述特征性免疫表型的成人ALL患者应进行bcr/abl融合基因检测。以上特征性免疫表型将有助于临床上对这组疾病进展迅速、预后差的亚型患者进行预测,并指导临床个体化治疗。

Ph染色体阳性急性白血病细胞遗传学及临床研究

为分析79例成人Ph染色体阳性急性白血病(Philadelphiachromosomepositiveacuteleukemia,Ph+AL)的细胞遗传学和相关临床表现及预后,联合应用细胞形态学、免疫分型,骨髓细胞染色体G显带技术(morphology,immunology,cytogenetics,MIC),对1991年10月-2003年12月住本院的79例Ph染色体阳性急性白血病进行了随访。结果表明:Ph+AL总的检出率为6.9%,其中Ph染色体阳性急性淋巴细胞性白血病(Philadelphiachromosomepositiveacutelymphoblasticleukemia,Ph+ALL)56例,检出率18%,Ph染色体阳性急性髓细胞性白血病(Philadelphiachromosomepositiveacutemyeloidleukemia,Ph+AML)10例,检出率1.2%。Ph染色体阳性急性混合细胞性白血病(Philadelphiachromosomepositivemixedacuteleukemia,Ph+MAL)13例。56例Ph+ALL中52例免疫表型为B细胞型。10例AML中,包括M14例,M2、M4和M7各2例。13例Ph+MAL中12例混合表达髓系和B淋巴细胞系表型,另1例为髓系、T淋巴细胞系混合型。总的染色体附加异常检出率为54.4%,附加异常较多涉及到的染色体包括:7号、双Ph染色体、+8等。Ph+ALL组和Ph+MAL组缓解率为57.0%,Ph+AML组无1例达到缓解。Ph+ALL完全缓解率明显低于同期正常核型ALL对照组(P<0.05)。Ph+ALL、Ph+MAL组总的中位生存期均为10个月。

伴Ph染色体阳性的急性早幼粒细胞白血病诊治反思

目的探讨伴Ph染色体阳性急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocytic leukemia,APL)的临床特征及诊治措施,以减少误诊误治。方法回顾性分析我院收治的1例骨髓形态、免疫组织化学及免疫表型极似急性粒单核细胞白血病且Ph染色体阳性APL的临床资料。结果本例因发热3周余就诊,根据骨髓形态学、免疫组织化学及免疫分型结果,初诊为急性粒单核细胞白血病,给予标准IDA方案(伊达比星加阿糖胞苷)化学治疗效果不佳。复查骨髓形态学并结合细胞遗传学检查,确诊为伴Ph染色体阳性APL,经维A酸(ATRA)联合三氧化二砷(ATO)治疗达完全缓解(CR),巩固治疗4个疗程。随访8个月仍处于CR,PML-RARA融合基因转阴,但BCR-ABL融合基因仍阳性。结论细胞遗传学检查应作为拟诊急性白血病患者的必要检查,可减少误诊,提高治疗效果。

费城染色体阳性患儿急性混合细胞白血病1例报告并文献复习

费城染色体（Philadelphia chromosome,Ph染色体）即t（9;22）（q34;q11）,是慢性粒细胞白血病（CML）的标记染色体,但也见于急性白血病、骨髓增生异常综合征、淋巴瘤和多发性骨髓瘤等疾病。近来我院发现1例Ph染色体阳性的急性混合细胞白血病（hybrid acute leukemia，HAL）（双克隆型）患儿，现对其临床和实验室检查特征并复习相关文献报道如下。

Ph染色体阳性慢性粒细胞白血病应用格列卫治疗的护理

目的探讨格列卫治疗Ph染色体阳性慢性粒细胞白血病的护理方法。方法对90例Ph染色体阳性慢性粒细胞白血病患者应用格列卫400～600mg口服,1次/d。根据血常规和骨髓检查结果调整剂量;出现药物不良反应实施针对性护理。结果84例(93.3%)获得血液学完全缓解;68例可评价遗传学效应,35例发生主要遗传学效应,其中31例为遗传学完全缓解。11例(12.2%)患者发生严重白细胞和/或血小板减少,通过调整剂量后症状控制。结论格列卫治疗Ph染色体阳性慢性粒细胞白血病患者可获得较高的完全血液学缓解率和主要细胞遗传学缓解率,其不良反应经对症处理后缓解,不影响疗程。

