利用PPT或Kan叶面喷施法建立番茄转基因阳性苗筛选技术研究

以三叶一心期Micro-Tom幼苗为试材,叶面喷施不同浓度PPT或Kan后采用RLA法评估叶片受伤害程度,划分分级标准,确定PPT或Kan筛选的适宜浓度,建立转基因抗性苗筛选体系,并用带有bar或nptⅡ的转基因T_(1)番茄幼苗进行抗性筛选验证。结果表明,PPT和Kan对Micro-Tom番茄幼苗的伤害均可分为7级;PPT浓度为1.50~1.75mg·L^(-1)、Kan浓度为120~150mg·L^(-1)时,番茄植株反应明显,且不会产生不可逆伤害,可作为转基因植株抗性苗筛选的适宜浓度;T_(1)转基因番茄幼苗的叶面喷施PPT或Kan抗性筛选结果与利用标记基因bar或nptⅡ的PCR克隆验证结果高度一致。