5例Ph染色体阳性的急性白血病临床和实验室分析

目的了解Ph染色体阳性(Ph+)急性白血病(AL)的临床特点及预后。方法对75例AL患者,采用骨髓细胞直接法或短期培养法制备染色体,经常规细胞遗传学检查确诊5例Ph+的AL,并对其进行荧光原位杂交研究,观察其临床特点、实验室改变和预后。结果Ph+AL占同期AL的6·7%。5例Ph+中急性淋巴细胞白血病4例,急性髓细胞白血病1例;3例为单纯t(9;22),bcr-abl融合基因均阳性;2例同时出现其它的染色体异常,其中1例为少见的继发性Ph+;4例外周血WBC>100×109/L。5例中3例获完全缓解,但又于半年内复发,5例均在1年内死亡,中位生存期为4.6个月。结论Ph+AL具有独特的临床、血液学和预后特点,是一种预后不良的细胞遗传学改变。

鸡马立克氏病疫苗荧光抗体染色阳性细胞数与蚀斑数线性回归(FAC^+ PR)方法的建立及应用

为解决鸡马立克氏病(MD)疫苗,尤其是MD多价疫苗在生产中疫苗配制环节上的盲目性,本试验建立了MDCVI988/Rispens/B5疫苗荧光抗体染色阳性细胞数(FAC+/mL)与疫苗蚀斑数(PFU/mL)两个数量化指标的线性关系(FAC+PR)。统计学检验证明,在此双变量下所建立的线性回归能客观反映该疫苗FAC+细胞数与疫苗PFU数之间的相互关系。将FAC+PR方法运用于MD疫苗的实验室制备,结果理论PFU/mL与实际PFU/mL的平均误差仅为5.4%。由此可见,采用这种方法可有效、准确估计出疫苗毒液中的PFU含量,并可以此为标准进行疫苗的配制。

伊马替尼联合预激方案治疗Ph染色体阳性的急性单核细胞白血病

[典型病例]患者女，70岁，面黄、乏力两月余，于2007年3月7日入院。患者于2月前无明显诱因下出现面黄、乏力，未予重视。2周前出现咳嗽，咳白色粘痰，伴全身乏力，无发热，无鼻出血、牙龈出血，无胸骨及关节疼痛。查血常规异常，住院进一步诊治。体征：体温37．1℃，血压120／80mmHg，神志清楚，贫血貌，皮肤粘膜无黄染及出血点，浅表淋巴结未扪及肿大，胸骨无压痛，两肺呼吸音粗，未闻及干湿哕音；心律齐，未闻及病理性杂音。

孔圣枕中丹对SAMP8鼠海马CA1区PAS染色阳性颗粒状结构及星形胶质细胞纤维酸性蛋白的影响

目的研究孔圣枕中丹对SAMP8海马CA1区形态结构、PAS染色阳性颗粒状结构(PGS)及星形胶质细胞纤维酸性蛋白(GFAP)的影响,探讨其改善SAMP8小鼠学习记忆的作用机制。方法选用7个月龄雄性的SAMP8小鼠分为模型组、治疗组;同时选用同源同月龄雄性的SAMR1小鼠作为正常老化对照组。检测指标:苏木精-伊红染色观察小鼠海马CA1区形态结构;免疫组化分析小鼠海马CA1区GFAP的表达;PAS病理特殊染色观察小鼠海马CA1区糖原的表达。结果孔圣枕中丹组海马CA1区神经元病理改变较模型组有明显改善;孔圣枕中丹PGS颗粒数有不同程度的减少,PGS颗粒体积减少,低密度颗粒数增加,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05);孔圣枕中丹组GFAP面密度与模型组、比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论孔圣枕中丹能通过对海马神经元组织结构的保护作用来提高SAMP8小鼠的认知功能。

Ph染色体阳性急性淋巴细胞性白血病的细胞遗传学特征

目的研究Ph染色体阳性急性淋巴细胞性白血病(Ph+ALL)的形态学、免疫学和细胞遗传学(MIC)特征。方法对48例Ph+ALL进行MIC分型实验研究,并与同期的Ph-ALL进行对比研究。结果(1)Ph+ALL占总ALL的20.6%。(2)Ph+ALL中B-ALL占68.8%、L2占68.8%。(3)Ph+ALL系列专一性为68.8%,明显低于Ph-ALL的82.7%;而表达二个系列抗原的Ph+ALL为27.1%,明显高于Ph-ALL的11.4%。(4)FCM检测的Ph+ALL中CD13表达比IFM检测的明显增高,其它髓系抗原和所有的淋系抗原则差异均无显著性。(5)FCM检测的115例ALL中Ph+ALL高表达CD13。(6)单色Ph染色体或Ph染色体和正常核型相嵌占56.2%,Ph染色体伴其它异常染色体43.8%。结论Ph+ALL有独特的MIC分型特点。

达沙替尼治疗儿童费城染色体阳性急性淋巴细胞白血病的临床综合评价

目的:评价达沙替尼治疗儿童费城染色体阳性急性淋巴细胞白血病的临床价值,为药品说明书修订、临床合理选药提供依据。方法:采用文献研究法、回顾性队列研究法、药物经济学模型研究法,比较达沙替尼与伊马替尼治疗儿童费城染色体阳性急性淋巴细胞白血病的有效性、安全性、经济性。结果:达沙替尼治疗的有效性优于伊马替尼,安全性无显著差异,且具有潜在的经济学优势。结论:达沙替尼在有效性、经济性上均优于伊马替尼,且安全性无明显差异,因此推荐其用于儿童费城染色体阳性急性淋巴细胞白血病(Ph+ALL)的临床治疗。本次评价尽管存在局限性,但通过试点验证了《儿童药品临床综合评价技术指南》的适用性和科学性,特别是如何基于我国临床实际用药数据进行药品临床价值分析。

伊马替尼联合化疗治疗成人费城染色体阳性急性淋巴细胞白血病46例临床分析

目的探讨伊马替尼联合化疗治疗费城染色体阳性(Ph+)急性淋巴细胞白血病(ALL)的疗效。方法 Ph+ALL患者46例,分别应用VDCP、VDCLP方案联合伊马替尼诱导治疗,完全缓解(CR)后继续伊马替尼联合化疗进行巩固及强化治疗,有合适供者的患者行异基因造血干细胞移植。结果 46例Ph+ALL CR率为67.4%(31/46),无治疗相关死亡。16例患者CR后行造血干细胞移植,10例目前仍无病生存;3例复发;3例死于慢性移植物抗宿主病(GVHD)合并感染。CR后持续巩固及强化治疗的15例患者中位缓解期为13(9～19)个月。结论伊马替尼联合化疗治疗Ph+ALL,CR率较常规化疗诱导治疗明显提高。伊马替尼联合化疗进行巩固治疗,中位缓解时间及生存时间较长,较单用化疗明显延长。

TKIs联合自体造血干细胞移植治疗成人费成染色体阳性急性淋巴细胞白血病的Meta分析

目的探讨酪氨酸激酶抑制剂(TKIs)联合自体造血干细胞移植治疗成人费城染色体阳性急性淋巴细胞白血病(Ph+ALL)的效果。方法通过计算机检索PubMed、Embase、Cochrane library、CNKI、万方、维普等数据库,检索时间均从建库至2019年6月30日,检索TKIs联合自体与异基因造血干细胞移植治疗成人Ph+ALL的临床对照试验。由2位研究者严格按照纳入标准与排除标准独立筛选相关文献、提取资料和评价纳入研究的方法学质量,采用RevMan 5.3软件进行Meta分析。结果全面检索得到892篇相关文献。最终纳入5篇文献,总共872例患者,其中自体造血干细胞移植(auto-HSCT)组136例,异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)组736例。Meta分析结果显示,自体组与异基因组相比,二者总体生存率(OR=1.14,95%CI:0.77~1.70,P=0.52)、无病生存率(OR=1.35,95%CI:0.56~3.28,P=0.50)、非复发死亡率(OR=0.42,95%CI:0.00~60.76,P=0.73),差异均无统计学意义。结论对于不能耐受异基因造血干细胞移植的Ph+ALL患者,TKIs联合自体移植可能使患者获益。